surat permohonan pemeriksaan kultur kumanFull description
Mikrobiologi virologi
Deskripsi lengkap
Full description
bakteriFull description
mengenai angka kumanDeskripsi lengkap
Deskripsi lengkap
Deskripsi lengkap
Full description
Full description
Full description
Full description
BAB I I I UL TRASTRUKTUR,MORFOLOGI ,PEWA WARNAAN KU KUMA MAN
•
•
•
•
- Pengamatan Leeuwenhoek (1675) dengan mikroskop sederhananya baru dapat menunjukkan penampilan kasar dari mikroorganisme. - Pada awal 1!"-an mulai ada mikroskop elektron dengan resolusi yang jauh lebih tinggi# mampu menunjukkan struktur halus mikroorganisme. - $truk $truktu turr halus halus mikroo mikroorga rgani nisme sme membe memberik rikan an keter keteran anga gan n tidak tidak terni ternilai lai bagi bagi kemaj kemajua uan n peng pengeta etahu huan an di bida bidang ng mikrob mikrobio iolog logii menge mengena naii kompo kompone nen n sel# sel# kompo komposis sisii kimiaw kimiawi# i# si%at si%at## %ung %ungsi# si# sitolo sitologi gi biokim biokimiaw iawi# i# telaa telaah h peng penggu guna naan an## pengendalian kuman# dan sebagainya. - &ala &alaup upun un bakte bakteri ri amat amat ke'il ke'il namun namun mudah mudah diuku diukurr deng dengan an tepat tepat deng dengan an mikroskop yang dilengkapi dengan mikrometer okular. - ikr ikrom omet eter er pent pentas as dile dileta takk kkan an di atas atas pent pentas as di bawa bawah h obye obyekt kti% i% seda sedang ng mikrometer okular disisipkan di dalam lensa mata# pada perbesaran kuat tampak kedua mikrometer itu berimpit atas bawah yang langsung bisa dibandingkan dan dihitung besarnya suatu sel dengan kalibrasi. Perhitungan gan dari perbanding perbandingan an antara antara luas permuka permukaan an dan olume olume sel# bagi bagi - Perhitun bakteri nilai ini sangat tinggi yang menunjukkan pula tingginya laju metabolisme pertumbuhan sel bakteri. prokariota ta struktu strukturnya rnya lebih lebih sederhan sederhana a dari sel eukariot eukariota# a# tetapi tetapi struktur struktur - $el prokario dinding selnya lebih kompleks. Nukleus/inti - *engan pewarnaan +eulgen (mewarnai molekul *,) inti sel prokariota dapat dilihat dengan mikroskop 'ahaya *engan an mikros mikrosko kop p elektr elektron on tampa tampak k inti inti tidak tidak mempu mempuny nyai ai membra membran n inti# inti# di - *eng dalamnya terdapat benang *, (*, %ibril) yang bila diekstraksi berupa molekul tunggalutuh dengan / 0- 2 1" # benang *, atau kromosom ini panjangnya kurang lebih 1 mm. - 3kstraks 3kstraksii *, dengan dengan melisisk melisiskan an dinding dinding sel se'ara se'ara hati-ha hati-hati# ti# disentri% disentri%uga ugasi# si# maka benang *, akan terpisah dan dapat dimurnikan. Sitoplasma - $el prokariota tidak mempunyai mitokondria atau kloroplast# en4im-en4im untuk transport elektron bekerja pada lamellae di bawah membran sel. /akteri menyimpa menyimpan n makanan makanan 'adang 'adangan an berupa berupa granula granula sitoplas sitoplasma# ma# sebagai sebagai - /akteri sumber sumber karbon karbon atau granula granula dikone dikonersi rsi menjadi menjadi sumber sumber nitrogen nitrogen bila protein protein berkurang jumlahnya. Pada jenis jenis bakteri bakteri tertentu tertentu granula granula sitopla sitoplasma sma menyimpa menyimpan n pula sul%ur# sul%ur# %os%at - Pada inor inorga gani nik k (gra (granu nula la olu oluti tin) n) yang yang pada pada kori korine neba bak k teri teria a dise disebu butt gran granul ula a metakromatik karena bila diwarnai dengan 4at warna biru tua menjadi berwarna merah. - $itoplasma prokariota tidak ada struktur mikrotubulus seperti pada eukariota. Membran sitoplasma/membran sel $trukturkomposisi terdiri dari %os%olipid dan protein# membran sel prokariota tidak tidak mengand mengandung ung sterol sterol ke'uali ke'uali genus genus y'oplas y'oplasma. ma. Pada Pada tempat-t tempat-temp empat at terte tertent ntu u membra membran n sel sel terda terdapa patt 'ekun 'ekunga gan nlek lekuk ukan an ke dalam dalam ('on ('onolu oluted ted inagination) disebut mesosom 1. $eptal $eptal mesosom mesosom ber%ungs ber%ungsii dalam pertumbu pertumbuhan han sel# kromoso kromosom m bakteri (*,) (*,) melekat pada septal mesosom. 0. Late Latera rall meso mesoso som. m. - +ungsi membran sel 1. $ebagai tempat transport bahan makanan se'ara selekti% 0. Pada jenis aerob sebagai tempat transport elektron dan oks oksidasi%os%orilasi
1
.
empat ekspresi eksoen4im hidrolitik
!.
engandung en4im# molekul-molekul yang ber%ungsi pada biosintesa *,# polimerisasi dinding sel dan lipid membran (%ungsi biosintetik) 5. engandung reseptor dan protein untuk sistim kemotaktik.
-
•
•
•
•
at antibakteri yang bekerja pada dinding sel seperti deterjen mengandung gugus lipo%ilik dan hidro%ilik akan merusak membran sitoplasma dan membunuh sel. ntibiotika spesi%ik mengganggu %ungsi biosintetik membran sel seperti polimiksin# asam nalidiksat# %enil alkohol# noobiosin.
Dinding sel - ekanan osmotik di dalam bakteri antara 5-0" atmos%ir# karena adanya transport akti% yang meninggikan konsentrasi larutan dalam sel. eskipun tekanan osmotik tinggi tetapi sel kuman tidak pe'ah sebab dinding sel amat kuat# terdiri atas lapisan peptidoglikanlapisan mureinmukopeptida. - 8espon bakteri terhadap pewarnaan 9ram dapat dibedakan positi% 9ram dan negati% 9ram# mula-mula sel kuman diwarnai dengan ungu kristal# iodium# dan di'u'i alkohol aseton. /akteri 9ram negati% kehilangan warna ungu sedangkan 9ram positi% tetap mempertahankan warna ungu. - +ungsi lain dinding sel 1. /erperanan penting dalam proses pembelahan sel 0. empat melaksanakan biosintesa pembentukan dinding sel . Lapisan tertentu dinding sel merupakan determinan dari antigen permukaan kuman !. Pada kuman 9ram negati% lapisan dinding sel mengandung lipopolisakarida (LP$) yang mempunyai aktiitas endotoksin# dimana pada binatang LP$ bersi%at toksik. - :omposisi kimiawi dinding sel adalah lapisan peptidoglikan terdiri atas polimer yang tersusun bahan pembangun 1. ,-asetilglukosamin (9) 0. sam ,-asetilmuramat () . Peptida terdiri atas asam amino L-alanin# *-alanin# asam *-glutamat# lisinasam diaminopimelat. Kapsul - /anyak sel bakteri mensintesa polimer ekstrasel (polisakarida) yang berkondensasi membentuk lapisan di sekeliling sel disebut kapsul. - Pada medium agar kuman berkapsul tampak koloninya berlendir - :uman berkapsul lebih tahan terhadap %agositosis dari daya pertahanan tubuh hospes kuman $trepto'o''us mutans dapat melekat erat pada gigi# - :apsul memproduksi asam# menyebabkan karies gigi. Flagel - /agian kuman berbentuk benang terdiri atas protein %lagellin# berdiameter 10-" nm# sebagai alat gerak. - da empat jenis %lagel 1. onotrikh tunggal di bagian ujung kuman 0. Lo%otrikh seberkas di satu ujung . m%itrikh satu atau lebih di kedua ujung kuman !. Peritrikh tersebar merata di kedua ujung kuman - /ila suspensi kuman ber%lagel diko'ok kuat maka %lagel dapat rontok# tetapi akan tumbuh lagi dalam -6 menit. Pili/fimbriae - /eberapa kuman 9ram negati% memiliki rambut pendek# keras terdiri atas subunit-subunit protein disebut pili.
2
da dua jenis pili 1. ;ang berperan dalam adhesi kuman dengan sel tubuh hospes 0. $eks pili ber%ungsi pada konjugasi dua kuman. -
•
•
Endospora - Pada kuman 9ram positi% batang genus /a'illus# =lostridium# membentuk spora (kuman dalam bentuk istirahat). - /ila medium sekitar kekurangan nutrienlingkungan buruk# setiap sel berdi%erensiasi membentuk spora dan sel induk mengalami otolisis. - $pora sangat resisten terhadap panas# kekeringan# 4at kimia - /ila kondisi lingkungan kembali membaik spora lalu melakukan germinasi memproduksi sel egetati%. - Proses sporulasi terjadi dengan 'ara isolasi badan inti# diikuti dengan melipatnya membran sel ke arah dalam. - $pora terdiri dari 1. =ore sitoplasma dari spora# di dalamnya terkandung semua unsur untuk kehidupan kuman# kromosom komplit# komponen-komponen untuk sintesis protein. 0. *inding spora lapisan dalam dari spora# terdiri dari lapisan peptido glikan# dan akan menjadi dinding sel bila spora kembali ke bentuk egetati%. . :orteks lapisan tebal dari spora enelope terdiri dari lapisan peptido glikan dalam bentuk istimewa. !. =oat terdiri dari 4at keratin yang menyebabkan spora tahan terhadap pengaruh luar. 5. 3ksosporium membran paling luar terdiri dari lipoprotein. - Peristiwa terjadinya germinasi menjadi sel egetati% 1. ktiasi diawali oleh adanya 4at yang dapat merusak 'oat seperti panas# asam sul%ihidril 0. >nisiasi spora melakukan germinasi menggunakan sumber makanan dari lingkungannya. . ?utgrowth terjadi degradasi korteks# sel egetati% keluar dan hidup seperti semula (normal). Morfologi sel kuman - da tiga bentuk utama kokus# basil# spiral 1. :okusbulat# dengan penataan berpasangan# bergerombol# rantai# %ilamen# pagar# roset. a. mikrokokus tunggaltersendirisingle b. diplokokus berpasangan dua-dua '. pneumokokus diplokokus bentuk lanset d. gonokokus diplokokus bentuk biji kopi e. tetrade tersusun rapi empat-empat %. sarsina kelompok delapan bentuk kubus g. streptokokus berderet seperti rantai h. sta%ilokokus bergerombol tidak teratur seperti untaian buah anggur. 0. /asilbatang# panjang berariasi 0-1" dari diameter kuman a. kokobasil batang pendek menyerupai kokus b. %usi%ormis kedua ujung batang merun'ing '. streptobasil bergandengan membentuk rantai batang %ilamen. . $piralpilinulir a. ibrio batang bengkokkoma b. spirilum spiral kasarkaku bergerak dengan %lagel
3
'. spirokhaeta spiral haluselastik%leksibel# bergerak dengan aksial %ilamen (borrelia bentuk gelombang# treponema spiral halus teratur# leptospira spiral dengan kaitan di satu atau kedua ujungnya). •
•
Pewarnaan kuman - ujuan untuk mempelajari mor%ologi# struktur# si%at-si%at dalam rangka identi%ikasi kuman. - :eberhasilan pewarnaan yang baik perlu diperhatikan 1. :a'a obyek bersih# bebas lemak 0. @mur biakan 1A-0! jam ke'uali tb'# lebih dari 0! jam mor%ologi dan strukturnya berubah. . :ualitas 4at warna# dibuat barusesaat# larutan 4at warna hanya untuk beberapa waktu. !. ebal tipisnya sediaan# terlalu tebalterlalu tipistidak rata penetrasi 4at warna tidak sama. Membuat sediaan - $etetes air garam %aalisotonis# disuspensikan biakan kuman# disebarratakan berdiameter 1 'm membentuk lingkaran - *ikeringanginkan atau dihangatkan di atas api# lalu di%iksasi - Benis-jenis pewarnaan negati% (ba'k ground staining)# sederhana (menggunakan satu ma'am 4at warna)# di%erensial (membedakan si%at kuman responnya terhadap 4at warna# khusus (bertujuan mengamati bagian-bagian tertentu dari sel kuman). 1. Pewarnaan negati% . *ibuat suspensi kuman dalam 4at warna nigrosin# disebarratakan membentuk sediaan hapus . :uman tidak diwarnakan tampak sebagai sel-sel yang terang dengan latar belakang hitam . $angat berguna untuk kuman-kuman yang sukar diwarnai seperti treponema# leptospira# borrelia. 0. Pewarnaan sederhana . enggunakan satu ma'am 4at warna misalnya biru metilen# %ukhsin# ungu kristal# lamanya 1-0 menit. . at warna anilin mudah diserap oleh sel kuman. . Pewarnaan di%erensial - @ntuk membedakan respon kuman terhadap 4at warna umumnya menggunakan lebih dari satu 4at warna. - Pewarnaan 9ram ditemukan oleh =hristian 9ram (1AA!) merupakan pewarnaan yang penting untuk bakteri - Pewarnaan tahan asam (a'id %ast staining) menurut iehl ,eelsen# :inyoun 9abbett. a. Pewarnaan 9ram . $ediaan sudah di%iksasi diwarnai dengan karbol kristal iolet (kk) selama 5 menit. . at warna dibuang diganti lugol (> 0C:>)# biarkan 1 menit. . Lugol dibuang# di'u'i dengan alkohol 6 D setengah menit atau sambil digoyang sampai tak ada 4at warna yang luntur. . *i'u'i air mengalir# warnai dengan %ukhsin 1-0 menit . *i'u'i# keringkan# amati mikroskopik perbesaran kuat. - $emua kuman bentuk kokus adalah 9ram positi% ke'uali ,eisseria# semua kuman bentuk basil adalah 9ram negati% ke'uali y'oba'terium# =oryneba'terium# Listeria# /a'illus# =lostridium. - Perbedaan dua golongan tersebut dikenal dua teori yang mendasari 1). eori $alton *inding sel kuman 9ram negati% kadar lipid tinggi (0"D)# lipid mudah larut selama di'u'i alkohol# poridinding sel membesar# 4at warna yang sudah diserap lepas dan kuman menjadi tidak berwarna.
4
:uman 9ram positi% ketika di'u'i alkohol dinding sel mengalami denaturasi protein menjadi keras# beku# pori-pori menge'i#l sehingga kompleks iod-k dipertahankan tidak bisa keluar (tetap ungu). 1). eori permeabilitas dinding sel :uman 9ram positi% lapisan peptidoglikan tebal (" lapis)# tersusun kompak# permeabilitas ke'il# kompleks iod-k tidak bisa keluar. :uman 9ram negati% mempunyai lapisan peptidoglikan tipis (1-0 lapis)# tersusun tidak kompak# permeabilitas besar# kompleks iod-k mudah terlepas. b. Pewarnaan tahan asam (iehl ,eelsen) . $ediaan kuman diwarnai karbol %ukhsin# panaskan keluar asap 5 menit. . *i'u'i air# masukkan larutan E0$?! 5 D 0 detik . *i'u'i alkohol 6" D hingga tidak ada warna merah yang luntur . =u'i air# warnai dengan biru metilen 1-0 menit# 'u'i air# kering kan . Easil kuman tahan asam merah# kuman tidak tahan asam biru . $i%at kuman tahan asam disebabkan terdapatnya asam mikolat dalam dinding sel (5"D)# disamping peptidoglikan# arabino galaktan# lipid. '. Pewarnaan :inyoun 9abbettan hiam Eok . $ediaan kuman diwarnai larutan :inyoun menit# 'u'i air . $ediaan diwarnai larutan 9abbett 1 menit# 'u'i air# keringkan . *itemukannya kuman tahan asam berhubungan dengan penyakit tuberkulosis. !. Pewarnaan khusus (spe'ial staining) - ujuan mewarnai bagian-bagian sel kuman tertentu - +lagel dengan pewarnaan 9ray# digunakan mordanpemantek untuk meningkatkan a%initas %lagel terhadap 4at warna dan memperbesar diameter %lagel. $uspensi koloid garam asam tanat menyebabkan terjadinya presipitat pada dinding sel dan %lagel# badan kuman dan %lagel membesar dengan diwarnai karbol %ukhsin mudah tampak pada mikroskop biasa. Pewarnaan ,oel# ettnow# +ontana-ribondeau# ketiganya menggunakan impregnasi perak. - :apsulsimpai# pewarnaan uir (simpai biru badan kuman ungu tua)# pewarnaan Eiss (simpai ungu muda badan kuman ungu tua)# pewarnaan 9ins /urri (kombinasi pewarnaan negati% dan sederhana) simpai tidak diwarnai tampak bulatan terang# latar belakang gelap badan kuman merah# simpai kuman mudah ditembus 4at warna tetapi sukar mengikat. - $pora menurut :lein# spora kuman merah badan kuman biru# dinding spora tebal perlu pemanasan agar pori-pori membesar dan 4at warna terserap masuk mewarnai spora. - >nti dengan pewarnaan +eulgen - *i%teri dengan pewarnaan ,eisser untuk melihat granula /abes-3rnst. - $pirokhaeta dengan pewarnaan /e'ker :rant4 dan +ontana-ribondeau.
