A. TUJUAN 1. Maha Mahasi sisw swaa menge mengeta tahu huii tent tentang ang pemer pemerik iksa saan an angka angka kuma kuman n pada pada makan makanan an dan dan minuman 2. Mahasiswa Mahasiswa mengetah mengetahui ui prosedur prosedur pemeri pemeriksaan ksaan angka angka kuman kuman pada sampel sampel 3. Maha Mahasi sisw swaa meng menget etah ahui ui kual kualit itas as samp sampel el maka makana nan n atau atau minu minum man yang ang diperiksa apakah sudah memenuhi standar kelayakan atau tidak B. DAA DAA! ! T"# T"#!$ !$ Menentukan %anyaknya mikro%a dalam suatu %ahan dilakukan untuk mengetahui sampai sampai se%era se%erapa pa &auh &auh %ahan %ahan itu ter'em ter'emar ar oleh oleh mikro% mikro%a. a. Dengan Dengan menget mengetahui ahui ¨ah ¨ah mikro%a maka dapat diketahui kualitas k ualitas mikro%iologi dari %ahan terse%ut. ("ndah. 2)11* Angka Angka lempen lempeng g total total merupa merupakan kan salah salah satu satu 'ara 'ara untuk untuk menghi menghitun tung g 'emara 'emaran n mikro%a+ dimana 'ara ini merupakan %agian dari metode hitung 'awan. ,rinsip pada metode hitungan 'awan adalah &ika sel &asad renik yang masih hidup ditum%uhkan pada medium agar+ maka sel &asad renik terse%ut akan %erkem%ang%iak mem%entuk koloni yang yang dapat dapat dili dilihat hat langs langsung ung dan dan dapa dapatt dihi dihitu tung ng denga dengan n meng menggun gunak akan an mata mata tanpa tanpa mikr mikros osko kop. p. Meto Metode de hitu hitung ngan an 'awa 'awan n meru merupa pakan kan 'ara 'ara yang yang palin paling g sens sensit itii-ee untu untuk k menentukan ¨ah sel &asad renik karena %e%erapa hal yaitu 1. /anya /anya sel yang yang masih masih hidup hidup yang yang dapat dapat dihit dihitung ung 2. Be%erapa Be%erapa &enis &enis &asad renik dapat dihitung dihitung satu satu kali 3. Dapat Dapat digunaka digunakan n untuk untuk isolasi isolasi dan identita identitass &asad renik renik karena karena koloni koloni yang ter%en ter%entuk tuk mungki mungkin n %erasa %erasall dari dari &asad &asad renik renik yang yang meneta menetap p menamp menampakk akkan an pertum%uhan yang spesi0ik . elan&utnya andias 12 menam%ahkan didalam metode hitungan 'awan %ahan pangan yang diperlukan mengandung le%ih dari 3)) sel &asad renik per ml atau per gram sampel atau atau memerl memerluka ukan n perlak perlakuan uan penge'e penge'ekan kan se%elu se%elum m ditum% ditum%uhka uhkan n pada medium medium agar. agar. Didalam 'awan petri terse%ut dalam ¨ah yyang dapat dihitung dimana ¨ah yang ter%aik adalah antara 3)3)) koloni. 4ara penum%uhan dalam perhitungan 'awan dapat di%edakan di%edakan men&adi dua yaitu yaitu metode metode tuang (pour plate* dan metode metode permukaan permukaan (sur0a'e plate*. Dalam metode tuang se¨ah 'ontoh pengen'eran yang dikehendaki dimasukkan ke dalam 'awan petri kemudian ditam%ahkan agar 'air steril yang telah didinginkan se%anyak 152) ml dan digoyangkan supaya selsel mikro%a dalam 'ontoh menye%ar rata pada permukaan+ dengan metode permukaan terle%ih dahulu di%uat agar dan kemudian ditu dituan ang g ke dala dalam m 'awa 'awan n se%n se%nay ayak ak )+1 )+1 ml 'ont 'ontoh oh yang yang dien dien'e 'erk rkan an dipi dipipe pett pada pada permukaan agar terse%ut dan diratakan dengan %ekas gelas melengkung yng steril. Jika semua pengen'eran dihasilkan kurng dari 3) koloni pada 'awan petri %erarti pengen'eran yang dilakukan terlalu tinggi oleh karena itu ¨ah koloni pada pengen'eran terendah yang dihitung adalah 3). Jika semua pengen'eran yang dihasilkan le%ih dari 3)) koloni pada 'awan petri %erarti pengen'eran yang dilakukan terlalu rendah. Jumlah mikro%a dapat dihitung dengan %e%erapa 'ara namu se'ara garis %esar di%edakan men&adi 1. 'ara 'ara langsu langsung+ ng+ hasil perhit perhitunga ungan n se'ara se'ara langsung langsung menunu&u menunu&ukkan kkan seluruh seluruh ¨ah ¨ah mikro%a yang masih hidup maupun yang sudh mati. 4aranya
a. Mem%uat preparat sederhan yang diwarnai %. Menggunakn kamar hitung 2. 'ara tidak langsung+ hasil perhitungan akan menun&ukkan ¨a& mikro%a yang masih hidup sa&a. 4aranya a. menghitung total ¨ah mikro%a %. 'ara pengen'eran '. memperkirakan ¨ah terke'il mikro%a yang ada d. 'ara kekeruhan. 4ara ini dapat digunakan untuk %ahan padat maupun 'air. 6husus untuk %ahan padat maka se%elum dilakukan perhitungan %ahan itu perlu dilakukan pelarutan atau di%uat suspensi dengan memperhitungkan 0aktor pengen'erannya (yari0 Udin. 2)17* Media pertum%uhan dan reagensia media ,4A(,late 4ount Agar* • mikroorganisme dapat hidup dimana sa&a seperti air+ udara+ darat+ termasuk di makanan. ,ada %e%erapa kondisi ¨ah mikroorganisme harus di%atasi seperti mikroorganisme pada saluran pem%uangan lim%ah dan &uga mikroorganisme pada makanan atau produk susu ¨ahnya harus mengikuti standar yang sudah ditetapkan. Untuk menghitung ¨ah organisme terse%ut %iasnya sampel dari makanan atau produk susu atau dari lim%ah terse%ut diu&i menggunakn medi agar ,4A dengan metode T,4 (Total ,late 4ount*. ,late 4ount Agar (,4A* atau yang sering &uga stadar methods agar merupakan se%uah meia pertum%uhan mikroorganisne yang umum digunakan untuk menghitung ¨ah mikroorganisme total yang terdapat pada setiap sampel makanan produk susu+ air lim%ah+ dan sampel lainnya yang %iasanya menggunakn metode T,4. ,engunaan ,4A se%agai media untuk menghitung &umalh total dari mikroorganisme sudah dilakukan se&ak lama sekarang industriindustri seperi makanan+ produk susu+ dan &uga pengolahan lim%ah sudah menerapkan perhitungan ¨ah total mikroorganisme pada sampel mereka sesuai dengan standar yang ada menggunakan ,4A. ,hysilogi'al 8oid (Na4l )+95 :* • ;aram 0isiologi digunakan untuk men&aga 0ungsi 0isiologis dari media agar %akteri yang ingin di%iakkan tidak rusak dan ter&aga kondisinya. ,em%uatan garam 0isiologi dengan melarutkan Na4l ke akuades dan diaduk merata tanpa dire%us (Asrie. 2)1)* ,engen'eran %ertingkat • uatu sampel dari suatu suspensi yang %erupa 'ampuran %erma'am ma'am spesies dien'erkan dalam suatu ta%ung tersendiri. Dari pengen'eran ini kemudian diam%il se¨ah 1 ml untuk dien'erkan le%ih lan&ut. Jika dari pengen'eran yang ketiga ini diam%il )+1 ml untuk dise%arkan pada suatu koloni tum%uh dalam medium terse%ut tetapi mungkin &uga kita hanya memperoleh satu koloni murni. 6alu kita %elum yakin %ahwa koloni tunggal yang kita peroleh itu
•
murni+ kit dapat mengulang pengen'eran dengan menggunakan koloni ini se%agai sampel. $solasi dapat dilakukan dengan menggunakan media 'air dengan 'ara pengen'eran. Dasar melakukan pengen'eran adalah penurunan ¨ah mikroorganisme sehingga pada suatu saat hanya ditemukan satu sel di dalam ta%ung. Metode ini dilakukan dengan mengen'erkan sum%er isolat yang telah diketahui %eratnya ke dalam ml garam 0isiologi (Na4l )+95 :* atau larutan %u00er pospat.
4. M"T#D" Metode yang digunakan adalah metode tuang
