INFORME DE BIOQUIMICA N°3
Identificación cualitativa de monosacáridos y disacáridos Introducción
FACULTAD DE INGENIERIA AGRICOLA
ING: OLGA PERNA MANRIQUE
INTEGRANTES: MARCOS MARTINEZ ENRIQUE ALDANA CARLOS BENAVIDEZ
28 / 09 / 15
UNIVERSIDAD DE SUCRE SINCELEJO – SUCRE
Identificación cualitativa de monosacáridos y disacáridos Introducción
Los monosacáridos consisten en una sola molécula de azúcar y son llamados azucares simples, debido, a que están compuestos por moléculas de un mismo tipo, como lo son: la glucosa (azúcar), galactosa (lácteos) y fructosa (frutas), como se mostrara en el presente informe, por otra parte, se clasifican de acuerdo con el número de átomos de carbono presente (triosas, tetrosas, pentosas, hexosas, etc.). También tenemos, a A los azúcares constituidos por dos unidades se le denomina “disacáridos”; los disacáridos más ampliamente conocidos son la sacarosa (“azúcar de mesa”) y la lactosa (el azúcar de la leche). Los disacáridos están formados por la unión de dos monosacáridos, generalmente hexosas y son los oligosacáridos de mayor importancia biológica. El enlace que se establece entre las dos unidades de monosacáridos recibe el nombre de enlace glucosidico (más correctamente O-glucosidico), y consiste en la unión de dos grupos –OH (hidroxilo) con pérdida de una molécula de agua. Este enlace se forma entre un carbono (llamado anomérico) del primer monosacárido y cualquier otro del segundo. Esta, como todas las reacciones que se dan en las células no es espontánea sino está catalizada por enzimas. La reacción es reversible, pero en la naturaleza requiere también la presencia de enzimas hidrolíticas específicas para cada disacárido (maltasa, sacarosa etc.). De forma que el reconocimiento de cada uno de ellos se hace posible cuando se aplica los
métodos cualitativos tales como: la prueba de fheling, tollens, benedict, barfoef, seliwanoff, y finalmente bial.
Objetivos
Objetivo General: identificar mediante reacciones la presencia de carbohidratos de origen vegetal.
Específicos: Diferenciar mediante reacciones cualitativas los monosacáridos de los disacáridos y polisacáridos. Reconocer y analizar las reacciones que se llevan en cada una de las pruebas de Molish, Bial, Seliwanoff, fehling, tollens, benedict. Identificar azucares reductores y no reductores Reconocer la importancia de los carbohidratos a la hora del consumo.
METODOLOGIA
Análisis PRUEBA DE MOLISCH
Al aplicar este método, se permite poder reconocer los carbohidratos en los cuales los polisacáridos y los disacáridos se hidrolizan al momento de entrar en contacto con el ácido sulfúrico, teniendo en cuenta que la hidrolisis es una descomposición de sustancias orgánicas e inorgánicas complejas en otras más sencillas por acción de agua. El ácido sulfúrico concentrado hidroliza enlaces glicosídicos para dar monosacáridos que pueden ser luego deshidratado dando furfural y sus derivados. Estos productos se combinan luego con α - naftol originando un complejo púrpura, de tal forma que al realizar la práctica los resultados arrojados fueron todos positivos, de modo que hay presencia de monosacáridos, donde se nota que la reacción fue exotérmica pues libero calor después de reaccionar. Tal como ocurre en la glucosa. Al momento de reaccionar el ácido sulfúrico con la glucosa, le arranca una molécula de agua, de forma que convierte la molécula de glucosa en un derivado del furfurral en este caso el hidroximetilenfurufural. Al momento de reaccionar, se mezcla con el alfa-naftol en presencia de ácido sulfúrico, el cual rompe el doble enlace de grupo carbonilo, el cual se une a un compuesto mixto, en los cuales se presentan los sustituyentes acidos y fenólicos, que al momento de reaccionar torna una coloración rojiza o violeta creando un anillo en la prueba.
PRUEBA DE TOLLENS
El reactivo tollens permite reconocer las aldosas, mediante una reacción de oxidación donde solo se hace posible la reacción de aldosas, debido a que las cetosas en ningún momento tienden a reaccionar. se mezcla un agente oxidante suave con un aldehído o una cetona desconocida; si el compuesto se oxida, es un aldehído, si no ocurre reacción, es una cetona. El complejo de plata amoniacal [Ag(NH 3)2]+ en solución básica es el agente oxidante utilizado en la prueba de Tollens. Si hay un aldehído presente, éste se oxida a la sal del ácido RCOO-. Al mismo tiempo, se produce plata metálica Ag(s) por la reducción del complejo de plata amoniacal. La glucosa de la prueba positiva ya que tiene la función aldehído. La plata metálica producida en esta reacción recubre la parte interna del recipiente y forma un espejo de plata.
PRUEBA DE BENEDICT La prueba de reactivo benedict permite el reconocimiento de carbohidratos reductores, este contiene un ion cúprico en medio alcalino que se reduce hasta oxido cuproso en presencia de azucares con el hidroxilo hemiacetálico libre. Los azucares reductores, son aquellos monosacáridos que presentan un grupo aldehído en su estructura lineal como lo son: fructosa, glucosa y lactosa. Por otra parte, los azucares no reductores son aquellos que se unen por enlaces
glucosidico de tipo alfa o beta c u a n d o 2 monosacáridos iguales o diferentes se unen forman un Disac á r i d o , l o s Disacáridos por condensación liberan una molécula de agua y son azú car es no r educ tor es ya qu e el gr up o Oxidrilo ( OH ) de una hexosa se combina con el grupo Aldehído ( CHO ) de otra hexosa liberando 1 molécula de H20, el licor de Feeling no tiene efecto sobre ellos lo cual los determina como azúcares no reductores, por ej: la Sacarosa ( glucosa + fructosa )
Estos tienen presencia de agentes oxidantes, como iones metálicos (CU+2). De acuerdo, a los resultados obtenidos identificamos que la sacarosa fue la única prueba que no reacciono, ya que, al ser esta la unión de extremos nucleofilicos de la glucosa y la fructosa No poseen iones libres para formar una reacción de reducción
PRUEBA DE SELIWANOFF La prueba de seliwanoff sirve para diferenciar una aldosa de una cetosa Tanto las aldosas como las cetosas en presencia de ácidos minerales y en un medio caliente sufren procesos de deshidratación, lo cual da como producto un anillo pentagonal de furfural o hidroximetilfurfural, según sea el monosacárido
pentosa o hexosa, los furfurales se condensas dando una coloración roja. Las cetosas se deshidratan más rápido que las aldosas, lo cual permite diferenciarlos. En la prueba de Seliwanoff en los resultados obtenidos se tiene que la fructosa da no reacciona, puede ser a que no se dejó el tiempo necesario para que ocurriera la reacción; por contrario, la sacarosa nos dio positivo debido a que esta al contener fructosa da un resultado positivo si se deja correr el tiempo adecuado para que se efectué la hidrolisis acida en donde la sacarosa libera fructosa.
Prueba de bial El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma complejos de coloración sólo con las pentosas, la base de dicha prueba es la formación de furfural, al hacer reaccionar pentosas con el reactivo bial da un resultado positivo, debido a que El furfural que esta contiene es un aldehído electrofilico, en presencia de ácido, adiciona fenoles (con pérdida de agua) produciendo sustancias altamente coloreadas, las pentosas originan una coloración azul-verde. En la prueba de Bial los resultados obtenidos con fructosa y glucosa nos dan negativo ya al no ser pentosas no dan una coloración positiva, sin embargo la pentosa al reaccionar con el reactivo de Bial originan una coloración verde muy claro, lo que nos indica que la prueba es positiva
RESULTADOS REACCION DE MOLISH
REACCION DE FEHLING+
REACCION DE TOLLENS
RACCION DE SELIWANOFF
Conclusiones De la práctica realizada se puede concluir: Los carbohidratos ayudan al metabolismo energético, además, sirven efectivamente como combustible de utilización inmediata para producir energía. En la prueba de molisch en la reacción con el ácido sulfúrico los disacáridos y polisacáridos se hidrolizan logrando la identificación de los monosacáridos que los componen. 1. La prueba de Tollens : es un procedimiento de laboratorio para distinguir un aldehído de una cetona: se mezcla un agente oxidante suave con un aldehído o una cetona desconocida; si el compuesto se oxida, es un aldehído, si no ocurre reacción, es una cetona. La prueba de feelling: El cambio de coloración a rojo ladrillo indica la presencia de azucares reductores, esto se debe a las reacciones de oxidación que se dan en los monosacáridos Prueba de benedict; La prueba de reactivo benedict permite el reconocimiento de carbohidratos reductores Prueba de molisch: E s t e e n s a y o e s u n e n s a y o p a r a recon ocimiento general de carbohidratos en el qu e l o s polisacáridos y disacáridos se hidrolizan
Prueba de bial: : El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma complejos de coloración sólo con las pentosas. PRUEBA DE SELLIWANOFF: 2. Los Azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar con otras moléculas y es reductor porque es capaz de reducir su carbono anomérico, formando enlaces glucosidico con otras moléculas de azúcares. 4. La plata y sus derivados pueden llegar a ser productos muy tóxicos al ambiente en grandes concentraciones ya que es absorbida por los tejidos lentamente ocasionando pigmentación en los mismos color negruzco. Puede ocasionar daños irreversibles en tejidos renales, hepáticos pulmonares y cerebrales.
http://www.fsalazar.bizland.com/pdf/POLISACARIDOS.pdf https://es.scribd.com/doc/126121136/Determinacion-de-Carbohidratos-Practica-1 https://biologiaupc.files.wordpress.com/2012/08/lab-de-carbohidratos.pdf http://www.academia.edu/6891511/PRACTICA_DE_LABORATORIO_No_1_carbohidratos