19046859 Hidrolisis Acida y Enzimatica Del Almidon

HIDRÓLISISACIDAYENZIMATICADELALMIDÓN Polisacáridos Senecesitanmásde10unidadesdeazúcaryaveceshastamilesdeunid Senecesitanmásde10unidadesdeazúcarya veceshastamilesdeunidades ades paraformarlospolisacáridos.Elalmidónesl paraformarlospolisa cáridos.Elalmidóneslaprincipalreservadeen aprincipalreservadeenergíade ergíade lashortalizasderaízyloscereales.Estáfo lashortalizasderaíz yloscereales.Estáformadoporlargascadenas rmadoporlargascadenasde de glucosaenformadegránulos,cuyotamañoyfo glucosaenformadegr ánulos,cuyotamañoyformavaríansegúnelveget rmavaríansegúnelvegetaldel aldel queformaparte. Lospolisacáridossinalmidónsonlosprincipa Lospolisacáridossin almidónsonlosprincipalescomponentesdelafib lescomponentesdelafibra ra alimenticia.Entreellosestán:lacelulosa,l alimenticia.Entreell osestán:lacelulosa,lashemicelulosas,laspec ashemicelulosas,laspectinasylas tinasylas gomas.Lacelulosaeselcomponenteprincipaldelasparedescelulares gomas.Lacelulosaeselcomponenteprincipal delasparedescelulares vegetalesyestáformadapormilesdeunidades 

1.Homopolisacáridos:unmismoconstituyenteentodalacadenaEj. 1.Homopolisacáridos:unmismoconstituyentee ntodalacadenaEj. Almidón,glucógeno,celulosa,inulina 

2.Heteropolisacáridos:Diferentescomponentesenlacadenaej. 2.Heteropolisacáridos:Diferentescomponentes enlacadenaej. Heparina,ácidohialurónico,condroitinas. ALMIDÓN Probablementenoexisteotrocompuestoorgánicotanampliamentedistrib Probablementenoexisteotrocompuestoorgánic otanampliamentedistribuido uido enlosvegetalescomoelalmidón.Eselproduc enlosvegetalescomo elalmidón.Eselproductodeasimilaciónmás todeasimilaciónmás importantedelafotosíntesisyconstituyela importantedelafotos íntesisyconstituyelaprincipalsustanciadere principalsustanciadereservade servade losvegetales. Químicamenteelalmidónoféculaesunpolisac Químicamenteelalmidó noféculaesunpolisacáridohomogéneoqueestá áridohomogéneoqueestá formadoporunamezcladedospolisacáridoses formadoporunamezcla dedospolisacáridosestructuralmentediferentes tructuralmentediferentes: : amilosayamilopectina. -Amilosaesunamoléculalinealcompuestapor250a300unidadesdea-D -Amilosaesunamoléculalinealcompuestapor 250a300unidadesdea-Dglucopirano glucopirano sa enlazadasporuniones1-4. -Laamilopectinaesramificada,constituidapor1.000a3.000unidades -Laamilopectinaesramificada,constituidapo r1.000a3.000unidadesde de glucosaconectadasporuniones1-4y1-6enlo glucosaconectadaspor uniones1-4y1-6enlospuntosderamificación. spuntosderamificación. Elalmidónseencuentraenabundanciaen: -Gramíneas(cereales):trigo(Triticumsativum -Gramíneas(cereales): trigo(Triticumsativum);arroz(Oryzasativa); );arroz(Oryzasativa);maíz maíz (Zeamays;);avena(Avenasativa);centeno(Se (Zeamays;);avena(Av enasativa);centeno(Secalecereale);cebada(Ho calecereale);cebada(Hordeum rdeum vulgare). -Leguminosas(legumbres):porotos(Phaseolusvu -Leguminosas(legumbre s):porotos(Phaseolusvulgaris);arvejas(Pisum lgaris);arvejas(Pisum sativum);lentejas(Lenssculenta),etc. -Solanáceas:papas(Solanumtuberosum). Industrialmenteseleobtieneporvíahúmedaa Industrialmentesele obtieneporvíahúmedaapartirdeellos. partirdeellos.

Característicaypropiedades:Sepresentacomopolvoblancofino,insípido, constituidoporgranoscaracterísticosmicroscópicamenteparacadaespecie. Parasucaracterizaciónsetomaencuenta:tamaño(aprox.2-150u),forma, hilioonúcleo,estratificaciones;granossimplesocompuestosyaspectosala luzpolarizada. Elalmidónesinsolubleenaguafría;enaguacalientesehinchaformando engrudo;setiñedeazulaazulvioletaconsol.Rlugol;daglucosacomo productofinaldelahidrólisistotal. Usos:enalimentación;pordegradaciónparcialseobtieneunamezclade polisacáridosdenominadoscomodextrina;obtenciónindustrialdeglucosapor hidrólisistotal;comoreactivoindicadorenyodometría;comoaprestode textilesypapel,etc.

ALFAAMILASA. Elnombredediastasascorrespondeaunsinónimodelasamilasas,aunquese usaprincipalmenteparadesignarlaalfa-amilasa,queseextraedecereales. Origendealfa-amilasa:Fúngico(Aspergillusoryzae),bacteriano(B. stearothermophilus,B.subtilis),decerealesydelpáncreas. Laenzimaalfa-amilasaseencuentraenpocacantidadeneltrigoyabundamás enaquelquehasidoparcialmentegerminado.Labeta-amilasa,porelcontrario, seencuentraengrancantidadenestecereal. Acciones:Comoessabido,elalmidónestáformadoporlafracciónamilosade cadenarectademoléculasdeglucosaunidasporenlacesglucosídicosalfa-1,4; entantoquelafracciónamilopectina,ademásdelacadenarecta,presenta ramificacionesconenlacesglucosídicos1,6. Laalfa-amilasacatalizalahidrólisisdelacadenalineal(amilosa)yla ramificada(amilopectina)delalmidón,rompiendoenlaces1,4interiores (endoamilasa)paraformarunamezcladedextrinas; Porelloselaconocecomoenzimadextrinogénica(mezcladeamilodextrina, eritrodextrina,acrodextrinaymaltodextrina)conpocaproduccióndemaltosa.

Porsuacción,laalfa-amilasaproveedefragmentosmenoresquepuedenser utilizadosporlaenzimabeta-amilasa.Laenzimaalfa-amilasarequieredeun activadorcomo,porej.,clorurodesodio.Essensibleaunaacidezelevadayse vuelveinactivaapH3,3oapHmenora0°Cpor15min.ElpHóptimode acciónestádentrodelrango5-7,siendode6,5paralaalfa-amilasabacteriana ypancreática.Laenzimaesresistentealcalor,puesa70°Cconservaun70% desuactividad.Actúasobrealmidonescrudosygelatinizados. FUNDAMENTO: -LahidrólisisácidaporaccióndelHCla100ºCproduceunahidrólisistotal delalmidónyformaglucosa,maltosa,eisomaltosa. -Lahidrólisisenzimáticaporaccióndelaenzimaalfaamilasaproduceuna hidrólisisparcialproduciendomaltosa,glucosaydextrinalímitequeesuna cadenaramificadayparapoderromperlasenecesitadea-1-6glucosidasa. OBJETIVOS: -Recordarlosconceptosdehidrólisisalrealizarlapractica. -Identificarlaestructuradelalmidón. -Reconocerquecompuestosdaporhidrólisiselalmidón. SUSTANCIAS: -Almidónal2% -ClHconc -Lugol -Enzimaalfaamilasa -Azucares(Glucosa,maltosa) -ReactivodeBenedict MATERIALES: -Fiola -Placadeporcelana -Reverbero -Tubosdeensayo -Pipetas

PROCEDIMIENTO: HIDRÓLISISACIDA:Agregar20mldealmidónal2%enunafiola,luego agregar1mldeClHconc,mezclar,llevaraunbañodeMariahirviendo,anotar eltiempodeiniciodelahidrólisis,luegocada5minutoshacerunareacción conlugolenunaplacadeporcelana.Hacerlareacciónhastaqueyanohayael colornegruzcosinoqueadquieraelcolordellugolqueescomocafé.Anotarel tiempodelahidrólisisácidaylafiolasiempredebeestarenelbaño. HIDRÓLISISENZIMÁTICA:Enuntubodeensayo16x100medir4mlde almidónal2%,hacerunbañoa37ºCpor5minutos,luegoagregar200uldela enzimaalfaamilasa,mezclar,anotareltiempodeiniciodelahidrólisisycada 5minutoshacerlareacciónconlugolhastacompletar15minutos.Alos15 minutossinsacareltubodeensayo0,5mldelhidrolizadoquecorresponderáal delo155minutos,luegoeneltuboqueestáenelbañocontinuarhaciendola reacciónconLugohastalos30minutos,retirareltubodelbaño. Paraconfirmarazucaresreductoresrealizarlareacciónde Benedict: Sol.Almidón-------------------------0,5ml Glucosa-------------------------------0,5ml Maltosa-------------------------------0,5ml Hidrolizadoenzimático(15´)------0,5ml Hidrolizadoenzimático(30´)------0,5ml Hidrolizadoácido-------------------0,5ml R.deBenedict-----------------------2,5mlc/tubo Hacerunbañodeaguahirviendopor5minutos,retirarlostubosyobservar. RESULTADOS REACTIVOREACCIONOBSERVACIONES SolalmidónGlucosa+Hidrólisistotal Maltosa+Hidrólisistotal H.enz.(15´)+Hidrólisisparcial H.enz.(30´)+Hidrólisisparcial H.acida+Hidrólisistotal Enlahidrólisisácidaseproduceunrompimientototaldelosenlacesque mantienenunidoalosmonómerosdelalmidónyseformaglucosa,maltosa, isomaltosa. Enlahidrólisisenzimáticaseproduceunrompimientoparcialdelosenlaces quemantienesunidoalasunidadesdelalmidónyseformarámaltosa,glucosa ydextrinalímitequeesunacadenaramificada.

UNIVERSIDADDEGUAYAQUIL FACULTADDECIENCIASQUIMICAS ESCUELADEQUIMICAYFARMACIA LABORATORIO DE BIOQUIMICA TEMA: SEPARACIONDECARBOHIDRATOS PORCROMATOGRAFIA ENCAPAFINA GRUPO#1 INTEGRANTES: NAHUMMALDONADO LUISTOALA GERARDOGUERRERO JAIMECAMINOVALDEZ JAVIERMURILLOMERO