SPEKTROFOTOMETRI SPEKTROFOT OMETRI MASSA
Dede Mirtha Adi P
Deasy Paramitha Sari
Reni Pebrianti
Risa Septi Handayani
Riska Narulita Putri S
Lukyta Setyo Hapsari
Eva Apriliyana R
Dita Rani Pupitasari
Tobok Jonathan Sianturi
Cita Royani
Melly Ariyani
Elsa Ardiana Harim Putri Irma Y Ali Ridwan Rahmad Aprianto Yulinda Tri Wahyuti Rosyta Velayanti Bernike Tiara Nora F Suryani Dian Afnitasari Anis Rahmatun Sri Anggun
Spektrofotometri Massa Spektrofotometri massa, tidak seperti metoda spektroskopi yang lain, tidak melibatkan interaksi antara radiasi ektromagnetik dan materi.
Spektrometer massa : adalah alat atau instrumen yang digunakan untuk menentukan struktur kimia dari molekul organik berdasarkan perhitungan massa dari molekul tersebut serta pola fragmentasinya
Prinsip Dasar •
•
•
•
Dalam spektrometri massa, molekul sampel dalam fase uap dibombardir dengan elektron berenergi tinggi (70 eV) yang menyebabkan lepasnya satu elektron dari kulit valensi molekul tersebut. Molekul yang kehilangan satu electron akan menjadi suatu kation radikal
(M)
+ e-
(M+.)
+ 2e-
Kation radikal tersebut mengandung semua atomatom dari molekul asal, minus satu elektron, dan disebut ion molekul /molecular ion , dan dinyatakan dengan M+. .
Instrumentasi
A. Ionisasi Elektron (EI) Ionisasi Elektron (EI) Juga disebut sebagai ionisasi tubrukan elektron, ionisasi electron merupakan metode ionisasi yang tertua dan terbaik untuk mengkarakterisasi dari semua metode ionisasi. Sebuah berkas elektron melewati sampel fase gas. Elektron yang bertabrakan dengan molekul analit netral bisa knock off elektron lain, menghasilkan ion bermuatan positif. Proses ionisasi dapat menghasilkan ion molekul yang akan memiliki berat molekul yang sama dan komposisi unsur dari analit awal, atau dapat menghasilkan ion fragmen yang sesuai dengan bagian yang lebih kecil dari molekul analit.
Lanjutan... Potensi ionisasi merupakan energi elektron yang akan menghasilkan ion molekuler. Potensial tampil sebagai ion fragmen yang diberikan energi elektron yang akan menghasilkan ion fragmen. Ei merupakan spektrometer massa yang menggunakan elektron dengan energi 70 elektron volt (eV). Penurunan energi elektron dapat mengurangi fragmentasi, tetapi juga mengurangi jumlah ion yang terbentuk.
Keunggulan:
Dapat diaplikasikan untuk hampir semua senyawa volatile
Dapat menghasilkan spektrum massa
Fragmentasi menyediakan informasi struktur
Perpustakaan spektrum massa dapat dicari "sidik jari" massa EI spektral
Kekurangan:
Sampel harus secara termal mudah menguap dan stabil
Molekul Ion mungkin lemah atau tidak ada untuk banyak senyawa.
Hanya dapat menganalisis senyawa dengan berat molekul rendah (<1000 Amu)
B. Ionisasi Kimia (CI) Ionisasi kimia menggunakan reaksi ion-molekul untuk menghasilkan ion dari analit. Proses ionisasi kimia dimulai ketika pereaksi gas seperti metana, isobutana, atau amonia terionisasi oleh karena tabrakan elektron. Gas reagen dengan tekanan tinggi (atau waktu reaksi yang lama) menghasilkan reaksi ion-molekul antara ion reagen gas dan reagen gas netral. Beberapa produk dari reaksi ion-molekul dapat bereaksi dengan molekul analit untuk menghasilkan ion analit.
Lanjutan...
R + e ---> R +. 2e +
R +. + RH ---> RH + + R
RH + + S ---> SH + + R
(R = reagent, S = sample, E = electron, . = radical electron , H = hydrogen)
Keunggulan:
Memberikan informasi berat molekul melalui molekul ion seperti ion [M + H] +, bahkan ketika EI tidak akan menghasilkan ion molekuler.
Spektrum massanya sederhana, pola fragmentasi berkurang dibandingkan dengan EI
Kekurangan:
Sampel harus secara termal mudah menguap dan stabil
Fragmentasinya kurang dari EI, pola fragmen tidak cukup informatif
Hasilnya tergantung pada jenis reagen gas, tekanan pereaksi gas atau waktu reaksi, dan sifat sampel.
C. Electrospray Ionization (ESI) Larutan sampel disemprotkan di perbedaan potensial tinggi (beberapa kilovolt) dari jarum ke sebuah lubang dalam antarmuka. Panas dan aliran gas digunakan untuk ion desolvate yang ada dalam larutan sampel. Ionisasi elektrospray dapat menghasilkan ion multiply yang dibebankan dengan jumlah beban yang cenderung meningkat dengan meningkatnya berat molekul.
Keunggulan:
Baik untuk dibebankan, senyawa polar atau dasar
Pendeteksian massa senyawa yang tinggi pada massa-untukbiaya rasio yang mudah ditentukan oleh spektrometer massa yang paling (m/z biasanya kurang dari 2000 hingga 3000).
Metode terbaik untuk menganalisis senyawa multiply
Latar belakang kimia yang sangat rendah menyebabkan batas deteksi yang sangat baik
Dapat mengendalikan atau tidak adanya fragmentasi dengan mengendalikan potensi antarmuka lensa
Kompatibel dengan MS/MS metode
Kekurangan: Spesies multiply dibebankan membutuhkan interpretasi dan transformasi matematika (kadangkadang bisa sulit) Dilengkapi dengan APCI. Tidak baik untuk bermuatan, non-dasar, senyawa dengan polaritas (egsteroids) Sangat sensitif terhadap kontaminan seperti logam alkali atau senyawa utama Aliran ion relatif rendah Hardware relatif kompleks dibandingkan dengan sumber ion lain
D. MALDI-TOF/MS (Matrix Assisted Laser Desorption / Ionisation-Time of Flight/Mass Spectrometry ) Metode baru yang lebih cepat dan lengkap untuk mendeteksi senyawa hasil metabolisme seperti gula, asam lemak, asam amino, dan senyawa organik lainnya dari jaringan hewan atau tumbuhan. Matriks terdiri dari pengkristalan molekul.
Identitas sesuai senyawa matriks ditentukan sampai batas tertentu dengan trial dan error, tetapi didasarkan pada beberapa pertimbangan desain molekul: Matriks yang mempunyai cukup berat molekul rendah tetapi cukup besar untuk tidak menguap selama persiapan sampel. Sering bersifat asam, bertindak sebagai sumber proton untuk mendorong ionisasi dari analitik. Memiliki penyerapan optik yang kuat, baik di UV atau jangkauan IR. polar functionalized dengan kelompok, Bersifat sehingga penggunaannya dalam larutan berair.
Keunggulan: Cepat dan dapat menentukan secara tepat berat molekul
Kekurangan:
Memerlukan analisa massa yang kompatibel dengan teknik ionisasi berpulsa
Tidak mudah kompatibel dengan LC / MS
Sinar laser tidak hanya menghasilkan ion dari molekul yang dianalisa akan tetapi juga membentuk ion-ion dengan berat molekul kecil (<500 Da) yang berasal dari matriks.
“Disebabkan adanya pengganggu ini maka kita tidak dapat menganalisa molekul kecil seperti senyawa metabolit yang memerankan peran penting dalam metabolisme makhluk hidup”
