INSTITUTO INSTITUT O POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA
SEPARACION DE FOSFOLIPIDOS POR CROMATOGRAFIA CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA. Alumnos:
Calderón Torres Torres Erika González Silva Adilene Hernández Sánchez Gustavo A. Fecha:
Sección: 2
!"A#ril"2
%$NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
INTRODUCCION: Los Los lípido lípidos, s, son un grupo grupo de compue compuesto stos s quím químic ica ament mente e dive divers rso os, solub oluble les s en solve solvente ntes s org orgnic nicos os !com !como o clor cloro" o"or ormo mo,, metano metanoll o bencen benceno#, o#, $ casi casi insolu insoluble bles s en agua% agua% La ma$orí ma$oría a de los organ organism ismos, os, los utili utili&a &an n como como rese reservo rvorio rios s de mol'c mol'cul ulas as "cilmente "cilmente utili&ables utili&ables para producir producir energía energía !ace !aceit ites es $ gras grasas as#% #% Los Los mamí mamí"e "erros, os, los los acumulamos como grasas, $ los peces como ceras( en las plantas se almacenan en "orma de aceites protectores con aromas $ sabores característ característicos% icos% Los "os"olípidos "os"olípidos $ esteroles esteroles cons consti titu tu$e $en n alre alrede dedo dorr de la mita mitad d de la masa de las membranas biol)gicas% biol)gicas% *ntre los lípidos tambi'n se encuentran co"actores de en&ima en&imas, s, acarr acarread eadore ores s de electr electrone ones, s, pigm pigmen ento tos s que que abso absorb rben en lu&, lu&, agen agente tes s emul emulsi si+c +ca antes ntes,, algun lgunas as vita vitami mina nas s $ ormonas, mensa-eros intracelulares $ todos los los compo ompone nent nte es no pro proteíc teíco os de las las membranas celulares% Los líp lípidos, pued ueden ser separados dos "ci "cilm lmen ente te de otra otras s biom biomol ol'c 'cul ulas as por por e.tra .tracc cci) i)n n con con solv solven ente tes s org orgni nico cos s $ pueden ser separad rados por t'cnica icas
e.perimenta e.perimentales les como la cromatogr cromatogra"ía a"ía de adsorc adsorci)n i)n,, croma cromatog togra" ra"ía ía de placa placa +na $ cromatogra"ía de "ase reversa% O/0*TI1O: 2eparar los "os"olípidos de la $ema de uevo por cromatogra"ía en capa +na% R*2ULT3DO2: Cromatogr Cromatogramas amas revelados revelados con: ninidrina, ninidrina, molibdato, bismuto $ $odo%
Tabla Tabla I: resultados de R" de muestras de $ema de uevo de pato $ de galli na% Pato
Molibdato
Yodo
1 2
4%456 4%849
4%768 4%;7
Ni
Gallina 1 2
4%7< >olibdato 4%6;7 4%<<8
4%= ?odo 4%6; 4%<= 4%98=
*-emplo de clculos: Distancia recorrida por el solvente @ ;%< cm
Rf
=
Rf
=
distancia recorrida porla muestra distanciarecorrida por el solvente 0.6 6.5
=
0.092
la literatura, en molibdato se identi+caron los "os"olípidos en general dando una coloraci)n color a&ul $a que, reacciona con grupos "os"atos, con bismuto se revelaron "os"olípidos que contienen colina !"os"atidilcolina, es+ngomielina, lecitina e isolecitina#, el reactivo de ninidrina reacciona con los grupos amino dando una coloraci)n violeta !"os"atidiletanolamina $ "os"atidil serina#, la Altima placa se revelo con $odo este reactivo revelo lípidos que tienen dobles enlaces, al igual que con molibdato todos los "os"olípidos reaccionaron los observamos de color ca"'% CONCLU2ION*2: ℘
DI2CU2ION: ℘
3l separar "os"olípidos por medio de cromatogra"ía en papel, identi+camos los "os"olípidos que contiene la $ema de uevo de pato $ de gallina, la $ema de uevo contiene: "os"atidilcolina, "os"atidiletanolamina, es+ngomielina, colesterol, lecitina e isolecitina% ?a que los lípidos son solubles en solventes orgnicos se pueden e.traer de los te-idos% Los "os"olípidos se separan en la placa con una "ase m)vil debido a sus propiedades de polaridad se pueden ir separando a lo largo de la placa% La identi+caci)n se i&o comparando cada cromatograma con el per+l de corrimiento en capa +na de "os"olípidos, tambi'n calculamos los valores de R" de cada una de las marcas que se revelaron con los reactivos los cuales se pueden comparar con valores reportados en
℘
Las propiedades de polaridad de los "os"olípidos permiten su separaci)n por cromatogra"ía% Bor medio de reacciones coloridas se pueden identi+car% *l R" tambi'n es un valor que sirve para identi+car el tipo de "os"olípido separado%
/I/LIOR3I3: o
*% 1a&que&EContreras, /ioquímica $ /iologogía >olecular en línea% Instituto de FuímicaEUN3>% ttp:GGlaguna%"medic%unam%m.GHeva &que&G448Gtipos64lipidos%tml%
o o
>acarulla, 0ose >%, eli. >% oJi% K/ioquímica umana: curso bsico% 6da edici)n% *ditorial reverte 2%3% Bag% 58
