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Cromatografía de líquidos HPLC
Descripción: cromatografia
CROMATOGRAFIA POR A FINIDADE FINIDADE
DEFINIÇÃO
“Cromatografia de Afinidade envolve a ligação
covalente de um reagente, denominado ligante de afinidade, a um suporte sólido.” 1
COMO FUNCIONA A fase estacionária estacionária para para esta cromatografia cromatografia é um sólido, como a agarose ou microesferas de vidro, no qual é imobilizado o ligante de afinidade.
O ligante pode ser de várias naturezas desde, anticorpos, antigénios, enzimas, substratos, etc..
COMO FUNCIONA A fase móvel vai desempenhar dois papeis distintos. 1 – Permitir uma forte ligação das moléculas do analito ao ligante. 2 – Remover as espécies indesejáveis e com o enfraquecimento da ligação, molécula de analito – ligante fazer a eluição do analito em si.
COMO FUNCIONA Em relação à segunda função esta pode ser feita com: Mudança no Ph Força iónica Isto vai permitir alterar as condições condi ções da eluição durante as duas fases do processo.
Este tipo de cromatografia tem como vantagem ser extraordinariamente seletiva. Foram usadas primeiramente no isolamento rápido de biomoléculas durante um trabalho preparativo.