REACCIONES SEROLÓGICAS: AGLUTINACIÓN Y PRECIPITACIÓN INTRODUCCION Las Las reac reacci cion ones es sero seroló lógic gicas as son son aque aquell llas as reac reacci cion ones es antí antíge geno no y anti anticu cuerp erpo o que que son son realizadas con el fn de comprobar la presencia de anticuerpos en la sangre; realizándose un examen que tiene como fn conocer la exposición o presencia de un microorganismo patógeno en particular y a partir de ella ver la capacidad de respuesta del individuo a tal inección, se puede utilizar la sangre o tomar solo el suero, el cual se obtiene luego de centriugar la sangre coagulada. ste examen serológico se realiza tambi!n para descartar sospec"as de alguna inección. n nuestro caso estaremos traba#ando con bacteria salmonella typ"i. $amos a poder observar cómo es que se dan estas reacciones con esta bacteria, lo veremos en una reacción de aglutinación; a continuación veremos la reacción antígeno % anticuerpo con la muestra de suero "umano "aciendo uso de la reacción de precipitación.
OBJETIVOS • •
&prender a dierenciar y saber cómo se realizan las reacciones serológicas. 'omprender como es que el anticuerpo y el antígeno reaccionan a trav!s de la aglutinación y la línea de precipitación.
FUNDAMENTO TEORICO Las pruebas pruebas serológ serológicas icas basadas basadas en la reacció reacción n antígeno antígeno anticuer anticuerpo po constituye constituyen n una valiosa valiosa "erra "erramie mienta nta en el diagnó diagnósti stico co y mane# mane#o o de la ener enerme medad dad inecc ineccios iosa. a. (u intro introduc ducció ción n como como ayudas diagnósticas se inició a fnales del siglo pasado y tuvo uno de sus momentos estelares "acia )*+ cuando &ugust $on -assermann /, adaptó la f#ación de complemento desarrollada por 0ules 1ordet 23,4/ al diagnóstico de la síflis 25/, convirti!ndola en un procedimiento procedimiento clásico que "asta "ace pocos a6os constituía el pilar undamental de laboratorio para el diagnóstico de esta enermedad, ue la amosa reacción de -assermann. 7e entonces a nuestros días las pruebas serológicas serológicas "an recorrido recorrido un largo camino buscando la precisión del diagnóstico de la enermedad inecciosa.
Reacción ser!ó"ica #e A"!$%inación n las t!cnicas de grupos sanguíneos eritrocitarios las reacciones más importantes son las de agluti aglutinac nación ión.. Los Los antíge antígenos nos situad situados os en la membra membrana na de los "emat "ematíes íes reacc reaccion ionan an con con los anticuerpos y el resultado de la reacción es la ormación de grumos de "ematíes o aglutinados. Las determinaciones de antígenos "emáticos y el estudio de anticuerpos en sueros se basan prin princ cipa ipalme lmente nte en la aglut glutin ina ació ción de los los "ematí matíes es,, aunqu unque e en oca ocasion iones la unió unión n antígeno8anticuerpo que activa la vía clásica del sistema del complemento puede ser detectada por una "emólisis 9in vitro:. Los anticuerpos de grupo sanguíneo esencialmente "emolíticos son anti<&, anti<1, antin acto actorr muy impor importan tante te es el tipo tipo de inmuno inmunoglo globul bulina ina a que perten pertenece ecen n los anticu anticuerp erpos os reaccionantes. (i los anticuerpos son del tipo ?g@ la aglutinación se produce directamente. =or su tama6o molecular y la distribución de los lugares de reacción con los antígenos, pueden unirse ácilmente con varios "ematíes y producir su aglutinación.
Reacción Ser!ó"ica #e Preci&i%ación Las pruebas de precipitación, cuya dinámica ue estudiada por Aeildelberger "acia ).*4+ 2/, constituyen una de las pruebas secundarias más versátiles. La característica undamental de !sta, es que el antígeno está siempre en dilución en una solución tampón la cual generalmente es solución salina. Aeildelberger 2/ encontró que el undamento visible de la reacción antígeno< anticuerpo ocurre en las reacciones de precipitación solamente cuando los dos componentes están en proporciones óptimas y que este enómeno puede evidenciarse claramente en la llamada curva de precipitación; cuando se coloca una serie de capilares con concentraciones descendentes de anticuerpos dirigidos contra una concentración constante del antígeno "omólogo en dilución, se produce, luego de un período de incubación, el enómeno visible y se puede determinar la presencia de tres zonas claramente dierenciables. >tilizada en el diagnóstico serológico de los antígenos solubles. (e realiza en un gel con ob#eto de que los antígenos y anticuerpos puedan diundir libremente y que, por el contrario, el entramado tridimensional ormado entre antígenos y anticuerpos específcos quede atrapado en el gel, ormando un precipitado macroscópico.
La ser!"'a #e! "(ner Sa!)ne!!a constituye el complemento necesario para el diagnóstico de la febre tioidea. •
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l g!nero (almonella tiene principalmente dos clases de antígenos. o
l antígeno BC o antígeno somático termoestable.
o
l antígeno BAC o antígeno Dagelar termolábil.
& partir de la segunda semana, el paciente que sure de febre tioidea, contiene anticuerpos en la sangre, que pueden ser identifcados probando el suero del paciente contra antígenos de (almonellas, los cuales pueden ser demostrados por la reacción de -idal.
La reacción de -idal incluye o
&glutinación en placa
=rocedimiento ampliamente utilizado por su simplicidad.
MATERIALES *Para !a reacción #e A"!$%inación • • • • •
'ultivo de salmonella typ"i (uero anti salmonella typ"i =orta ob#eto &za bacteriológica @ec"ero
EPara !a reacción #e Preci&i%ación • • •
>na lámina porta ob#eto 'olocar ) gota de &gar Foble 24<5ml/ &ntígeno suero "umano
• • •
&nticuerpo suero "umano =laca =etri 'oloración azul de amidosc"aiGtz
PROCEDIMIENTO Para !a reacción #e A"!$%inación ). n una lámina porta ob#eto, colocamos una gota del antígeno. 3. n la misma lámina colocamos una gota del anticuerpo. 4. bservamos si "ay reacción.
Para !a reacción #e Preci&i%ación •
n una lámina porta ob#eto colocar ) gota de &gar Foble 24<5ml/
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'olocar el antígeno y el anticuerpo esto debe estar a una distancia de Hmm.
ANTIGENO
&FI?'>J=
SUERO
(>J
,)) • • •
'olocar el colorante azul. 'olocarlo en una placa =etri con agua y de#arlo encubar por 4 días. bservar cómo se ormó la línea de =recipitación.
Línea de =reci itación
RESULTADOS •
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n el primer caso de aglutinación observamos perectamente la reacción ocurrida, se ormó unos grumos blancos en la reacción.
n el segundo caso de precipitación tambi!n pudimos observar cómo ue que reacciono el suero "umano con su antígeno y su anticuerpo ormándose la línea de precipitación.
DISCUSION •
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La primera prueba ue muy sencilla ya ue solo se colocó el antígeno y el anticuerpo #untos y se esperó a que ocurra la reacción, la cual se observó por los peque6os grumos blancos que presentaba; a la cual se le llama aglutinación. Aubo complicaciones a la "ora de observar todos, ya que todos se amontonaban para ver la reacción. sta práctica se realizó con muc"o cuidado ya que se usó la bacteria de la salmonella typ"i, el cual es muy contagioso. n la segunda reacción de precipitación, solo observamos el resultado fnal que se pudo observar gracias a la coloración azul, pudimos divisar la línea de precipitación.
CONCLUCION •
Llegamos a la conclusión de que las reacciones serológicas son pruebas muy necesarias para saber cómo es que reaccionan los antígenos y anticuerpos, si es que "ay reacción o no, con estas pruebas se pueden detectar enermedades inecciosas y tambi!n los grupos sanguíneos, en la actualidad son de gran utilidad ya que es requerida cuando se ingresa un elemento extra6o al cuerpo de una persona, para saber que reacción va a provocar.
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