Tabel Tabel 2. Rangkuman Rangku man Analisis Analisis Uji Protein Metode Kualitatif dan Kuantitatif Jenis Analisis F I T A T I L A U K S I S I L A N A
Nama Metode
Tujuan
Prinsip Kerja
Uji Positif/ Penentuan hasil terbentuk %arna ungu #&iolet$
Membuktikan on !u2" #dari adanya molekul- pereaksi biuret$ molekul peptida dalam suasana dari protein. basa akan bereaksi dengan ikatan-ikatan peptida yang menyusun protein membentuk senya%a kompleks ber%arna ungu #&iolet$. Uji 'ant 'antop oprrotei otein n Menu Menunj njuk ukka kan n )itrasi inti Mun*ulnya keberadaan ben(ena yang gumpalan atau gugus ben(ene terdapat pada *in*in %arna pada protein. molekul protein. kuning. Uji Uji +opk +opkin inss-!o !ole le Menu Menunj njuk ukka kan n Terjadi Adanya *in*in adanya asam kondensasi ungu pada bidang amino triptofan triptofan dengan batas. pada protein.. gugus alde,ida dari asam glioksilat dalam suasana asam pekat. Uji Millon Membuktikan Ternitrasinya Adanya endapan adanya tirosin tirosin mera, bata pada pada protein. membentuk ter,adap asam garam merkuri amino yang diuji. yang ber%arna mera,. Uji )in,idrin Membuktikan emua asam Membentuk adanya asam amino atau senya%a kompleks amino bebas peptida yang ber%arna biru dalam protein. mengandung ungu. Untuk prolin asam -amino dan ,idroksi prolin bebas dan akan meng,asilkan sedikitnya satu senya%a ber%arna gugus ,idroksil kuning akan bereaksi dengan nin,idrin #triketo,idrindena ,idrat$ Uji Biuret
membentuk senya%a kompleks ber%arna biru ungu. Untuk prolin dan ,idroksi prolin akan meng,asilkan senya%a ber%arna kuning F I T A T I T N A U K S I S I L A N A
Metode Kjelda,l
Metode pektrofotometri 5isible #Biuret$
menganalisis kadar protein kasar dalam ba,an makanan se*ara tidak langsung.
menentukan kadar protein dengan menganalisis adanya ikatan peptida dengan *ara menamba,kan
Terdiri dari / ta,ap0 yaitu1 . Destrusi menggunakan asam sulfat dan katalis meng,asilkan amonium sulfat. 2. Destilasi . ammonium sulfat dipe*a, menjadi ammonia #)+/$ dengan penamba,an )a3+. /. Titrasi0 untuk menentukan kadar protein dalam sampel0 dengan menggunakan larutan asam borat dan larutan +!l. Ba,an yang mengandung ikatan peptida dua atau lebi, akan membentuk kompleks ber%arna ungu dengan ion !u2"
Apabila penampung destilat digunakan asam klorida 4i,at !umus " Apabila penampung destilasi digunakan asam borat 4i,at !umus # Meng,itung persen kadar nitrogen dari kadar proteinnya 4i,at !umus $
6ilakukan pengukuran menggunakan pektrofotometer &isible0 kemudian di,itung berdasarkan ,okum 4ambert-Beer
reagen biuret ke pada kondisi dalam sampel alkali jika yang kemudian direaksikan diukur dengan reagen absorbansinya biuret. katan menggunakan peptida yang spektrofotomete meng,asilkan r. %arna ungu tersebut berada pada absorbansi 789 nm. Pereaksi yang digunakan adala, larutan biuret dan larutan protein standar berupa larutan bo&ine serum albumin #BA$ dalam air.
