PRUEBA DE TOLERANCIA ORAL A LA GLUCOSA
PRESENTACIÓN El presente presente guión constituye constituye actividad práctica de la Unidad II de la. Por medio de esta actividad se pretende que el estudiante comprenda los mecanismos de absorción intestinal de la glucosa ingerida, su metabolización y los mecanismos de control homeostáticos de sus niveles circulantes en sangre INTRODUCCION: Si un individuo ingiere una comida rica en carbohidratos, la glucosa que es absorbida a nivel de intestino delgado a travs de mecanismos transportadores transportadores espec!"cos para la molcula, ingresa a la circulación sangu!nea, y en segundos, estimula una rápida secreción de la hormona insulina por parte de la clulas #pancreáticas $páncreas $páncreas endocrino%, lo que a su vez conlleva a una rápida captación de glucosa por las clulas hepáticas, musculares y te&ido adiposo para su posterior utilización. Una de las 'unciones más trascendentales de la insulina es 'avorecer que la glucosa absorbida luego de una ingesta alimentaria, se almacene casi de inmediato en el h!gado en 'orma de molculas de glucógeno. (uando sucede el per!odo entre comidas $per!odo de ayuno%, cuando los niveles de glucosa en sangre $glicemia% comienzan a disminuir y no se dispone de insulina, el glucógeno hepático almacenado es liberado progresivamente, progresivamente, seg)n las necesidades del organismo, organismo, hacia la sangre peri'rica, para evitar una disminución signi"cativa de la glicemia. El mecanismo bioqu!mico por el cual la insulina ocasiona la captación y almacenamiento de la glucosa en h!gado incluye* Etapa I* inhibición de la 'os'orilasa hepática, la cual origina el desdoblamiento enzimático del glucógeno en molculas de glucosa. (on esta etapa se evita la destrucción del glucógeno hepático almacenado. .#Etapa II* la insulina aumenta la captación de glucosa sangu!nea por las clulas hepáticas, incrementando la actividad de la enzima glucocinasa, la cual 'os'orila a la glucosa una vez captada por la clula. +a glucosa 'os'orilada no puede atravesar la membrana plasmática celular. celular. .#Etapa III* la insulina promueve el aumento de la actividad de enzimas que sintetizan el glucógeno, como la 'os'o#'ructocinasa ' os'o#'ructocinasa y la glucógeno sintetasa $que se encarga de la polimerización de unidades de monosacáridos para 'ormar molculas de glucógeno%. En este punto hay que recordar tambin que la insulina inhibe la gluconeognesis. Parte Parte de esta actividad es consecuencia de la disminución de la liberación de aminoácidos a partir de te&idos etra# hepáticos.
Prueba de -olerancia a la lucosa $P-%* esta es una prueba o test que mide la capacidad del organismo para metabolizar la glucosa. -iene un valor diagnóstico y predictivo en seres humanos. Se realiza para diagnosticar o con"rmar la presencia de diabetes mellitus en casos en los que se sospeche la presencia de la en'ermedad, as! como para el diagnóstico de hiperinsulinemia. +os mtodos más utilizados para evaluar la tolerancia a una carga determinada de glucosa son* .#Prueba de -olerancia /ral a la lucosa .#Prueba de -olerancia con dosis intra#venosas de lucosa +as más empleada y tolerada es la prueba de tolerancia oral. +uego de una etapa de ayuno nocturno, el individuo procede a ingerir, luego de tomada la primera muestra sangu!nea basal, solución que contiene una cantidad conocida de glucosa. +uego se toman muestras sangu!neas cada 01 minutos hasta por 2 o 0 horas $seg)n la solicitud del mdico% para valorar la glicemia. Esta prueba mide el balance entre la velocidad de pasa&e de glucosa al l!quido etracelular y su separación por la captación etracelular $te&idos hepático, muscular, adiposo% y la ecreción urinaria $si sta )ltima eistiera% 105
1.- OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: 3l "nalizar la práctica las $os% alumnas $os% deberán estar en capacidad de* .Evaluar los mecanismos de control homeostáticos de los niveles circulantes de glucosa en sangre. .Entender los mecanismos de liberación y acción de la Insulina. .(onocer los mtodos para determinar los niveles de glucosa en sangre y orina. .4ealizar una prueba de tolerancia oral a la glucosa. .+eer e interpretar una curva de tolerancia a la glucosa. 2.-MATERIAL REQUERIDO PARA LA EXPERIENCIA PRÁCTICA: Reac!"# $e %&!ce'!a c#( e)*($a+ P!,ea) a#'*!ca) $e 1-1& / $e 1-1 & 0 %+a$!&&a) c#( T#) $e e()a/# 134 56 T#) c#( EDTA ,a+a #'a $e 'e)+a )a(%7(ea
3.-MANIOBRAS EXPERIMENTALES: 5.#Se seleccionarán con antelación voluntarios$as% entre el grupo de práctica correspondiente $que no hayan sido debidamente diagnosticados como diabéticos con anterioridad% 2.#+os $as% voluntarios$as% seleccionados$as% deberán cumplir un ayuno nocturno riguroso, por lo menos con 52 horas con anterioridad a la realización de la práctica.
0.#3 cada voluntario $a% se le realizará una prueba de glicemia basal en ayunas, la cual se realizará pinchando la yema de un dedo con una lanceta estril. +a muestra será medida en un glucómetro digital. 3notar la hora de la toma de la muestra y el valor de glicemia obtenido. 6.#Preparar la solución glucosada que será ingerida por el $la% voluntario $a%* 78 gramos de glucosa $o en su de'ecto, az)car% en aproimadamente 011 cc. de agua potable 'r!a. 8.#Indicar al $la% voluntario $a% que ingiera la solución en un tiempo no mayor de 8 minutos, y comience a contar el tiempo a partir de que ingiera la totalidad de la solución. 9.#Procdase a obtener muestras de sangre de la yema de los dedos a los 91, :1 y 521 minutos de ingerida la solución. ;edir los niveles de glicemia con el glucómetro digital. 7.#3note los resultados obtenidos y gra'!quelos para obtener la curva correspondiente 106
8.-RESULTADOS OBTENIDOS-
P43(-I(3 I<* E=>/(4I=/* P4UE?3 >E -/+E43=(I3 /43+ 3 +3 +U(/S3 P4ESE=-3(I@= El presente guión constituye la actividad práctica de la Unidad de Endocrinolog!a de la asignatura Aisiolog!a. Por medio de esta actividad se pretende que el estudiante comprenda los mecanismos de absorción
intestinal de la glucosa ingerida, su metabolización y los mecanismos de control homeostáticos de sus niveles circulantes en sangre I=-4/>U((I/=* Si un individuo ingiere una comida rica en carbohidratos, la glucosa que es absorbida a nivel de intestino delgado a travs de mecanismos transportadores espec!"cos para la molcula, ingresa a la circulación sangu!nea, y en segundos, estimula una rápida secreción de la hormona insulina por parte de las clulas #pancreáticas $páncreas endocrino%, lo que a su vez conlleva a una rápida captación de glucosa por las clulas hepáticas, musculares y te&ido adiposo para su posterior utilización. Una de las 'unciones más trascendentales de la insulina es 'avorecer que la glucosa absorbida luego de una ingesta alimentaria, se almacene casi de inmediato en el h!gado en 'orma de molculas de glucógeno. (uando sucede el per!odo entre comidas $per!odo de ayuno%, cuando los niveles de glucosa en sangre $glicemia% comienzan a disminuir y no se dispone de insulina, el glucógeno hepático almacenado es liberado progresivamente, seg)n las necesidades del organismo, hacia la sangre peri'rica, para evitar una disminución signi"cativa de la glicemia. El mecanismo bioqu!mico por el cual la insulina ocasiona la captación y almacenamiento de la glucosa en h!gado incluye varia etapas que los estudiantes consultaran en los libros. +os mtodos más utilizados para evaluar la tolerancia a una carga determinada de glucosa son* .#Prueba de -olerancia /ral a la lucosa .#Prueba de -olerancia con dosis intra#venosas de lucosa +as más empleada y tolerada es la prueba de tolerancia oral. +uego de una etapa de ayuno nocturno, el individuo procede a ingerir, luego de tomada la primera muestra sangu!nea basal, solución que contiene una cantidad conocida de glucosa. +uego se toman muestras sangu!neas cada 01 minutos hasta por 2 o 0 horas para valorar la glicemia. Esta prueba mide el balance entre la velocidad de pasa&e de glucosa al l!quido etracelular y su separación por la captación etracelular $te&idos hepático, muscular, adiposo% y la ecreción urinaria $si sta )ltima eistiera% /?BE-IE +3 P4C(-I(3* 3l "nalizar la práctica los alumnos deberán estar en capacidad de* .#Evaluar mecanismos control homeostático de los niveles circulantes de glucosa en sangre. .#Entender los mecanismos de liberación y acción de la Insulina. .#(onocer los mtodos para determinar los niveles de glucosa en sangre y orina.
.#4ealizar una prueba de tolerancia oral a la glucosa. .#+eer e interpretar una curva de tolerancia a la glucosa. ;3-E4I3+ 4EDUE4I>/ P343 +3 EPE4IE=(I3 P4C(-I(3* lucosa anhidra 911 gr o en su de'ecto sacarosa -ubos de ensayo 50 78 $F gradillas con 51 tubos cGu% Pipetas automáticas de 811 ul y de 51 ul 4eactivo de lucosa H estándar de la misma Espectro'otómetro (entri'uga 011 ml de limonada por grupo $S/+/ +I;/= 3U3%
I;IE=-/ 5.#Se seleccionarán con antelación voluntarios$as% entre el grupo de práctica correspondiente $Due no hayan sido debidamente diagnosticados como diabticos con anterioridad% 2.#+os $as% voluntarios$as% seleccionados$as% deberán cumplir un ayuno nocturno riguroso, por +o menos con 52 horas con anterioridad a la realización de la práctica. 0.#3 cada voluntario $a% se le realizará una prueba de glicemia basal en ayunas, la cual se 4ealizará tomando una muestra de sangre que será la basa 6.#Preparar la solución glucosada* pesar 78 gr de >etrosa y disolverlo en 011 ml de limonada que será ingerida en su totalidad en 0 minutos por el $la% voluntario 8.#Procdase a obtener muestras de sangre a los 01, 91, :1 y 521 minutos, despus de 58 minutos centri'ugar la sangre para obtener el suero con que se traba&ara 9.# ;edir los niveles de glicemia Enumerar 7 tubos -$blanco% S- $estándar% ?$basal % 01J, 91J,:1J y 521J 3 cada tubo agregar 811 ul del reactivo de glucosa +uego aKadir 8 ul de estándar, del suero basal, de 01J etc., mezclar
+eer en el espectro'otómetro, sacar los cálculos respectivos para obtener la concentración de la glucosa en mgL 7.#3note los resultados obtenidos y gra'!quelos para obtener la curva correspondiente #4ESU+-3>/S /?-E=I>/S#>IS(USI/=*
3nálisis y >iscusión de los 4esultados* Par elaborar la discusión de sus resultados es necesario que #;encione, Men qu lugar del tubo intestinal se absorbe la glucosa ingerida, y cuál es su ;ecanismo básico de absorciónN Puede utilizar esquemas o dibu&os. # Indique el lugar de producción de la insulina. # M(ómo act)a la insulina una vez liberada a la circulación sangu!neaN MDu acción tiene a nivel >e h!gado y m)sculoN #;encione, M(ómo act)a la insulina a nivel de la membrana plasmática celular para lograr o Aacilitar el pasa&e o entrada de glucosa a la mismaN # (on base a los resultados obtenidos, Usted grá"co la (urva de -olerancia /ral a la lucosa en tres di'erentes tiempos. 3nalice el grá"co y discuta en el grupo las implicaciones y consecuencias "siológicas derivadas del mismo. ?revemente, anote los comentarios más importantes. # Eplique la razón del incremento y posterior decremento de la glicemia en la (urva de -olerancia /ral a la lucosa, y discuta Mqu hormonas pueden estar implicadas en este e'ecto AisiológicoN # MDu situaciones podr!an alterar los resultados dando 'alsos positivosN # (on los resultados obtenidos, podr!a Usted indicar si los $las% voluntarios $as% participantes en
el ensayo, son su&etos sanos o padecen trastornos de utilización de la glucosa (/=(+USI/=ES >E +3 3(-I3> P4C(-I(3* 3 continuación, y con sus propias palabras proceda a elaborar las principales conclusiones /btenidas de la eperiencia e'ectuada en el laboratorio.
