KRATOS Suavidad que perdura
Elaborado por: Jessica León Ruiz Alejandra Cancino Antonio Carlos Alberto Pinto Orozco Jorge Luis Torres Vidal Ernesto Vladimir Vázquez Gómez Sergio Alexis López Sánchez
Índice TEMAS
PAGINA
OBJETIVO GENERAL
2
OBJETIVO ESPECIFICO
2
JUSTIFICACIÓN
2
ANTECEDENTES
4
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
6
FORMULACIÓN
7
PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS
8
PROPIEDADES MICROBIOLÓGICAS
8
PROPIEDADES SENSORIALES
8
VIDA ÚTIL Y DE ANAQUEL
9
NORMAS DE CALIDAD
9
PRODUCTOS SIMILARES EXISTENTES EN EL MERCADO
9
PRESENTACIÓN
11
ENVASE
11
EMPAQUE
13
NOMBRE Y MARCA DEL PRODUCTO
14
ANÁLISIS DE COSTOS
15
SEGMENTACIÓN DEL MERCADO
16
ANEXO I
20
ANEXO II
21
BIBLIOGRAFÍA
49
1
Índice TEMAS
PAGINA
OBJETIVO GENERAL
2
OBJETIVO ESPECIFICO
2
JUSTIFICACIÓN
2
ANTECEDENTES
4
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
6
FORMULACIÓN
7
PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS
8
PROPIEDADES MICROBIOLÓGICAS
8
PROPIEDADES SENSORIALES
8
VIDA ÚTIL Y DE ANAQUEL
9
NORMAS DE CALIDAD
9
PRODUCTOS SIMILARES EXISTENTES EN EL MERCADO
9
PRESENTACIÓN
11
ENVASE
11
EMPAQUE
13
NOMBRE Y MARCA DEL PRODUCTO
14
ANÁLISIS DE COSTOS
15
SEGMENTACIÓN DEL MERCADO
16
ANEXO I
20
ANEXO II
21
BIBLIOGRAFÍA
49
1
NOMBRE DEL PROYECTO: KRATOS
Suavidad que perdura
OBJETIVO GENERAL: Elaborar una investigación general de las cremas para afeitar en base a las normas oficiales
OBJETIVO ESPECIFICO Analizar las características características de la crema para afeitar elaborada en el laboratorio y verificar si cumple con las normas de calidad y su impacto en el mercado
JUSTIFICACIÓN El producto cosmético al cual nos referimos en este trabajo es la crema para afeitar, la cual, tiene un gran impacto en la sociedad ya que interviene en el cuidado estético de las personas del género masculino (comenzando en los jóvenes a partir de la pubertad). Valiéndose de esta necesidad, a lo largo del tiempo, varias empresas han desarrollado diversos productos para facilitar esta tarea. La acción de rasurarse puede provocar, en mayor o menor medida, irritación en la piel. Existen personas cuya piel es demasiado sensible y no les permite rasurarse fácilmente al ras o personas cuyo vello facial es demasiado grueso y eso dificulta el proceso de afeitado. Para evitar las dificultades del rasurado se han utilizado diferentes complementos para evitar irritaciones y cortes; entre estos se encuentra la crema para rasurar. Este trabajo de investigación se basó en los hechos que se acaban de mencionar para observar la importancia que el producto tiene en el mercado actual. Este proyecto se desarrolló con dos finalidades principales:
La primera finalidad, es analizar todo el proceso de elaboración de la crema para afeitar y el impacto que produce en el mercado masculino, tanto en el juvenil como en el de adultos. La segunda finalidad, es verificar si la crema de afeitar que elaboramos cumple con las normas de calidad y si la elaboración de este nuevo producto impactaría en el mercado. 2
Debido a estas razones, se decidió realizar una investigación, en la cual se presentaron los diversos puntos que se mencionaran. Durante el desarrollo de este proyecto se tocan los puntos importantes que se llevan a cabo en la la producción de este cosmético, por ejemplo: el control de calidad que se realiza tanto en la recepción de materiales como el que se implementa a lo largo del proceso de elaboración y el que se lleva a cabo al finalizar el producto. Observaremos que, tanto la crema para afeitar como cualquier otro cosmético, presenta un proceso de elaboración un tanto complejo a nivel industrial, ya que se debe de cumplir con un estricto control de calidad con respecto a los cuidados sanitarios (principalmente el control microbiológico y el control de materia extraña) como a los cuidados que hay que tener para controlar la calidad fisicoquímico del producto que se obtendrá (el control de calidad de todo el conjunto de propiedades fisicoquímicas que el producto presenta). Observaremos también, que todo producto cosmético debe de presentar un control de calidad tanto en el envasado como en el empaquetado, ya que con ello se podrá mantener un control de seguridad al momento de que se comercialice. Todos los cuidados que se mencionan a lo largo de este trabajo se encuentran basados en las normas que en México se implementan (en su mayor parte, ya ya que, también se manejan normas internacionales como la ISO), las cuales son: las normas oficiales mexicanas (NOM). Otro punto importante que se observa en este trabajo, es el imprescindible análisis de costos, ya que, como en cualquier elaboración de cualquier producto, la finalidad principal del trabajo realizado es la comercialización y con ello la ganancia monetaria que esté produce. En esta parte intervienen muchos factores los cuales impactan en el costo final del producto a la hora de comercializarse; entre estos factores se encuentran todos los costos de producción (la materia prima utilizada, la energía utilizada, la mano de obra directa e indirecta, los costos indirectos de fabricación y los gastos imprevistos, entre otros.), y la competencia y la demanda del producto en el mercado.
3
Con todo esto se puede determinar si el producto realizado vale la pena con respecto a las ganancias monetarias que esté produce. También, se realizó un estudio de mercado para poder observar y conocer el impacto que este producto presenta en la sociedad (con respecto a su comercialización). En dicho análisis se podrá ver: que tanta demanda tiene el producto en el mercado, cuales son las características principales que el producto ha de tener para su comercialización, cual es el grupo comercial al que se dirige con mayor auge, entre otros aspectos.
ANTECEDENTES La higiene tiene una gran importancia para la conservación de la belleza. El ser humano se contamina continuamente en el ambiente en que vive, y la falta de higiene conduce a la proliferación de microorganismos e insectos, parásitos, causales de enfermedades de la piel. Aún si no se presenta la enfermedad, las funciones propias de éste tejido se ven modificadas, es antiestético y hace a los individuos incapaces de participar en la vida social y civil Por lo general el hombre tiende a considerar como un trabajo penoso la eliminación diaria de 20 000-25 000 terminales de pelos que cubren una superficie facial de 250 cm 2. Para minimizar el trauma del afeitado, actualmente se dispone de una amplia gama de preparados que acondicionan la barba y la cara para el afeitado, aumentan la velocidad y comodidad durante el mismo y proporcionan una sensación de bienestar después del afeitado. La elección del preparado para el afeitado es en gran medida individual; no obstante, generalmente se reconoce que se requieren diferentes formas de preparados para el afeitado «húmedo» (con hoja de afeitar) y «seco» (máquina eléctrica). Esto es el resultado del contraste de mecanismos del corte del pelo, que afecta a la apariencia de las terminaciones de los pelos cortados por los dos instrumentos La acción de rasurarse puede provocar, en mayor o menor medida, irritación en la piel. Existen personas cuya piel es demasiado sensible y no les permite rasurarse fácilmente al ras o personas cuyo vello facial es demasiado grueso y eso dificulta el proceso de afeitado. Para evitar las dificultades del rasurado se han utilizado diferentes complementos para evitar irritaciones y cortes. Estos complementos van desde utilizar agua para humedecer el rostro y ablandar el vello hasta jabones, geles especializados y la crema para rasurar. La crema para rasurar, también llamada crema de afeitar, es un auxiliar en el proceso de rasurado. El proceso de rasurado, afeitado o rasuración consiste en quitar o recortar el vello facial de los hombres, compuesto 4
por la barba y el bigote. El rasurado puede ser parcial o total y se lleva a cabo a través de herramientas afiladas, como puede ser una navaja. La crema de afeitar o espuma de afeitar es una crema que se aplica en la cara, o cualquier otro lugar donde crece el pelo, para facilitar el afeitado. Ellos logran tres objetivos, lubricar el proceso de corte, se hinchan de queratina y desensibilizar la piel. Las cremas de afeitar normalmente consisten en una emulsión de aceites, jabones o tensioactivos y agua. La crema de afeitar (o loción preafeitado si es líquido) es un producto químico que se utiliza al afeitarse, principalmente con el objetivo de abrir los poros y ablandar la barba. Se suele preparar con la ayuda de una brocha de afeitar. Si bien las características varían de un producto a otro, las más comunes son:
Ablandar la barba, lo que facilita el afeitado. Permitir un deslizamiento de la rasuradora más suave. Retirar el sudor. Humectar la piel, dejándola lisa y con buen aspecto. Desinfectantes y cicatrizantes (para las heridas que puedan producirse). Evita el dolor, picazón, sequedad y otras sensaciones que pueden ser molestas. Proporciona una espuma de excelentes características, permitiendo un afeitado muy suave y dejando tu piel extremadamente suave.
Por lo general se identifican tres tipos de cremas para rasurar: tradicional, sin brocha y en envase.
Crema para rasurar tradicional
Es la crema para rasurar con mayor contenido de agua. Se utiliza en las barberías profesionales y su aplicación requiere del uso de una brocha. Produce espuma y su presentación es en botes o latas.
Crema para rasurar sin brocha
Este tipo de crema para rasurar tiene un menor contenido de agua y, como su nombre indica, no requiere de brocha para su aplicación. Para una mejor rasurada es necesario aplicar una mayor cantidad de este producto en comparación con la crema tradicional.
Crema para rasurar en envase
Es la crema para rasurar que se comercializa en botes de aluminio, puede ser espuma o gel y contiene gases comprimidos para producir espuma instantánea al mezclarlos. 5
DATOS HISTÓRICOS:
Una forma rudimentaria de crema de afeitar se documentó en Sumeria alrededor del 3000 A.C.1 Esta sustancia era una mezcla de álcali de maderas y grasa animal, la cual se aplicaba a la barba como una preparación para el afeitado. La crema de afeitar como la conocemos hoy en día empezó a fabricarse hace más de 200 años por las barberías más exclusivas de Londres como Truefitt & Hill, Geo.F. Trumper y Taylor of Old Bond Street. Truefitt & Hill ha producido crema de afeitar al menos desde 1805, año de su fundación. La crema de afeitar ofreció en ese entonces una alternativa al tradicional jabón de afeitar. Hasta principios del siglo 20, se utilizaron barras o palos de jabón de afeitar duro. Más tarde, se vendieron tubos que contienen compuestos de aceites y jabón suave. Durante la década de 1950 aparecieron las primeras espumas de afeitar envasadas. Éstas contenían clorofluorocarbonos (CFC), los cuales dañaban la capa de ozono. Esto llevó a la sustitución de CFC (a finales de la década de 1970) por gases como pentano, propano, butano eisobutano. La lógica detrás de las espumas y geles de afeitar en bote es ahorrar tiempo en el afeitado. Mientras esto es cierto, también se ha discutido que los propósitos principales de la crema de afeitar (lubricar y proteger la piel) se pierden al envasar la crema y mezclarla con gases propulsores y otros químicos. Como ya no se genera una espuma mezclada con agua, la crema ya no protege la piel y su único propósito es lubricar un poco el rostro para que la navaja o rastrillo puedan cortar la barba ya que no ofrecen mayor protección contra cortes e irritación. La insatisfacción de muchos hombres en los últimos años ha despertado nuevamente el interés en la crema de afeitar tradicional.
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO La crema de afeitar es un producto químico que se utiliza al afeitarse, principalmente con el objetivo de abrir los poros y ablandar la barba. Si bien las características varían de un producto a otro, sin embargo, las más comunes son:
Ablandar el vello facial, lo que facilita el afeitado. Permitir un deslizamiento de la rasuradora más suave. Retirar el sudor. Prevenir irritaciones Humectar la piel, dejándola lisa y con buen aspecto. Desinfectantes y cicatrizantes (para las heridas que puedan producirse). Evita el dolor, picazón, sequedad y otras sensaciones que pueden ser molestas.
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Por lo general se identifican tres tipos de cremas para rasurar: tradicional, sin brocha y en envase.
Crema para rasurar tradicional: Es la crema para rasurar con mayor contenido de agua. Se utiliza en las barberías profesionales y su aplicación requiere del uso de una brocha. Produce espuma y su presentación es en botes o latas. Crema para rasurar sin brocha: Este tipo de crema para rasurar tiene un menor contenido de agua y, como su nombre indica, no requiere de brocha para su aplicación. Para una mejor rasurada es necesario aplicar una mayor cantidad de este producto en comparación con la crema tradicional. Crema para rasurar en envase: Es la crema para rasurar que se comercializa en botes de aluminio, puede ser espuma o gel y contiene gases comprimidos para producir espuma instantánea al mezclarlos.
FORMULACIÓN La formulación de la crema está en base a lo establecido por la PROFECO.
PROCEDIMIENTO:
Vierte el agua en la olla y ponla al fuego. Agrega el jabón, la glicerina y el mentol. Agita hasta que se disuelvan, des ués retira del fue o de a enfriar. Pasa la mezcla al vaso de precipitado de 600 ml. Aquí añade muy lentamente el carbopol, pero pasándolo por el colador, luego coloca la mezcla en la olla nuevamente, y agita con la batidora a velocidad media Enseguida agrega la trietanolamina y bate la mezcla por un minuto Finalmente agrega el aceite mineral en forma de un hilo fino, mientras, bate a velocidad alta para emulsionarlo. Envasa la crema para rasurar en el tarro de plástico.
7
PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS Tabla 1. Propiedades fisicoquímicas de la crema para afeitar 5.0 – 6.0
pH Humedad requerida
por lo menos 10%
Consistencia
blanda
1000 Kg/m3 100 Pa*s
Densidad Viscosidad
Las propiedades de las materias primas se pueden ver en anexo I.
PROPIEDADES MICROBIOLÓGICAS Calidad Microbiológica. Los productos cosméticos deben cumplir con los requisitos microbiológicos establecidos en la tabla 2. TABLA 2. Requisitos microbiológicos para los productos cosméticos
ÁREA DE APLICACIÓN Productos cosméticos susceptibles de contaminación microbiológica
LÍMITES DE ACEPTABILIDAD a. Recuento de microorganismos mesófilos aerobios totales. Límite máximo 5 x 10 3 UFC/g ó ml b. Recuento de hongos: hasta 100 UFC/g c. Recuento de levaduras: hasta 1000 UFC/g d. Ausencia de Pseudomonas aeruginosa en 1 g ó ml. e. Ausencia de Staphylococcus aureus en 1 g ó ml. f. Ausencia de Escherichia coli en 1 g ó ml
PROPIEDADES SENSORIALES Los requerimientos de una buena crema de afeitar son los siguientes: 1. 2. 3. 4. 5.
Debe producir una abundante espuma compuesta de pequeñas burbujas. No debe ser irritante. Debe tener buenas propiedades humedecedoras. Debe ser suave, agradable y completamente libre de grumos. Debe adherirse fácilmente tanto a la cara como a la brocha y, sin embargo, ser fácil de eliminar en el enjuague. 6. Debe conservar una consistencia y textura satisfactorias en todas las condiciones de temperatura probables a las que se encuentran durante el uso. PARÁMETROS Olor Textura
CARACTERÍSTICAS Agradable Suave
8
VIDA ÚTIL Y DE ANAQUEL En base a lo establecido por la PROFECO: La crema para afeitar tiene una vida útil de seis meses y una vida de anaquel de ocho meses. Para conservarlas es necesario no contaminarlas, manejándolas con las manos bien limpias, y taparlas correctamente. No es aconsejable dejarlas en el baño para evitar cambios de temperatura y la humedad, y si es posible se debe guardar en sus cajas si los recipientes son claros ya que pueden ser dañadas por la luz.
NORMAS DE CALIDAD
(CHECAR ANEXO II)
EL PROCESO DE ELABORACIÓN DE UNA CREMA PARA AFEITAR DEBE ENCONTRASE APEGADO A LO INDICADO EN LAS NORMAS: 1. SECRETARÍA DE ECONOMÍA NORMA MEXICANA NMX-Q-016-SCFI-2011 BUENAS PRÁCTICAS DE MANUFACTURA PARA ESTABLECIMIENTOS DEDICADOS A LA MANUFACTURA DE PRODUCTOS DE ASEO (Normas generales de control de calidad) 2. PARÁMETROS DE CALIDAD PARA MATERIAS PRIMAS (ANEXO I)
3. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-039-SSA1-1993, PRODUCTOS DE PERFUMERÍA Y BELLEZA. DETERMINACIÓN DE LOS ÍNDICES DE IRRITACIÓN OCULAR, PRIMARIA DÉRMICA Y SENSIBILIZACIÓN 4. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-089-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODOS PARA LA DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO MICROBIANO EN PRODUCTOS DE BELLEZA. 5. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-118-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MATERIAS PRIMAS PARA ALIMENTOS, PRODUCTOS DE PERFUMERÍA Y BELLEZA. COLORANTES Y PIGMENTOS INORGÁNICOS. ESPECIFICACIONES SANITARIAS.
PRODUCTOS SIMILARES EXISTENTES EN EL MERCADO
Barra de jabón de afeitar Se puede preparar una barra de jabón de afeitar partiendo de una mezcla que contenga un 80% de jabones de ácidos grasos, un 5-10% de glicerina y un 810% de agua. La relación de ácidos grasos y la relación de jabones potásicos con respecto a lo sódicos deben ser similares a las descritas en cremas de jabón de afeitar. Después de mezclar la composición, se trocea, seca y muele con los otros componentes requeridos, tales como perfume, colorante o un opalescente. Las escamas de jabón se adensan en la forma que se desee en una compactadora de jabón. 9
Espumas aerosoles de afeitar Las espumas aerosoles de afeitar son emulsiones aceite-agua en que las gotitas de propulsor licuado bajo presión forman una parte importante de la fase oleosa. Cuando la emulsión se descarga a la atmósfera, las gotitas dispersas del propulsor se vaporizan, produciendo una espuma formada por las burbujas de vapor propulsor rodeadas de una fase acuosa tensioactiva.
Espuma aerosol caliente El interés por las espumas calientes de afeitar es consecuencia de la mejora del reblandecimiento de la barba por el aumento de temperatura. Espumas calientes de afeitar pueden obtenerse por reacción química exotérmica entre componentes que se mantienen separados dentro del envase aerosol o poniendo la espuma en contacto con un intercambiador de calor conectado al suministro de agua caliente. Los productos que se basan en una reacción exotérmica redox requieren un doble dispositivo en el envase aerosol; el compartimiento interno contiene peróxido de hidrógeno y el externo la solución jabonosa, un propulsor, una piridina, una tiourea y un sulfito o tiosulfito. Cualquiera que sea el medio de calentar la espuma, generalmente son inadecuadas las composiciones convencionales de aerosoles de afeitar pues, a temperaturas superiores, forman grandes burbujas inestables y la espuma carece del cuerpo necesario para un afeitado satisfactorio.
Gel aerosol post-espumante Productos de este tipo descargan de un envase aerosol como un gel estable que, cuando se extiende en el rostro, se afirma que mejora la humidificación de la piel y la barba. La espuma se forma posteriormente in situ en la superficie de la piel por la vaporización de los hidrocarburos alifáticos de baja temperatura de ebullición. El producto se envasa en recipiente aerosol con una barrera para separar el gel que posteriormente forma espuma de propulsor requerido para la expulsión. El envase barrera garantiza que se descargue un gel homogéneo, esencialmente libre de burbujas, que produce una espuma autogenerada de consistencia y densidad uniformes durante toda la vida del producto. El gel post- espumante consta fundamentalmente de una dispersión acuosa de jabones, agentes gelificantes solubles en agua y un agente post-espumante que tiene una presión de vapor de 0,422-0, 984 kg/cm2 (41-96 KPa) a 37 °C, por ejemplo hidrocarburos saturados alifáticos o hidrocarburos halogenados. También se incluyen varios aditivos en la formulación, tales como humectantes, emolientes, auxiliares espumantes, perfume, etc.
Cremas no espumantes o sin brocha Las cremas de afeitar sin brocha o no espumantes son emulsiones aceiteagua. Contienen componentes similares a los de las cremas evanescentes, 10
siendo la principal diferencia que la concentración de aceites y agentes emulsionantes tiende a ser más elevada en las preparaciones de afeitar. Idealmente, la crema debe desaparecer en la ejecución del afeitado, dejando el rostro libre de irritación con una apariencia mate. Puesto que una desaparición demasiado rápida de la crema puede ser perjudicial para el bienestar y el apurado del afeitado, debe ser posible como mínimo, extender crema remanente en la piel después del afeitado. La popularidad de las cremas sin brocha se atribuye a su comodidad, puesto que eliminan la necesidad de la brocha, y facilitan un afeitado más rápido. La espesa película de lubrificante sobre el rostro proporciona emoliencia y protección a la piel, reduciendo la resistencia al deslizamiento de la hoja de afeitar durante el afeitado.
Barras de afeitar sin brocha Thomas y Whitham describen una barra para el afeitado sin brocha que puede ser aplicada directamente al rostro. Se asegura que la continua y fina película que se forma sobre la piel humedecida proporciona adecuada lubrificación para la operación del afeitado. La barra se compone de sustancias grasas o cerosas, a las cuales un adecuado emulsionante proporciona propiedades hidrófilas, por ejemplo jabón o un éster parcial de ácido graso de un alcohol polihídrico. Esto garantiza que el producto se humedezca rápidamente, pero sólo es escasamente soluble en agua. Se incorporan pigmento, colorante u opalescente para indicar la presencia de la composición en la cara.
PRESENTACIÓN Como cualquier producto cosmético, la crema para afeitar, presenta una amplia variedad en las características de su presentación (variando en tamaño, forma y material del recipiente; así como también en su contenido neto; entre otras características.), las cuales, dependen de la marca que lo elabore. La presentación en la que habitualmente se encuentran las cremas para rasurar en el mercado es: en un tubo o en un tarro hecho de plástico o metal y con un contenido neto que varía entre los 50 ml a los 200 ml. o
ENVASE
La aparición de botellas de cosméticos y frascos de cosméticos puede influir directamente en el reconocimiento de los consumidores de la marca y la calidad del producto. Por lo general, los cosméticos de primera clase tienen contenedores de primera clase, cada marca de cosméticos pone mucho esfuerzo en sus envases de productos de plástico tales como frascos de cosméticos, botellas y dispensadores de botellas para garantizar la calidad del producto, la belleza y la 11
comodidad también. Desde la perspectiva del consumidor, la impresión, facilidad de apertura, el tacto del plástico envase cosmético de la superficie y el diseño exterior son factores importantes a considerar cuando se está eligiendo un producto cosmético. Salvo diseño exterior, todos los otros factores están estrechamente relacionados con el rendimiento del material de embalaje de cosméticos.
Consideraciones a tomar en cuenta para envasar un cosmético Al momento de envasar un producto, sea la industria que sea, se deben observar algunas consideraciones para generar un entorno óptimo en su manufactura. Uno de los tópicos más importantes es la función “bunker”, la cual consiste en delimitar
el contenido y su envase. Por ejemplo, si se piensa envasar una crema se selecciona regularmente un envase de plástico o polietileno, aluminio o incluso vidrio, que evite la contaminación del producto. Otro factor importante es el relacionado con la preservación ante riesgos físicos durante el transporte del producto. El envase debe buscar la conservación de artículos de uso delicado, que ante cualquier alteración podrían producir un fuerte riesgo en la salud del consumidor final. Dichos elementos van desde temperatura, humedad, oxígeno, volatilidad, luz, deterioro biológico, entre otros. También es importante considerar el factor de comunicación, pues el envase es el estandarte de la relación cliente-producto, es decir, será el vocero para promover el producto. El envase comunica por medio de su color, textura, tipografía, forma, tamaño, incluso a través del material, el cual tendrá un valor determinante.
Maquinaria, material y envase Otro tema fundamental es la maquinaria y la relación con el proceso y tipo de material para el envasado del producto. El plástico es un material utilizado para el envasado de productos cosméticos por sus propiedades químicas y físicas que permiten envasar líquidos, sólidos o gaseosos. Estos se clasifican en termoplásticos, termofijos y elastómeros. Entre sus características se encuentran: su bajo costo en toda su familia de polímeros, flexibilidad, resistencia a la fatiga, impacto, baja conductividad térmica, resistencia a la corrosión, propiedades ópticas, higiene, seguridad, etcétera. En la industria cosmética se utilizan plásticos como PEAD, PP y PVC que son menos impermeables y más resistentes a los rayos UV, también son mejores conservadores para líquidos y no producen oxidación con sustancias en polvo. Asimismo se mantiene alta exigencia en cuestión del envasado ya que se requiere transparencia e insensibilidad frente a aceites, aromas y alcoholes.
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En cuanto al envasado y maquinaria, las grandes innovaciones se están enfocando en la inyección-soplado para obtener diversas superficies, así como para configurar acorde a la necesidad de convertir ideas abstractas en diseños.
El proceso de envasado debe cumplir con lo establecido en la norma: NORMA MEXICANA NMX-Q-016-SCFI-2011 BUENAS PRÁCTICAS DE MANUFACTURA PARA ESTABLECIMIENTOS DEDICADOS A LA MANUFACTURA DE PRODUCTOS DE ASEO o
EMPAQUE
En el caso de los cosméticos, es importante que en su empaque contenga la composición del producto, así como sus ingredientes, ya que existen personas que son alérgicas a ciertas sustancias químicas. Por lo general, tanto los empaques de cosméticos poseen tres tipos de embalaje:
El envase primario, el cual se encuentra en contacto directo con el producto. El envase secundario, es el que contiene el primario suelen ser cajas de suma resistencia. El envase terciario este tipo de envase se utiliza para trasportaciones en masa, es decir, contienen las cajas o envases secundarios con el fin de no ser dañados en el transporte y almacenamiento.
Existen riesgos de tipos físico o mecánico que pueden sufrir los cosméticos; por mencionar algunos: golpes, caídas, presiones, entre otros, pero existen factores de riesgo que pueden ser minimizados por medio del empaque, tales como:
Humedad: puede producir ablandamiento o endurecimiento en el producto. Temperatura: produce un deterioro de los productos, aceleran las reacciones degradativas y la evaporación de disolventes. Luz: una amenaza para aquellos productos que sufran foto degradación, además de que se puede experimentar una decoloración. Gases atmosféricos: el oxígeno da pie a la oxidación de ciertas sustancias.
El proceso de empaque debe cumplir con lo establecido en la norma: NORMA MEXICANA NMX-Q-016-SCFI-2011 BUENAS PRÁCTICAS MANUFACTURA PARA ESTABLECIMIENTOS DEDICADOS A MANUFACTURA DE PRODUCTOS DE ASEO
DE LA
8.2.3Asignación del número de lote Deberá ser asignado un número o código de identificación, a cada lote de producto fabricado. Este número no necesita ser idéntico al número de lote que aparece en la etiqueta del producto terminado, aunque deberán estar relacionados a fin de tener rastreabilidad del lote. 13
8.2.4La identificación de los contenedores con producto deberá indicar: 8.2.4.1Número o código de identificación. 8.2.4.2En caso de que aplique, número de lote. 8.2.4.3Especificaciones de almacenamiento en caso de ser necesarias para asegurar la calidad del producto. 8.4Asignación del lote 8.4.1Cada unidad del producto terminado deberá contar con la declaración del lote. La declaración del lote puede ir en cualquier parte del envase primario o secundario, debe permitir la rastreabilidad del producto.
NOMBRE Y MARCA DEL PRODUCTO La crema para afeitar que se elaborado fue llamado KRATOS, y es de la marca ASCLEPIA. o
ETIQUETA
Se utiliza para identificar el producto. La cual puede ser adherido al recipiente o envase y es un factor determinante para su venta. El etiquetado debe de ser un apoyo de orientación para el consumidor debido a que contienen una descripción general del producto, así como las recomendaciones de su uso. Datos de la etiqueta: Nombre del producto. Logotipo del producto. Nombre de la Empresa. (Fabricante) Composición naturaleza y propiedades del producto. Contenido Neto. Formas de uso. Código de barras. Almacenamiento.
14
ANÁLISIS DE COSTOS PRECIO UNITARIO (Contenido por unidad: 72 g) REACTIVO Jabón neutralizado Aceite mineral Glicerina Carbopol Trietanolamina Mentol Agua envase Jeringas Energía eléctrica Mano de obra directa Mano de obra indirecta Costos indirectos de fabricación Gastos imprevistos COSTO TOTAL
PRECIO $1.03 pesos $ 3.23 pesos $2.08 pesos $1.14 pesos $0.012 pesos $1.56 pesos $0.5216 pesos $6 pesos $10 pesos $1 peso $ 5 pesos $ 4.98 pesos 7.972 pesos $2.176 pesos $ 46.7018 pesos
15
SEGMENTACIÓN DEL MERCADO ENCUESTA: 1. ¿Qué edad tienes? 15-20 años 2.
20-40 años
Más de 40 años
¿Te afeitas? Si
No
3. ¿Con que frecuencia te afeitas? Diariamente
3 a 5 veces por semana
1 a 2 veces por semana
Rastrillo
Máquina de afeitar
4. ¿Qué usas para afeitarte? Navaja
5. ¿Qué característica buscas en una crema de afeitar? Que humecte la piel
Que no irrite
Otra
6. ¿Qué fragancia prefieres en una crema de afeitar? Fragancia fresca
Fragancia a cítricos
Otra
7. ¿Con que frecuencia compra la crema de su preferencia? Cada 2 semanas
cada mes
Más de un mes
Calidad
Porque alguien te la ha recomendado
8. Al elegir una crema te basas en: Precio otra razón 9. ¿Cuánto dinero gastas en cremas para afeitar al mes? De 50 a 100 pesos
De 100 a 130 pesos
Más de 130 pesos
10. ¿comprarías una crema de afeitar que sea de una marca no tan conocida, si presenta todas las características que te gustan? Si
No
Quizás
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RESULTADOS DE LA SEGMENTACIÓN DE MERCADO:
1. ¿Qué edad tienes? (10 personas ) 15-20 años 2.
( 11 personas) 20-40 años
¿Te afeitas? (22 personas) Si
( 6 personas ) Más de 40 años
(5 personas ) No
3. ¿Con que frecuencia te afeitas? (0 personas)Diariamente
(5 personas) 3 a 5 veces por semana
(17 personas)1 a 2 veces por semana
4. ¿Qué usas para afeitarte? (3 personas) Navaja
(15 personas) Rastrillo
(4 personas) Máquina de afeitar
5. ¿Qué característica buscas en una crema de afeitar? (9 personas) Que humecte la piel
(13 personas) Que no irrite
(0 personas) Otra
6. ¿Qué fragancia prefieres en una crema de afeitar? (19 personas) Fragancia (0 personas) Fragancia a fresca cítricos
(3 personas) Otra
7. ¿Con que frecuencia compra la crema de su preferencia? ( 3 personas) Cada 2 semanas
(8 personas) cada mes
(11 personas) Más de un mes
8. Al elegir una crema te basas en: (0 personas) Precio
(22 personas) Calidad
(0 personas) otra razón
(0 personas)Porque alguien te la ha recomendado
9. ¿Cuánto dinero gastas en cremas para afeitar al mes? (10 personas) (7 personas) (5 personas) De 50 a 100 pesos De 100 a 130 pesos Más de 130 pesos 10. ¿comprarías una crema de afeitar que sea de una marca no tan conocida, si presenta todas las características que te gustan? (10 personas) Si
(3 personas) No
(9 personas) Quizás 17
RESULTADOS DE LA SEGMENTACIÓN DE MERCADO:
FRECUENCIA CON LA QUE SE AFEITAN 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 DIARIAMENTE
3 A 5 VECES POR SEMANA
1 A 2 VECES POR SEMANA
UTENSILIO EMPLEADO PARA AFEITARSE 16 14 12 10 8 6 4 2 0 NAVAJA
RASTRILLO
MAQUINA DE AFEITAR
CARACTERÍSTICA QUE SE BUSCA EN UNA CREMA PARA AFEITAR 14 12 10 8 6 4 2 0 QUE HUMECTE LA PIEL
QUE NO IRRITE
OTRA
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FRECUENCIA CON LA QUE SE COMPRA LA CREMA DE AFEITAR 12 10 8 6 4 2 0 CADA 2 SEMANAS
CADA MES
MAS DE UN MES
DINERO GASTADO EN CREMAS PARA AFEITAR AL MES 12 10 8 6 4 2 0 50 A 100 PESOS
100 A 130 PESOS
MAS DE 130 PESOS
SE COMPRARÍA UNA CREMA DE AFEITAR QUE SEA DE UNA MARCA NO CONOCIDA Y QUE CONTENGA LAS CARACTERÍSTICAS QUE AL CLIENTE LE GUSTE (resultado obtenido). 12 10 8 6 4 2 0 SI
NO
QUIZÁS
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ANEXOS: ANEXO I. PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS DE LA MATERIA PRIMA carbopol
CARACTERISTICAS la apariencia Viscosidad( 0.5% w/v) ph sobre la pérdida de secado residueon de encendido heavy metal grupos de ácidos carboxílicos
PLIEGO DE CONDICIONES Flujo libre de polvo, blanco 20000-40000 2.5-3.5 & le; 2.0% & le; 2.0% & le; 20 ppm 56.0-68.0%
Cristal de mentol
Fórmula molecular: Las propiedades de la física: Nombre químico: Color y apariencia: El olor: Punto de fusión: No- materia volátil: La pureza: Solubilidad en alcohol en 25: La rotación específica 25 en grados celsius: Contenido de arsénico: Contenido de metales pesados( como pb): Usos: De embalaje: De almacenamiento:
c10h20o cristal blanco 2- isopropilico- 5- de metilo- hexanol Incoloro, transparente cristales hexagonales o aciculares. Tener olor característico del mentol natural obtenido del aceite de menta avensis. 42-44 grados celsius 0.05% 99.5% min 1g de la muestra puede ser disuelto en 5 ml de 90%( v/v) alcohol que forma una solución limpia. - 50- 49 grado menos que 3 ppm menos de 10 ppm norma Es ampliamente utilizado en el medicamento, de los alimentos, cigarrillo, cosméticos y pasta de dientes. En 25kg neto tambor de la fibra, tambores 360 a uno 20'container. Para ser almacenado en recipientes cerrados, mantener en un lugar fresco y seco por debajo de 33 grados celsius, evitar el sol y la lluvia
Glicerina 1. glicerina es esencialmente utilizados en la producción de jabones, el ácido esteárico, jabones metálicos de ácido esteárico, aminas grasos gms y etc.
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2. es refinado el glicerol producidos a partir de agua dulce que contienen agua generada por saponificación, la hidrólisis o transesterificación de los animales o los aceites vegetales y grasas. i. ii. iii. iv.
fórmula estructural: ch2-oh Peso molecular: 92.09 de embalaje: 250kg/tambor
requisitos técnicos. 1) propiedades: incoloro o ligeramente amarillo líquido transparente y viscoso. 2) fisicoquímicas de los índices de: nombre de índice el índice de de grado la prima de grado de primer grado Chroma& le; 20 20 Ensayo %& ge; 99.7 99.5 Density 20 centigrade g/m ≥ 1.2598 1.2572 Ensayo de cloruro de & le; 0.001 0.001 La sulfatación de ceniza( %)& le; 0.01 0.01 La acidez o alcalinidad( mmol/100g)& le; 0.064 0.064 Equivalente de saponificación( 0.64 0.64 mmol/100g)& le; Metales pesados ensayo(as pb, mg/kg& 5 5 le; Como( como como, mg/kg)& le; 2 2
ANEXO II. NORMAS NORMA MEXICANA NMX-Q-016-SCFI-2011. BUENAS PRÁCTICAS DE MANUFACTURA PARA ESTABLECIMIENTOS DEDICADOS A LA MANUFACTURA DE PRODUCTOS DE ASEO. GOOD MANUFACTURING PRACTICES FOR FACILITIES ENGAGED IN THE MANUFACTURING OF HOME CARE PRODUCTS 4 PERSONAL 4.1 Organización 4.1.1 El establecimiento debe contar con una organización interna acorde c on las actividades de la empresa y los productos que fabrica. 4.1.2 Deberá existir un organigrama actualizado en donde se identifique el puesto y niveles jerárquicos, en caso de con contar con el organigrama, podrá ser a través de informes, documentos, entre otros, que demuestren el cumplimiento de este punto. 4.1.3 La empresa deberá definir el número de personas re queridas para cubrir las funciones operativas dentro del horario de trabajo. 4.4 Personal en el área de manufactura o producción 4.4.1 Se deberá capacitar al personal responsable en el PNO aplicable para el proceso de manufactura. 4.4.2 La empresa deberá definir los requerimientos de indumentaria y de equipo de protección personal para cada área de manufactura. 4.4.3 El personal no debe usar artículos de joyería visible en las áreas de producción y deberá cumplir con los procedimientos y normas de seguridad aplicables. 4.4.4 Dentro del área de producción o manufactura, el personal no deberá comer, beber, fumar, mascar o escupir. El personal podrá tomar agua sólo en los lugares asignados por la empresa 5 INSTALACIONES 5.1 El establecimiento debe estar localizado, diseñado, construido y conservado de acuerdo con las operaciones que en él se efectúen.
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5.2 Debe existir un PNO de recepción y distribución que garantice la conservación de la calidad de los insumos y productos hasta el momento de su utilización y/o distribución. 5.3 Las dimensiones de las áreas estarán en función de la capacidad de producción, de la diversidad de productos y del tipo de operaciones para las que se destine cada una; así como permitir el flujo de materiales y personal que no ponga en riesgo la calidad de los productos, los procesos y el personal de operación. 5.4 Pisos, paredes, techos y ventanas en el área de producción 5.4.1 Las superficies interiores de las áreas de pro ducción deben mantenerse limpios y en buen estado. 5.4.2 Las áreas deben estar iluminadas y ventiladas. 5.5 Ventilación 5.5.1 Las instalaciones de ductos de ventilación deben tener una ubicación y diseño tal que permita su mantenimiento y limpieza. 5.5.2 Las áreas de producción donde se generen polvos deben contar con sistemas de captación y recolección, así como procedimientos para el reciclado y en su caso, la disposición final de polvos c olectados. 5.6 Iluminación 5.6.1 Las líneas de energía eléctrica deben tener un diseño tal que permita su mantenimiento y limpieza. 5.6.2 Las lámparas de las áreas de p roducción deben permitir su mantenimiento y limpieza. 5.7 Tuberías, drenaje y ductos 5.7.1 Los drenajes no deben presentar fugas. Además, deben estar convenientemente protegidos; especialmente aquellos ubicados en las áreas de manufactura. 5.7.2 Los establecimientos deben disponer de un sistema de evacuación de efluentes y aguas residuales, el cual debe mantenerse en buen estado. 5.7.3 Las tuberías y ductos deben ser instalados y recibir el mantenimiento requerido de tal manera que se eviten los goteos o condensaciones que puedan contaminar los materiales, productos, superficies y equipos. 5.8 Limpieza de áreas 5.8.1 Las instalaciones deberán mantenerse limpias para la protección del producto y de los empleados. 5.8.2 Deberán existir programas de limpieza para las áreas y equipos , y aplicarse de acuerdo a los PNO’s específicos. 5.9 Mantenimiento 5.9.1 Las instalaciones involucradas en las actividades descritas en esta norma deberán ser mantenidas en buen estado. 5.9.2 En caso de contar con taller de mantenimiento, éste deberá de disponer de un área específica y delimitada de las otras áreas de manufactura. 5.10 Control de plagas Debe existir un control de plagas apropiado, de tal manera que se impida la entrada de animales y fauna nociva al establecimiento. 5.11 Servicios sanitarios 5.11.1 Los servicios sanitarios y en caso de contar con áreas destinadas para cambio y almacenamiento de ropa de trabajo, lavado y/o duchas; éstas deben estar en lugares de fácil acceso y en correspondencia con el número de trabajadores. 5.11.2 Los lavabos, mingitorios e inodoros deben mantenerse en buen estado y limpios. 5.12 Otros servicios 5.12.1 En caso de contar con comedor, éste d ebe estar separado de las áreas de manufactura. 5.12.2 En caso de contar con Servicio Médico, éste debe estar separado de las áreas de manufactura. 6 Equipos, accesorios y utensilios 6.1 Diseño e instalación de equipos 6.1.1 Los equipos de producción deben ser diseñados, instalados, identificados y mantenidos de acuerdo a sus propósitos, y deben estar localizados de manera tal que se facilite su operación, limpieza y mantenimiento sin poner en riesgo la calidad del producto. 6.1.2 Todo equipo utilizado en la producción, empaque o manejo de los productos debe encontrarse localizado e instalado de tal manera que: 6.1.2.1 No obstaculice los movimientos del personal y facilite el flujo de los materiales. 6.1.2.2 Se asegure el orden durante los procesos y se controle el riesgo de confusión u omisión de alguna etapa del proceso. 6.1.2.3 Permita su limpieza y la de las áreas adyacentes, y no interfiera con otras operaciones del proceso. 6.1.3 El material utilizado en la construcción del equipo no deberá ser reactivo ni absorber las materias primas, producto terminado y agentes de limpieza, a fin de no alterar la calidad de l producto. 6.1.4 Los engranajes y partes móviles que estén en contacto con el producto, deben estar protegidos para evitar la contaminación del mismo. 6.2 Calibración Los equipos e instrumentos utilizados en el seguimiento y medición del producto, deben ser calibrados y/o verificados, antes de ser puestos en servicio. Se debe establecer un PNO específico para tal efecto. 6.3 Limpieza y mantenimiento
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6.3.1 El equipo debe limpiarse y mantenerse cuando así lo requiera para prevenir el mal funcionamiento o contaminación del producto. 6.3.2 Cuando aplique, se debe retirar toda la documentación y etiquetas adheridas al equipo que identifique al lote del proceso anterior. 6.3.3 Deben existir y aplicarse PNO’s de limpieza y mantenimiento para equipos y utensilios usados duran te la producción, envasado o manejo del producto. 6.4 Consumibles Cualquier sustancia requerida para la operación del equipo, como lubricantes, refrigerantes u otros, no deben estar en contacto con los componentes de la fórmula, envases p rimarios del producto o del producto e n sí. 6.5 Equipo automático, mecánico y electrónico 6.5.1 Deben ser calibrados e inspeccionados, para asegurar su funcionamiento. Las operaciones de calibración e inspección deben documentarse. 6.5.2 Con el fin de asegurar la exactitud de los datos manejados por estos sistemas, se debe implementar un sistema de protección de los mismos para evitar modificaciones a las fórmulas o registros efectuados por personal no autorizado. 6.5.3 Se debe mantener un respaldo de la información relevante a la empresa, archivada en las computadoras o los sistemas relacionados, para asegurar que la información emitida por éstos es exacta, completa y que no existen modificaciones inadvertidas. 7 Materias primas y materiales de empaque Las materias primas y materiales de empaque deben satisfacer los criterios de aceptación y/o especificaciones establecidas para éstos. 7.1 Adquisición Las materias primas y material de acondicionamiento deben comprarse de conformidad con el control interno, definido por la empresa. 7.2 Recepción 7.2.1 La recepción de materiales para la producción debe s eguir procedimientos establecidos. 7.2.2 La entrega de materias primas y material de empaque deberá corresponder a la orden de compra o equivalente. 7.2.3 Al recibir cualquier envío, se debe revisar que su embalaje no presente deterioros o daños de cualquier tipo que puedan afectar las características de calidad del material que c ontienen. 7.3 Identificación 7.3.1 Los contenedores de materias primas y materiales de empaque deben tener etiquetas que contengan la identificación y el número de lote cuando aplique. 7.3.2 Las materias primas y materiales de empaque en caso de ser rechazados, deberán estar identificados de manera apropiada. 7.3.3 Los registros para materia prima y material de empaque, deben contener por lo menos la siguiente información: - Nombre del producto o código interno o externo. - Fecha de recepción. - Nombre del proveedor. - Cuando aplique, número de lote. 7.3.4 Los materiales de empaque y envases de materias primas no deben utilizarse para fines diferentes a los que fueron destinados originalmente, a menos que el material así lo permita y se eliminen las etiquetas y leyendas habilitándose para el nuevo uso en forma correcta. 7.4 Liberación La empresa deberá asegurarse que solo se utilicen aquellas materias primas y materiales de empaque aprobados. 7.5 Almacenamiento 7.5.1 El almacenamiento de materias primas y materiales de empaque debe realizarse de acuerdo a las características de cada uno, bajo las condiciones establecidas por la empresa. 7.5.2 Las condiciones de almacenaje deben ser especificadas en los PNO’s respectivos.
7.5.3 Cuando las materias primas o material de empaque sean reempacados, deberán etiquetarse conservando los datos de origen. 7.5.4 Si las materias primas o material de empaque se rechazan o se envían a cuarentena, deberán almacenarse en un área específica o se deberá usar algún sistema que brinde el mismo nivel de c ontrol. 7.5.5 Los almacenes deberán de contar con la limpieza y el mantenimiento requeridos. 7.5.6 Se debe contar con un sistema de primeras entradas, primeras salidas (PEP’s) y se debe asegurar la
rotación de inventario. 7.5.7 Se deberán realizar inventarios periódicos para asegurar la confiabilidad del uso de los materiales correctos. 7.6 Reevaluación y análisis de materias primas y material de
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Empaque 7.6.1 Cuando aplique, se deberá establecer un sistema para reevaluar apropiadamente estos materiales para determinar, si después de un período de almacenamiento, continúan siendo adecuados para ser utilizados. 7.6.2 Cuando la vigencia de aprobación de estos materiales ha terminado, deben ponerse en retención temporal, para su reanálisis y/o disposición final. 7.7 Calidad del agua usada en producción 7.7.1 Los sistemas de tratamiento de agua que se empleen en el establecimiento, deben mantenerse en condiciones apropiadas para que garanticen la calidad requerida, según el destino de cada una de ellas (potable, des-ionizada, ablandada, purificada u otra). 7.7.2 La calidad química y microbiológica del agua debe ser verificada de acuerdo a las necesidades del proceso. 7.7.3 El sistema de agua de proceso debe permitir su limpieza y en caso necesario, su sanitización. 7.7.4 Los equipos de tratamiento de agua deberán estar diseñados para evitar el estancamiento y los riesgos de contaminación. 8 Producción 8.1 Generalidades 8.1.1 En cada etapa de la producción, deben llevarse a cabo medidas dirigidas a garantizar la calidad del producto. Se deberá evitar la contaminación del mismo. 8.1.2 El encargado del área de producción deberá asegurar que los productos se fabriquen dentro de especificaciones, de acuerdo con las buenas prácticas de manufactura. 8.1.3 Cuando los resultados de un producto demuestren que se trata de un producto fuera de especificación, deberá evaluarse de acuerdo con los criterios establecidos por la empresa, el destino final de éste. 8.2 Operaciones de manufactura 8.2.1 Disponibilidad de documentos 8.2.1.1 Los documentos necesarios para realizar las actividades durante el proceso de producción deben estar disponibles para su uso y consulta en el área de trabajo. 8.2.1.2 Los PNO’s relativos a la elaboración del producto, deben estar disponibles para su consulta.
8.2.1.3 La producción deberá ser realizada de acuerdo al procedimiento de elaboración correspondiente, disponiendo al menos de la siguiente información: 8.2.1.3.1 Identificación. 8.2.1.3.2 Maquinaria necesaria para manufacturar. 8.2.1.3.3 Orden de manufactura. 8.2.1.3.4 Listado de materias primas que intervienen con número de lote y cantidad surtida. 8.2.1.3.5 Modo operativo detallado: secuencias de agregado, temperatura, velocidades de agitación, tiempos de transferencia, entre otros. 8.2.1.4 Toda elaboración de lote/partida se inicia con una orden de producción . 8.2.2 Inicio de elaboración o manufactura 8.2.2.1 Antes de empezar una operación de manufactura, se deberá asegurar que: 8.2.2.1.1 Toda la documentación esté disponible. 8.2.2.1.2 Todas las materias primas estén surtidas. 8.2.2.1.3 El equipo esté listo para su uso. 8.2.2.1.4 El área se encuentre despejada de materiales y fabricaciones previas. 8.2.2.1.5 El personal cumpla con los requisitos establecidos en la presente Norma Mexicana. 8.2.3 Asignación del número de lote Deberá ser asignado un número o código de identificación, a cada lote de producto fabricado. Este número no necesita ser idéntico al número de lote que aparece en la etiqueta del producto terminado, aunque deberán estar relacionados a fin de tener rastreabilidad del lote. 8.2.4 La identificación de los contenedores con producto deberá indicar: 8.2.4.1 Número o código de identificación. 8.2.4.2 En caso de que aplique, número de lote. 8.2.4.3 Especificaciones de almacenamiento en caso de ser necesarias para asegurar la calidad del producto. 8.2.5 Control del proceso de elaboración o manufactura 8.2.5.1 Los controles en proceso y sus criterios de aceptación deberán ser definidos de acuerdo al tipo de producto. 8.2.5.2 Cualquier resultado fuera de especificación deberá ser reportado e investigado. 8.3 Operaciones de llenado y acondicionamiento 8.3.1 Revisión al inicio 8.3.1.1 Antes de empezar cualquier operación de llenado y acondicionamiento, se debe verificar que: 8.3.1.1.1 El área se encuentra en las condiciones apropiadas para evitar c ontaminación cruzada.
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8.3.1.1.2 Toda la documentación relevante de las operaciones de llenado y acondicionamiento esté disponible. 8.3.1.1.3 Todos los materiales de llenado y acondicionamiento estén disponibles e identificados. 8.3.1.1.4 El equipo apropiado y recipientes estén disponibles para usarse, limpios y si es necesario, sanitizados. 8.3.1.1.5 Los códigos que permitan la identificación del producto estén definidos. 8.3.2 Los documentos de llenado y acondicionamiento deben estar disponibles en cada etapa de las operaciones. 8.3.3 En todo momento, debe ser posible identificar la línea de llenado y acondicionamiento con su nombre o código de identificación, o bien con el nombre o código del producto terminado y lote. 8.4 Asignación del lote 8.4.1 Cada unidad del producto terminado deberá contar con la declaración del lote. La declaración del lote puede ir en cualquier parte del envase primario o secundario, debe permitir la rastreabilidad del producto. 8.5 Control de proceso de llenado y acondicionamiento 8.5.1 Los controles de proceso y sus criterios de aceptación deberán estar definidos. 8.5.2 Los controles de proceso deberán llevarse a cabo de acuerdo a los parámetros establecidos. 8.5.3 Cualquier resultado fuera del criterio de aceptación deberá ser evaluado para el ajuste del proceso. 8.6 Producto terminado 8.6.1 El producto terminado debe cumplir con los parámetros de calidad establecidos. 8.6.2 Liberación del producto terminado. 8.6.3 La liberación de producto terminado debe ser realizada por el personal autorizado, cuando el producto cumpla con el criterio de aceptación. 8.7 Almacenamiento 8.7.1 El producto terminado deberá estar almacenado en un área definida bajo condiciones apropiadas para conservar el producto en buen es tado. 8.7.2 La identificación de los contenedores del producto terminado deberá indicar: 8.7.2.1 Nombre o código de identificación. 8.7.2.2 Condiciones de almacenamiento cuando tal información sea crítica para asegurar la calidad del producto. 8.7.2.3 Cantidad. 8.7.3 Excepto en circunstancias especiales, la rotación de las mercancías deberá permitir que el producto liberado más viejo sea usado primero (PEP’s).
8.7.4 Los registros de inventario deben llevarse de tal manera que permitan la reastreabilidad de las cantidades recibidas contra las cantidades surtidas. 8.8 Transporte Debe verificarse que las condiciones en el transporte no afecten la calidad del producto. 8.9 Devoluciones 8.9.1 Las devoluciones de producto terminado deberán estar identificadas y controladas de manera apropiada. 8.9.2 Las devoluciones deberán ser evaluadas contra los criterios establecidos para determinar su situación. 8.9.3 Antes de colocar nuevamente el producto devuelto en el mercado, se deberá asegurar que se cumple con la calidad requerida de acuerdo a los criterios establecidos. 9 Quejas, devoluciones y recolección de producto Las quejas, devoluciones y recolección de producto serán manejadas de acuerdo a las políticas de la compañía. 10 Control de cambios Deberá evaluarse cualquier cambio en el área de producción que pueda afectar la calidad del producto y en su caso, documentarse y aprobarse. NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-039-SSA I-1993, PRODUCTOS DE PERFUMERÍA Y BELLEZA. DETERMINACIÓN DE LOS ÍNDICES DE IRRITACIÓN OCULAR, PRIMARIA DÉRMICA Y SENSIBILIZACIÓN. 4 PRUEBAS IN VIVO 4.1 Prueba de irritación ocular. Para el desarrollo del ensayo deberán seguirse los siguientes lineamientos: 4.1.1 Reactivos y materiales. - Una jeringa Hamilton de 1 ml (sin aguja) o una pipeta de 0.1 ml con divisiones de 0.10 ml. - Tres conejos albinos con un peso entre 2 y 3 kg con ojos sanos y sin defectos. - Tres cepos. - Agua destilada esterilizada.
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- Un matraz Erlenmeyer de 125 ml esterilizado. - Una lente de aumento. - Solución salina al 0.9% esterilizada. - Mortero. - Tamiz del número 40 (0.42 mm de abertura de malla). - Balanza analítica. 4.1.2 Procedimiento. Esta prueba debe realizarse en 3 conejos. Sujetar los conejos en los cepos. Sujetar los párpados del conejo suavemente para mantener el ojo de prueba abierto. Aplicar directamente en la córnea 0.1 ml del líquido de prueba, utilizando la jeringa o la pipeta (utilizar una jeringa limpia para cada sustancia de prueba). El otro ojo queda como testigo. En el caso de jabones y champús deberá pre pararse una solución al 10% (peso/volumen o volumen/volumen) utilizando como vehículo agua destilada: aplicar 0.1 ml de esta solución de la manera antes descrita. Para sólidos, el material de prueba deberá ser pulverizado con ayuda de un mortero y hacer una suspensión acuosa al 10%. Aplicar 0.1 ml de esta suspensión directamente en la córnea del ojo de prueba, quedando el otro ojo como testigo. En el caso de pastas se aplican 0.1 g del material de prueba directamente en la córnea d el ojo. Liberar el párpado inmediatamente después de la aplicación, sin forzar el parpadeo n i manipular. Llevar un registro de la hora de aplicación y anotar además si los animales de prueba mostraron cualquier signo de malestar como consecuencia de la aplicación de la sustancia de prueba. Mantener a los animales en sus cepos durante tres horas y después regresarlos a sus jaulas. 4.1.3 Evaluación de prueba. 4.1.3.1 Observar los ojos de los conejos a la 1a., 2a. y 3a. hora, a las 24 y 48 horas y al 4o., 5o., 6o. y 7o. día y después de aplicada la sustancia de prueba, usando el ojo no tratado como control o testigo, haciéndose las anotaciones correspondientes. 4.1.3.2 La prueba podrá suspenderse después del 3er. día siempre y cuando no se observe irritación alguna en los ojos de prueba. 4.1.3.3 Evaluar en los ojos de prueba la reacción que ante la aplicación de la muestra presentan la conjuntiva, la córnea y el iris, con ayuda de una lente de aumento utilizando la siguiente escala de calificación. 4.1.4 Escala para la evaluación numérica de las lesiones oculares. Observar con el ojo cerrado la quemosis y lacrimación, abrir el párpado para evaluar la conjuntiva, la córnea, el iris, utilizando la lente de aumento. 4.1.4.1 Conjuntiva: 4.1.4.1.1 Enrojecimiento (se refiere a la conjuntiva palpebral y bulbar, excluyendo la córnea y el iris). - Vasos normales 0 - Vasos capilares con ligero enrojecimiento 1 - Enrojecimiento 2 - Enrojecimiento difuso intenso 3 4.1.4.1.2 Quemosis. - No hay inflamación 0 -Inflamación ligera, incluyendo la membrana nictante 1 -Inflamación con eversión parcial del párpado 2 -Inflamación con párpados cerrados a la mitad 3 -Inflamación con párpados totalmente cerrados 4 4.1.4.1.3 Secreción. -Ausencia de secreción 0 -Secreción ligera apenas perceptible 1 - Secreción con humedecimiento de los párpados y del pelo adyacente al borde palpebral externo 2 - Secreción con humedecimiento de los párpados y del pelo sobre grandes zonas alrededor del ojo 3 4.1.4.1.4 Calificación total. (a + b + c) x 2 = 20 (máximo) 4.1.4.2 Córnea: 4.1.4.2.1 Grado de opacidad. -No hay opacidad (no hay pérdida de brillantez o luminosidad) 0 -Ligera opacidad (sin perder la transparencia pero sí la brillantez) 1 -Presencia de opacidad aún traslúcida con el i ris ligeramente oscurecido 2 -Presencia de opacidad con iris poco visible y contorno de la pupila difícilmente visible 3 - Presencia de opacidad que hace al iris invisible 4 4.1.4.2.2 Areas de opacidad. -Menos de un cuarto 1
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-Entre un cuarto hasta la mitad 2 -Más de la mitad y tres cuartos 3 -De tres cuartos a toda el área 4 4.1.4.2.3 Total de lesiones en córnea. a x b x 5 = 80 (máximo) 4.1.4.3 Iris 4.1.4.3.1 Valores -Normal 0 - Congestionado, con inyecciones circuncorneales y obviamente más arrugado que lo normal (una o varias de éstas características), con el iris aún reaccionando a la luz (una reacción lenta es una reacción positiva) 1 - No hay reacción a la luz, hemorragia, lesión considerable (una o varias de estas características) 2 4.1.4.3.2 Total de lesiones en iris. a x 5 = 10 (máxima) 4.1.5 Interpretación de los resultados. Se suman las calificaciones obtenidas en conjuntiva, córnea e iris para cada conejo, se promedian los valores de los 3 conejos, obteniéndose así la calificación de la prueba por día. Una vez terminada la prueba según lo mencionado en el párrafo 4.1.3 (b) e incluyendo el valor del último día de la prueba se promedian los valores de las calificaciones de la prueba por d ía. El valor promedio obtenido se divide entre 110 (suma total de las calificaciones máximas posibles) y dependiendo del cociente obtenido se clasificará el producto de acuerdo a la siguiente tabla: 0.0 a 0.1 no irritante Más de 0.1 a 0.3 ligeramente irritante Más de 0.3 a 0.5 irritante Más de 0.5 a 1.0 irritante severo 4.1.6 Criterio de aceptación. El producto que tenga una calificación no mayor de 0.3 será aceptado como producto apto para uso humano. En el caso de productos destinados a be bés la calificación máxima deberá ser 0.1. 4.2 Prueba de irritación en piel de conejos. 4.2.1 Material y reactivos. - 3 conejos albinos de 2.0 a 3.5 kg de peso, cualquier sexo y sin daño en la piel; - 3 cepos; - 3 jaulas individuales de malla metálica; - Máquina rasuradora eléctrica, para animales pequeños oster clipper cutting con peines del número 40 y del número 0 ; - Pipeta de 1 ml. graduada en centésimas; - Gasa quirúrgica esterilizada; - Matraces Erlenmeyer; - Tela adhesiva; - Matraces aforados de 50 ml; - Tela permeable; - Agua destilada esterilizada; - Mortero con pistilo; - Fuente de luz blanca; - Balanza analítica; - Lente de aumento; - Tamiz del número 40 (0.42 mm de abertura de malla); - La cantidad de sustancia de prueba para cada tipo de productos se especifica en la tabla I. 4.2.2 Procedimiento. 4.2.2.1 Preparación de los animales: el día anterior a la realización de la prueba, se rasura el dorso de los conejos de manera que quede sin pelo desde la región escapular a la lumbar a un lado y otro de la columna vertebral. Para ello utilizar primero el peine del número 40 y después el del número 0. Esto debe hacerse con mucho cuidado a fín de no lesionar la p iel al rasurar. 4.2.2.2 El material de prueba se aplicará directamente en el dorso de cada animal, cubrir con un parche de gasa quirúrgica de 2 cm x 2 cm con un grosor de 2 a 4 monocapas, colocado en el sitio elegido. Considerar como control cualquier otra área de la piel en esta zona. 4.2.2.3 Colocar a cada animal en un cepo para minimizar sus movimientos durante la prueba. Si la sustancia de prueba es un líquido, aplicar la cantidad que se indica en la tabla 1 directamente en la piel, después sujetar la gasa al conejo con una tela adhesiva. En el caso de materiales sólidos, semisólidos o en polvo, sujetar el parche a la piel en uno de los lados utilizando tela adhesiva; a continuación colocar el material de prueba en la cantidad que se indica en la tabla 1, entre el parche y la piel y después cerrar el lado restante con tela adhesiva. Para sólidos y polvos, el producto deberá molerse y tamizarse antes de pesarse. Cuando el material de prueba contenga sustancias volátiles, se deberá permitir la evaporación del disolvente antes de aplicar el parche con la sustancia de prueba y de colocarlo en la piel del conejo. El tiempo de aplicación del parche varía dependiendo de la naturaleza del producto; este tiempo para cada grupo de productos se especifica en la tabla 1. 4.2.3 Evaluación de la prueba.
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Una vez que ha transcurrido el tiempo de aplicación, sacar a los conejos de los cepos, remover el parche y eliminar los restos del material de prueba con una toalla húmeda. Regresar cada animal a su jaula. Aproximadamente de 30 a 60 minutos después de haber removido los parches, evaluar el sitio de prueba de acuerdo con las siguientes escalas de evaluación: Eritema 0 No eritema 1 Eritema 2 Eritema bien definido 3 Eritema de moderado a severo 4 Eritema severo (rojo betabel) Calificación máxima posible de eritema: 4 Edema 0 No edema; 1 Edema muy ligero apenas perceptible; 2 Edema ligero con bordes sobresalientes con elevación definida; 3 Edema moderado, con una elevación máxima de 1 mm aproximadamente; 4 Edema severo, elevación mayor de 1 mm extendiéndose más allá del sitio de aplicación; Calificación máxima posible de edema: 4 Las evaluaciones deberán realizarse de 30 a 60 minutos después de remover el parche, a las 24 horas y a las 72 horas de iniciada la prueba. 4.2.4 Análisis de datos: Una vez obtenidas las lecturas de Eritema y Edema, promediar las calificaciones de eritema de las 3 evaluaciones (1/2, 24 y 72 horas después de remover el parche) para los tres animales (9 calificaciones en total) y por separado promediar las calificaciones de edema de la misma manera (9 calificaciones en total). A partir de estos promedios, calcular el índice de irritación primaria como sigue: Indice de irritación primaria = Promedio de eritema + Promedio de edema. 4.2.5 Interpretación de los resultados. Con base en el Indice de Irritación Primaria, los productos podrán ubicarse en alguna de las siguientes categorías: 0 - 1 -No irritante 1.1 - 2 -Ligeramente irritante 2.1 - 5 -Moderadamente irritante 5.1 - 6 -Irritante moderado a severo 6.1 - 8 -Irritante severo Todos los productos para uso en bebés deberán tener un índice de irritación primaria no mayor de 1. El producto que tenga un índice de irritación primaria no mayor de 5 será aceptado como un producto apto para uso humano. Cuando un producto obtenga una calificación entre 5.1 y 6 deberá: 4.2.6.1 Ostentar la leyenda "Precaución, este producto es irritante". 4.2.6.2 Repetir la prueba, si los resultados de esta segunda prueba confirman los obtenidos en la primera, deberá optarse por la alternativa 4.2.6.1. Si el índice de irritación primaria obtenido en la segunda prueba tiene un valor no mayor de 5, el producto será considerado apto para uso humano. Los productos que tengan una calificación mayor de 6 no serán aceptados para su uso en humanos. TABLA 1. PREPARACION DE LA MUESTRA PREPARACION DE LA CANTIDAD A CONDICIONE MUESTRA APLICACION APLICAR S DE PRODUCTO Shampoo, jabón 10% sol. 0.5 ml acuosa Parche semiocluido líquido, 4 horas. enjuague, acondicionador Jabón, crema y espuma de afeitar, jabón de tocador, jabón desodorante, productos para baño o ducha. Loción capilar Presentación 0.5 ml Dejar evaporar original por 15 min. Parche 4 horas. semiocluido Perfumes, lociones Presentación 0.5 ml Dejar evaporar y similares original por 15 min
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Parche semiocluido Endurecedor, Presentación
24 horas.
Removedor de Presentación Sombra, crema
Presentación
0.5 ml o g Parche 0.5 g
Maquillaje. talco, polvo, lápiz labial Desmaquillante
Lo suficiente Dejar evaporar adhesivo y original para cubrir por 15 min Cutícula original 1 hora. Parche semiocluido original 24 horas
Presentación
0.5 g
Dejar evaporar delineador, original por 15 min. Parche semiocluido original 1 hora. original 24 horas
Tinte Presentación 0.5 ml Desodorantes Presentación 0.5 g o ml 4.3 Prueba de sensibilización en piel de cobayos. 4.3.1 Material y reactivos. En esta prueba deben utilizarse cobayos de la cepa Hartley, con un peso entre 300 y 400 g, para cada fase de la prueba se aconseja emplear el mismo número de hembras que de machos. El número de animales necesarios en cada fase es el siguiente: - Un mínimo de 10 animales de prueba (de preferencia 20) para las fases de inducción y desafío; - 10 animales control para la fase de re-desafío, cuando ésta se requiera; - 4 animales para el estudio de i rritación previo a la fase de inducción; - 8 animales para el estudio de i rritación previo a la fase de desafío; Se requiere además del siguiente material: - Cepos dotados de una banda elástica de hule, para mantener sujeto al animal durante el tiempo de aplicación de los parches; - Jaulas individuales de malla metálica u otro material adecuado; - Rasuradora eléctrica, Oster Clipper Cutting equipo para animales pequeños con peines del número 40 y del número 0; - Pipetas de volumen ajustable, graduadas en décimas de ml; - Agua destilada esterilizada; - Balanza analítica; - Fuente de luz blanca fluorescente de 160 watts; - Gasa quirúrgica esterilizada; - Tela adhesiva (de adhesión suave); - Tamiz del número 40 (0.42 mm de abertura de malla); - Bandas elásticas (tensoplast) quirúrgicas. 4.3.2 Procedimiento. 4.3.2.1 Consideraciones generales. El único periodo de estrés a que deben ser sometidos los animales es el tiempo que se les mantiene en los cepos, durante la exposición a la sustancia de prueba. La administración de analgésicos o sedantes puede modificar la respuesta inflamatoria a evaluar. También puede modificarse el tono muscular, trayendo como consecuencia que las condiciones de oclusión de los parches se modifiquen de manera importante. Por lo tanto, no se debe administrar este tipo de sustancias ni otros medicamentos a los animales durante el tiempo que dura la prueba. 4.3.2.2 Métodos de tratamiento y observación. 4.3.2.2.1 El día anterior a la prueba debe rasurarse el dorso del animal en el área de aplicación de los parches con la rasuradora eléctrica, utilizando primero el peine del número 40 y después el del número 0. Esto debe hacerse cuidadosamente sin lesionar la piel al rasurar. 4.3.2.2.2 Los parches a aplicar deben ser ocluidos, preparándose como sigue: El material de prueba se aplicará directamente al animal, cubrir con el parche de gasa quirúrgica esterilizada de 2 cm por 2 cm con un grosor de 2 a 4 monocapas colocado en cualquier sitio del dorso del animal. Considerar como control cualquier otra área de la piel en esta zona. En el caso de líquidos, aplicar 0.4 ml en el caso de sólidos, polvos o pastas, sujetar el parche a la piel en uno de los lados utilizando tela adhesiva, colocar el material de prueba 0.4 g sobre la piel y cerrar el lado restante del parche con tela adhesiva. Los sólidos y polvos deberán ser molidos y tamizados antes de pesar. 4.3.2.2.3 Colocar el animal en el cepo y aplicar el parche en el área adecuada. Ocluir el parche utilizando la banda elástica, ajustándola de manera que haga contacto con la región dorsal del animal de manera uniforme. Ajustar el cepo para minimizar los movimientos del animal durante el periodo de exposición.
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Mientras permanezcan en el cepo, los animales deberán ser revisados cada 60 o 90 minutos, anotándose cuidadosamente cualquier síntoma de molestia. Los parches deberán permanecer por 6 horas en todas las fases de la prueba. Transcurrido este tiempo remover el parche y limpiar el área de aplicación con una toalla o gasa húmeda y regresar los animales a s u jaula. 4.3.3 Se debe realizar la evaluación a las 18 horas. Utilizando la escala que se incluye en la tabla 2. Repetir la evaluación 24 horas más tarde (es decir, 48 horas después de haber re movido el parche). Debe utilizarse esta escala para realizar las valuaciones de las pruebas preliminares de irritación y de la fase de desafío. La evaluación de todos los animales debe realizarse colocándolos bajo una fuente de luz blanca fluorescente de 160 watts, a una distancia de 90 cm y sobre un fondo negro plano. Esta evaluación debe hacerse por dos técnicos, los cuales deben estar de acuerdo en la calificación que se registre. Además, cuando la respuesta sea difícil de evaluar pueden compararse los sitios de aplicación del parche de otros animales en el grupo de prueb a y en el control antes de emitir la calificación. 4.3.4 Estudio de irritación previo a la fase de inducción. Efectuar un estudio previo a la fase de inducción con objeto de determinar el potencial de irritación de la sustancia de prueba. Para ello utilizar un grupo d e 4 cobayos, de preferencia 2 hembras y 2 machos. Rasurar el pelo en el lomo y los flancos de cada animal un día antes de iniciar la prueba. Transcurridas 24 horas, aplicar los parches como se indicó en la fracción b, utilizando 4 concentraciones de la sustancia, incluido el 100%. Para hacer diluciones deberá utilizarse un vehículo adecuado (agua, aceite mineral, alcohol, etc.) dependiendo de la naturaleza de la sustancia de prueba. Los sitios de aplicación del parche en cada animal para esta fase del estudio deberán ser los indicados en la figura 1. Ver imagen (dar doble click con el ratón) Deben alternarse los sitios de aplicación de las diferentes concentraciones entre los 4 animales, como se indica en la figura 2, para minimizar la vari ación de la respuesta entre sitios. Ver imagen (dar doble click con el ratón) El sitio de aplicación de cada concentración en el animal deberá anotarse claramente. Los parches deberán permanecer aplicados durante 6 horas, después se remueven de acuerdo a lo indicado en la fracción 4.3.2.2.2. Evaluar la reacción de cada sitio de prueba a las 24 y 48 horas como se explica en la sección 4.3.3, utilizando la escala de evaluación (Tabla 2). Elegir la concentración que provoque una irritación dérmica ligera para realizar la fase de inducción. Si como resultado de esa prueba se encuentra que la máxima concentración no produce irritación, esta concentración será elegida para realizar la fase de inducción y la fase de desafío. En aquellos casos en que una de las concentraciones utilizadas provoque una irritación dérmica ligera, será necesario realizar otro estudio de irritación previo a la fase de desafío, como se describe a continuación. 4.3.5 Estudio de irritación previo a la fase de desafío. Cuando sea necesario realizar un nuevo estudio de irritación previo a la fase de desafío, considerando la concentración que provocó una irritación dérmica ligera como concentración máxima. A partir de este valor, elegir otras 3 concentraciones menores a intervalos regulares. En este caso sólo podrán aplicarse 2 parches en cada animal como se muestra en la figura 3. Alternar los sitios de aplicación entre los 8 animales, como se indica en la figura 4, para minimizar la variación entre sitios. Aplicar los parches de la manera antes descrita durante 6 horas. Transcurrido este tiempo remover el parche y limpiar el área de aplicación de acuerdo a lo mencionado en la fracción c. Evaluar a las 24 y 48 horas, utilizando la escala incluida en la tabla 2. Elegir la máxima concentración que No provoca irritación para r ealizar la fase de desafío. 4.3.6 Fase de inducción. Emplear un mínimo de 10 cobayos como animales de prueba. Día 0. Rasurar el pelo del flanco superior izquierdo de cada animal del grupo, como se describió en la fracción b. Día 1. Aplicar los parches a los animales de acuerdo a lo descrito en la fracción b. El sitio de aplicación del parche de inducción en cada animal se indica en la figura 5. Ver imagen (dar doble click con el ratón) Después de 6 horas de aplicado el parche, removerlo, limpiar como lo indica la fracción b y regresarlo a su jaula. Días 6 y 13. Rasurar nuevamente a los animales. Días 7 y 14. Proceder como el día 1. Anotar cualquier reacción de la piel en el sitio de aplicación del parche durante esta fase. 4.3.7 Fase de desafío. Día 27. Rasurar el flanco posterior izquierdo de los 10 (o 20) cobayos de la fase de inducción y a 10 animales no expuestos a sustancias de prueba, que servirán como control. Día 28. Aplicar un parche de desafío a cada uno de los 20 (o 30) animales (10 o 20 de p rueba y 10 de control) como se describe en la fracción b en el sitio que se indica en la figura 6.
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Note que este sitio es DIFERENTE al empleado para aplicar el parche de inducción. Remover el parche después de 6 horas de aplicación, limpiar el sitio y regresar cada animal a su jaula. Día 29. Evaluar la respuesta a las 24 horas de haber removido el parche de desafío, utilizando la escala incluida en la tabla 2. Día 30. Evaluar la respuesta a las 48 horas de haber removido el parche de d esafío. Proceder como el día 29. 4.3.8 Fase de re-desafío. Cuando la respuesta obtenida en la fase de desafío es dudosa, deberá realizarse un re -desafío en el grupo de prueba de 7 a 15 días después del primer desafío. Deberán incluirse otros 10 cobayos no expuestos anteriomente a la sustancia de prueba como control. Rasurarse la porción dorsal derecha, como se indica en la sección b, en el sitio indicado en la figura 7. Note que este sitio es DIFERENTE a los sitios de aplicación del parche de inducción y de l parche de desafío. Ver imagen (dar doble click con el ratón) Remover el parche después de 6 horas de aplicación y evaluar a las 24 y 48 horas después de la remoción del parche, como se indica en la fracción c utilizando la escala incluida en la tabla 2. Los animales utilizados en este estudio no podrán usarse nuevamente en una prueba de sensibilización. TABLA 2 ESCALA DE EVALUACION 0 = No hay evidencia de reacción. + = Eritema muy ligero, apenas perceptible, que se presenta sólo en algunas zonas en el área de aplicación del parche. 1 = Eritema ligero confluente (reacción ligera pero definida en todo el sitio del parche) o eritema moderado pero irregular (eritema moderado desarrollado en el 50% del área del parche). 2 = Eritema moderado evidente. 3 = Eritema severo con o sin edema. 4.3.9 Análisis de datos. Tabular las evaluaciones como se indica en las tablas incluidas en los apéndices 1 y 2. Una comparación de los resultados entre los animales del grupo de prueba y de los grupos de control permite la identificación de la sensibilización. Los resultados se expresan en términos de incidencia y severidad de la respuesta. Incidencia: El número de animales que muestra una calificación mayor de 1 a las 24 o 48 horas dividido entre el número de animales tratados. Severidad: La suma de las calificaciones divididas entre el número de animales tratados. 4.3.10 Interpretación de los resultados. Como regla general, un material puede clasificarse como un sensibilizante por contacto si se produce una reacción con calificación mayor de 1 en 20% o más en los animales de prueba, siempre y cuando la incidencia en el grupo de control sea mayor de la mitad que en el grupo de prueba, además por lo menos en uno de los cobayos del grupo de prueba que presentaron reacción, ésta deberá haber persistido durante 48 h oras. A continuación se incluyen ejemplos que ilustran resultados de prueba de sensibilización y su interpretación. Ejemplo Grupo Incidencia (1) Interpretación 1 Prueba 4/20 Positiva Control 0/10 2 Prueba 9/20 Positiva Control 2/10 3 Prueba 10/20 Cuestionable Control 3/10 4 Prueba 3/20 Cuestionable Control 0/10 5 Prueba 0/20 Negativa Control 1/10 (1) Número total de animales que muestran una reacción de la piel mayor de 1 a las 24 o 48 horas después del tratamiento, con respecto al número total de animales incluidos. 4.3.11 Criterio de aceptación. Los productos para los que s e obtenga una interpretación NEGATIVA en esta prueba de sensiblización, serán aceptados como productos aptos para uso humano. Si en un producto se obtiene una interpretación CUESTIONABLE, se podrá optar por cualquiera de las siguientes alternativas: 4.3.11.1 Ostentar la leyenda "Este producto puede ser sensibilizante". 4.3.11.2 Repetir la prueba. Si los resultados de esta segunda prueba confirman los obtenidos en la primera, deberá optarse por la alternativa de la fracción 4.3.11.1, si la interpretación obtenida en la segunda prueba es negativa, el producto será considerado apto para uso hu mano. 5 PRUEBAS IN VITRO 5.1 Prueba de la membrana corioalantoica.
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5.1.1 Material. - 10 huevos frescos fertilizados de gallina Lehmann Leghorn con un peso entre 50 y 60 g por cada concentración de sustancia empleada. - Incubadora con charolas de rotado aut omático. - Fresa dental con rotor de baja velocidad (12000 a 15000 RPM). - Microscopio estéreo de alta magnificación. - Solución salina isotónica. 5.1.2 Procedimiento. Se ponen a incubar los huevos a 37.5 ± 0.5 ºC de temperatura, a una humedad de 62.5 ± 7.5% durante 10 días, girándolos al 5o. día para controlar el crecimiento. El décimo día se abren los huevos y por el extremo ancho donde se localiza la burbuja de aire, empleando una fresa dental con rotor, la membrana interior del huevo se empapa con una solución salina isotónica para removerla mecánicamente, una vez removida ésta, la membrana corioalantoica está lista para analizar productos. Se le aplican 0.3 ml de la muestra de prueba, se observa directamente o se emplea un estereomicroscopio para observar hasta la reacción más ligera. 5.1.3 Análisis de los datos. Se deja el producto en contacto con la membrana 5 minutos (300 segundos) y se prueban distintas concentraciones. Se observa si se presentan reacciones y se anotará el índice de acuerdo con la siguiente tabla; si no hay reacción detectable, se calificará al producto como n o irritante. TABLA 3 REACCION CALIFICACION Vasos capilares más inyectados de lo normal 1 Enrojecimiento con los vasos difícilmente distinguibles 2 Enrojecimiento intenso 3 Enrojecimiento intenso con inflamación 4 Hemorragia generalizada 5 Lisis (destrucción de vasos) 7 Coagulación 10 (Desnaturalización proteica con trombosis, decoloración, opacidad y turbidez intra y extravascular) Se califica cada serie de huevos y se obtiene el promedio. 5.1.4 Interpretación de los resultados. De los promedios obtenidos se obtiene una clasificación así: INDICE CLASIFICACION de 0.0 a 0.9 No irritante de 1.0 a 3.9 Ligeramente irritante de 4.0 a 8.9 Moderadamente irritante de 9.0 y mayores Severamente irritante 5.1.5 Criterio de aceptación. Los productos para uso en bebés deberán ser no irritantes. Los demás productos para permanecer en el mercado deberán obtener una calificación no mayor de 4. Los productos que tengan una calificación mayor deberán ostentar en etiquetas la leyenda: "Producto irritante". Los productos con una calificación mayor de 9 no podrán destinarse para uso humano. 5.2 Ensayo en ojo de bovino. 5.2.1 Materiales. - 8 ojos sanos de ternera extraídos de animales recién sacrificados, se colocan dentro de los 10 minutos siguientes a la extracción en una solución salina (0.15 M de cloruro de sodio en agua) y se transportan a una temperatura entre 15 y 20 C (por cada producto a investigar), se verifican dentro de la solución salina y se descartan los ojos con daños o anormalidades y el resto se mantiene en solución salina. - Equipo para baño maría. - Tamiz del número 40 (0.42 mm de abertura de malla). - Charola portahuevos de plástico. - Mortero con pistilo. - Anillos de silicón con diámetro interior de 8 mm y diámetro exterior de 13 mm. - Solución salina isotónica. - Solución de fluoresceina (2% en solución pH 7.0). - Lente de aumento. - Fuente de luz blanca. - Balanza analítica. - Matraz Erlenmeyer de 1.5 ml. 5.2.2 Procedimiento.
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Los ojos se emplean dentro de las 4 horas siguientes a su extracción, se destinan 5 a la prueba y 3 como controles y se colocan en una atmósfera húmeda en el baño maría cerrado por 5 minutos, se les aplican 0.1 ml del producto de prueba si es líquido y si es sólido se pulveriza en un mortero hasta hacerlo pasar por un tamiz del número 40 y se calcula la dosis a aplicar mediante una multiplicación de la densidad del producto en mg/ml por 0.1. La cantidad a aplicarse debe pesarse con una precisión del 1% utilizando una balanza analítica. Se aplica la sustancia de prueba directamente en la córnea dentro del anillo, en los 5 ojos de prueba, de los ojos de control uno se deja sin tratar y a los otros se les aplica 0.1 ml de tolueno y acetona, respectivamente, después de 30 segundos los ojos se riegan con solución salina 10 ml en total; se continúa la incubación en el baño maría cerrado 10 minutos más; se les aplica fluoresceina y se examinan los resultados. 5.2.3 Interpretación de los resultados. Se examina con una lente de aumento, auxiliándose con una fuente de luz, los ojos de prueba; se observa la integridad del epitelio de la córnea, las calificaciones se establecen de acuerdo con la tabla del No_ 4_. La calificación final se obtiene sumando las calificaciones de opacidad, integridad epitelial y desprendimiento epitelial y dividiendo entre el número de ojos expuestos en cada caso. TABLA 4 OPACIDAD CALIFICACION INTEGRIDAD CALIFICACION DESPRENDIMIENTO CALIFICACION EPITERIAL EPITELIAL NINGUNA LIGERA
0 1
NINGUNA DIFUSA
0 0.5
SIN GRAVES ARRUGAMIENTO DE LA SUPERFICIE
0 1
MARCADA
2
1
2
3
PERDIDA EPITELIO AUSENCIA EPITELIO
DE
SEVERA
CONFLUENTE Y DEBIL CONFLUENTE E INTENSA
DE
3
1.5
5.2.4 Criterio de aceptación. Todos los productos para uso en bebés deberán obtener resultados de cero -0- en los tres parámetros. Los demás productos deberán obtener una calificación de opacidad no mayor de 2, una de integridad del epitelio no mayor de 0.5 y no mayor de 0 (cero) de desprendimiento epitelial. Los productos que obtengan calificaciones mayores podrán repetir la prueba o imprimir en etiquetas la nota "Este producto es irritante". 5.3 Ensayo en células rojas de s angre. 5.3.1 Material. - Células rojas de sangre, aisladas por centrifugación de sangre de ternera o cerdos sacrificados, citrada y lavada hasta eliminar trazas de plasma y células blancas. - Una centrifuga clínica estándar (10,000 RPM) de alta velocidad. - Un espectrofotómetro con filtros para mediciones a 500, 530, 540, 560 y 575 nm. de doble rayo. - Tubo de ensayo. - Solución 1000 ppm de dodecil sulfato de sodio c omo estándar. - Matraces Erlenmeyer suficientes. 5.3.2 Procedimiento. Se preparan diluciones a partir de la concentración de 0.125 mm/1 de oxihemoglobina, así como diluciones del dodecil-sulfato de sodio a partir de 1000 ppm. Se aplican las diferentes concentraciones de dodecil sulfato de sodio a la solución de oxihemoglobina y se mide la desnaturalización de ésta fotométricamente con el cambio continuo de color de rojo claro a café rojizo a 530, 540, 560 y 575 nm. La experiencia anota que a una concentración de 0.125 mmol /l de dodecil sulfato de sodio la desnaturalización es total (100%). A partir de este dato se traza una curva de respuesta concentración. 5.3.3 Interpretación de los resultados La inclinación positiva de la curva muestra el aumento en el daño celular, la liberación inmediata de oxihemoglobina se refleja en el aumento de absorbancia, a mayor concentración del estándar al haber destrucción celular las absorbancias a 540 y 575 nm. Disminuyen por la desnaturalización alcanzando un Plano a 1000 ppm, la absorbancia a 560 nm. No cambia. A partir de esta curva se hace el ensayo a distintas conce ntraciones de prueba de la sustancia a investigar con las células rojas y se estima su índice de desnaturalización. 5.3.4 Criterio de aceptación. Los productos para uso humano no deberán presentar ningún índice de desnaturalización de células rojas de sangre. 5.5 Ensayo de desnaturalización de proteínas.
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5.5.1 Materiales. - Fotocolorímetro - Filtros a 400 nm. 430 nm, 730 nm. - Celdillas de plástico de 1.5 ml (100) - Solución de formacina al 5%, al 10% y al 20% en agua destilada - Papel pH - Soluciones conocidas de irritantes, por ejemplo lauril sulfato de sodio al 5%, 10%, 15%, 20% y 25% - Reactivo proteico en polvo para prueba de desnaturalización IN VITRO (disponible en el mercado especializado) - Activador del reactivo (disponible en el mercado) - Micropipetas de 100 ul - Tapas de plástico para las celdillas - Dosificador Eppendor + con micropipetas de 250 ul a 1 ml con incrementos de 250 u l. - Micropipetas de 20 a 200 ul - Soportes para las celdillas - Incubadora - Papel filtro grande de 8" de diámetro - Embudo de gran capacidad - Probeta graduada - Matraz Erlenmeyer con tapón - Ampolletas reutilizables - Espátulas - Pipeta de rocío 5.5.2 Procedimiento 5.5.2.1 Unidades de medición Para fines prácticos de medición del grado de desnaturalización, se emplean unidades de densidad óptica multiplicadas por 1000 que se reportan como "unidades de opacidad". La densidad óptica de las soluciones de formacina que se emplean como calibradores deberá estar en los siguientes intervalos: Solución Densidad Unidades de óptica opacidad 5% 0.400 0.650 400 - 650 10% 0.800 1.050 800 -1050 20% 1.350 1.800 1350 -1800 5.5.2.2 Determinación de la densidad óptica. Para determinar si éste es el procedimiento adecuado, se deberá desarrollar lo siguiente: se colocan 100 ul o 100 mg de la muestra de prueba en 1 ml de disolvente en una celdilla. Se ajusta el colorímetro a cero con una celdilla que contenga sólo disolvente, después se lee la muestra a 400 nm. si la densidad óptica es mayor de 0.5 se deberá optar por la técnica de membrana, si es menor se puede emplear esta técnica. 5.5.2.3 Prueba de pH Se determinará el pH de la muestra; si éste es mayor de 8.5 deberán aplicarse modificaciones a la técnica. 5.5.2.4 Control de calidad Para todos los casos realice pruebas con controles conocidos cada 60 días por triplicado, en ensayos separados, para verificar procedimientos. 5.5.2.5 Curva dosis-respuesta Se determina el índice de irritación primaria dérmica IN VIVO y además con esta técnica, empleando soluciones estándar de un irritante conocido a diferentes concentraciones, se traza una curva de equivalencia entre los índices IN VIVO y las IN VITRO medidas como densidad óptica a 400 nm o a la que corresponda en muestras coloridas y reactivos. 5.5.2.6 Cálculo de la densidad óptica. Prepare una solución del reactivo proteico añadiendo agua destilada hasta dilución total, filtre y transfiera el reactivo empleando una pieza de papel filtro ajustada al embudo y una ampolleta para reactivo, deje que se filtre lentamente (de 30 a 45 minutos), etiquete con la fecha de elaboración. El reactivo es estable por 30 días almacenado de 4° a 8°C. Para activar el reactivo añada el activador en proporciones IX, 3X a 5X así, si el pH es menor de 8.5 adicione: IX o sea 0.5 ml de activador a 25 ml del reactivo preparado (la activación se efectúa antes de cada ensayo), si se va hacer en proporción 3X se adicionan 1.5 ml de activador a 25 ml de reactivo y si es 5X, 2.5 ml de activador a 25 ml de reactivo; si el pH es mayor de 8.5 no active el reactivo. Se preparan soluciones de la muestra a partir de 1000 ppm. Se aplican a diferentes concentraciones del reactivo y se determina la densidad óptica del reactivo desnaturalizado a 400 nm. o a la que corresponda según el tipo de muestra y se extrapola en la curva de dosis respuesta. 5.5.2.7 Muestras que no califican.
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Si la muestra es muy colorida dará lecturas demasiado altas, entonces deberá cambiarse el filtro para tener una lectura a 470 nm. o 730 nm. Si la muestra es reactiva y afecta la celdilla, se analiza poniendo primero el reactivo o el disolvente y añadiendo la muestra. Si todavía reacciona el producto, puede medirse en tubos de ensayo, si sigue habiendo reacción o vaporización debe optarse por o tro método. 5.5.3 Interpretación de los resultados. La clasificación de irritación IN VITRO corresponde con la IN VIVO extrapolada de la curva y debe leerse así: INDICE CLASIFICACION 0 - 0.5 No irritante 0.51- 1.5 Ligeramente irritante 1.6 - 3.0 Moderadamente irritante 3.1 - 5.0 Irritante 5.1 mayores Severamente irritante Los productos para uso en bebés deberán ser no irritantes. Los demás productos deberán tener índice no mayor de 3 en esta prueba para considerarse aptos para uso humano o bien deberán incluir en sus etiquetas la leyenda "Este producto es irritante". 6 MUESTREO El procedimiento de muestreo para los productos objeto de esta Norma se sujetará a lo que establece la Ley General de Salud 09-25-95 NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-089-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODOS PARA LA DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO MICROBIANO EN PRODUCTOS DE BELLEZA. . 5. Disposiciones sanitarias 5.1 Los productos en los cuales se aplicarán los métodos objeto de esta norma, se encuentran establecidos en el Reglamento. 5.2 Los fabricantes podrán efectuar métodos diferentes a los incluidos en esta norma, para el control interno de sus productos; pero para efectos de comprobación de resultados por acciones de verificación sanitaria, se deben ajustar a los métodos de la presente no rma. 6. Reactivos y medios de cultivo Los reactivos empleados en esta prueba deben s er grado analítico a menos que se indique otra c osa. Cuando se hable de agua debe entenderse agua destilada. 6.1 Reactivos Aceite mineral Agar DNA azul-toluidina Acetona Agar eosina azul de metileno Ácido acético 5 N Agar extracto de malta Ácido clorhídrico Agar hierro y lisina Acido oxálico Agar hierro y triple azúcar Ácido sulfanílico Agar Letthen modificado Acido tartárico Agar MacConkey Alcohol amílico o butílico Agar pseudomona F Alfa naftilamino Agar pseudomona P Amoniaco concentrado Agar papa dextrosa Cloruro de sodio Agar sal-manitol Cristal violeta Agar sulfito de bismuto Diclorhidrato de N-N-dimetil p-fenilendiamina Agar verde brillante Etanol absoluto Agar Vogel-Johnson Fosfato monobásico de potasio Agar xilosa lisina desoxicolato (agar XLD) Hidróxido de potasio Base de caldo tetrationato Hidróxido de sodio al 10% Caldo cistina selenito 1-Naftol Caldo Dextrosa Sabouraud Oxalato de amonio Caldo infusión de cerebro corazón Para dimetilamino benzaldehído Caldo Letthen modificado Peróxido de hidrógeno Caldo lisina descarboxilasa Rojo de metilo Caldo urea Safranina O Medio basal O/F (oxidativo-fermentativo) Sulfato de cobre Medio indol ornitina Telurito de potasio Medio indol nitrito Zinc en polvo Medio rojo de metilo Voges Proskauer 6.2 Medios de cultivo Medio SIM Agar cetrimida Tiras API para pruebas bioquímicas Agar citrato de Simmons
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6.3 Preparación de reactivos y medios de cultivo 6.3.1 Reactivos 6.3.1.1 Solución salina al 0,85% 6.3.1.2 Solución de etanol 80% y HCl al 1% v/v 6.3.1.3 Solución de tween 80% 6.3.1.4 Aceite mineral 6.3.1.5 Solución de Acido Tartárico al 10% p/v 6.3.1.6 Solución de telurito de potasio al 1% p/v 6.3.1.7 Solución de yodo-yoduro de potasio p/v 6.3.1.8 Solución de agua oxigenada al 3% v/v 6.3.1.9 Solución indicadora rojo de metilo. 6.3.1.10 Reactivo de Griess-Ilosvays 6.3.1.11 Reactivo de Kovacs y Ehrlich 6.3.1.12 Reactivo de O'Meora 6.3.1.13 Solución de sulfato de cobre según Leifson 6.3.1.14 Reactivo de Barrit 6.3.1.15 Solución de cristal violeta 6.3.1.17 Solución safranina 6.3.1.18 Solución alcohol-acetona 6.3.2 Medios de cultivo 6.3.2.1 Medios nutritivos o de enriquecimiento 6.3.2.1.1 Agar Letheen modificado 6.3.2.1.2 Caldo Letheen modificado 6.3.2.1.3 Agar papa dextrosa 6.3.2.1.4 Base de caldo tetrationato 6.3.2.1.5 Caldo Dextrosa Sabouraud 6.3.2.2 Medios selectivos y diferenciales. 6.3.2.2.1 Agar MacConkey 6.3.2.2.2 Agar Vogel Johnson 6.3.2.2.3 Agar de sal y manitol 6.3.2.2.4 Agar Cetrimida 6.3.2.2.5 Agar eosina azul de metileno 6.3.2.2.6 Agar extracto de malta 6.3.2.2.7 Caldo infusión de cerebro corazón 6.3.2.2.8 Agar verde brillante. 6.3.2.2.9 Agar xilosa lisina desoxicolato (agar XLD) 6.3.2.2.10 Agar Pseudomona F 6.3.2.2.11 Agar Pseudomona P 6.3.2.2.12 Caldo Cistina Selenito 6.3.2.2.13 Agar Sulfito y Bismuto 6.3.3 Medios para pruebas bioquímicas 6.3.3.1 Medio Basal O/F (de Hugh y Leifson) 6.3.3.2 Medio Indol Ornitina (MIO) 6.3.3.3 Medio Indol Nitrito (Medio de tripcaseína y nitrato) 6.3.3.4 Medio Rojo de Metilo Voges Proskauer 6.3.3.5 Agar Citrato de Simmons 6.3.3.6 Caldo urea 6.3.3.7 Agar lisina hierro 6.3.3.8 Agar de hierro y triple azúcar. 6.3.3.9 Agar DNA azul toluidina 6.3.3.10 Caldo de lisina y descarboxilasa 6.3.3.11 Medio SIM 7. Material y equipo 7.1 Material Matraces Erlenmeyer de 2000, 1000, 500, 200 y 100 ml Pipetas serológicas en 1/10 de 1, 2, 5, 10 y 25 ml Vasos de precipitados de 80 y 500 ml Probetas de 100, 500 y 1000 ml Embudos de vidrio Cajas de Petri 20 X 100 mm y 15 x 100 mm Pipetas Pasteur
Tubos de ensayo 16 X 150 mm Botellas de 100 ml para dilución con tapón de rosca Botellas de dilución de leche de 250 ml Codos de vidrio Termómetros graduación de -10 a 200ºC Portaobjetos Papel parafilm
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Marcador Bolsas estériles de polietileno Masking tape Membrana de 0,45 μ Gasa y algodón Porta filtro 7.2 Equipo Estufa a 35 ± 2ºC Microespátulas Estufa a 30 ± 1ºC Microscopio Refrigerador Baño maría Balanzas analítica y granataria Cuenta colonias Potenciómetro Asa y porta asa Autoclave Pinzas y tijeras Horno para esterilizar Esterilizar el material y equipo en autoclave (a Recipiente para material contaminado 121ºC durante 15 minutos) u horno (170-180ºC Espátulas durante 2 horas), según sea conveniente. 7.2.1 Cepas de referencia Candida albicans (ATCC 10231) Aspergillus niger (ATCC 16404) Staphylococcus aureus (ATCC 6538) Escherichia coli (ATCC 11105, 10536) Salmonella typhi (LNA 99) Pseudomona aeruginosa (ATCC 15442, 25619) 8. Cuenta total de hongos, levaduras y mesofílicos aerobios 8.1 Toma de muestra (del producto) 8.1.1 Analizar la muestra tan pronto como sea posible. Si es necesario almacenar, debe hacerse a la temperatura ambiente. 8.1.2 No incube, refrigere o congele las muestras antes o después de su análisis. 8.1.3 Inspeccione las muestras cuidadosamente antes de abrirlas y anote cualquier irregularidad del contenedor de dichas muestras. 8.1.4 Desinfecte la superficie del contenedor con un algodón estéril impregnado con cualquiera de los siguientes desinfectantes: Solución de etanol al 70% (v/v) y ác ido clorhídrico 1% (v/v) (alcohol ácido). Solución de etanol al 70% con 4% d e yodo Solución de glutaraldehído al 2% Benzal al 0,001% 8.1.5 Antes de abrir y tomar la muestra o contenido; secar la superficie con gasa estéril. 8.1.6 Homogeneizar el producto al tomar la muestra necesaria de acuerdo a su estado físico. Para líquidos, agitar el contenido del envase; para semisólidos y polvos, mezclar el contenido con una espátula estéril; para sólidos, raspar el producto con espátula estéril y tomar una muestra representativa; y para aerosoles, después de limpiar asépticamente el recipiente, expeler apropiadamente la cantidad de producto previa agitación. 8.2 Preparación preliminar de las muestras 8.2.1 Para las muestras que sean miscibles en CLM y CDS, adicionar 1 g o ml en 90 ml de CLM y 1 g o ml en 90 ml de CDS en condiciones asépticas. 8.2.2 Para las muestras que no sean miscibles en CLM y CDS (ejemplo, cremas, labiales, etc.), en 2 frascos estériles o bolsas de polietileno estériles debidamente etiquetados; uno para CLM y otro para CDS, adicionar 1 g o 1ml de la muestra y agregar 0,5 ml de tween 80 estéril a cada uno de los frascos o bolsas previamente marcados y homogeneizar la muestra. 8.2.3 En caso de usar los frascos poner en baño maría a 45ºC hasta formar una emulsión homogénea (el tiempo de exposición en el baño no debe exceder de 15 minutos). 8.2.4 Posteriormente agregar a cada uno de los frascos o bolsas 90 ml de CLM y 90 ml de CDS respectivamente y agitar perfectamente. 8.3 Procedimiento 8.3.1 Incubar a 30ºC ± 2 durante 7 días los medios de cultivo inoculados. Marcar los frascos o bolsas que se enturbien al agregar la muestra. 8.3.2 Confirmar si existe crecimiento a los 2 y 7 días de incubación. 8.3.3 Cuando el crecimiento sea evidente o se tenga duda de desarrollo microbiano, hacer una resiembra en ALM y AEM, inoculando 0,5 ml de cultivo del CLM y CDS respectivamente, empleando el método de vaciado en placa o de dispersión con codos de vidrio esterilizado. 8.3.4 Incubar durante 4 días a 30ºC ± 2. 8.4 Interpretación de resultados Observar si hay crecimiento en los medios inoculados: Si no hay crecimiento reportar: menos de 10 UFC/ml o g de muestra. Concluyendo el ensayo. Si se presenta crecimiento, continuar con la prueba definitiva que se describe a continuación. 8.5 Cuenta total de mesofílicos aerobios, hongos y levaduras.
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8.5.1 Procedimiento Agregar por separado 10 ml o g de muestra a 90 ml de medio CDS y CLM (Dilución 10-1) cuando las muestras sean miscibles en éstos. Para las muestras que no s on miscibles; en dos frascos o bolsas estériles debidamente etiquetados: uno para CLM y otro para CDS, adicionar 10 g o ml de muestra y colocar 5 ml de tween 80 estéril a cada uno de los frascos o bolsas previamente marcados. En caso de usar los frascos poner en baño de agua a 45ºC hasta formar una emulsión homogénea (el tiempo de exposición en el b año de agua no debe exceder de 15 minutos). Posteriormente agregar a cada uno de los frascos o bolsas 85 ml de CLM y 85 ml de CDS respectivamente y agitar perfectamente. (Dilución 10-1) A partir de la dilución 10-1, realizar diluciones seriadas según el crecimiento esperado de la siguiente manera: TUBO DILUCION VOLUMEN AGREGADO CLM o CDS (ml) 1 10-2 o 1:100 1 ml de dilución 10-1 9 2 10-3 o 1:1000 1 ml de dilución 10-2 9 3 10-4 o 1:10 000 1 ml de dilución 10-3 9 4 etc. Para la cuenta estándar total, realizar las diluciones en CLM; y para la cuenta de hongos y levaduras, realizar las diluciones utilizando el CDS. Mezclar hasta homogeneizar. Colocar 1 ml de cada dilución en cajas de Petri estériles previamente marcadas con la dilución, registro y fecha, agregar de 18 a 20 ml de medio de cultivo cuidando que la temperatura no sea mayor de 45ºC; p ara cuenta estándar total, utilizar ALM; y para cuenta de hongos y levaduras, emplear AEM o PDA. Homogeneizar el inóculo en el medio de cultivo, rotando la caja sembrada de izquierda a derecha, vertical y horizontalmente 6 veces en cada ocasión. Dejar solidificar el medio de cultivo en las cajas. Si se emplea el método de dispersión con codos de vidrio, utilizar 0,5 ml de inóculo por cada dilución y colocarlo en cajas de Petri conteniendo ALM y AEM para cuenta estándar total y cuenta de hongos y levaduras respectivamente. Dispersar el inóculo con codos de vidrio estériles. Dejar que se absorba el inóculo. Invertir las cajas e incubar: a 30°C ± 2 durante 48 horas para la cuenta estándar total; a 22ºC durante 5 días para la cuenta de hongos y a 35ºC por 48 horas para la cuenta de levaduras.. 8.5.2 Interpretación de resultados 8.5.2.1 Cuenta total de hongos y levaduras Contar el número de hongos y levadu ras que se encuentren. Reportar el número de colonias /ml o g de muestra multiplicando por el inverso de la dilución observada. En el caso de utilizar el método por dispersión de codo de vidrio, el resultado s e multiplicará por 2. Concluyendo la prueba. 8.5.2.2 Cuenta total de mesofílicos aerobios Contar las cajas en donde se enc uentren de 25 a 250 UFC. Reportar el número de UFC/ml o g de muestra multiplicando por el inverso de la dilución observada. En el caso de utilizar el método por dispersión con codo de vidrio, el resultado obtenido se multiplicará por 2. Para identificación de microorganismos patógenos se continuará con el punto siguiente. 9. Identificación de patógenos 9.1 Procedimiento Incubar los tubos de la dilución 1:100 o 1:1000 de CLM utilizados para la cuenta es tándar total, durante 7 días a 30ºC ± 2. A partir de los tubos inoculados sembrar una azada en los siguientes medios de cultivo diferenciales: agar cetrimida, EMB, AMC y AVJ. Incubar de 33 a 37ºC durante 24 horas los medios de EMB y AMC, y 48 horas el agar cetrimida y AVJ. Observar las cajas inoculadas para búsqueda de E. coli, S. Typhi, S. aureus y Ps. sp. en los medios respectivos (ver Tabla 1). MEDIO DE CULTIVO MICROORGANISMO CARACTERISTICAS COLONIALES Agar eosina azul de E. coli Colonias pequeñas azul negro en la parte central metileno con brillo metálico verdoso a la luz reflejada Salmonella Transparentes, color ámbar Staphylococcus coagulasa Colonias incoloras, en punta de alfiler Salmonella Shigella y otros Agar MacConkey Incoloros, transparentes E. coli Grandes, rojas, que pueden estar rodeadas de una zona de precipitación de bilis Enterobacter, Klebsiella Grandes, rosadas, mucosas Enterococos, Staphylococcus Diminutas, de crecimiento y otros aislado, opacas Ps. sp. Agar cetrimida Colonias grandes blancas o verdes cremosas E. coli Crece poco, sin pigmento S. aureus No crece S. aureus Agar Vogel Johnson Colonias pequeñas, negras, con halo amarillo.
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S.
epidermidis
y
otros
negro-grisáceas, sin halo
Pequeñas E. coli Ps. aeruginosa
No crece No crece
9.2 Tinción de Gram Si se observan colonias sospechosas de los microorganismos antes mencionados, de acuerdo a la Tabla No. 1, realizar una tinción de Gram para identificar morfología microscópica. 9.2.1 Procedimiento Preparar un frotis con microorganismos provenientes de un cultivo de 24 -48 horas de incubación. Aplicar calor suave al portaobjetos con la llama de un mechero o de una lámpara de alcohol de manera paulatina. El calentamiento no debe ser excesivo ni violento. Enfriar y aplicar sobre el frotis unas gotas de solución de cristal violeta, dejar actuar un minuto. Lavar con agua y escurrir. Aplicar unas gotas de la solución yodo-yodurada con mordente, dejar actuar un minuto. Lavar con agua y escurrir. Decolorar el frotis con unas gotas de la solución alcohol-acetona, durante no más de 10 segundos. Lavar con agua y escurrir. Aplicar unas gotas de la solución de safranina, dejar actuar entre 15 y 30 segundos. Lavar con agua, inclinar el portaobjeto para dejar escurrir el exceso de agua y secar los bordes con papel secante. 9.2.2 Interpretación de resultados Observar al microscopio con objetivo de inmersión. Las bacterias Gram positivas, se observan teñidas de c olor azul violáceo intenso. Las Gram negativas se observan de c olor rojo. 9.3 Identificación de S. aureus En caso de encontrar cocos en racimo Gram positivos, continuar con las siguientes pruebas para búsqueda de S. aureus. 9.3.1 Prueba de catalasa Aislar la colonia sospechosa en ALM, incubar a 33-37ºC durante 18-24 horas. Si se observa crecimiento, realizar la prueba de catalasa como se indica a continuación: en un portaobjetos adicionar una gota de solución de agua oxigenada al 3% y dispersar una porción de la colonia sospechosa. La reacción es positiva si se observan burbujas efervescentes del oxígeno desp rendido, utilizar controles positivos y negativos. Aislar en agar de sal y manitol o AVJ, incubando a 33-37ºC durante 24-48 horas. Observar si hay colonias fermentadoras de manitol. Resembrar en medio de oxidación-fermentación con dextrosa, incubar a 33-37ºC durante 18-24 horas, y observar s i hay desarrollo microbiano. Sembrar las colonias sospechosas en dos tubos con BHI, uno destinado para la técnica de coagulasa y otro para la técnica de termonucleasa, incubar a 35ºC de 18-24 horas. Reportar de acuerdo a la Tabla No. 2 9.3.2 Prueba de coagulasa 9.3.2.1 Procedimiento (método 1) Con la ayuda de una asa, transferir individualmente las colonias sospechosas de la cajas en que se desarrollaron de cualquiera de los dos medios de cultivo, de agar sal y manitol o AVJ para estafilococo, a tubos individuales que contengan 0,5 ml de plasma de conejo o de cobayo. Incubar en baño maría a 35ºC durante una hora, observar a las 3 horas y después a distintos intervalos hasta las 24 horas. Reportar positiva la prueba si hay formación de coágulo pequeño pero b ien constituido o una coagulación total de la mezcla. Correr en paralelo el mismo procedimiento con el testigo, éste debe dar la prueba positiva. 9.3.2.2 Procedimiento (método 2) Adicionar a cada tubo 0,5 ml de BHI. Transferir cada colonia sospechosa de las cajas en las que se desarrollaron al caldo con ayuda de una asa. Hacer lo mismo con el control positivo. Incubar 24 horas a 35ºC. Posteriormente adicionar a cada tubo 0,5 ml de plasma. Incubar 3 horas en baño de agua, entre 35 37ºC sin movimiento. 9.3.2.3 Interpretación de resultados La presencia de un coágulo dará la prueba positiva, de lo contrario se procederá a continuar la incubación hasta 24 horas. Si al transcurrir el tiempo no se observa coágulo, la prueba se considera negativa. NOTA: No todos los tipos de S. aureus son coagulasa positiva. 9.3.3 Prueba de la termonucleasa Al otro tubo sembrado en BHI, practicar la prueba de la termonucleasa, corriendo dicha prueba con un control positivo. 9.3.3.1 Procedimiento (método 1) En una caja de Petri desechable con 10 ml de medio de cultivo, agar DNA azul toluidina, se efectúan orificios de 2 mm de diámetro. Calentar en baño maría durante 15 minutos el cultivo de Staphylococcus aureus seleccionado. Colocar una gota del cultivo obtenido en alguno de los orificios e identificarlo, incubar a 37ºC durante 24horas. 9.3.3.2 Procedimiento (método 2)
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Inactivar el cultivo en baño maría durante 15 minutos. En un portaobjetos con agar DNA azul toluidina, aplicar en oradaciones de 2 mm de diámetro (previamente realizadas) la muestra y el control positivo. Incubar durante 24 horas de 35-37ºC. 9.3.3.3 Interpretación de resultados Transcurrido el tiempo de incubación, observar vire del agar de morado a violeta o rosa y la presencia de halo. Se da como positiva la prueba con la presencia de un halo color rosa alrededor de los orificios que indican hidrólisis del DNA. Reportar: Staphylococcus aureus termonucleasa positiva. Tabla No. 2 CARACTERISTICAS DIFERENCIALES DE S. aureus DETERMINACION S.aureus S.epidermidis Micrococcus sp. Prueba de catalasa + Fermentación de manitol + + Crecimiento en O/F fermentativo Prueba de Coagulasa + Prueba de Termonucleasa + Vogel Proskauer Oxidasa + Reducción de nitratos Variable 9.4 Pruebas bioquímicas empleadas 9.4.1 Prueba de oxidasa La prueba de oxidasa se realiza de la siguiente manera: impregnar una tira de papel filtro en diclorohidrato de N-N dimetil p-fenilendiamina y sobre ella colocar una porción de la colonia sospechosa. La prueba es positiva si se produce un color que va de rosa a púrpura. 9.4.2 Prueba en TSI Sembrar el cultivo puro sometido a ensayo tanto por estría en la superficie inclinada como en la columna vertical, mediante estría central. Incubar 48 horas a 37ºC. 9.4.2.1 Interpretación de resultados A = Viraje a rojo por formación de álcali. OA = Sin alteración del color original del medio de cultivo o rojo por formación de álcali. S = Viraje a amarillo, por formación de ácido. SG = Viraje a amarillo y formación de gas. + = Ennegrecimiento por formación de H2S. - = Ausencia de ennegrecimiento. 9.4.3 Prueba en LIA Sembrar el cultivo puro sometido a ensayo, tanto por estría sobre la superficie inclinada como por picadura central en la columna vertical subyacente. Incubar de 16 -18 horas a 37ºC. 9.4.3.1 Interpretación de resultados Violeta = Viraje del indicador de pH púrpura de bromocresol por la descarboxilación de lisina y la consecuente alcalinidad. Amarillo = Fermentación de glucosa con la consecuente acidez del medio. Negro = Formación de coloración negra por el H2S y producción de sulfato de hierro. 9.4.4 Prueba en medio basal O/F (de Hugh y Leifson) A partir del cultivo puro sometido a ensayo, que se encuentre lo más posible en la fase logarítmica de multiplicación, sembrar por el procedimiento de picadura hasta el fondo, un tubo con recubrimiento de parafina y otro tubo sin tal recubrimiento para cada carbohidrato elegido. Incubar 48 horas como mínimo a la temperatura de 35ºC. 9.4.4.1 Interpretación de resultados Amarillo en ambos tubos = Fermentación del correspondiente carbohidrato. Amarillo en tubo no recubierto = Degradación oxidativa del carbohidrato. Oxidación en la superficie. Movilidad = Si la turbidez se extiende en la totalidad del medio. Gas = Observar formación de gas. 9.4.5 Prueba en agar citrato de Simmons Sembrar el cultivo puro por estría, en la superficie del medio de cultivo e incubar de 24 a 48 horas a 37ºC. 9.4.5.1 Interpretación de resultados Positivo = Medio de cultivo azul oscuro. Negativo o inhibido = Sin cambio. 9.4.6 Prueba en caldo urea Sembrar masivamente con el cultivo puro, objeto de ensayo. Incubar hasta 48 horas a 37ºC.
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9.4.6.1 Interpretación de resultados Rojo = Urea positivo. Amarillo = Urea negativo. 9.4.7 Prueba en medio MR-VP 9.4.7.1 Procedimiento Sembrar en dos tubos de caldo MR-VP con el cultivo puro, objeto de investigación. Incubar hasta 4 días a 37ºC. A continuación se realizan los ensayos: 9.4.7.1.1 Prueba del rojo de metilo: añadir al primer tubo unas 5 gotas de la solución indicadora de rojo de metilo. 9.4.7.1.2 Prueba de Voges-Proskauer: al segundo tubo se le añaden 5 ml de la solución de sulfato de cobre según Leifson o 3 ml de reactivo de Barritt y un ml de hidróxido de potasio al 40% o 5 ml de reactivo de O'Meora. En caso positivo se presenta para los dos primeros métodos después de algunos minutos, un viraje a rojo. Con el reactivo de O'Meora aparece en caso positivo y tras frecuente agitación, una coloración rosa al cabo de unos 20 minutos, iniciándose en la superficie y que se intensifica en el transcurso aproximado de 2 horas. 9.4.7.2 Interpretación de resultados De anaranjado a rojo = positivo por utilización de glucosa. De anaranjado a amarillo = negativo. Rojo = Positivo, por formación de acetoína a partir de glucosa. Sin reacción = negativo. 9.4.8 Prueba en Medio indol nitrito 9.4.8.1 Formación de nitritos: Para investigar nitritos utilice 3 tubos separados; uno para el control positivo ( E . coli ), otro para el control negativo y el tercero para la prueba c on la cepa en estudio. Inocule masivamente cada tubo por punción. Incube a 35ºC de 12 a 24 horas. Agregue aproximadamente 10 gotas (mezcla de partes iguales de las soluciones A+B) del reactivo Griess-Ilosvays. 9.4.8.2 Interpretación de resultados La formación de un color rojo en uno o 2 minutos indica reducción de nitratos a nitritos (prueba positiva). Si la cantidad de nitritos es elevada el color rojo c ambia a amarillo. Si no aparece color, agregue a los tubos una pizca de zinc en polvo (libre de nitratos y de nitritos) Observe si se forma el color rojo o el cultivo permanece incoloro. Si no hubo reducción del nitrato presente en el medio de cultivo por el microorganismo, el zinc lo reducirá a nitrito y se formará un color rojo al reaccionar con el reactivo de Griess-Ilosvays. La prueba entonces será negativa (ausencia de nitratasa). Si no aparece color, esto nos indica que el germen redujo el nitrato presente en el medio de cultivo hasta más allá de la formación de nitritos, posiblemente llegando la reacción hasta nitrógeno gaseoso. La prueba entonces es positiva (presencia de nitratasa). 9.4.8.3 Formación de indol Recubrir el medio con una capa de aproximadamente 0,5 cm de altura del reactivo del indol según Kovacs. En presencia del indol libre, se presenta al cabo de pocos minutos una coloración rojo cereza en la capa del reactivo. 9.4.9 Prueba en medio SIM 9.4.9.1 Procedimiento El cultivo puro sometido a examen se siembra por punción en la capa superior del medio de cultivo y se incuba de 18-24 horas a 37ºC. 9.4.9.2 Interpretación de resultados La movilidad se pone de manifiesto por la turbidez difusa del medio de cultivo alrededor del canal de la picadura. La no movilidad se caracteriza por el crecimiento producido exclusivamente a lo largo de dicho canal. La formación de H2S se reconoce por el ennegrecimiento de la zona de crecimiento. La demostración del indol se efectúa mediante el reactivo de Kovacs. La formación del indol da lugar a una coloración rojo púrpura de la capa de reactivo. También puede usarse con el mismo propósito la tira de papel filtro impregnada con una solución de ácido oxálico. Esta se coloca seca, en la boca del tubo, virando a un color rosado en el caso de formación de indol. 9.4.10 Prueba en medio MIO 9.4.10.1 Procedimiento Los cultivos son inoculados por punción en el medio MIO preparado en tubos y se incuban de 18-24 horas a 35ºC. Se leen las reacciones de movilidad y de ornitina descarboxilasa antes de agregar el reactivo de Kovacs para la prueba de indol.
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9.4.10.2 Interpretación de resultados La movilidad es indicada por turbidez del medio o por crecimiento extendido a partir de la línea de inoculación. La ornitina descarboxilasa es indicada por el co lor púrpura del medio. La ornitina negativa produce un color amarillo, en el fondo puede s er púrpura al final. Para la prueba de indol se añaden de 3-4 gotas de reactivo de Kovacs, y se agita suavemente el tubo. La aparición de color rosa o rojo en el reactivo se interpreta como prueba positiva de indol. Comparar los resultados obtenidos con un tubo testigo sin sembrarse 9.4.11 Prueba en caldo lisina descarboxilasa 9.4.11.1 Procedimiento Los tubos con el caldo se inoculan con los microorganismos de prueba y se incuban durante 24 horas de 3235ºC o si se prefiere a 37ºC. Los bacilos entéricos producen ácido en la fermentación inicial de dextrosa, ocasionando un cambio de color amarillo. Los cultivos que también producen descarboxilación de la lisina, forman cadaverina y el caldo vuelve a tomar el color púrpura alcalino. 9.4.11.2 Interpretación de resultados Un color amarillo después de 24 horas indica un resultado negativo. El color púrpura es un resultado positivo que indica la descarboxilación de la lisina. 9.5 Identificación de bacterias Gram negativas 9.5.1 Pruebas para identificación de Pseudomona sp. 9.5.1.1 Procedimiento En caso de que en el medio agar cetrimida se encuentren colonias sospechosas de Pseudomona sp., realizar la prueba de oxidasa y una tinción de Gram (Tabla No. 3). Observar con luz ultravioleta las colonias desarrolladas y c omparar la morfología colonial conforme a la Tabla No. 3. CARACTERISTICAS DE P s e u d o m o n a s p . Medio de cultivo Morfología colonial Tinción de Prueba de Gram oxidasa Agar cetrimida a 37ºC Colonias grandes Bacilos + o 42ºC Agar Pseudomonas F para obtención de fluoresceína
blancas o verdes cremosas Colonias incoloras o amarillentas, con luz ultravioleta se observan de color amarillento
Bacilos Bacilos -
+
+ Agar Pseudomonas P Colonias verde azulosas. Con luz para detección de ultravioleta se observan de color azul. piocianina 9.5.1.2 La presencia de Pseudomona sp. Puede confirmarse, si es necesario, con pruebas bioquímicas mencionadas en los puntos del 9.4.1 al 9.4.11 y comparar con la Tabla No.4. Tabla No. 4 P s eu d o m o n a s p . Pruebas bioquímicas Resultado H2S (formación) + Movilidad -Indol Urea Variable Lisina descarboxilasa Lactosa VP Variable + Citrato de Simmons Manitol Variable Glucosa (gas) Variable Sorbitol Inositol OF/F + OF/O 9.5.2 Pruebas para identificación de Salmonella sp. En caso de que en los medios EMB o AMC se encuentren colonias sospechosas de Salmonella (cuadro No. 1), sembrarlas en medio caldo cistina-selenito y caldo tetrationato, incubar durante 12- 24 horas a 37ºC o 43ºC. 9.5.2.1 Pruebas selectivas para Salmonella sp. Si se presenta crecimiento en cualquiera de los medios de enriquecimiento, tomar una azada y aislar por estría cruzada en los siguientes medios: agar verde brillante, agar XLD y agar sulfito de bismuto.
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Si son bacilos Gram negativos, correspondiendo a la morfología de Salmonella sp., sembrar por estría y punción en el medio agar triple azúcar-hierro e incubar de 18 a 24 horas a 35ºC. Observar las morfologías coloniales y microscópicas y compararlas con las descritas en la Tabla No.5. Tabla No. 5 CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS DE S a l m o n e l l a s p . Medio de cultivo Características morfológicas Tinción de Gram Agar verde Colonias pequeñas transparentes, incoloras, Bacilos brillante rosas o blancas opacas, frecuentemente rodeadas de una zona rosa o roja. Agar xilosa-lisina Colonias rojas con o sin centro Bacilos Bacilos desoxicolato negro. Agar sulfito de Colonias negras o verdes Bacilos bismuto Agar hierro triple Superficie alcalina (roja) punción ácida (amarilla), Bacilos azúcar con o sin producción de ácido sulfhídrico (negro) 9.5.2.2 Para confirmación de Salmonella realizar las pruebas bioquímicas mencionadas en los puntos del 9.4.1 al 9.4.11 y comparar con la Tabla No. 6. Pruebas bioquímicas Resultado TSI: Superficie Alcalino Punción acido Gas H2S + LIA: Superficie K Alcalino Punción K Alcalino Gas H2S + (-) MIO: Movilidad +(-) Indol Ornitina Urea Lisina descarboxilasa + Malonato Lactosa VP Citrato de Simmons Manitol + Glucosa (gas) Sorbitol + Ornitina Descarboxilasa Dulcitol variable Inositol Triolosa + Mucato Fucsina glicerol Arabinosa Ramnosa Celobiosa variable Eritritol Acetato de sodio 9.5.3 Pruebas selectivas para Escherichia coli . 9.5.3.1 Procedimiento En caso de que encuentren colonias sospechosas de E. coli (Tabla No. 1), sembrar por estría cruzada en los medios AMC y agar Levine-eosina azul de metileno e incubar a 35°C. Observar el crecimiento y si ninguna colonia corresponde a la morfología descrita en la Tabla No.1, la muestra cumple los requisitos de ausencia de Escherichia coli . Confirme la presencia utilizando las pruebas bioquímicas mencionadas en los puntos del 9.4.1 al 9.4.11 y comparar con la Tabla No. 7. Tabla 7. E s c h e r i c h i a c o l i Pruebas bioquímicas Resultado TSI: Superficie Acido Punción Acido
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LIA:
MIO: Urea Lisina descarboxilasa Malonato Lactosa VP Citrato de Simmons Manitol Glucosa (gas) Sorbitol Ornitina descarboxilasa Dulcitol Inositol Triolosa Arabinosa Ramnosa Eritritol OF/F y OF/O Mucato
Gas H2S Superficie Punción Gas H2S Movilidad Indol
+ Alcalino Acido + +(-) + + + + acido + Variable Variable + + Variable + +
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-118-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MATERIAS PRIMAS PARA ALIMENTOS, PRODUCTOS DE PERFUMERÍA Y BELLEZA. COLORANTES Y PIGMENTOS INORGÁNICOS. ESPECIFICACIONES SANITARIAS. 5. Clasificación 5.1 Para efectos de esta Norma los colorantes y pigmentos inorgánicos permitidos se clasifican por su uso: 5.1.1 En alimentos Dióxido de titanio 5.1.2 En productos de perfumería y belleza Aluminio en polvo Oxido de fierro Carbonato de magnesio Pirofilita Dióxido de titanio Plata Ferrocianuro férrico Polvo de bronce Ferrocianuro férrico amónico Polvo de cobre Hidróxido crómico verde Silicato de calcio Mica Sulfato de bario Oxicloruro de bismuto Sulfato de calcio Oxido crómico verde Sulfuro de zinc Oxido de magnesio Ultramarinos Oxido de zinc Violeta de manganeso 6. Especificaciones sanitarias Los colorantes y pigmentos inorgánicos deben cumplir con las siguientes especificaciones físicas, químicas, de identidad y pureza. 6.1 Físicas y químicas 6.1.1 Para alimentos 6.1.1.1 DIOXIDO DE TITANIO 6.1.1.1.1 Físicas Sinónimo: CI Pigment White 6 Fórmula: TiO2 Número de Código: CI 77891 Peso molecular: 79,90
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Color: Blanco Descripción: Polvo blanco amorfo 6.1.1.1.2 Pureza Contenido de dióxido de titanio; no menos de 99,0% después de 3 horas a 105ºC Plomo (como Pb); no más de 10 mg/kg Antimonio (como Sb); no más de 2 mg/kg Arsénico (como As); no más de 1 mg/kg Mercurio (como Hg); no más de 1 mg/kg Residuos por ignición a 800ºC (después de 3 horas a 105ºC); no más de 0,5% Sustancias solubles en agua; no más de 0,3% Sustancias solubles en ácido; no más de 0,5% Oxido de aluminio o dióxido de silicio; no más de 2% de cualquiera de las dos o combinadas 6.1.1.1.3 Identificación A 500 mg de TiO2 adicionar 5 ml de H2SO4 concentrado y calentar suavemente hasta la aparición de humos de trióxido de azufre. Enfríe la suspensión a temperatura ambiente y con cuidado colóquela en un matraz aforado de 100 ml. Diluya con agua destilada hasta el a foro. Filtre y tome 5 ml de la solución clara obtenida. Adicione 2-3 gotas de peróxido de hidrógeno TS (para la preparación de soluciones TS véase apéndice informativo A). Un color rojo naranja se desarrollará inmediatamente indicándonos la presencia de dióxido de titanio. 6.1.2 Para productos de perfumería y belleza 6.1.2.1 ALUMINIO EN POLVO 6.1.2.1.1 Físicas Sinónimo: Pigment metal 1 Peso molecular: 27 Número de Código: CI 77000 Color: de blanco lustroso a gris lustroso Fórmula: Al Descripción: Polvo plateado Composición: Tipo I (polvo) Tipo II (pasta) no volátiles 99,0% 65,0% lubricantes máximo 4,0% 3,0% impurezas máximo 1,0% 0,7% 6.1.2.1.2 Pureza Aluminio; no menos de 99% Mercurio; no más de 1 mg/kg Plomo; no más de 20 mg/kg Arsénico; no más de 3 mg/kg 6.1.2.2 CARBONATO DE MAGNESIO 6.1.2.2.1 Físicas Sinónimo: Pigment White 1 Descripción: Polvo blanco Número de Código: CI 77713 Solubilidad: Es prácticamente insoluble en agua y en alcohol y soluble en ácidos diluidos con efervescencia. 6.1.2.2.2 Pureza Contenido de MgO (óxido de magnesio), el equivalente de no menos de 40% y no más de 43,5% Sustancias insolubles en ácido no más de 0,05% Metales pesados (como Pb) no más de 3 mg/kg Arsénico (como As) no más de 3 mg/kg Plomo no más de 10 mg/kg Oxido de calcio no más de 0,6% Sales solubles no más de 1% 6.1.2.2.3 Identificación Cuando se trata con HCl diluido TS, se disuelve con efervescencia y la solución resultante da la prueba positiva para magnesio. 6.1.2.6 HIDROXIDO CROMICO VERDE 6.1.2.6.1 Físicas Sinónimo: CI Pigment Green 18 Peso molecular: 188 Número de Código: CI 77289 Color: Verde brillante a verde azulado brillante Fórmula: Cr2O3.2 H2O pH (solución al 10%): 6,0-7,0 Composición: Cr2O3 76-80% H2O 14-19% B2O3 4-7% 6.1.2.6.2 Pureza Material soluble en agua; no mayor de 2,5% Material volátil total a 1 000 ºC; no más de 20 % Boro (como B2O3); no más de 8% Plomo (como Pb); no más de 20 mg/kg
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Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg 6.1.2.7 MICA 6.1.2.7.1 Físicas Sinónimo: CI Pigment White 20 Número de Código: CI 77019 Fórmula: 3(Al2O3) K2O 6(SiO2).2 H2O Composición: Al2O3 33-39% K2O 9-12% SiO2 45-48% H2O 4-5% Otros óxidos 0,5% 6.1.2.7.2 Pureza Residuo por ignición de 600-650°C; no más de 2% Plomo (como Pb); no más de 20 mg/kg
Mercurio (como Hg); no más de 1 mg/kg
Peso molecular: 796 Color: Blanco a gris pálido pH (solución al 10%): 4,2-9,3
Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg Mercurio (como Hg); no más de 1 mg/kg
6.1.2.10 OXIDO DE MAGNESIO 6.1.2.10.1 Físicas Número de Código: CI 77711 Descripción: Polvo blanco Fórmula: MgO Solubilidad: Insoluble en agua y en alcohol. Es Peso molecular: 40,30 soluble en ácidos diluidos 6.1.2.10.2 Pureza No menos de 96% de MgO después de ignición Oxido de calcio; no más de 1,5% Sustancias insolubles en ácidos; no más de 0,1% Metales pesados (como Pb); no más de 40 mg/kg Alcali (libre) y sales solubles; pasa la prueba Plomo; no más de 10 mg/kg Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg Pérdida por ignición; no más de 10% 6.1.2.10.3 Identificación Disolver 15 mg en 2 ml de solución de HNO3 (ácido nítrico) 2 M y neutralizar con solución de hidróxido de amonio 2 M. La solución resultante da positivas las pruebas de magnesio 6.1.2.11 OXIDO DE ZINC 6.1.2.11.1 Físicas Sinónimo: CI Pigment White 4 Descripción: Polvo amorfo blanco amarillento Número de Código: CI 77947 pH: 6,9-7,4 Fórmula: ZnO Composición: ZnO 99-99,7% Peso molecular: 81,37 Zn 80,3% Color: Blanco O 9,7% Solubilidad: Insoluble en agua, soluble en ácido acético diluido, ácidos minerales, carbonato de amonio e hidróxidos alcalinos. 6.1.2.11.2 Pureza Oxido de zinc (como ZnO); no menos del 99% Mercurio (como Hg); no más de 1 mg/kg Residuo por ignición a 800 ºC; no más del 1% Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg Cadmio (como Cd); no más de 15 mg/kg Plomo (como Pb); no más de 20 mg/kg 6.1.2.12 OXIDOS DE FIERRO 6.1.2.12.1 Físicas Sinónimos: Oxido de fierro rojo: CI Pigment Red 101 CI Pigment Brown 7 CI Pigment Red 102 Oxido de fierro negro: Oxido de fierro amarillo: CI Pigment Black CI Pigment Yellow 42 Número de Códigos: CI 77491 CI Pigment Yellow 43 CI 77492 Oxido de fierro café: CI 77499 CI Pigment Brown 6 Fórmulas: FeO, Fe2O3, Fe3O4 pH (solución al 10%); 4,0-9,0 Solubilidad: Son solubles en HCl concentrado, insolubles en agua y solventes orgánicos.
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6.1.2.12.2 Pureza Contenido; no menos de 60% de fierro (Fe) Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg Plomo (como Pb); no más de 10 mg/kg Mercurio (como Hg); no más de 1 mg/kg 6.1.2.13 PIROFILITA 6.1.2.13.1 Físicas Número de Código: CI 77004 6.1.2.13.2 Pureza Plomo (como Pb); no más de 20 mg/kg 6.1.2.14 PLATA 6.1.2.14.1 Físicas Número de Código: CI 77820 Fórmula: Ag 6.1.2.14.2 Pureza Plata (como Ag); no menos del 99,9% Plomo (como Pb); no más de 10 mg/kg 6.1.2.16 POLVO DE COBRE 6.1.2.16.1 Físicas Sinónimo: CI Pigment Metal 2 Número de Código: CI 77400 Fórmula: Cu 6.1.2.16.2 Pureza Cobre (como Cu); no menos de 70% y no más de 95% Acido oléico o esteárico; no más de 5% Cadmio (como Cd); no más de 15 mg/kg Plomo (como Pb); no más de 20 mg/kg 6.1.2.17 SILICATO DE CALCIO 6.1.2.17.1 Físicas Sinónimos: CI Pigment White 28 Número de Código: CI 77230 Fórmula: CaSiO4 Peso molecular: 119 Color: Blanco Descripción: Polvo blanco 6.1.2.17.2 Pureza Arsénico; no más de 3 mg/kg Fluoruro; no más de 10 mg/kg Metales pesados (como Pb); no más de 4 mg/kg 6.1.2.18 SULFATO DE BARIO 6.1.2.18.1 Físicas Sinónimo: CI Pigment White 21 Número de Código: CI 77120 Fórmula: BaS04 Peso molecular: 233 Color: Blanco 6.1.2.18.2 Pureza No menos de 97,5% y no más de 100,5% de BaSO4 Sustancias solubles en ácido: no más de 15 mg Arsénico: no más de 0,8 mg/kg 6.1.2.19 SULFATO DE CALCIO 6.1.2.19.1 Físicas Sinónimo: CI Pigment White 25
Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg
Arsénico (como As); no más de 5 mg/kg Mercurio (como Hg); no más de 1 mg/kg
Peso molecular: 64 Color: oro rojo lustroso Descripción: Polvo Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg Mercurio (como Hg); no más de 1 mg/kg Aluminio (como Al); no más de 0,5% Estaño (como Sn); no más de 0,5%
pH (en solución al 10%) 9,5-9,9 pH (en solución acuosa al 5%): entre 8,4 y 10,2 Composición: Natural Sintético CaO 46,9% 27,8% SiO4 50,9% 49,8% Otros óxidos 1,7% 5,0% Plomo; no más de 10 mg/kg Residuo a la ignición; 0,5% (natural) y 17,4% (sintético)
pH (solución al 10%): 6,3-9,0 Composición: BaSO4 97-99% SiO2 0-2% Otros: 1%
Número de Código: CI 77231
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Fórmula: CaSO4.2H2O pH (solución al 10%): 6,3-9,0 Peso molecular: 136,14 (anhidro) Descripción: Polvo fino blanco o blanco Color: Blanco amarillento 6.1.2.19.2 Pureza No menos de 99% de CaSO4. (Calculado en base CaSO4 (anhidro) no más de 1,5% seca) Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg Pérdida al secado; Fluoruro; no más de 30 mg/kg CaSO4.2H2O no menor de 19% y no mayor a 23% Metales pesados (como Pb); no más de 10 mg/kg Selenio; no más de 30 mg/kg 6.1.2.19.3 Identificación Disolver exactamente 250 mg de la muestra en 100 ml de agua y 4 ml de HCl diluido TS, hervir hasta disolución y enfriar. Añadir con agitación (de preferencia con agitador magnético) 30 ml de EDTA disódico (sal disódica del ácido etilendiaminotetraacético) 0,05 M con una bureta de 50 ml, añadir 25 ml de hidróxido de sodio TS y 30 mg de indicador azul hidroxinaftol y continuar la titulación hasta obtener la coloración azul. Cada ml de EDTA disódico es equivalente a 6,807 mg de CaSO4. 6.1.2.20 SULFURO DE ZINC 6.1.2.20.1 Físicas Sinónimo: CI Pigment White 7 pH (solución al 10%): 6,0-8,0 Fórmula: ZnS Composición: ZnS 97% Peso molecular: 97 ZnO 0,3% Color: Blanco 6.1.2.20.2 Pureza Contenido de ZnS: 97% Sustancias solubles: no más de 0,4% ZnO: no más de 0,3% Humedad: no más de 0,2% 6.1.2.21 ULTRAMARINOS 6.1.2.21.1 Físicas Sinónimos: CI Pigment Blue 29 Pigment Green 24: Azul verde amarillento CI Pigment Green 24 Fórmula: Na7Al6Si6O24S3 Número de Códigos: 6.1.2.21.2 Pureza Pigment Blue 29: CI 77007 Plomo (como Pb); no más de 20 mg/kg Pigment Green 24: CI 77013 Arsénico (como As); no más de 3 mg/kg Color: Pigment Blue 29: Azul Mercurio (como Hg); no más de 1 mg/kg 6.2 Microbiológicas Los colorantes y pigmentos inorgánicos objeto de esta Norma, deben estar exentos de microorganismos patógenos. 7. Muestreo El procedimiento de muestreo para los productos objeto de esta Norma, debe sujetarse a lo que establece la Ley General de Salud. 8. Métodos de prueba Para la verificación de las especificaciones que se establecen en esta Norma, se deben aplicar los métodos de prueba contemplados en la norma que se señala en el Apartado de referencias. Para la determinación de impureza, se deben aplicar los métodos de prueba señalados en el Apéndice Normativo A. 9. Etiquetado La etiqueta de los productos objeto de esta Norma, además de cumplir con lo establecido en el Reglamento y la Norma Oficial Mexicana correspondiente, debe sujetarse a lo siguiente: Color Index (en su caso); Nombre químico; Declaración de pureza. 10. Envase y empaque 10.1 Envase.
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