PREPARACIÓN DE UNA CURVA PATRÓN PARA GLUCOSA

CENTRO DE CIENCIAS BÁSICAS DEPARTAMENTO DE QUÍMICA BIOQUIMICA I PRÁCTICA #9: PREPARACIÓN DE UNA CURVA PATRÓN PARA GLUCOSA

MC MARÍA CRISTINA SERNA GUTIÉRREZ

LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGÍA 3ER SEMESTRE

ADOLFO ANDRADE DE LA CRUZ FRIDA GUERRERO LÓPEZ

06/11/17

The world’s largest digital library

Try Scribd FREE for 30 days to access over 125 million titles without ads or interruptions! Start Free Trial Cancel Anytime.



RESULTADOS Tubo

Concentración (mg/ml)

Absorbancia

2

0.0100

0.049

3

0.0200

0.351

4

0.0300

0.303

5

0.0400

0.494

6 (Problema)

0.0194

0.227

Tabla 1. Valores de absorbancia obtenidos.

Gráfico 1. Curva de calibración para la glucosa, indicando la ubicación interpolada y la obtenida por medio de la ecuación de la muestra problema.

A partir de la ecuación de de la recta despejamos la concentración:  = 12.87( 12.87( ) − 0.0225 =

 + 0.022 0.02255 12.87

Calculamos la concentración de la muestra problema a partir de la absorbancia registrada:



DISCUSIONES Al incidir un haz de luz de de determinada longitud de onda ( ) sobre una muestra, parte de la luz es absorbida y la otra parte es reflejada o transmitida (Quesada, 2007) como se puede ver en la imagen 1.1, la absorbancia de las muestras (tabla 1) se tomaron a una longitud de onda de 540 nm, dando diferentes absorbancias según las concentraciones de las muestras ya que la cantidad de la luz absorbida es directamente proporcional a la concentración (glucosa) de la muestra.

IMAGEN 1.1 Ejemplo de una luz que incide sobre una muestra donde: Li=luz incidente Lt=luz transmitida l = ancho de la cubeta

Para la calibración del espectrofotómetro como dice Bolaños et al (2003) para calibrar el espectrofotómetro, se hace uso de un blanco, este no contiene la disolución patrón a medir. Se mide su absorbancia y se resta del resto de las muestras que se utilizan para la construcción de la curva patrón. En el espectrofotómetro utilizado para las mediciones se tiene la opción de calibrar y restar el blanco en automático.

Con las absorbancias obtenidas se construyó una curva de absorbancia contra concentración y como Quesada (2007) menciona a partir de la curva de calibración de una sustancia, es posible conocer la concentración de una muestra; para ello, se mide su absorbancia a la misma longitud de onda y, con base en ese valor, se interpola la concentración. Siguiendo lo mencionado con anterioridad el resultado de la concentración de la muestra fue aproximadamente 0.019 mg/ml. En cambio, Sierra et al (2008) nos da la opción de hacer h acer la curva por el método de mínimos cuadrados el cual permite obtener la ecuación de la mejor línea recta que pase por los lo s puntos (cuya pendiente será ε ). Siendo así solo se saca la ecuación de la recta, y se hace un despeje para conocer la concentración, dando como resultado una concentración de 0.0194 mg/ml, teniendo una pequeña diferencia, que resulta de la agudeza visual o escala del gráfico necesaria para dar resultados precisos por el método de interpolación.

CONCLUSIONES Al término de la práctica se pudo preparar de manera exitosa una curva de calibración para la glucosa utilizando un reactivo de cobre en medio básico y realizando mediciones de absorbancia mediante espectrofotometría. De esta manera y mediante los métodos de interpolación, y de mínimos cuadrados se pudo calcular la concentración de glucosa en una muestra problema.

BIBLIOGRAFÍA 

Bolaños N. Lutz Lutz G. & Herrera R. (2003) Química Química de Alimentos: Manual Manual de laboratorio. Costa Rica: editorial de la universidad de Costa Rica. p.p.47



Quesada S. (2007) Manual de experimentos de laboratorio para bioquímica. Costa

PREPARACIÓN DE UNA CURVA PATRÓN PARA GLUCOSA

Recommend Documents