PERCOBAAN PENENTUAN KADAR KLOROFIL DENGAN SPEKTROFOTOMETER
LAPORAN PRAKTIKUM Disusun untuk memenuhi tugas matakuliah Teknik Teknik La!"at!"ium #ang $iiming !leh Ba%ak I &a#an &a#an Sume"a"tha
Oleh ' Kel!m%!k ( () Dita Pe"$ana *(+,-.(/,0+,12 3) Lell# Lu4kitasa"i *(+,-.(/,,--12 -) Luth5ianti Fanani *(+,-.(/,-,(12 .) Ri$a$#ah &ilu6eng &ilu6eng *(+,-.(/,,(302 +) Ri$! Sigit &i4aks!n! &i4aks!n! *(+,-.(/,---32
UNI7ERSITAS UNI7ERSITAS NEGERI MALANG FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETA8UAN ALAM 9URUSAN BIOLOGI DESEMBER 3,(+
Percobaan Penentuan Kadar Klorofil dengan Spektrofotometer
A. Tujua juan Mahasis:a $iha"a%kan $a%at) () Meng!%e"asikan s%ekt"!5!t!mete" $engan ena"
3) Menguku" ka$a" kl!"!5il %a$a $aun $engan menggunakan s%ekt"!5!t!mete" B. Dasar Teori S%ekt"!5!t!mete" me"u%akan alat #ang $igunakan untuk menguku" ka$a" ;at
te"la"ut $alam suatu la"utan) P"insi% ke"6a $a"i alat ini e"$asa"kan se"a%an 4aha#a *as!"ansi2 m!n!k"!mtik !leh ;at te"la"ut) S%ekt"!5!t!mete" akan menghasilkan sina" $a"i s%e4t"um $engan %an6ang gel!mang ene"gi se4a"a "elati
Spektrofotometer terdiri dari : 1. Sumber cahaya. 2. Monokromator. 3. Kompartemen sampel. 4. Detektor dan pengukur intensitas cahaya. Skema konstruksi spektrofotometer :
Spektrofotometer memiliki beberapa enis. !enis"enis spektrofotometer : 1. #erdasarkan pada daerah spektrum yang akan dieksporasi$ terdiri dari : a. Spektrofotometer sinar tampak %&is'. b. Spektrofotometer sinar tampak %&is' dan ultra(iolet %)&'. 2. #erdasarkan teknik optika sinar$ terdiri dari : a. Spektrofotometer optika sinar ganda %double beams optic'.
b. Spektrofotometer optika sinar tunggal %single beams optic'. Ka$a" suatu la"utan $a%at $itetukan se4a"a s%ekt"!5!t!met"ik e"$asa"kan hukum Lame"t > Bee") 8ukum Lame"t men#atakan %"!%!"si e"kas 4aha#a #ang $atang #ang $ise"a% !leh suatu ahan?me$ium ti$ak e"gantung %a$a intensitas e"ka 4aha#a #ang $ating) 8ukum Bee" men#atakan as!"ansi 4aha#a e"n$ing lu"us $engan k!nsent"asi $an ketealan ahan?me$ium) Syarat *ukum #eer :
Konsentrasi harus rendah$ +at yang diukur harus stabil$ cahaya yang dipakai harus monokromatis$ larutan yang diukur harus ernih. Untuk %enggunaan analisis kimia %"isti:a as!"ansi me"u%akan $asa" $a"i s%et"!sk!%i) P"!se$u" $asa" $alam analisis kuantitati5 se4a"a s%ekt"!sk!%i a$alah meman$ingkan as!"ansi ene"g# "a$iasi sina" m!n!k"!mastik $engan %an6ang gel!mang te"tentu !leh la"utan 4u%likan $engan suatu la"utan stan$a" atau $engan la"utan lank!) Ca"a menggunakan S%ekt"!5!t!mete" ti%e SPECTRONIC 3( D $engan ena" a$alah seagai e"ikut) @ 8i$u%kan %e"alatan s%ekt"!5!t!mete" $engan 4a"a memuta" t!m!l %!:e" ON $an memia"kan te"leih $ahulu sekita" (+ menit seelum $igunakan aga" agian optical system = #aitu sume" 4aha#a= phototube= $an detector men4a%ai kea$aan stail) *alat ti$ak !leh lanngsung $ihuungkan $engan sume" a"us= teta%i @
melalui sta
@
4a"a memuta" kn! #ang te"se$ia) Untuk , -., > +11= kn! $i%uta" ke ki"i Untuk , /,, > 1+,= kn! $i%uta" ke kanan Atu"lah m!$e tam%ilan %a$a TRANSMITTANCE $engan 4a"a menekan
@
t!m!l m!$e hingga LED $isam%ing tulisan t"ansmittan4e e"4aha#a Selan6utn#a sesuaikan angka %a$a tam%ilan $engan 4a"a memuta" %!:e" s:it4h? ;e"! 4!nt"!l= hingga %a$a tam%ilan e"nilai ,T *tem%at 4u%likan %a$a a$a%te" ha"us k!s!ng $an te"tutu%2
@
Isilah 4u
@
ku
@
t"ansmittan4e sehingga menun6ukkan nilai (,, T) Tekanlah t!m!l MODE@ABSORBANCE= $engan memuta" kn!
@ @
as!"ansi sehingga menun6ukkn nilai ,), A) Kelua"kan 4u
@ @ @
tutu%lah "uang a$a%te") Lakukan %ema4aan %a$a T atau A Kelua"kan ku
C. Metodologi Penelitian 1. Alat dan Baan Alat ♣ S%ekt"!5!t!mete" S%e4t"!ni4 3( D ♣ Ku
Bahan ♣ ♣
Daun mu$a Daun tua
♣ ♣ ♣
Ke"tas sa"ing Alk!h!l 1/ Aua$es
!. Cara Kerja Mengukur kadar klorofil daun muda
Ditimbang daun -$2 gram daun muda.
Daun dipotong kecil"kecil$ digerus dengan mortar dan pistil.
Diambilalkohol alkoholmurni /0 sebanyak 1- mlku(et menggunakan gelas ukur. Dimasukkan /0 ke dalam sebagai larutan blanko
ke dalam spektofotometer. Ditambahkan alkohol /0 Dimasukkan dalam gelas lautan ukur keblanko daun sedikit demi sedikit untuk mempermudah pen
-$ diatur pada gelombang /4 berisi dan // nm. daun. ncur$ dimasukkan Diatur semuaabsorbansinya alkohol /0 dalam gelas ukurpanang 1- ml ke dalam mortar gerusan
il larutan blanko$ekstrak kemudian diganti dengan dengan larutandan ekstrak dalam ku(et pertama$ Disaring daun menggunakan kertas saring dimasukkan ke dalam gelasdilanutka ukur 1--
Dihitung kadar dngan dari intermans dan De Moot #ila Dicatat ekstrak absorbansinya. klorol belum mencapai 2- ml$klorolnya ditambahkan lagirumus dengan alkohol /0 hingga menad
Diulang cara kera klorol pada daun Dimasukkan ekstrak klorol ke untuk dalam 2pengukuran ku(et sekaligus. Diusahakan lautantua. tetap homogen
D. Data Pengamatan Tael Penguku"an Ka$a" Kl!"!5il Daun Menggunakan S%ekt"!5!t!mete"
Umu"
As!"ansi %a$a ,
Daun
/.1
//+
,=,/. ,=,+( ,=,+0+ ,=301 ,=-(+ ,=310
,=,/3 ,=,+3 ,=,+0, ,=310 ,=-3. ,=-(,+
Mu$a Re"ata Tua Re"ata
Ka$a" Kl!"!5il *mg?lt2 a
T!tal
,=0-(+
(= ,../
,=,3-
3=+.-(-
+=30(0+
.=,.+1+
". Analisis Data Penghitungan ka$a" kl!"!5il %a$a %e"4!aan S%ekt!5!t!mete" menggunakan
"umus &inte"mans $an De M!!ts #akni ' Kl!"!5il a *mg?l2 (-=0 *OD//+2 > +=0/ *OD/.12
Kl!"!5il *mg?l2 3+= *OD/.12 > 0=0 *OD//+2 Kl!"!5il t!tal *mg?l2 3, *OD/.12 /=( *OD//+2 Kete"angan OD *O%ti4al Densit#2 a$alah nilai as!"ansi kl!"!5il #ang tete"a %a$a S%ekt"!5!t!mete") Penghitungan ka$a" "ata@"ata kl!"!5il untuk umu" $aun mu$a' Kl!"!5il a *mg?l2 (-=0 *OD//+2 > +=0/ *OD/.12 (-=0 *,=,+0,2 > +=0/ *,=,+0+2 (=,/+1 > ,=-300+ #$%&'1( mg)lt Kl!"!5il *mg?l2 3+= *OD/.12 > 0=0 *OD//+2 3+= *,=,+0+2 > 0=0 *,=,+0,2 (=.-+ > ,=.-1 1$#**+ mg)lt Kl!"!5il t!tal
*mg?l2 3, *OD/.12 /=( *OD//+2 3, *,=,+0+2 /=( *,=,+0,2 (=(+ ,=-.00 1$*,%% mg)lt Penghitungan ka$a" "ata@"ata kl!"!5il untuk umu" $aun tua' Kl!"!5il a *mg?l2 (-=0 *OD//+2 > +=0/ *OD/.12 (-=0 *,=-(,+2 > +=0/ *,=3102 .=3+-+ > (=0(,03 !$(*&1& mg)lt Kl!"!5il *mg?l2 3+= *OD/.12 > 0=0 *OD//+2 3+= *,=3102 > 0=0 *,=-(+,2 0=//3/ > 3=-1,+ ($!%1%( mg)lt Kl!"!5il t!tal *mg?l2 3, *OD/.12 /=( *OD//+2 3, *,=3102 /=( *,=-(+,2 +=1. (=1.,+ %$'&*#( mg)lt
-. Pembaasan Pe"4!aan ini $ilakukan $engan tu6uan untuk menguku" ka$a" kl!"!5il %a$a
$aun se4a"a kuantitati5 menggunakan s%ekt"!5!t!mete") S%ekt"!5!t!mete" a$alah inst"umen #ang $igunakan untuk menguku" ka$a" ;at te"laut %a$a suatu la"utan meman5aatkan si5at as!"ansi ;at te"la"ut %a$a suatu la"utan) S%ekt!5!t!mete" #ang $igunakan %a$a %e"4!aan kali ini a$alah ti%e S%e4t"!ni4 3( D $an mengunakan $ua s%ekt"!5!t!mete" #ang $igunakan untuk %an6ang gel!mang /.1 $an //+ nm) Hakni %an6ang gel!mang #ang $a%at $ise"a% !leh kl!"!5il ketika %"!ses 5!t!sintesis %a$a tumuhan) Menggunakan $u a s%ekt"!5!t!mete" ka"ena untuk mem%e"mu$ah %e"4!aan $an 6uga %e"a:atan alat aga ti$ak "usak kali"asin#a) Ka"ena 6ika $alam suatu %e"4!aan s%ekt"!5!t!mete" se"ing $iganti %an6ang gel!mangn#a $alam 6angka :aktu #ang %en$ek= $ikha:ati"kan $a%at mem%enga"uhi kali"asi alat) Tanaman #ang $igunakan %a$a %e4!aan kali ini a$alah tanaman Hymenocallis littoralis atau akung@akungan $a"i 5amili Ama"#lli$a4eae) Tanaman ini memiliki $aun #ang teal= $aun mu$an#a ti$ak kaku= se$angkan $aun tuan#a teal $an kaku) Tanaman ini e"unga satu tahun sekali $engan unga :ana %utih= me"ah= hingga !"ange) Pe"4!aan I $ilakukan untuk menguku" ka$a" kl!"!5il %a$a $aun mu$a) Dan menghasilkan %ema4aan as!"ansi %a$a %an6ang 4aha#a /.1 nm a$alah ,=,/. $an %a$a ulangann#a seesa" ,=,/3) Kemu$ian %a$a %ema4aan $engan %an6ang 4aha#a //+ nm a$alah ,=,+( $an ulangann#a ,=,+3) Pe"e$aan nilai as!"ansi %a$a %e"4!aan I ese"ta ulangann#a menun6ukkan ah:a la"utan #ang te"$a%at %a$a $ua 4u
menghitung ka$a" kl!"!5il $i4a"i "e"ata $ata #ang $i%e"!leh %a$a masing@masing %en6ang gel!mang) Dan $i%e"!leh "e"ata $ata seagai e"ikut= %an6ang gel!mang /.1 nm a$alah ,=310 $an %an6ang gel!mang //+ nm a$alah ,=-(,+) Setelah men$a%atkan $ata te"seut= $i4a"i ka$a" kl!"!5il a= = $an kl!"!5il t!tal menggunakan "umus &inte"mans $an De M!!ts) Dan akhi"n#a $i%e"!leh ka$a" kl!"!5il %a$a $aun mu$a a$alah kl!"!5il a seesa" ,=0-(+ mg?lt= kl!"!5il seesa" (=,../ mg?lt= $an kl!"!5il t!taln#a (=.100 mg?lt) Ka$a" kl!"!5il %a$a $aun tua a$alah kl!"!5il a seesa" 3=+.-(- mg?lt= kl!"!5il seesa" +=30(0+ mg?lt= $an ka$a" kl!"!5il t!taln#a a$alah 0=-.,+ mg?lt) A%aila $ata %a$a $is%la# s%ekt"!5!t!mete" e"ke$i%@ke$i%= itu a"tin#a 4u
. Diskusi Pe"tan#aan ' () Menga%a lank! #ang $igunakan %a$a %e"4!aan ini alk!h!l 1/ 9a:a ' Ka"ena alk!h!l 1/ 6uga $igunakan seagai %ela"ut kl!"!5il
sehingga hasil kali"asin#a nanti isa sangat sesuai $engan sam%el $an menghasilkan hasil #ang
hasil #ang
0,73815
(=.100
mg L
$an kl!"!5il (=,../
mg L
%a$a $aun mu$a $an $aun tua mengan$ung kl!"!5il a
sean#ak 3=+.-(-
0=-.,+
mg L
mg L
kl!"!5il +=30(0+
$an kl!"!5il t!tal seesa"
mg L
$an kl!"!5il t!tal
mg L )
0. Saran () Dalam melakukan %e"4!aan s%ekt"!5!t!mete" la"utan #ang $iuat 6angan
$ia$uk seelum %e4!aan ka"ena hal ini $a%at memuat %e"e$aan 6umlah %a"tikel anta"a la"utan #ang e"a$a %a$a ku
3) Pastikan seelum memasukkan ku
Daftar Rujukan nggraini Dian. 5anlinastuti. S. 6atimah. 5usuf 7ampira. 2-11. Penentuan Kadar Zirkonium dalam paduan U-ZR Menggunakan Spektrofotometer UV-VIS dengan Pengompleks Arsenao III. #atan"Serpong. 8usat 9eknologi #ahan #akar. Marais ;ialita Kesia$
Menggunakan Spektrofotometri UV-VIS. Manado : 8ogram study 6armasi 6M>8 )7S;9 Manado. Sabrina nnina. Surani onorahardo. 7eena ?akia. 2-12. 8erbandingan Metode Spektrofotometri )&"&>S dan K=K9 %Kromatogra =air Kinera 9inggi' pada nalisis Kadar sam #en+oat dan Kafein dalam 9eh Kemasan. 2-11. Malang : )ni(ersitas 7egeri Malang