Pada Praktikum Kali Ini Dilakukan Penentuan Kadar Fosfor Dalam Urin Dengan Menggunakan Spektrofotometer

Pada praktikum kali ini dilakukan penentuan kadar fosfor dalam urin dengan menggunakan spektrofotometer. Tujuan dari praktikum ini yaitu untuk menentukan konsentrasi fosfor anorganik dalam sampel urin menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Fosfor merupakan komponen penting penyusun untuk transfer energi (ATP & nukleoprotein lain), untuk sistem informasi genetik, untuk memran sel (fosfolipid), dan fosfoprotein. Terlei! da!ulu dilakukan pemuatan reagen amonium molidat dengan melarutkan amonium molidat dalam a"uades lalu ditama!kan asam sulfat. Preparasi sampel dilakukan pengen#eran urin dan air dengan perandingan $% $ dan ditama!kan T'A  lalu disentrifugasi agar terpisa! antara *at yang akan diukur dengan *at pengotornya se!ingga diperole! supernatan. Pengukuran konsentrasi fosfor dilakukan dengan analisis kuantitatif dengan spektrofotometer pada panjang gelomang +isile yaitu  nm. imana sampel, langko dan larutan standar dimasukkan ke /ell lalu ditama!kan amonium molidat dan asam sulfanili# masinng-masing ke dalam /ell, kemudian diinkuasi selama 0 menit dan diukur asoransinya. Penama!an T'A  ertujuan untuk mengendapkan eragai protein dan *at pengotor di dalam larutan. Penama!an asam sulfat ertujuan untuk mengua! semua metafosfat dan pirofosfat menjadi ortofosfat yang ada dalam sampel se!ingga akan ereaksi dengan amonium molidat dan memperta!ankan terjadinya reaksi. Penama!an amonium molidat ertujuan untuk mengikat fosfor karena fosfor ersifat muda! teroksidasi, terjadi pementukan amonium fosfomolidat er/arna kuning. Penama!an asam sulfinili# ertujuan mereduksi sampel mementu k kompleks senya/a asam fosfomolidenum er/arna iru, dimana spektrofotometer dapat mendeteksi kadar fosfor erdasarkan serapan intensitas /arna pada panjang gelomang +isile karena fosfor mempunyai konsentrasi yang sangat ke#il se!ingga !anya terdeteksi pada panjang gelomang terseut. 1arna iru terseut dengan jumla! fosfor eranding langsung dengan intensitas larutan uji.

imana energi #a!aya yang terserap erfungsi untuk transisi elektron yang dapat menyeakan eksitasi molekul pada sampel dari tingkat dasar ke tingkat yang lei! tinggi. Pada panjang gelomang /arna larutan dikorelasikan dengan panjang ikatan pada senya/a p!ospor yang yang mengandung gugus-gugus pengasorsi. Pada praktikum ini diuat kur+a standar. 2ur+a standar merupakan standar dari sampel yang dapat digunakan seagai a#uan untuk sampel terseut pada saat pengujian. Asoransi adala! suatu polarisasi #a!aya yang terserap ole! a!an ( komponen kimia ) tertentu pada panjang gelomang tertentu se!ingga akan memerikan /arna tertentu ter!adap sampel. 3inar ersifat monokromatis dan mempunyai panjang gelomang tertentu. 4ika #a!aya yang ersifat monokromatis terseut dile/atkan pada media transparan maka intensitas #a!aya akan erkurang seanding dengan ketealan konsentrasi larutan. Untuk terjadi proses asoransi utu! senya/a standar. 3ampel memiliki konsentrasi tertentu untuk dapat terjadi proses asoransi. 3ampel tidak ole! terlalu pekat se!ingga !arus dien#erkan terlei! da!ulu seelum melakuk an asoransi. Pengen#eran kur+a aku $ mg5dl dien#erkan menjadi eragai konsentrasi $, mg5dl, $ mg5dl, , mg5dl, dan ,6 mg5dl. Pemuatan kur+a standar ini ertujuan untuk mengeta!ui !uungan antara konsentrasi larutan dengan nilai asoransinya, se!ingga konsentrasi sampel dapat diketa!ui. Tujuan dari pemuatan larutan standar dengan +olume yang ereda-eda adala! untuk memuat kur+a kalirasi yang nantinya akan digunakan untuk meng!itung kadar fosfor dalam sampel urin. Pada pemuatan kur+a standar dengan konsentrasi .$ mg5dl !asil asoransi yang di dapat menunjukaan angka yang terlalu tinggi se!ingga dapat merusak kur+a yang diuat, se!ingga tidak digunakan. ari pemuatan kur+a standar didapatkan persamaan y7 .$089:.6; dengan koefisien korelasi .$. 3elanjutnya kadar sampel di!itung menggunakan persamaan terseut.

dan kadar terenda! yaitu -,6=$ mg5d>. ?asil pengukuran kadar yang ereda jau! terseut kemungkinan diduga diseakan ole! faktor kurangnya konsumsi fosfat ole! pemilik sampel, fosfat yang menguap ketika perlakuan urin, preparasi sampel yang kurang tepat, dan juga adanya kontaminasi yang mengganggu pada saat pengukuran. ari 0 sampel uji yang diukur kadar fosfat anorganiknya, diketa!ui a!/a ; sampel memiliki kadar fosfat dalam urin yang normal dan 6; sampel memiliki kadar fosfat dalam urin yang tidak normal.