Laporan Praktikum Mikroteknik PEMBUATAN PREPARAT IRISAN DENGAN METODE NON EMBEDDING Citrus sp.
Oleh : Chenes Aprilia 44014111147
JURUSAN BIOLOGI FAKULT FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU ILM U PENGETAHUAN PEN GETAHUAN ALAM UNIVERSITAS UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG 2014
PREPARAT IRISAN DENGAN METODE NON EMBEDDING Citrus sp.
A.
TUJUAN
1. Membuat preparat irisan penampang melintang jaringan tumbuhan dari organ akar batang dan daun Citrus sp. dengan metode nonembeding dengan !at "arna #a$ranin. %. Menganalisis hasil pembuatan preparat irisan melintang jaringan tumbuhan Citrus sp. &. Mengetahui struktur pada organ akar batang dan daunCitrus sp. 4. Membedakan ma'am jaringan tumbuhan pada organ akar batang dan daun Citrus sp.
B.
LANDASAN TEORI
(ubuh tumbuhan se'ara keseluruhan terbagi menjadi & bagian )aitu akar batang dan daun )ang masing*masing mempun)ai struktur anatomi )ang sangat berbeda. +aringan tumbuhan terdiri dari satuan )ang dapat dikenali se'ara mor$ologis )akni sel )ang diselubungi oleh dinding sel dan melekat pada sel lain dengan adan)a !at pelekat antar sel. #usunan jaringan dalam tumbuhan menunjukkan organisasi struktur dan $ungsional. Menurut #a'hs ,1-7/ jaringan dibagi menjadi & sistem berdasarkan kesinambungan topogra$is )akni
sistem dermal sistem
pembuluh dan sistem jaringan dasar. #istem dermal men'akup epidermis dan periderm )akni jaringan pelindung penganti epidermis. pidermis terdiri dari sel biasa dan sel )ang terspesialisasi seperti sel rambut sel penutup pada stomata dan lain*lain. #istem pembuluh terdiri dari dua jaringan )aitu $loem ,konduksi hasil $otosintesis/ dan ilem ,konduksi nutrisi dan air/. #istem jaringan dasar meliputi jaringan )ang membentuk dasar bagi tumbuhan namun sekaligus juga menunjukkan spesialisasi.
+aringan dasar utama adalah parenkim kolenkim dan sklerenkim. 2ntuk mengkaji dengan mendalam dibutuhkan preparat jaringan tumbuhan dengan baik dan lengkap suatu irisan dengan tebal tertentu sehingga dapat diamati diba"ah mikroskop. Metode irisan dibagi menjadi dua ma'am )aitu metode irisan dengan tangan dan metode irisan dengan mikrotom. Metode irisan tangan dapat digunakan untuk membuat preparat jaringan tumbuhan preparat duodenum preparat paru*paru dan lain*lain. Caran)a adalah sebagai berikut: sepotong jaringan dipegang diantara ibu jari dan jari penunjuk. 3engan sebuah pisau atau silet )ang tajam jaringan ini dipotong melintang beberapa kali dengan 'epat paralel dan sedekat mungkin dengan permukaan atas jaringan )ang akan dipotong agar supa)a mendapat irisan )ang setipis mungkin. Preparat irisan dapat berupa preparat irisan melintang ,memotong/ atau preparat irisan membujur ,sejajar/. 3alam pembuatan preparat dibutuhkan larutan $iksati$ )ang digunakan untuk $iksasi jaringan ,sel/ )ang akan dibuat preparat 'ontoh larutan $iksati$ adalah larutan AA ,$ormalin asetat alkohol/. Agar preparat tampak jelas saat diamati diba"ah mikroskop maka diberi "arna misaln)a menggunakan pe"arna sa$ranin 15 dalam alkohol 705. 2ntuk menghilangkan air dilakukan dehidarsi dengan larutan dehidran berupa alkohol misal alkohol 705. 3ibutuhkan juga langkah dealkioholisasi dan 'learing untuk menghilangkan alkohol dan penjernihan preparat misaln)a menggunakan larutan alkohol ilol bertingkat dan larutan ilol murni.
C.
CARA KERJA
Alat dan bahan harus disiapkan terlebih dahulu. Pertama daun akar dan batang dipotong melintang setipis mungkin menggunakan silet )ang tajam. 6abus digunakan untuk membantu membuat irisan melintang daun. 3aun diselipkan di bagian tengah belahan gabus lalu disa)at menggunakan silet )ang tajam. 2ntuk akar dan batang disa)at
biasa tanpa menggunakan gabus kemudian potongan*potongan tersebut dimasukkan ke dalam botol plakon )ang berbeda )ang berisi AA. Potongan*potongan )ang telah dimasukkan botol plakon di$iksasi dengan menggunakan $iksati$ AA selama %4 jam dan olume $iksati$ harus disesuaikan dengan olume irisan organ. #elanjutn)a adalah tahap pen'u'ian irisan epidermis di'u'i dengan menggunakan alkohol sisa 705 seban)ak tiga kali dengan 'ara larutan $iksati$ dalam botol $lakon diambil dengan menggunakan spet dan diganti dengan alkohol sisa 705. (ahap selanjutn)a adalah pe"arnaan pe"arnaan dilakukan dengan menggunakan !at "arna sa$ranin 15 dalam alkohol 705 selama % %4 jam. Pe"arnaan dilakukan dengan 'ara )ang sama seperti pada proses pen'u'ian. 8risan Citrus sp didehidrasi dengan menggunakan al'ohol bertingkat dari 705 -05 905 dan absolute masing*masing selama % menit. (ahapan selanjutn)a adalah dealkoholisasi'learing dengan menggunakan larutan al'ohol ilol & : 1 1 : 1 dan 1 : & kemudian
dilanjutkan dengan ilol murni 8 dan 88 masing*masing
selama % menit. 6elas benda )ang bersih dan bebas lemak disiapkan. ;emudian irisan melintang akar batang dan daun dipindahkan ke 'a"an petri untuk memudahkan proses pen)eleksian irisan )ang baik untuk ditarus di gelas benda. #atu gelas benda diletakkan tiga irisan kemudian kanada balsam diteteskan di atasn)a dan ditutup dengan gelas penutup. Preparat diamati di ba"ah mikroskop dengan perbesaran kuat kemudian di$oto dan dianalisis hasiln)a. . D.
HASIL PENGAMATAN Gambar
K!ra"#a"
=ilem mpulu
1. 2.
1 2
r pider
$.
3
mis
4
loem ;orteks ndode
4. %. &.
5 6
rmis PL. Akar Citrus sp. Perbesaran 10 10 1.
pidermis
1
%.
;orteks
2
&.
mpulur
3
4.
loem
4
.
=ilem
1.
5
PL.
1
pengangkut
2 3 4
%.
pidermis atas
&.
Parenkim
4.
pidermis ba"ah
PL. 3aun Citrus sp. Perbesaran 10 10
E.
PEMBAHASAN
Pada hasil pengamatan terhadap $oto di atas dapat diketahui bah"a preparat irisan melintang jaringan tumbuhan Citrus sp )ang dibuat 'ukup bagus sehingga bagian*bagian pada organ akar batang dan daun dapat teridenti$ikasi dengan 'ukup baik. Pe"arnaan pada preparat tersebut sudah 'ukup baik "arna 'ukup merata "alaupun masih terlihat ada bagian )ang tebal dan kelihatan hitam atau gosong tetapi masih bisa dibedakan antara bagian satu dengan lainn)a. >al ini dikarenakan adan)a irisan tipis dan tebal )ang tidak merata. Pe"arna )ang digunakan pada pembuatan preparat irisan jaringan tumbuhan adalah pe"arna sa$ranin. Pe"arnaan ini di lakukan selama % %4 jam sehingga di peroleh hasil pe"arnaan )ang 'ukup baik. Pada saat pengamatan hasil )ang diperoleh kurang baik terdapat gelembung udara pada preparat setelah ditutup dengan ka'a penutup hal ini di sebabkan karena kanada balsan )ang digunakan untuk mounting bergelembung.
F.
SIMPULAN DAN SARAN 1.
S'm()*a"
a.
Sara"
3alam proses pengirisan preparat harus menggunakan silet )ang tajam supa)a irisan tipis.
b.
2ntuk menghasilkan preparat )ang baik harus ban)ak berlatih untuk mengiris preparat.
'.
3alam pembuatan preparat jaringan tumbuhan harus sesuai dengan prosedur dan hati*hati agar dihasilkan preparat )ang baik.
d.
#ebaikn)a 'ek kualitas kanada balsam )ang akan digunakan apakan bergelembung atau tidak. >al tersebut dapat mempengaruhi proses mounting.
G.
DAFTAR PUSTAKA
?ud)atmi li. %01%. Diktat Mikroteknik. #emarang: +urusan #. 19-&. Metode Pewarnaan. +akarta: Penerbit
