Introducción En el universo existen partículas diminutas que no son visibles al ojo humano, como por p or ejemplo las células. Para la correcta visualización de las células se requiere de un microscopio. En la actualidad existen distintos tipos de microscopía como por ejemplo: Microscopía de campo brillante, microscopía en contraste de ase, microscopía conocal, microscopía de campo oscuro, etc. En este e ste pr!ctico se simuló la microscopía de campo oscuro. "#ué es la microscopia de campo ca mpo oscuro$, "% para qué se utiliza$ “Es una técnica de contraste donde solo la luz difractada desde la muestra se usa para formar la imagen. La muestra aparece brillante brillante contra un fondo oscuro” &'(. Esta técnica se utiliza para el an!lisis de elementos bioló)icos transparentes o sin pi)mentación al)una, * nos permitir! observar detalles como bordes * contornos de las muestras analizadas. Es importante conocer también el n+mero * tamao de células que contiene una muestra. Para el conteo de células se necesita una c!mara de -eubauer, * para determinar las dimensiones de est!s se necesita tener una re)lilla en el ocular del microscopio. Esta microscopio. Esta reglilla posee una escala que contiene 100 rayas sin unidades. Por lo tanto antes de medir una célula se necesita calibrar la reglilla &(.
Hipótesis: /enerando un campo oscuro los bordes de la muestra resaltar!n. % a través de la c!mara -eubauer se conocer! el n+mero de células, * con la re)lilla se determinar! el tamao celular. c elular. Objetivos:
'. 0naliz 0nalizar ar una mues muestra tra )ener )enerand ando o un campo campo oscuro oscuro . 1ealizar 1ealizar el recuento recuento de )lóbulos )lóbulos rojos, rojos, a través través de la c!mara c!mara -eubauer -eubauer 2. 3eterminar 3eterminar el el tamao tamao celular en un rotis rotis san)uíneo san)uíneo permante permante,, con el uso de la re)lilla.
&'( http:44tecnicaenlaboratorios.com4-i5on46no7campo7oscuro.htm (2) Guía de laboratorio de biología biología celular N° 3: Microscopia II. II.
Materiales y métodos Actividad A: Campo oscuro e prepar! u"a muestra temporal de cabello #uma"o$ % se observ! e" el microscopio de campo claro "ormal a &'$ '$ % &'. *uego se coloc! u" circulo "egro de cart!" sobre la +ue"te de lu, e" la parte i"+erior del microscopio$ observado co" el ob-etivo &'. para /"ali,ar se observ! "uevame"te la muestra co" u" aume"to de '$ do"de se le i"terpo"dr0 el cart!" "egro e"tre la +ue"te de lu, % la plati"a del microscopio$ para -ugar co" la lu, del microscopio.
Resultados. Actividad A: Campo oscuro
Figura 1: 1elo #uma"o visuali,ado e" campo claro ipo de preparaci!": emporal ipo de ti"ci!": Ni"gu"a Aume"to total: &' bservacio"es: e puede" ver clarame"te las estructuras del pelo como la cutícula$ corte,a % m4dula
Figura 2: 1elo #uma"o visuali,ado e" campo oscuro ipo de preparaci!": emporal ipo de ti"ci!": Ni"gu"a Aume"to total: &' bservacio"es: Co" u" aume"to de &'$ se visuali,! mu% oscura la muestra$ pero se logra apreciar leveme"te los bordes. 5Cu0l es la di+ere"cia e" la observaci!" co" el microscopio de campo claro % el de campo oscuro6 5Cu0l es el e+ecto obte"ido6 *a di+ere"cia radica e" 7ue co" la observaci!" de campo claro e" la muestra se ve clarame"te sus estructuras$ e" cambio co" la del campo oscuro se ve la muestra mu% oscura. el e+ecto obte"ido por el campo oscuro es 7ue solo se logra apreciar leveme"te los bordes de la muestra.
Figura 3: 1elo #uma"o visuali,ado co" co"traste de +ase ipo de preparaci!": emporal ipo de ti"ci!": Ni"gu"a Aume"to total: ' bservacio"es: Co" u" aume"to de ' la muestra se apreci! "ormal como e" el campo claro e" u" lado % la otra mitad se ve oscura co" bordes bla"cos
Discución 8" la actividad A$ se a"ali,o u"a muestr a temporal de cabello #uma"o media"te la observaci!" de u" microscopio de campo claro % simulaci!" de campo oscuro % co"traste de +ase. Cua"do se simul! el campo oscuro$ la muestra se apreci! mu% oscura % poco visible debido a 7ue solo se estaba simula"do u" microscopio de campo oscuro. *a correcta visuali,aci!" de u"a muestra e" campo oscuro debería #aberse visto la mu estra ilumi"ada co" sus bordes e" u" +o"do oscuro.
