MAKALAH ANALISIS PANGAN ANALISIS KUANTITATIF KUANTITATIF VITAMIN Kelompok 5: Desnastiyas Lusiana 240210130024 Adista Andrian H 240210130025 Nurul Fauziah 240210130026 240210130026 Firna Telia Res 240210130027 Mina Aalina 24021013002! "rene #teny 24021013002$ %urnia A&ustina 240210130030
Departemen Teknologi Ind!tri Pangan Faklta! Teknologi Ind!tri Pertanian Uni"er!ita! Pad#ad#aran $atinangor %&'5
KATA KATA P(NGANTA) P(NG ANTA)
'u(i syu)ur )ita u*a+)an atas )ehadirat Allah #,T#,T- )arena den&an rahat dan )arunia.Nya )ita asih di/eri)an )ese+atan untu) enyelesai)an a)alah ini Tida) lu+a (u&a )ita san(un& sa(i)an selaat /eririn&)an sala )e+ada na/i )ita ya)ni Na/i Muhaad #A, yan& yan& e/aa )ita dari ala )e/dhan hin&&a ala yan& +enuh +en&etahuan yan& se+erti )ita sara)an +ada saat ini Ta) Ta) lu+a )ai u*a+)an dsen +e/i/in& +e /i/in& dan tean.tean yan& telah e/eri du)un&an dala enyelesai)an a)alah ini 'enulis enyadari /aha dala +enulisan ini asih /anya) )e)uran&an leh se/a/ itu %ai san&at en&hara+)an )riti)an dan saran yan& e/an&un tiasi #e&a den&an selesainya a)alah ini da+at /eranaat /a&i +e/a*a dan tean.tean Ain
Ma)assar- 24 Mei 2015
'enulis
Analisis Kuantitatif Kuantitatif Vitamin Vitamin
KATA KATA P(NGANTA) P(NG ANTA)
'u(i syu)ur )ita u*a+)an atas )ehadirat Allah #,T#,T- )arena den&an rahat dan )arunia.Nya )ita asih di/eri)an )ese+atan untu) enyelesai)an a)alah ini Tida) lu+a (u&a )ita san(un& sa(i)an selaat /eririn&)an sala )e+ada na/i )ita ya)ni Na/i Muhaad #A, yan& yan& e/aa )ita dari ala )e/dhan hin&&a ala yan& +enuh +en&etahuan yan& se+erti )ita sara)an +ada saat ini Ta) Ta) lu+a )ai u*a+)an dsen +e/i/in& +e /i/in& dan tean.tean yan& telah e/eri du)un&an dala enyelesai)an a)alah ini 'enulis enyadari /aha dala +enulisan ini asih /anya) )e)uran&an leh se/a/ itu %ai san&at en&hara+)an )riti)an dan saran yan& e/an&un tiasi #e&a den&an selesainya a)alah ini da+at /eranaat /a&i +e/a*a dan tean.tean Ain
Ma)assar- 24 Mei 2015
'enulis
Analisis Kuantitatif Kuantitatif Vitamin Vitamin
DAFTA) ISI
HALAMAN DL DL 1 1 %AT %ATA '8N9ANTAR '8N9ANTAR 2 2 DAFTAR DAFTAR "#" "#" 3 :A: " '8NDAHLAN A LAT LATAR :8LA%AN9 :8LA%AN9 4 : RM#AN RM#AN MA#ALAH MA#ALAH 4 4 ; TAN TAN 5 :A: "" '8M:AHA#AN A <"TAM"N <"TAM"N A A 6 : <"TAM"N <"TAM"N D D 11 ; <"TAM"N <"TAM"N 8 8 12 12 D <"TA <"TAM"N :115 8 <"T <"TAM"N M"N :21! F <"T <"TAM"N M"N :621 9 <"TA <"TAM"N :1223 H <"TAM"N <"TAM"N ; ; 24 :A: """ '8NT' A %8#"M'LAN %8#"M'LAN 34 DAFTAR DAFTAR '#TA%A '#TA%A 35
*A* I P(NDAHULUAN A+ LAT LATA) *(LAK *(LAKANG ANG Tu/uh Tu/uh e/utuh)an (ulah yan& /er/eda untu) setia+ itain
#etia+ ran& +unya )e/utuhan itain yan& /er/eda Ana).ana)- ran& tua-
Analisis Kuantitatif Kuantitatif Vitamin Vitamin
ran& yan& enderita +enya)it atau anita hail e/utuh)an (ulah yan& le/ih tin&&i a)an /e/era+a itain dala a)anan ere)a sehari.hari
untu) rea)si enziati)
yan& larut dala lea) =itain A- D- 8- dan %> ? 2 :a&aiana ruus stru)tur- etde analisis- dan intera)si /at itain yan& larut dala air =itain : dan ;> ?
,+ TU$UAN 1
A&ar ahasisa en&etahui dan eahai ruus stru)tur-
etde analisis- dan intera)si /at itain A- D- 8- dan % se*ara )uantitati 2 A&ar ahasisa en&etahui dan eahai ruus stru)turetde analisis- dan intera)si /at itain : dan ; se*ara )uantitati
Analisis Kuantitatif Vitamin
*A* II P(M*AHASAN A+ VITAMIN A
9a/ar 21 @ #tru)tur
Ta/el 21
Analisis Kuantitatif Vitamin
9u&us R
λ a)s
1
E1 cm
:M
H ;H3; ;15H31;
324-5 n 326 n 326 n
1!41 1534 $61
Tia+ #" setara den&an 0-344 µ g trans itain A asetat atau 0-3 µ g trans itain A M(T-D( ANALISIS VITAMIN A 1 Metde s+e)trtetri #+e)tru a/sr/si ultrailet itain A dan itain A asetat e+unyai a/sr/ansi a)sial +ada +an(an& &el/anh antara 325 sa+ai 32! n dala /er/a&ai +elarut Larutan itain A dala is+r+anl a/sr/ansinya diu)ur a)s dan +ada dua titi)- ya)ni satu se/elah )anan λ a)s dan satunya la&i +ada se/elah )iri λ a)s A/sr/si +ada λ a)s di)re)si terhada+ senyaa +en&&an&&u den&an en&&una)an rula )re)si )arena senyaa B senyaa ini a)an i)ut enyera+ +ada daerah < :e/era+a +en&&an&&u- terutaa +ada inya) i)an adalah itain A2- )itl- anhidr itain A- dan asa +lien 'ada itain A sinteti) senyaa +en&&an&&unya adalah senyaa.senyaa anatara =interediet> ntu) en&)re)si +e/a*aan +ada a/sr/ansi a)si uMrtn dan #tu//s en&eu)a)an )re)si &eetri) i)a l arutan itain A enyera+ lurus +ada daerah +an(an& &el/an& 325.32! n a)a )re)si &eetri) da+at di&una)an %re)si di&una)an untu) en&)re)si senyaa +en&an&&u yan& e+unyai a/sr/ansi teta+a)an teta+i )esalahan yan& /esar a)an ter(adi a+a/ila rula )re)si ini di&una)an terhada+ +en&an&&u yan& tida) lurus Cara penetapan vitamin A secara spektrofotometri 'eneta+an dila)u)an se*e+at un&)in- terlindun& dari *ahayadan terlindun& dari senyaa )sidatr #e/elu dila)u)an +eneta+an )adar- s)ala s+e)trteter di+eri)sa terle/ih dahulu #e/a&ai +edan da+at di&una)an &aris ra)sa +ada 313-16 n dan 334-5 n
Analisis Kuantitatif Vitamin
2!6-44 32!-4! 524-44
serta &aris hidr&en +ada 37$-7 n dan 4!6-1 n )eteta+an a/s/ansi yan& telah di)re)si le/ih rendha (i)a di/andin&)an den&an a/sr/ansi yan& diaati lan&sun& dan d&una)an dala +erhitun&an %arena itu +en&u)uran a/sr/ansi e/utuh)an +erhatian )husus dan se)uran&. )uran&nya harus dila)u)an dua )ali +eneta+an a A)sertl dala /entu) ester Cat yan& tida) se&era larut dala si)lhe)san diurni)an den&an *ara +enyarin&an atau *ara lain yan& tida) en&&una)an *ara +enya/unan i)a *ara +eurnian Terse/ut tida) dila)u)ana)a +eneta+an dila)u)an enurut *ara yan& tertera dala aa)sertl lain ;ara +eneta+an )adar a)sertl urni adalah se/a&ai /eri)ut @ se(ualh sa+el atau sa+el yan& sudah diurni)an ditia/n& se*ara sa)sa lalu dilarut)an dala si)lhesan se*u)u+nya hin&&a di+erleh larutan yan& en&andun& antara $ #" sa+ai 15 #" tia+ L dan diteta+)an +an(an& &el/an& yan& tertera dala datar /eri)ut dan dihitun& se/a&ai a/sr/ansi relati terhada+ a/sr/ansi +ada 32! n 'an(an& &el/an& 300 n 316 n 32! n 340 n 360 n
A/sr/ansi relati 0-550 0-$07 1-000 0-!11 0-2$$
i)a +an(an& &el/an& a)sial terleta) antara 326 n dan 32$ n- dan a/sr/ansi relati yan& ter/a*a tida) /er/eda le/ih dari 0-02 dari har&a yan& tertera dala datar- a)a +tensi =dala #"> tia+ zat yan& di+eri)sa dihitun& den&an ruus A.%/ 0 '1+&&& i)a +an(an& &el/an& a/sr/ansi a)sial terleta) antara 326 n dan 32$ n- teta+i a/sr/ansi relati yan& ter/a*a /er/eda le/ih dasar 0-02 dari har&a yan& tertera dala datar- a)a dihitun& har&a a/sr/ansi +ada 32! n y& di)re)si den&an ruus A.%/ nm 2kor3 4 .5% 2 %A .%/ nm 6 A.'7 nm 6 A.8& nm3
Analisis Kuantitatif Vitamin
i)a har&a a/sr/ansi yan& telah di)re)si A.%/ nm 2kor3 9 terleta) dala /atas E 3 dari har&a a/sr/ansi yan& /elu di)re)si a)a +erhitun&an dila)u)an den&an en&&una)an
har&a a/sr/ansi yan& /elu di)re)si i)a har&a a/sr/ansi yan& telah di)re)si terleta) antara !5 sa+ai $7 dari har&a yan& /elu di)re)si a)a +erhitun&an dila)u)an en&&una)an har&a a/sr/ansi yan& /elu
di)re)si i)a har&a a/sr/ansi yan& telah di)re)si terleta) le/ih )e*il dari !5 dan le/ih /esar dari 103 dari har&a yan& /elu di)re)si atau (i)a +an(an& &el/an& a/sr/ansi a)sial tida) terleta) antara 326 n sa+ai 32$ n- a)a +eneta+an
)adar dila)u)an enurut *ara yan& tertera +ada a)sertl lain / A)sertl lain ;ara +enentuan A)sertl lain@ se(ulah zat yan& diti/an& se*ara sa)saa- =en&andun& tida) )uran& dari 500 #" a)sertl dan tida) le/ih dari 1 &ra lea)>- di*a+ur den&an 30 L etanl utla) dan 3 L )aliu hidr)sida 50 ;a+uran direlu)s s elaa 30 enit sa/il en&alir)an &as nitr&en /e/as )si&en )edalanya- lalu didin&in)an den&an *e+at dan dita/h 30 L air Larutan di+indah )e dala *rn& +isah dan dila)u)an e)stra)si ti&a )ali- tia+ )ali den&an 50 L eter Larutan di&(n& selaa satu enit dan di/iar)an eisah La+isan air di/uan& La+isan eter di*u*i 4 )ali- tia+ )ali den&an 50 L air 'ada 2 )ali +en*u*ian +ertaa dila)u)an se*ar a hati. hati untu) en*e&ah eulsi #ari eter diua+)an hin&&a tersisa )uran& le/ih 5 L #ari eter ha/is Residu eter dila)u)an dala is+r+anl se*u)u+nya hin&&a di+erleh larutan yan& en&andun& $ #" sa+ai 15 #" a)sertl tia+ L A/sr/ansi larutan diu)ur 300 n- 310 n325 n dan 334 n #elan(utnya dila)u)an +enentuan +an(an& &el/ an& a)sial 'erhitun&an +tensial dila)u)an se/a&ai /eri)ut@ i)a a)sial &el/an& a)sial antar 323 n dan 327 n dan
+er/andin&an a/sr/ansi +ada 300 n terhada+ a/sr/ansi +ada 327 n tida) le/ih dari 0-73- a)a a/sr/ansi yan& telah di)re)si A32! n =)r>G dihitun& den&an ruus
Analisis Kuantitatif Vitamin
A.%5 nm 2kor3 4 7/'5 A.%5 nm 6 %555 A.'& nm 8%7 A..8 nm 'tensi dala #" tia+ zat yan& di+eri)sa dihitun& den&an ruus A.%5 nm 2kor3 ; '/+&&& i)a a/sr/ansi yan& telah di)re)si terlet) dalaa /atas E 3
dari har&a a/sr/ansi yan& /elu di)re)si- +erhitun&an dila)u)an
den&an en&&una)an har&a a/sr/ansi yan& /elu di)re)si i)a +an(an& &el/an& a/sr/ansi a)sial tida) terleta) antara 325 n dan 327 n atau (i)a +er/andin&an a/sr/ansi +ada 300 n terhada+ a/sr/ansi +ada 327 n le/ih dari 0-73 a)a tida) tersa/un)an dari zat yan& di+eri)sa harus diurni)an den&an *ara )rat&rai Pemilihan dan penggunana pelarut i)a larutan a)sertl ter)ena sinar atahari a)a s+e)tru
a/sr/sinya enyi+an& 'ada ulanya a/sr/ansi +ada +an(an& &el/an& a)sial nai) )eudian turun se*ara *e+at 'ada a)tu yan& saa +er/andin&an a/sr/ansi +ada )edua sisi +an(an& &el/an& a)sial nai) den&an *e+at den&an )enai)an yan& le/ih /esar +ada +an(an& &el/an& yan& le/ih rendah %arena sinar enye/a/)an )enai)an a/sr/ansi a)a )re)si &eetri en(adi le/ih +entin& 'eilihan +elarut /iasanya eru+a)an +eilihan +ri/adi teta+i di+erti/an&)an den&an sun&&uh.sun&&uh 'er&antian dari satu +elarut )e +elarut lain harus dihindari )arena a)sertl yan& tertin&&i se/a&ai la+isan ti+is +ada la/u a)an udah terurai leh sinar atahari #i)lhe)san le/ih disu)ai )arena +er/edaan s+e)tru diantara neo dan all trans a)sertl +ada daerah 310 B 355 n )uran& te&as di/andin&)an den&an +en&&unaan +elarut is+r+anl atau +etrleu eter #iat +etrleu eter yan& udah en&ua+ ser ta )ehilan&an +elarut )arena +en&ua+an selaa +en&u)uran da+ar dihindari den&an en&&una)an )u/et tertutu+
2 Metde %lrietri a Metde ;arr.'ri*e
Analisis Kuantitatif Vitamin
Metde ini /erdasar)an atas rea)si a)sertl den&an antin tri)lrida anhidrat dala )lrr yan& en&ahsil)an arna /iru Rea)si ini ter(adi antara antin tri)lrid den&an rantai tida) (enuh dari a)sertl %arten- asa +liena dan /e/era+a sneyaa dala inya) i)an en&hasil)an arna /iru (u&a ,arna yan& ter(adi intensitasnya *e+at e*a+ai a)siu teta+i (u&a *e+at +u*at 'e/a*aan /iasanya dila)u)an dala a)tu 10 sa+ai 15 deti) setelah sa+el dita/ah +erea)si / 'en&u/ahan a)sertl en(adi anhidra)sertl A)sertl udah diu/ah en(adi anhidra)sertl den&an /antuan se(ulah )e*il asa r&ani) )uat 'ada etde /uds)i dan /ndi- a)sertl diu/ah en(adi anhidra)sertl dala +elarut /enzen den&an )atalisatr asa tluen. p.sulnat +ada te+eratur )aar %enai)an a/sr/ansi +ada 3$$ n eru+a)an hasil dehidrasi yan& /r/andin& lan&sun& den&an (ulah a)sertl yan& ter)andun& Rea)si ini da+at dihenti)an den&an +ena/ahan al)ali 'en&u)uran a/sr/ansi +ada 35! n- 377 n- dan 3$$ n dala /enzen eru+a)an *ara yan& /ai) untu) en&etahui )eurnian a)sertl ya)ni den&an elihat /aha A3$$ n A377 n se/esar 0-!6! dan A35! n A377 n se/esar 0-6$2 Larutan )atalisatr di/uat den&an elarut)an 15 & asa tluen. p.sulnat nhidrat dala 100 L :enzen yan& telah didestilasi lalu direlu)s sa+ai larut Di&una)an )alsiu )lrida +ada u(un& +endin&in /ali) %uran& le/ih 10 L /enzen didestilasi untu) en&hilan&)an air dan larutan di(a&a terhada+ )ele/a+an udara dan didia)an sa+ai din&in lalu dita/ah /enzen anhidrat sa+ai 100 L Larutan dia)tid)an se/elu di&una)an den&an ela)u)an destilasi ulan& ;ara analisis@ se/anya) 1-0 L larutan sa+el dala /enzen di*a+ur den&an 4 L larutan )atalisatr #etelah 1 enit- larutan dinetral)an den&an 5 L natriu hidr)sida 0-5 N- dan di&(& selaa 1 enit %edua larutan di+isah)an den&an +eusin&an dari
Analisis Kuantitatif Vitamin
larutan (enuh /enzen diu)ur +ada 3$$ n terhada+ /lan) yan& /erdiri atas 1 L sa+el dala /enzen yan& dien*er)an den&an 4 L /enzen Tia+ L larutan sa+el setara den&an A0-0122 satuan 0-0122 adalah )enai)an daya resa+ sesuai den&an 1 satuan a)sertl * Metde )rat&rai A)tiitas iser itain A *u)u+ /er/eda sehin&&a untu) +eisahan di)e/an&)an den&an )l i*r/re #a+el =1-0. 10-0 &> dih&en)an #e/anya) 30 L air dita/ah)na )e dala sa+el =(i)a sa+elnya +adat> #a+nii)asi dila)u)an den&an *a+ur 40 L sa+el yan& telah dih&en)an den&an 12 L larutan %H 60I !0 L etanl utla)I 0-5 L ter ./utilhidr)si tluen.etanli) 1I dan 0-5 & asa as)r/at untu) en&hindari ter(adinya )sidasi #a+el diadu) +ada suhu )aar selaa 16 (a #etelah selesai sa+nii)asi- slut dien*er)an sa+ai 250 L den&an air dan etanl untu) e+erleh suatu rasi etanl@ air =1@1 > #e/anya) 20 L aliJut dita/ah)an )e dala *atr id&e %isel&uhr dan setelah 20 enit die)stra)si den&an 50L +etrleu eter rin&an 8luat selan(utnya diua+)an dan dilarut)an )e/ali den&an 2.50 L is)tana= ter&antun& +ada )nsentrasi itain A dala sa+el ula.ula> "ser &eetri retinl =itain A> di+isah)an den&an )l +en&aan = 7 K 2 id> dan )l analisis =10 * K 0-2 * id> yan& )eduanya /erisi sili)a &el den&an u)uran +arti)el 3 i)rn #e/a&ai eluen adalah he)san yan& en&andun& 1.)tanl dala )nsentrasi rendah %arena +an(an& &el/an& a/sr/si a)siu iser.iser ini /er/eda a)a di&una)an dete)tr Photodiode array ='AD> Metde ini telah su)ses eisah)an 7 iser itain A ya)ni@ 11.cis.I 11-13. di.cis.I 13.cis.I $-13.di.cis.I $.cis.I 7.cisI dan seua trans.retinl den&an a)tu retensi relati terhada+ trans.retinl asin&.asin& se/esar 0-510I 0-56!I 0-672I 0-740I 0-!77I 0-$24I dan 1-000 *+ VITAMIN D
Analisis Kuantitatif Vitamin
Dari /e/era+a itain D- 2 diantaranya dian&&a+ yan& +alin& +entin& yaitu D2 =er& )alsierl> dan itain D3 =)le )alsierl> #tru)tur )edua itain ini san&at iri+ dala /ahan na/ati- seentara itain D 3 /anya) terda+at dala inya) i)an hati
9a/ar 22 stru)tur itain D 2 dan D3
Dala AA;- analisis )uantitati itain D dala inya) yan& en&andun& 100000 #" )le)alsierl atau itain D3& - dala resin yan& en&andun& 20000000 #" )le)alsierl&ra- dan dala ser/u) atau dis+ersi *air yan& en&andun& 25000 #" )le)alsierl& dila)u)an den&an en&&una)an etde )rat&rai *air )iner(a tin&&i den&an )l )rat&rai Li*hrsr/ #i 60 =u)uran +arti)el 5> en&&una)an dete)tr < 254 n = sensitiitas dete)tr 0-12! AF#> Fase &era)@ n. he)sanaI n.ail al)hl =$77@3 > %e*e+atan alir ase &era) 2 Lenit =1 atser>- seentara lue in(e)si l
,+ VITAMIN (
9a/ar 23 #tru)tur )iia t)erl
Ala.t)erl Ala.t)erl asetat
Analisis Kuantitatif Vitamin
9u&us R H ;H3;
#usunan ;2$H502 ;31H523
:erat le)ul 430-72 472-76
Ala.t)erl ala eutar eutar /idan& +larisasi )e )anansedan& ala.t)erl /uatan adalah resei) =DL> T)erl lainnya =/eta-&aa- dan /elta> )uran& +entin& )arena +tensi hayatinya rendah :er/a&ai /entu) ala.t)erl telah di)etahui +tensinya ya)ni @ 1 & L..t)erl asetat
1 #"
1 & =D.L> ..t)erl
1-1 #"
1 & D..t)erl asetat
1-36 #"
1 & D..t)erl
1-4$ #"
T)erl /e/as *e+at di)sidasi leh udara dan sinar- )arenanya dala +erda&an&an di&una)na t)erl ester yan& sta/il M(T-D( ANALISIS VITAMIN ( 2T-K-F()-L3
1 Metde #erietri Metde serietri /erdasar)an atas siat eredu)si t)erl setelah t)erl asetat dihidrlisis den&an asa T)erl tida) sta/il dala larutan /asa ;ara +eneta+an )adar t)erl asetat urni@ le/ih )uran& 250 & t)erl astetat yan& diti/an& sa)saa- diasu))an )e dala la/u *)lat )unin& dasar /ulat 100 L dan dilarut)an dala 25 L etanl utla) Larutan dita/ah)an 20 L larutan asa sulat 15 dala etanl $5- lalu direlu)s selaa 3 (a dan didin&in)an Larutan di+indah)an )e dala la/u ta)ar *)lat )unin& 200 L dan dien*er)an den&an etanl utla) se*u)u+nya hin&&a 200 L #e/anya) 50-0 L larutan yan& diu)ur se*ara sa)saa dita/ah 50 L larutan asa sulat 1-5 dala etanl $5 dan 20 L air #a/il di*a+ur /ai). /ai)-larutan dititrasi den&an seriu ="<> sulat 0-01 N en&&una)an indi)atr 2 tetes dienilain Titrasi dila)u)an terlindun& dari *ahaya lan&sun&- se/ai)nya dite+at &ela+- den&an tetesan diatur tia+ 10 deti) Dila)u)an (u&a titrasi /lan) Tia+ L seriu ="<> sulat 0-01 N setara den&an 2-363! & t)erl asetat 2 Metde #+e)trtetri Ala.t)erl dala etanl $5 enun(u))an a/sr/ansi a)siu +ada 2$2 n dan inuu +ada 257 n i)a di&una)an
Analisis Kuantitatif Vitamin
+elarut si)lhe)san a)a ala.t)erl enun(u))an a/sr/ansi a)siu +ada 2$! n dan iniu +ada 257 n Ala.t)erl asetat dala etanl $5 enun(u))an a/sr/ansi a)siu +ertaa +ada 2!4 n dan )edua +ada 27$ n serta a/sr/ansi iniu di 2!1 n Dala si)lhe)san- ala. t)erl enun(u))an a/sr/ansi iniu )eti&a +ada 2!! n den&an iniu +ada 2!6 n ntu) +eneta+an )adar ala.t)erl dala etanl di&una)an +an(an& &el/an& 2$2 n atau 2$! n dala si)lhe)san #eentara itu- untu) ala.t)erl asetat +an(an& &el/an& 2!4 n da+at di&una)an untu) )edua +elarut terse/ut 3 Metde %lrietri Daun AA; =1$$5>- +eneta+an )adar itain 8 dala a)anan /ai) dala /entu) )erin& au+un /asah dila)u)an se*ara )lrietri 'rinsi+nya@ ala.t)erl die)stra)si dari sa+el den&an +alrut r&ani) Residu lea) disa/un)an- .t)erl diislasi den&an )rat&rai la+is ti+is- dan diteta+)an )adarnya se*ara )lrietri INT()AKSI -*AT VITAMIN
•
•
A)i/atnya @ +enyera+an itain /er)uran& A)i/atnya @ +enyera+an itain A dan D /er)uran& %lestirain di&una)an +ada +asien yan& )adar )lesterlnya tin&&i dala darah A)i/atnya @ ee) itain D /er)ura& Fenitin adalah anti)nulsan yan& di&una)an untu) en&endali)an )e(an& +ada &an&&uan se+erti
•
ayan
•
resi) +erdarahan enin&)at
Analisis Kuantitatif Vitamin
e/e)u +ada saat +asien di/ati den&an anti)a&ulan 'asien terse/ut harus en&hindari a)anan )aya itain % se+erti hati- sayuran /erdaun =as+aran&us- )l- )e/an& )l )an&)un&- slada- /aya- sai •
•
•
hi(au- seledri air> 'ena/ahan itain % haruslah den&an rese+ d)ter B Antasida A)i/atnya @ +enyera+an itain /er)uran& :esi B Antasida A)i/atnya @ +enyera+an /esi /er)uran& :esi- )alsiu- sen& B Anti/iti)a tetrasi)lin 8e) tetrasi)lin da+at /er)uran& Tetrasi)lin adalah anti/iti* yan& di&una)an untu) elaan ine)si A)i/atnya @ ine)si un&)in tida) ter)endali den&an /ai)
D+ VITAMIN *'
Dala a)anan- itain :1 =Thiain H;l> da+at diteu)an dala /entu) /e/as atau dala /entu) )+le)s den&an +rtein atau )+le)s +rtein.sat
9a/ar 24 #tru)tur )iia itain : 1 =tiain H;l>
Tiain hidr)lrid dala )eadaan )erin& *u)u+ sta/il dan +ada +eanasan 100 ;- a)an teta+i (i)a +H larutannya di atas 5-5 a)an *e+at terhidrlisa #atu &ra tiain hidr)lrida )ristal setara den&an 333-000 #" Tiain nnitrat +adat le/ih sta/il dari+ada tiain hidr)lrida M(T-D( ANALISA VITAMIN *'
1 Metde #+e)trluretri Tiain dala a)anan dan dala sediaan arasi harus disari le/ih dahulu se*ara )uantitati yan& /iasanya den&an endidih)annya dala asa en*er )eudian tiain di/e/as)an dari +ersenyaaan )+le)s den&an enzi satese ntu) sa+el yan& en&andun& +rtein di+erlu)an enzi +rteliti) se+erti +e+sin Tiain /e/as +erlu
Analisis Kuantitatif Vitamin
diurni)an dari senyaa +en&&an&&u den&an en&alir)annya elalui zelit =suatu +enu)ar in anr&ani)> sehin&&a tiain a)an tertin&&al dala zelit- sedan&)an senyaa lain se+erti redu)tr- asa dan senyaa yan& netral a)an )eluar dari )l %eudian tiain dielusi dari zeit den&an )aliu )lrida yan& diasa)an Tiain di)sida leh )aliu he)sasianerat ="""> atau )aliu eri sianida en&hasil)an ti)r- suatu senyaa /erlursensi /iru %+ Metode Kolorimetri Dala etde ini adalah rea)si antara tiain den&an 6.ain. til yan& telah didiaztasi Hasil +eruraian tiain tida) en&hasil)an arna den&na +erea)si ini De)trsa- la)tsa- altsa- su)rsa- te+un&)asein- &elatin- +e+tn- urea- &lisersat dan l&a /erat- den&an )adar 100 )ali /esar dari tiain teta+ tida) en&&an&&u #edan&)an ri/lain- asa ni)tinat- ni)tinaid- +irid)sin- asa +anttenat&uanin- adenin- tri+t+an- tirsin- dan histidin yan& terda+at den&an )adar 20 )ali le/ih /esar dari+ada )adar tiain yan& en&&an&&u 'erea)si 6.aintil di/uat den&an elarut)an 50& 6. aintil dala 50l asa )lrida 0-35 dan en&en*er)annya den&an air se*u)u+nya hin&&a 100l ;ara u(i tiain urni den&an +erea)si 6.aintil@ se(ulah 5-0 +erea)si 6.aintil didin&in)an den&an es- dita/ah 2-0 l natriu nitrit 0-1- lalu di*a+ur dan didia)an selaa 1 enit Larutan selan(utnya dita/ah 5-0 l natriu hidr)sida 20 dan dien*er)an den&an air se*u)u+nya sa+ai 20-0 l #e(ulah 1-0 +erea)si ini dita/ah 1-0 larutan sa+el #etelah 5 enit- larutan dien*er)an untu) enda+at)an a/sr/ansi yan& sesuai Di&una)an larutan /lan) i)a larutan sa+el telah /erarna atau )eruh- dila)u)an +eneta+an se+erti di atas )eudian arna yan& ter(adi disari den&an *a+uran +elarut yan& terdiri atas $0 l tlue redestilasi dan 10 l n./utanl La+isan +elarut r&ani) di+isah)an dan dita/ah sedi)it natriu sulat anhidrat untu) en&erin&)an +elarut lalu diu)ur a/sr/ansinya 3 Metde Al)alietri Adanya hidr)lrida +ada tiain hidr)lrida da+at dititrasi den&an natriu hidr)sida 0-1 N en&&una)an indi)atr /r til /iru
Analisis Kuantitatif Vitamin
;ara +eneta+an )adar tiain hidr)lrida den&an etde al)alietri@ le/ih )uran& 500 & tiain hidr)lrida yan& diti/an& sa)saa- dilarut)an dala air /e/as ; 2 lalu dititrasi den&an NaH 0-1 N en&&una)an indi)atr /r til /iru Tia+ l NaH 0-1 N setara den&an 33-70 & tiain hidr)lrida :erat e)uialen =:8> tiain hidr)lrida +ada +eneta+an se*ara al)alietri adalah saa den&an /erat le)ulnya =:M> Hal ini dise/a/)an )arena tia+ 1 l tiain hidr)lrida /erea)si den&an 1 l NaH V NaOH ×N ×NaOH ×BE × 100 mg sampel 4 Metde Titrasi :e/as Air =T:A> Tiain hidr)lrida dala asa asetat &lasial da+at dititrasi %adar Tiain H;lS
den&an asa +er)lrat den&an se/elunya dita/ah ra)sa =""> asetat /erle/ihan %edua at nitr&en dala tiain hidr)lrida tertitrasi sehin&&a /erat e)ialennya seten&ah dari /erat le)ulnya #e/a&ai indi)atr da+at di&una)an +.natl /enzen- erah )uinaldin- atau den&an )ristal ilet 'rsedur u(i tiain den&an etde T:A@ le/ih )uran& 250 & tiain hidr)lrida yan& diti/an& sa)saa dita/ah 10 l asa asetat &lasial- 10 l ra)sa =""> asetat 5 dala asa asetat &lasial- dan dita/ah 20 l di)san #elan(utnya larutan dititrasi den&an asa +er)lrat 0-1 N en&&una)an indi)atr 3 tetes )ristal ilet sa+ai arna /iru Tia+ l asa +er)lrat 0-1 N setara den&an 16-!6 :erat e)ialen =:8> tiain hidrlrida +ada +eneta+an se*ara titrasi /e/as air adalah seten&ah dari /erat le)ulnya =M:2> Hal ini dise/a/)an )arena tia+ 1 l tiain hidr)lrida /erea)si den&an 2 l H;l4
kadar Tiamin HCl=
V HCLO 4 × N HCLO 4 × BE mg sampel
× 100
5 Metde Ar&entetri Adanya )lrida dala tiain hidr)lrida da+at diteta+)an se*ara ar&entetri den&an en&&una)an etde <lhard 'ada +eneta+an den&an etde <lhard suasananya harus asa a)a a)an ter(adi rea)si antara +era) nitrat den&an /asa e/entu) A&=H> yan& +ada taha+ selan(utnya a)an e/entu) enda+an +utih A& 2- a)i/atnya
Analisis Kuantitatif Vitamin
+era) nitrat tida) hanya /erea)si den&an sa+el teta+i (u&a /erea)si den&an /asa 'rsedur u(i @ le/ih )uran& 100 & tiain hidr)lrida yan& diti/an& sa)saa dilarut)lan dala 20 L air Larutan diasa)an den&an asa nitrat en*er dan dita/ah)an 10L +era) nitrat 0-1N8nda+an yan& ter(adi disarin& dan di*u*i den&an air sa+ai tida) en&andun& )lrida Filtrate selan(utnya dititrasi den&an larutan /a)u aniu tisianat 0-1N en&&una)an indi*atr /esi =""" > aniu sulat Tia+ L +era) nitrat 0-1N setara den&an 16-!6 & tiain hidr)lrida :erat 8)uialen =:8> tiain hidr)lrida +ada +eneta+an se*ara ar&entetri adalah seten&ah dari /erat le)ulnya =:M2> Hal ini dise/a/)an )arena tia+ 1 ltiain hidr)lrida =yan& en&andun& 2 ;l.> /erea)si den&an 2 l A&N3 6 Metde 9raietri Tiain dala ta/let itain :1 dan dala in(e)si da+at diteta+)an se*ara &raietri* den&an *ara en&enda+)an larutan tiain en&&una)an asa sili)lraat 'rsedur u(i tiain den&an etde &raietri*@ se(ulah tertentu ta/let yan& telah diti/an& se*ara sa)saa dan setara denn&an le/ih )uran& 50 & tiain hidr)lrida- dien*er)an den&an air se*u)u+nya hin&&a 50 L lalu dita/ah 2 L asa )lrida +e)at dan di+anad)an hin&&a endidih 'ada larutan yan& telah endidih ini selan(utnya dita/ah den&an *e+at tetes dei tetes 4 L asa sili)lraat yan& /aru disarin& lalu dididih)an selaa 4 enit Larutan disarin& elalui )a*a asir lalu di*u*i den&na 50 L *a+uran endidih yan& terdiri atas 1 /a&ian lue asa )lrida +e)at dan 1$ /a&ian air yan& en&andun& asa sili)lraat 0-2 /- )eudian di*u*i 2 )ali tia+ )ali den&na 5 L asetn #isa di)erin&)an +ada suhu 105 ° ; selaa satu (a lalu didin&in)an selaa 10 enit dan di/iar)an dala e)si)atr di atas larutan asa sulat 3! lalu diti/an& Tia+ &ra sisa setara den&an 1$2-$ & tiain hidr)lrida (+ VITAMIN *%
Analisis Kuantitatif Vitamin
9a/ar 25 #tru)tur itain : 2 =Ri/lain>
%elarutan ri/lain dala air /erariasi dari 1 /a&ian ri/lain dala 3000 /a&ian air sa+ai 1 /a&ian ri/lain dala 15000 /a&ian air
'ada a)tu +eneta+an )adar- ri/lain harus terhindar dari *ahaya 'enyinaran den&an *ahaya ultrailet atau *ahaya ta+a) terhada+ larutan ri/lain dala /asa en&hasil)an luilain- sedan&)an larutan ri/lain dala suasana netral atau asa en&hasil)an lui)r yan& /erluresensi /iru Redu)tr se+erti natriu hidrsulit eredu)si ri/lain en(adi leu)lain Rea)si ini /ersiat reersi/le
M(T-D( ANALISIS VITAMIN *% 2)I*-FLAVIN3
1 Metde #+e)trluretri
Analisis Kuantitatif Vitamin
;ara +eneta+an lan&sun& da+at di&una)an terhada+ *a+uran yan& /e/as dari senyaa /erarna yan& en&&an&&u atau senyaa +en&&an&&u lain dan en&andun& ri/lain le/ih dari 0-1 ;ara +eneta+an lan&sun& da+at di&una)an terhada+ *a+uran yan& tida) en&andun& senyaa /erluresensi atau senyaa /erarna yan& larut dala air atau dala asa en*er 'en&u)uran harus dila)u)an se*e+at un&)in )arena ri/lain terurai leh sinar ultrailet :e/era+a senyaa +en&&an&&u da+at di)sidasi den&an +ena/ahan )aliu +eran&anat %eudian- )ele/ihan +eran&anat da+at dihilan&)an den&an +ena/ahan hydr&en +er)sida Larutan sa+el@ se(ulah ser/u) yan& diti/an& sa)saa dan setara den&an le/ih )uran& 2-5 & ri/lain diasu))an )e dala la/u 250 L lali dita/ah)an 1 L asa asetat 32-5 dan air se*u)u+nya hin&&a 200 L larutan di+anas)an di atas +enan&as air sa/il serin& di)*) hin&&a ri/lain larut- lalu didin&in)an hin&&a suhu 20 °; larutan dita/ah air se*u)u+nya hin&&a 250 L dan di*a+ur /ai). /ai) #e/anya) 10-0 L larutan dien*er)an den&an air se*u)u+nya hin&&a 1000 L dan di*a+ur /ai)./ai) Larutan ri/lain /a)u +ersediaan "- di/uat den&an elarut)an 50 & ri/lain yan& telah di)erin&)an +ada suhu 105; selaa 2 (a dala asetat 0-02 N se*u)unya hin&&a 500 l i)a +erlu larutan dihan&at)an diatas +enan&as air Larutan disi+an di/aah la+isan tluene dala leari +endin&in Larutan ri/lain /a)u +ersediaan "" - di/uat den&an *ara ena/ah 10-0l larutan ri/lain /a)u +ersedian " den&an asa asetat 0-02 N se*u)u+nya hin&&a 100l larutan disi+an di/aah la+isan tluene dala leari +endin&in Larutan ri/lain /a)u- di/uat den&an en&en*er)an 10-0 l larutan ri/lain /a)u +ersediaan "" den&an air se*u)u+nya hin&&an 1l Tia+ l larutan ini setara den&an 1& ri/lain Larutan ri/lain /a)u tida) /leh disi+an se/a&ai +ersediaan
Analisis Kuantitatif Vitamin
;ara +eneta+an ri/lain se*ara luretri@ =selaa +er*/aan larutan ri/lain diindun&i terhada+ *ahaya> %edala dua ta/un& diasu))an asin&.asin& 10l larutan 'ada ta/un& +ertaa dita/ah 1l larutan ri/lain /a)u lalu di*a+ur 'ada ta/un& )edua dita/ah 1l air lalu di*a+ur %edala asin&.asin& ta/un& dita/ah 1 l asa asetat &la*ial lalu dia*a+ur %edala )edua ta/un& selan(utnya dita/ah 0-5l larutan )aliu +eran&anate 4/ sa/il diadu) dan di/iar)an selaa 2 enit lalu dita/ah 0-25l hydr&en +er)sida 27-5 ,arna +eran&anate harus hilan& dala a)tu 10 deti) %edua ta/un& di)*) )uat.)uat hin&&a )ele/ihan )si&en )eluar i)a setelah +e/usaan /erhenti ada &ele/un& &as +ada dindin&- a)a dihilan&)an den&an eirin&)an ta/un& +erlahan. lahan Larutan dala ta/un& +ertaa selan(utnya diu)ur luresensinya =+e/a*aan A> dei)ian (u&a dala ta/un& )edua =+e/a*aan :> +ada ta/un& +ertaa dita/ah 20 & natriu /isulit- di*a+ur- lalu diu)ur luresensinya dala a)tu lia deti) setelah +en*a+uran Dila)u)an +er*/aan yan& saa dala ta/un& )edua =+e/a*aan rata. rata )edua ta/un& adalah +e/a*aan ;> %adar =dala & ri/lain> dihitun& den&an en&&una)an ruus@ 2,5 ×
B C A B −
−
2 Metde #+e)trtetri Larutan ri/lain dala da+ar +H 4-0 enun(u)an a/sr/ansi a)siu = aK> +ada 444 n den&an
1 %} ¿
E1 cm
320 ;ara ini
di&una)an untu) eneta+)an )eurnian ri/lain atau untu) +eneta+an ri/lain den&an )adar e/ih /esar dari $0 'eneta+an ri/lain dila)u)an den&an *ara terlindun& dari *ahaya ;ara +eneta+an ri/lain tun&&al se*ara s+e)trtetri@ le/ih )uran& 100& ri/lain yan& diti/an& sa)saa dilarut)an den&an +eanasan dala *a+uran 2l asa asetat &la*ial dan 150l air Larut)an selan(utnya dien*er)an den&an air- didin&in)an- dita/ah air
Analisis Kuantitatif Vitamin
se*u)u+nya hin&&a 1000l +ad 10-0 l larutan dita/ah 3-5l natriu asetat 0-1M )eudian dita/ah air se*u)u+nya hin&&a 100l larutan a)hir diu)ur a/sr/ansinya den&an )uet 1* +ada +an(an& &el/an& 444n %adar ri/lain dihitun& den&an en&&una)an ri/lain /a)u se/a&ai +e/andin& F+ VITAMIN *7 Di ala- itain :6 terda+at se/a&ai *a+uran +irid)sin- +irid)sal-
dan +irid)sain den&an +er/andin&an yan& /erariasi Ruus /an&un )eti&a senyaa terse/ut da+at di&a/ar)an se/a&ai /eri)ut@
'irid)sin H;l
'irid)sal
'irid)sain H;l :MS205-65
:MS203-63
:MS241-12 9a/ar 26 #tru)tur )iia +irid)sin H;l- +irid)sal H;l- dan +irid)sain H;l
'eneta+an )adar se*ara i)r/il&i atau se*ara hayati dari )eti&a senyaa terse/ut enun(u)an tan&&a+an yan& sele)ti #edan&)an etde isi)a dan )iia tida) da+at e/eda)an )eti&a senyaa terse/ut Metde isi)a dan )iia hanya **) untu) +irid)sin urni dan +ersediaannya
M(T-D( ANALISIS VITAMIN *7
1 Metde s+e)trtetri 'ada daerah ultrailet- +irid)sin- +irid)ain- dan +irid)sal enun(u)an daerah +enyera+an yan& )ara)teristi) alau+un tida) ada a)siu untu) )eti&anya %adar itain :6 (ulah dala larutan :uer +H 6-75 da+at diteta+)an +ada +an(an& &el/an& 325 n 'ada +an(an& &el/an& ini- +irid)sin dan +irid)sain enun(u)an a/sr/ansi a)siu- sedan&)an +irid)sal enun(u)an a/sr/ansi a)siu +ada 316n %ura +enyera+an +irid)sin sendiri /eru/ah den&an /eru/ahnya +H larutan Larutan +irid)sin dala asa )lrida
Analisis Kuantitatif Vitamin
0-1N enun(u)an satu a/sr/ansi a)siu +ada 2$1 n- s edan& dala larutan netral atau larutan al)ali enun(u)an dua a/sr/ansi a)siu Ta/el 22 'an(an& &el/an& a)sial +irid)sin dala /er/a&ai +elarut serta nilai 1
E 1 cm 'elarut Asa )lrida 0-1 N Da+ar sat +H 7 Natriu Hidr)sida 0-1 N
Ma)s 2$1n 254n 324n 244n 30$n
1
E1 cm 430 1!0 350 326 33!
;ara +eneta+an )adar +irid)sin dala ta/let tun&&al se*ara s+e)trttetri@se/anya) 20 ta/let diti/an& dan diser/u) 'ada se(ulah ser/u) yan& diti/an& sa)saa yan& setara den&an le/ih )uran& 25& +irid)sin hidr)lrida-dita/ah 50l asa )lrida 0-1 N-sa/il se)ali.)ali diadu) Larutan dien*er)an den&an asa )lrida 0-1N se*u)u+nya hin&&a 100l larutan di)ur a/sr/ansinya en&&una)an )uet den&an )ete/alan 1 * +ada +an(an& &el/an& a)siu =le/ih )uran& 2$1n> %adar +irid)sin hidr)lrida dihitun& terhada+ +irid)sin hidr)lrida /a)u 'ada +en&&unaan ede ini harus tida) ada senyaa +en&&an&&u 2 Metde )lrietri Metde ini +ertaa )ali di)eten&ah)an leh #eudi yan& endasar)an +ada rea)si enl den&an 2-6.di)lr.+./enz)uin.4. )lriina den&an en&hasil)an arna /iru yan& da+at disari den&an +elarut r&ani* Rea)si ini eru+a)an rea)si uu untu) senyaa enl yan& /er)edudu)an +ara terhada+ &u&us hidr)sil e nl tida) tersu/stitusi Metde ini enun(u)an )e+e)aan yan& rendah (i)a sa+el en&andun& )uran& dari 0-1 & dan +eruraian da+at ter(adi se/elu arna /er)e/an& en*a+ai a)siu 3 Metde titrasi :e/as Air 'irid)sin hidr)lrida da+at diteta+)an se*ara titrasi /e/as air setelah dita/ah ra)sa =""> asetat ;ara +eneta+an )adar +irid)sin hidr)lrida den&an titrasi /e/as air@ le/ih )uran& 300& +irid)sin hidr)lrida yan& diti/an& sa)saa-dilarut)an dala 40l asa
Analisis Kuantitatif Vitamin
asetat &la*ial lalu dititrasi den&an asa +er)lrat 0-1N en&&una)an indi*atr 3 tetes %ristal ilet sa+ai /iru hi(au Tia+ l asa +er)lrat 0-1 N setara den&an 20-56 & +irid)sin hidr)lrida 4 Metde %rat&rai %rat&rai *air )iner(a tin&&i =%;%T> den&an dete*tr luresen telah di&una)an se*ara luas untu) analisis )uantitati itain :6 dala aya dan /ahan a)anan lainnya #a+el yan& telah di&erus =2-5& sa+el (i)a )andun&an itain :6 le/ih /esar dari+ada 2-0 && dan se/anya) 5 & (i)a )andun&an itain :6.nya le/ih rendah> di*a+ur den&an 25l larutan natriu asetat 0-05MI 2-5l larutan asa &li)salat 1MI 400l larutan /esi =""> sulat =36-56 & er sulat yan& dilarut)an dala 10l natriu asetat 0-05M>I dan 20 & satase asa ;a+uran di&yan& terus.enerus +ada suhu 37; selaa seala #etelah selesai in)u/asi- *a+uran didin&in)an dan dien*er)an sa+ai 50l den&an air endidih lalu disarin& atau disentriu&asi #e/anya) 5-0 l aliJut di*a+ur den&an 4-5l larutan natriu /rhidrida 0-1M lalu d)*) dan selan(utnya dita/ah den&an 0-5 l asa asetat &la*ial Larutan selan(utnya disarin& dan di&una)an untu) analisis den&an %;%T 'eisahan dila)u)an den&an )l )tadesil silan =250 U 4-6 idI u)uran +arti)el 5 i)rn> yan& dihu/un&)an den&an )l +en&aan )tadesil silan =4U U 4 idI u)uran +arti)el 10 i)rn> 8luen dihantar)an se*ara is)rati) yan& tersusun atasI asetnitril.)aliu dihidr&en sat 0-05M atau natriu )tan sulnat 0-03 MI +H diatur 2-5 den&an asa rtsat %e*e+atan alir ase &era) 1 lenit den&an +an(an& &el/an& e)sitasi dan eisi dete*tr asin&.asin& se/esar 2$0 dan 3$5 n G+ VITAMIN *'% #ian)/lain ; 63H!!14 N14';- eru+a)an senyaa )+le)s
den&an )rdinat )/alt /er/erat le)ul 1355-4 %ristalnya *e+at enyera+ le/a/ udara #ian)/lain /ersiat netral dan en&andun& &u&us sian 9u&us ini da+at di&anti den&an /er/a&ai in untu) en&hasil)an senyaa
Analisis Kuantitatif Vitamin
/aru se+erti )lr)/alain dan hidr)s)/alain :ila sian)/alain dihidrlisis den&an asa a)a a)an en&hasil)an 5-6.dietil/enziidazl M(T-D( P(N(TAPAN KADA) VITAMIN *'% 2SIAN-K-*ALAMIN3 1 Metde s+e)trtetri #ian)/alain dala air enun(u)an a/sr/ansi a)siu
= a)s> +ada 27!E1n-361n dan 550 E 2n Metde s+e)trtetri tida) s+esii) untu) sian)/alaina )arena senyaa /erarna erah dan +seudsian)/alain enun(u)an s+e*tra a/sr/ansi yan& seru+a Metde yan& +alin& sederhana adalah den&an eneta+)an +ada 550 n- teta+i etde ini hanya da+at di&una)an terhada+ sian)/alain yan& /e/as senyaa +en&&an&&u Metde yan& le/ih +e)a ialah den&an ela)u)an +eneta+an +ada +an(an& &el/an& 361 n ;ara +eneta+an )adar sian)/alain se*ara s+e)trtetri@ le/ih )uran& 2 & sian)/alain yan& diti/an& sa)saa- dilarut)an dala air se*u)u+nya hin&&a 50 L Larutan diu)ur a/sr/ansinya den&an )uet 1 * +ada +an(an& &el/an& 361 n Nilai 81 1 * +ada 361 n adalah 207 2 Metde %rat&rai Metde %;%T telah su)ses di&una)an untu) +eisahan dan analisis )uantitati itain :1- :2- dan *a+uran.*a+urannya dala /er/a&ai a*a /ahan a)anan :er/a&ai a*a iser itain :12 =sian)/alain> yan& ada dala /er/a&ai a*a susu (u&a telah di+isah)an den&an en&&una)an etde %;%T asse ter/ali) #ian)a/alain die)stra)si dari sa+el den&an en*a+ur 25 L susu den&an 2.4 L H;l 0-1 M +H 4-6 ;a+uran di+anas)an +ada suhu 120 0; selaa 10 enit dan selan(utnya disarin& +H iltrate diatur 5-5 den&an natriu hidr)sida 0-1 M dan dien*e r)an den&an aJuades sa+ai 50 L #ian)a/alain selan(utnya di+e)at)an +ada cartridge )tadesil silan yan& telah di)ndisi)an den&an 2 L asetnitril dan di*u*i den&an 6 L aJuades Filtrat selan(utnya dileat)an elalui *artrid&e dan selan(utnya *artrid&e di*u*i den&an 12 L air #ian)/alain dielusi den&an asetnitril@ air =1@1 > dan di+isah)an den&an )l )til sili*a 8lusi &radient diulai den&an asetnitril@
Analisis Kuantitatif Vitamin
larutan aniu sat +H 3-0 =5@$5> lalu )nsentrasi asetnitril ditin&))at)an sa+ai 30 selaa 16 enit %nsentrasi itain :12 selan(utnya ditentu)an den&an etde radioassay
H+ VITAMIN , Ruus /an&un asa as)r/at =/erat le)ul 176-13> atau itain ;
da+at di&a/ar)an se/a&ai /eri)ut@
Asa as)r/at dala )eadaan )erin& *u)u+ sta/il- teta+i dala larutan *e+at di)sidasi leh udara Rea)si )sidasi ini di+er*e+at leh /e/era+a l&a- terutaa te/a&a Asa as)r/at (i)a ter)ena sinar la/at laun a)an /eru/ah en(adi *)lat M(T-D( ANALISIS VITAMIN , 1 Metde "dietri Dasar dari etde ini adalah siat eredu)si asa as)r/at
Metde idietri =titrasi lan&sun& den&an larutan /a)u idiu 0-1 N> da+at di&una)an terhada+ asa as)r/at urni atau larutannya ;ara +eneta+an )adar itain ; se*ara idietri@ le/ih )uran& 400 & asa as)r/at yan& diti/an& sa)saa- dilarut)an dala *a+uran yan& terdiri atas 100 L air /e/as )ar/n di)sida dan 25 L asa sulat en*er Larutan dititrasi se&era den&an idiu 0-1 N en&&una)an indi*atr )an(i sa+ai ter/entu) arna /iru teta+ Tia+ L idiu setara den&an !-!06 & asa as)r/at Metde ini da+at (u&a di&una)an untu) +eeri)saan harian terhada+ sediaan itain ; yan& tida) en&andun& senyaa eredu)si lainnya Larutan /a)u lain yan& da+at di&una)an /erdasar)an siat eredu)si asa as)r/at adalah seriu ="<> aniu sulat atau 2
)aliu idat Metde 2-6.di)lrenlindenl =D;"'> Metde 2-6.di)lrenlindenl =D;"'> ini /erdasar)an atas siat eredu)si asa as)r/at terhada+ zat arna 2-6.
Analisis Kuantitatif Vitamin
di)lrenlindenl Asa as)r/at a)an eredu)si indi)atr arna 2-6.di)lrenl.indenl e/entu) larutan yan& tida) /erarna 'ada titi) a)hir titrasi- )ele/ihan zat arna yan& tida) teredu)si a)an /erarna erah uda dala larutan asa Hasil +eneta+an den&an etde ini ende)ati hasil +eneta+an den&an etde hayati ,alau+un dei)ian- etde ini tida) s+esii) )arena /e/ra+a senyaa eredu)si lainnya da+at en&&an&&u +eneta+an #enyaa +en&&an&&u terse/ut adalah senyaa sulhidriltisulat- /entu) teredu)si dari turunan asa a)ntianat- ri/lain- dan senyaa /esi =""> r&ani) 'elarut ter/ai) untu) asa as)r/at adalah asa etasat dan asa )salat )arena senyaa ini en*e&ah +en&aruh te/a&a #uatu *ara untu) en&hilan&)an +en&aruh senyaa +en&&an&&u adalah @ #eua asa as)r/at diu/ah en(adi asa dehidras)r/att • den&an ena/ah)an nrit )edala larutan asa as)r/at atau • •
•
den&an en&&una)an a)sidase asa As)r/at ulah senyaa eredu)si yan& asih ada diteta+)an Asa dehidras)r/at diredu)si en(adi asa as)r/at den&an +ena/ahan hydr&en sulide +ada +H 4.7 Asa as)r/at dititrasi den&an di)lrenl indenl Den&an en&&una)an *ara terse/ut di atas a)a etde D;"'
en(adi le/ih s+esii) Asa dehidras)r/at tida) /erea)si den&an di)lrenlindenl Metde ini di&una)an untu) +eneta+an )adar asa as)r/at dala sediaan itain dan (us Metde ini tida) di+a)ai untu) +eneta+an )adar larutan (us yan& san&at /erarna atau %aren adanya /esi=""> =Fe2V>- stan =#n2V>- te/a&="> =;uV>- #2- sulit- atau tisulat :eri)ut adalah *arJJa +eneta+an itain ; den&an etde 2-6 di)lrenlindenl @ :ahan yan& di&una)an @ a> Larutan 'en&e)stra)si Larutan asa etasat.asa asetat di/uat den&an • elarut)an 15 & asa etasat =H' 3> dala 40 L asa
Analisis Kuantitatif Vitamin
asetat dan 200 L aJuades den&an +en&&(n&an lalu en&en*er)annya sa+ai 500 L larutan disarin& *e+at dan disi+an dala reri&eratr =H'3 a)an /eru/ah se*ara +erlahan.lahan en(adi H3'4- ta+i (i)a disi+an dala reri&eratr larutan a)an tahan 7.120 hari> Larutan asa etasat.asa Asetat.asa sulat- di/uat
•
den&an *ara ela)u)an se+erti =a>- )e*uali +en&&unaan H 2#4 0-3 N untu) en&&anti air /> Larutan /a)u asa as)r/at B 1 &L- di/uat den&an eni/an& se*ara sa)saa 50 & asa as)r/at /a)u yan& telah disi+an dala desi)atr dan dihindar)an dari +en&aruh *ahaya sa+ai /atas tanda den&an larutan asa etasat.asa asetat saese &era un&)in sae/elu di&una)an *> Larutan /a)u di)lrenl Bindenl =D;"'>- di/uat den&an elarut)an 50 & &ara Na 2-6.di)lrenl indenl yan& telah disi+an dala desi)atr elalui Wsda lieX dala 50 L air yan& telah dita/ah)an 42 & natriu /i)ar/nat - lalu di&(& )uat i)a zat arna telah larut a)a larutan dien*er)an den&an 200 L air lalu disarin& dan dihindar)an dari +en&aruh *ahayas dan disi+an dala reri&eratr d> "ndi*atr +H til den&an 10-75 l NaH 0-02 N den&an +en&han&atan Larutan dien*er)an den&an H2 sa+ai 250 L 'rsedur u(i itain ; dala inuan den&an etde D;"' a> 'e/a)uan Larutan :a)u D;"' den&an Larutan :a)u
la/u 8rleneyer dita/ah 5 L larutan H'3. ;H3;H Larutan dititrasi *e+at den&an larutan D;"' dari /uret 50 L sa+ai un*ul arna erah udah dala a)tu 5 deti) Dihitun& lue rata.rata larutan /a)u D;"' yan& di&una)an
•
untu) titrasi Dila)u)an (u&a 3 )ali titrasi /lan) yan& terdiri atas 5-0 L larutan H'3. ;H3;H dan 2 L H 2 di hitun& untu) titrasi /lan) =isal)an Y>
Analisis Kuantitatif Vitamin
•
:anya)nya lue U di )uran&i den&an lue Y dihitun& )esetaran & itain ; tia+ L /u)u D;"' =+e/a)uan D;"' se+ereti diatas- dila)u)an setia+ )ali au e/a)u)an
D;"' den&an /a)u asa as)r/at yan& di /uat /aru /> (i 'endahuluan Adanya #en/yaa :asa Dala ulah ;u)u+ :esar #e(ulah sa+el dari )a+sul- ta/let- atau sediaan +adat lainnya di&erus lalu dita/ah)an 2 L larutan H' 3.;H3;H +H larutan diu(i den&an enetes)an indi*atr +H til /iru i)a +H Z1-2 enun(u)an adanya senyaa yan& /ersiat /asa dala (ulah yan& *u)u+ /esar ntu) sediaan *air- se(ulah sa+el dien*er)an den&an 2 )ali larutan H'3.;H3;H se/elu diu(i den&an indi*atr +H til /iru *> 'enyia+an Larutan #a+el i ntu) sa+el )erin& yan& tida) en&andun& senyaa /asa dala (ulah *u)u+ tin&&i #a+el diser/u))an den&an +en&erusan leah- lalu • dita/ah)an larutan H'.;H3;H Larutan dien*er)an den&an H'3.;H3;H sa+ai lue yan& teru)ur •
Larutan ini den&an < L Di&una)an 10 L larutan +en&e)stra)si & sa+el )erin& =Larutan a)hir diusaha)an en&andun& 10 . 100 & asa
ii
as)r/at100 L> ntu) sa+el )erin& yan& en&andun& senyaa /asa dala (ulah *u)u+ tin&&i #a+el diser/u))an den&an +en&&erusan leah- lalu • dita/ah larutan H'.;H3;H.H2#4 untu) en&atur +H 1-2 Larutan dien*er)an den&an H' .;H3;H sa+ai lue yan& &teru)ur <lue ini ditandai den&an •
< L Di&una)an 10 L larutan +en&estra)si& sa+el )erin& =Larutan a)hir diusaha)an en&andun& 10.100 & asa
iii
as)r/at100 L> ntu) sa+el *air
Analisis Kuantitatif Vitamin
•
Dia/il se(ulah sa+el yan& en&andun& 100 & asa as)r/aT i)a sa+el en&andun& senyaa /asa dala (ulah yan& *u)u+ tin&&i a)a +H.nya diatur 1-2 den&a
•
ena/ah)an larutan H'3.;H3;H.H2#4 Larutan dien*er)an den&an H' 3.;H3;H sa+ai lue yan& teru)ur yan& en&andun& 10.100 & asa
as)r/at100 L lue ditandai den&an < L d> 'eneta+an %adar Dia/il se(ulah lue aliJut sa+el yan& en&andun& • )uran& le/ih 2 & asa as)r/at i)a lue aliJut sa+el yan& en&andun& E 2 & asa as)r/at [7 L- lalu dita/ah •
larutan H'3.;H3;H hin&&a luenya 7 L Larutan dititrasi se*ara *e+at den&an larutan D;"' den&an en&&una)an /uret 50 L sa+ai un*ul arna erah uda
•
dala a)tu 5 deti) Dila)u)an re+li)asi 3 )ali lalu dihitun& lue rata.rata
•
larutan D;"' yan& di&una)an untu) titrasi Dila)u)an (u&a 3 )ali titrasi /lan) se+erti titrasi sa+el den&an /anya) L aliJut sa+el di&anti den&an L H 2 dala (ulah yan& saa lalu dihitun& lue rata.rata larutan
/a)u D;"' yan& di&una)an untu) titrasi /lan) e> 'erhitun&an F V & asa as)r/at&- ta/let- L S =U.:> K K E Y U @ <lue rata.rata D;"' untu) titrasi sa+el : @ <lue rata.rata D;"' untu) titrasi /lan) F @ %esetaraan & asa as)r/atL D;"' 8 @ ulah & sa+el- ta/let- L ds/ yan& diu)ur < @ <lue larutan u(i aal yan& dia/il Y @ lue aliJut sa+el yan& dititrasi 3 Metde %lrietri 4.et)si.2.nitranilin Asa as)r/at den&an 4.et)si.2.nitranilin yan& telah didiaztasi e/entu) senyaa yan& /earna /iru Metde ini *u)u+ s+esii) untu) asa as)r/at )arena asa dehidras)r/at- asa 2-3.di)et&lu)nat- tiain- ri/lain- +irid)sin- +anttenat- asa lat- niasin- niasinaid- itain A- itain D-
Analisis Kuantitatif Vitamin
'erea)si 4.et)si.2.nitranilin di/uat den&an elarut)an 500 & 4.et)si.2.nitranilin dala 126 L asa asetat &la*ial lalu en&en*er)annya den&an asda sulat 10 sa+ai 250 L ;ara +eneta+an itain ; den&an +erea)si 4.et)si.2.nitranilin dita/ah 2 L natriu nitrit 0-2- diadu) hin&&a arna ( in&&a hilan& lalu dita/ah 75 L n./util al*hl dan di*a+ur Larutan ini selan(utnya dita/ah)an 0-5.2 & asda as)r/at 0-5 dan di+indah)an )e dala *rn& +isah #elan(utnya larutan dita/ah 25 L natriu hidr)sida 10 dan 150 L dietil eter- di&(& /ai)./ai)dan didia)an hin&&a eisah La+isan /aah =la+isan air> di+isah)an La+isan r&ani* di*u*i 3 )ali- tia+ )ali den&an 15 L natriu hidr)sida 10 La+isan air dan *airan hasil *u*ian den&an air dien*er)an den&asn air hin&&a 200 L /lan) di/uat den&an *ara yan& saa tan+a +ena/ahan +erea)si A/sr/ansi larutan diu)ur terhada+ /lan) +ada 570 n 4 Metde #+e)trluretri Asa as)r/at dala larutan air netral enun(u))an a/sr/ansi a)siu +ada 264 n den&an nilai 8 1 * S 57$ 'an(an& &el/an& a)siu ini a)an /er&eser aleh adanya asa ineral Asa as)r/at dala asa sulat 0-01 e+unyai +an(an& &el/an& a)siaL 254 n den&an nilai 81* 5 Metde #+e)trluretri #uatu etde s+e)trluretri untu) enentu)an )adar itain ; yan& endasar)an +ada rea)si yan& di)atalis leh he&l/in telah di)e/an&)an %e dala la/u ta)ar 25 L- diasu))an 0-1 L hydr&en +er)sida 1-0 U 10.3 MI 6-0 L larutan /uer sat +H 10-4 yan& en&andun& NH 3. NH4;l 5-0 MI se(ulah tertentu sa+el yan& en&andun& asa as)r/at $U10 .10 M dan 0-5 L he&l/in 1-0 U 10.5 M larutan dien*er)an den&an aJuadest sa+ai /atas tanda se/elu dila)u)an +en&&yan&an Larutan selan(utnya dileta))an diatas +enan&as air yan& suhunya di(a&a teta+ +ada suhu 25 0; selaa 10
Analisis Kuantitatif Vitamin
enit "ntensitas luresensi larutan sa+el =F> dan /lan) =F 0> diu)ur +ada +an(an& &el/an& e)sitasi 31! n dan +an(an& &el/an& eisi 422 n #elan(utnya dihitun& selisih F.F #a+el in(e)si dan ta/ let itain ; dianalisis )andun&an itaiunnya den&an etde diatas #e/anya) 20 ta/let diti/an& lallu /erat rata.rata ta/let dihitun& se/elu di&erusa en(adi ser/u) #e(ulah ser/u) yan& setara den&an /erat ta/let rata.rata dilarut)an dala air lalu disarin& dan dita/ah)an air la&i hin&&a 25-0 L #a+el in(e)si (u&a dien*er)an sedei)ian ru+a hin&&a di+erleh larutan den&an )nsentrasi yan& sesuai Metde ini linier +ada )isaran )nsentrasi asa as)r/at $-0 U 10 . 10
sa+ai 3-6 U 10 .! M /atas dete)si =hasil +erhitun&an> 3-0 U 10
.10
M
si+an&an /a)u relatid etde ini 1-6 +ada )nsentrasi 7-0 U 10 .$ M = 11 )ali re+li)asi> Metde s+e)trluretri lain untu) analisis )uantitati itain adalah /erdasar)an +ada rea)si antara asa as)r/at =AA> den&an etilen /iru =M:> "ntensitas luresensi M: diu)ur +ada +an(an& &el/an& e)sitasi 664 n dan +an(an& &el/an& e isi 6!2 n %nsentrasi M: enurun se/a&ai un&si +enurunan intensitas lursensi M: )arena ter/entu) M: yan& )uran& /earnas =Leu*. M:> setelah ter(adi rea)si antara AA dan M: Rea)si ini eru+a)an rea)si red)s- yan& ana AA a)an di)sidasi en(adi asa dehidras)r/at seentara M: a)an diredu)si en(adi Leu*.M: yan& )uran& /earna #uatu hu/un&an linier di+erleh antara +enurunan intensitas luresensi M: dan )nsentrasi AA +ada )isaran 3-0 U 10 .7 sa+ai 6-0 U 10.6 M /atas dete)si etde ini 2-5 U 10 .7 M Metde ini telah su)ses di&una)an untu) eneta+)an )adar itain ; dala ta/let su++leent itain 6 Metde %rat&rai #uatu etde )rat&rai ;air %iner(a Tin&&i =%;%T> telah di)e/an&)an untu) +enentuan asa as)r/at dala inuan rin&an
Analisis Kuantitatif Vitamin
dan (us a+el en&&una)an tris =2-2./i+iridin ruteniu =""> atau =Ru=/+y>32V ele)trluinesense #a+el disarin& dan dien*er)an se/elu dila)u)an analisis den&an %;%T dan tida) ada +ra.+erla)uan lain yan& dila)u)an 'eisahan asa as)r/at dila)u)an den&an en&&una)an )l )tadesil/silan =D#- ;1!> en&&una)an ase &era) larutan /uer NaH2'4.% 2H'4 =+H 6-5> Aliran ase &era) 0-3 Lenit Asa as)r/at yan& terelusi di*a+ur den&an =Ru=/+y> 32V 0-5 M dan di)sidasi +ada 1-5 < =den&an ele)trda A&A&;l> Adanya &an&&uan asa sitrat da+at dihindari den&an ena/ah tetra. /utilaniu.tetralur/rat =:u4 N:F4> 10.4 M +ada eluen INT()AKSI -*AT VITAMIN
•
;uadin adalah anti)a&ulan yan& +alin& /anya) di&una)an
•
enin&)at)an )adar darah as+irin en*a+ai )nsentrasi t)si)>
•
di&una)an se/a&ai seditia atau +il tidur se*ara tida) teratur B "ni a)i/at +en&i)atan )e/ali )+nen hrne dari +il %: +ada saat +e/erian itain di/eri)an 'erdarahan eru+a)an tanda ter(adinya rea)si ;atatan @ 'en&&unaan itain dala ta)aran se)itar 250.500 & da+at
•
en&uran&i intera)si terse/ut
Analisis Kuantitatif Vitamin
•
A)i/atnya @ un&)in ter(adi +er+an(an&an asa )er(a +riidn 'riidn adalah anti)nulsan yan& di&una)an untu) en*e&ah )e(an&
•
•
+ada &an&&uan se+erti ayan B Asa /rat %/inasi ini da+at en&hilan&)an
•
sale+ )ulit- su+sitria asir
•
un&)in ter(adi )e)uran&an itain 9una)an itain : 6 ta/ahan B Hidralazin =A+reslin> %/inasi ini da+at en&hilan&)an
•
Hidralazin di&una)an untu) enan&&ulan&i te)anan darah tin&&i B Led+a =D+ar- Lard+a- #ineet> 8e) led+a da+at /er)uran& Led+a di&una)an untu) en&endali)an trer )arena +enya)it 'ar)insn A)i/atnya @ )ndisi yan& di/ati un&)in tida) ter)endali de4n&an /ai) ;atata n @
•
+en&&unaan sineet a)an en&uran&i intera)si
•
•
ta/ahan )aliu )lrida )arena tu/uh serin& )ehilan&an )aliu Asa lat = B 'il %: %/inasi ini da+at en&hilan&)an asa lat dari tu/uh A)i/atnya @ un&)in ter(adi )e)uran&an asa lat 9una)an asa lat ta/ahan Asa lat = B 8str&en =hrn anita>
Analisis Kuantitatif Vitamin
%/inasi ini da+at en&hilan&)an asa lat dari tu/uh A)i/atnya @ •
un&)in ter(adi )e)uran&an asa lat 9una)an asa lat ta/ahan Asa lat = B Fenitin =Dilantin> %/inasi ini da+at en&hilan&)an asa lat dari tu/uh A)i/atnya @ un&)in ter(adi )e)uran&an asa lat 9una)an asa lat ta/ahanta+i (an&an terlalu /anya) B asa lat dala (ulah /anya) da+at enurun)an ee) enitin Fenitin adalah anti)nulsan yan&
•
di&una)an untu) ene&endali)an )e(an& +ada &an&&uan se+erti ayan Asa lat = B 'riidn =Mysline> %/inasi ini da+at en&hilan&)an asa lat dari tu/uh A)i/atnya @ un&)in ter(adi )e)uran&an asa lat 9una)an asa lat ta/ahan 'riidn adalah anti)nulsan yan& di&una)an untu) en&endali)an
•
)e(an& se+erti ayan Asa lat = B #ulasalazin =Azulidine> %/inasi ini da+at en&hilan&)an asa lat dari tu/uh A)i/atnya @ un&)in ter(adi )e)uran&an asa lat 9una)an asa lat ta/ahan #ulasalazin di&una)an +ada *litis ulserati
*A* III P(NUTUP K(SIMPULAN Fun&si )husus itain adalah se/a&ai )a)tr =eleen +e/antu>
untu) rea)si enziati)
Analisis Kuantitatif Vitamin