Kolesterol Dalam Darah

5/14/2018

Kole ste rol Da la m Da ra h - slide pdf.c om

LAPORAN PRATIKUM BIOKIMIA

PERCOBAAN 04 PENENTUAN KADAR TOTAL KOLESTEROL

Nama

: Oktaviandri Saputra

NIM

: 10509050

Kelompok

: IV

Tanggal percobaan

: 8 Maret 2012

Tanggal pengumpulan

: 9 Maret 2012

Nama Asisten

: Isriyanti Affifah

LABORATORIUM BIOKIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM PROGRAM STUDI KIMIA INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2011/2012

http://slide pdf.c om/re a de r/full/kole ste rol-da la m-da ra h

1/8

5/14/2018


Penentuan Kadar Total Kolesterol Darah

I.

Tujuan percobaan

Menentukan kadar kolesterol dari sampel serum II.

Teori dasar

Kolesterol adalah metabolit yang mengandung lemak sterol (bahasa Inggris: waxy steroid) yang ditemukan pada membran sel dan disirkulasikan dalam plasma darah. Kandungan kadar kolesterol pada setiap bagian tubuh hewan berbeda, ada bagian yang sangat banyak mengandung kolesterol dan bagian lain sebaliknya. Sebagai contoh pada otak, hati dan kuning telur memiliki kadar kolesterol yang sangat tinggi. Kolesterol secara fisiologi penting bagi tubuh, karena merupakan bahan untuk membangun membran sel dan hormon-hormon yang memiliki peranan vital khususnya kelompok hormon steroid.

Tubuh manusia dan hewan yang normal akan berusaha memelihara konsentrasi plasma kolesterol dengan cara mengatur sintesis dan ekskresi kolesterol. Kolesterol yang melebihi kebutuhan tubuh akan dieliminir melalui empedu, tetapi walapun begitu jika pasok kolesterol dari makanan berlebih, maka akan berakibat kurang baik bagi

tubuh

dan

dapat

menimbulkan

berbagai

gangguan

fisiologi

seperti

artheroskerosis yang dapat menjadi penyakit jantung koroner atau stroke. Kolesterol merupakan substansi lemah, oleh karena itu kolesterol tidak larut dalam air, dapat diekstraksi dari jaringan dengan kloroform, eter, benzena, dan alkohol panas. Dari uraian di atas maka dilakukan praktikum tentang pengukuran kadar kolesterol dengan harapan kadar kolesterol dari sampel yang digunakan bisa diketahui. Sampel yang digunakan pada praktikum ini adalah serum. Dan metode yang digunakan untuk


2/8

5/14/2018


menentukan kadar koleterol adalah metode Lieberman-Burchards yang menggunakan alat spesifik berupa spektrofotometer.

III.

Prosedur

0.2 ml serum ditempatkan dalam tabung reaksi kering (tabung sampel). Tambahkan 10 ml asam asetat anhidrida dari buret ke dalam tabung reaksi yang telah berisi serum tadi lalu tutup tabung reaksi dengan sumbat gabus yang diberi pipet kapiler dan biarkan selama 5 menit. Kocok tabung dan panaskan di dalam penangas air selama 30 menit untuk mengekstraksi kolesterol. Setelah tabung-tabung tersebut dingin (suhu kamar) dekantasi dengan hati-hati cairannya ke dalam tabung reaksi yang kering.

Siapkan larutan standar kolesterol seperti pada tabel di bawah ini :

Larutan

mg standar/ 100 ml kolesterol

ml standar

ml asam asetat anhidrida

Standar 1

50

1

9

Standar 2

100

2

8

Standar 3

150

3

7

Standar 4

200

4

6

Standar 5

250

5

5

Standar 6

300

6

4

Standar 7

350

7

3

Tambah 0.36 ml H2SO4 pekat pada tiap-tiap tabung reaksi dan kocok keras-keras. Simpan di tempat gelap, setelah 15 menit, semua larutan (kolesterol standard dan sampel) diukur absorbannya pada λ = 660 nm. IV.

Data Pengamatan

mg standar/ Larutan

100 ml kolesterol


ml asam asetat ml standar

anhidrida

A

3/8

5/14/2018


V.

Standar 1

50

1

9

0.027

Standar 2

100

2

8

0.055

Standar 3

150

3

7

0.101

Standar 4 Standar 5

200 250

4 5

6 5

0.109 0.163

Standar 6

300

6

4

0.165

Standar 7

350

7

3

0.244

Sampel 1

?

-

10

0.177

Sampel 2

?

-

10

0.169

Pengolahan Data

Dari data pengamatan di atas dapat kita hitung konsentrasi dari sampel yang digunakan. Dengan cara memplotkan absorbansi terhadap konsentrasi.

Grafik Penentuan Kolesterol Darah 0.3 0.25

y = 0.6664x - 0.0099 R² = 0.9559

0.2 A0.15

Grafik Penentuan Kolesterol Darah

0.1

Linear (Grafik Penentuan Kolesterol Darah)

0.05

0

0

0.1

0.2

0.3

0.4

mg kolesterol/100 ml serum

Dari grafik di atas, didapatkan nilai persamaan garis y = 0.666x – 0.009 dimana y mewakili nilai absorbansi rata-rata dari sampel dan x adalah konsentrasi kolesterol dalam serum. Oleh karena itu besarnya konsentrasi kolesterol dalam serum dapat ditentukan melalui subtitusi absorbansi rata-rata sampel ke dalam persamaan tersebut.


4/8

5/14/2018


Larutan

A

Sampel 1

0.177

Sampel 2

0.169

Sampel 1 :

          

   

  

Sampel 2 :

          

   

  

Jadi konsentrasi kolesterol di dalam sampel serum adalah 279 mg/ml dan 267 mg/ml. VI.

Pembahasan

Pada percobaan ini, ditentukan kadar kolesterol dalam serum. Serum yang digunakan dicampurkan dengan asam asetat anhidrida dan asam sulfat pekat kemudian absorbansinya dibandingkan dengan larutan standar yang telah dibuat. Metode ini juga disebut metode Liebermenn Burchard.

Penambahan asam asetat anhidrida ke dalam serum bertujuan untuk membentuk turunan asetil sedangkan penambahan asam sulfat bertujuan untuk membentuk ikatan terkonjugasi dengan kolesterol sehingga dihasilkan senyawa ester-kolesterol asetat yang berwarna hijau. Warna hijau ini akan dihasilkan oleh beberapa tahapan reaksi berikut beserta reagennya ;


5/8

5/14/2018


Gambar 3 : Mekanisme reaksi Lieberman Burchard

Dalam percobaan ini, kondisinya dibuat sekering mungkin (tidak ada air pada alat tabung reaksi atau alat lain yang digunakan) hal ini dikarenakan asam asetat anhidrida sangat mudah bereaksi dengan air. Apabila terdapat air maka tidak akan terbentuk turunan asetil yang diharapkan karena asam asetat anhidrida akan bereaksi dengan air menghasilkan asam asetat. Selama mereaksikan campuran serum dan asam asetat anhidrida dengan asam sulfat, kondisi tabung reaksi dibuat gelap. Hal ini bertujuan untuk mencegah terjadinya oksidasi akibat sinar UV, karena ada kemungkinan hasil yang didapatkan bukan merupakan ester kolesterol-asetat melainkan senyawa peroksida.

Serum merupakan bagian dari cairan tubuh yang bercampur dengan darah. Seringkali serum diartiakan sebagai cairan tanda sel darah dan faktor koagulasi atau fibrinogen. Serum juga merupakan sebuah plasma darah tanpa adanya fibrinogen. Oleh karena itu, pada percobaan ini digunakan serum sebagai sampel karena serum merupakan suatu plasma darah yang menjadi tempat sirkulasi kolesterol. Jadi, secara otomatis kolesterol pasti terkandung di dalam serum.


6/8

5/14/2018


Berdasarkan pengolahan data didapatkan kadar total kolesterol dalam darah adalah 279 mg/ml dan 267 mg/ml. Ini menandakan bahwa tingkat kolesterol dalam darah di atas batas normal yakni <200 mg/ml. Setiap orang memiliki kolesterol di dalam darahnya, dimana 80% diproduksi oleh tubuh sendiri dan 20% berasal dari makanan. Kolesterol yang diproduksi terdiri atas 2 jenis yaitu : 1. Kolesterol LDL (Low Density Lipoprotein), adalah kolesterol jahat, yang bila jumlahnya berlebih di dalam darah akan diendapkan pada dinding pembuluh darah membentuk bekuan yang dapat menyumbat pembulun darah. 2. Kolesterol HDL (High Density Lipoprotein), adalah kolesterol baik yang memiliki fungsi membersihkan pembuluh darah dari kolesterol LDL yang berlebihan. Kadar kolesterol HDL yang tinggi merupakan suatu tanda yang baik sepanjang kolesterol LDL kurang dari 150 mg/dl. 3. Kolesterol LDL sering disebut dengan kolesterol „jahat‟, karena peningkatan kadar kolesterol ini dalam darah dihubungkan dengan peningkatan resiko penyakit jantung koroner. Kolesterol LDL akan berakumulasi di dinding arteri sehingga membentuk semacam plak yang menyebabkan dinding arteri menjadi kaku dan rongga pembuluh darah menyempit. Proses ini dikenal dengan nama atherosklerosis. Kolesterol HDL sebaliknya sering disebut dengan kolesterol „baik‟ karena kolesterol HDL mencegah terjadinya atherosklerosis dengan cara mengeluarkan kolesterol „jahat‟ dari dinding arteri dan mengirimkannya ke hati. Jadi, bila kadar kolesterol LDL tinggi sedangkan kadar

kolesterol

HDL

rendah

maka

merupakan

faktor

resiko

terjadinya

atherosklerosis. Sebaliknya yang diharapkan adalah kadar kolesterol LDL rendah dan kadar kolesterol HDL yang tinggi. Secara fisiologi kolesterol penting bagi tubuh karena berfumgsi untuk membuat : 1. Hormon seks, sangat penting bagi perkembangan dan fungsi organ seksual. 2. Hormon korteks adrenal,m penting untuk metabolisme dan keseimbangan garam dalam tubuh. 3. Vitamin D, penting dalam penyerapan Ca. 4. Garam empedu, membantu usus menyerap lemak. 5. Membran sel dan lapisan luar lipoprotein.


7/8

5/14/2018


VII.

Kesimpulan

Kadar kolesterol dalam sampel serum adalah 279 mg/ml dan 267 mg/ml. VIII. Daftar Pustaka

http://www.farmasiku.com/index.php?target=categories&category_id=194

tanggal

akses(8 maret 2012 22:44) http://tech.dir.groups.yahoo.com/group/kimia_indonesia/message/13225

tanggal

akses (8 maret 2012 21:03) th

Lehninger , A. L. (2008), “Principles of Biochemistry”, 5 Ed., Worth Publisher, Inc., New York.


8/8

Kolesterol Dalam Darah

Recommend Documents