INMOVILIZACION DE ENZIMAS POR EL MÉTODO DE ATRAPAMIENTO EN AGAR
I.
INTRODUCCIÓN
La tecnología enzimática tiene como objetivo la superación de todos aquellos inconvenientes que parecen retrasar la aplicación de las enzimas en estos procesos a escala industrial, las enzimas son proteínas cuya función biológica es catalizar las reacciones que suceden en las células. Esta área tiene aplicaciones desde tiempos remotos como la fermentación, actualmente en diferentes industrias a diferentes niveles, ya que implica la utilización de sistemas enzimáticos diversos que optimizan el procesamiento en la obtención de detergente, aditivos alimenticios, productos químicos y farmacéuticos. La tecnología enzimática representa como alternativa biotecnológica basada en que las industrias desarrollen productos de calidad homogénea, aprovechen óptimamente sus materias primas, aceleres sus procesos de producción, minimicen desperdicios y disminuyan el deterioro del medio ambiente. En los últimos años, la biotecnología ha experimentado grandes avances y, paralelamente sus aplicaciones industriales en la obtención de productos químicos, en la industria alimentaria y farmacéutica. Los procesos catalizados por enzimas en la industria son cada día más numerosos, ya que presentan una serie de ventajas frente a los catalizadores convencionales no biológicos: Presentan una gran actividad catalítica; Muestran una gran especificidad de sustrato (incluso este reo selectividad y regio especificidad); Son muy activos a temperatura ambiente y presión atmosférica. A pesar de estas claras ventajas, el empleo de enzimas no se ha generalizado en los procesos químicos industriales debido a que la mayoría de las enzimas no son estables e n las condiciones de trabajo. Por otra parte al ser solubles en agua, su separación de los sustratos y productos es difícil, y por tanto, no se pueden reutilizar. Con la inmovilización de las enzimas se han podido superar estos últimos inconvenientes, permitiendo que el proceso biotecnológico sea económicamente rent able
II.
OBJETIVOS
III.
Aprender técnicas de inmovilización de enzimas y aplicar los conocimientos adquiridos para tratar las enzimas Establecer la efectividad de enzimas inmovilizadas y sin inmovilizar Determinar el tiempo de residencia del sustrato en el sistema de la enzima inmovilizada Establecer tiempos de catálisis de la enzima en cada uno de los sistemas(inmovilizada y sin inmovilización)
MATERIALES Y METODOS
cultivo de sacchromyces cereviseae (18-24 horas ) agar noble 4% aceite refrigerado a 4°C entre 30y 40 minutos baño termostático 45°C probeta pipeta vaso de precipitación
Atrapamiento en Agar-Agar
Se licuo el agar y se vertió 20 ml de ello en 20 ml de cultivo de saccharomyces cerevisae a temperatura de 45 ºC.
IV.
Posteriormente extraer con la jeringa el mezclado y por dejar caer gotas sobre el aceite refrigerado. Los pelletes formados se secó con papel bulki Luego se conservó los pellets a 4 °C para ser usado después
RESULTADOS
Produccion de pelletes por el metodo de atrapamiento en agar
Imagen: 01
Imagen: 02
Separación de los pelletes en papel bulki
V.
DISCUSION
Aunque se han desarrollado y aplicado muchas técnicas de inmovilización a numerosos enzimas, se reconoce que no existe un método universal válido para todos los enzimas en todos los casos. No obstante, gracias a toda la información disponible en la actualidad, se pueden hacer generalizaciones sobre cada método de inmovilización y así, podremos seleccionar el más adecuado para cada aplicación específica. La elección ha de tener en cuenta las condiciones de la reacción biocatalizada, el tipo de reactor que se vaya a utilizar, el tipo de sustrato que tenga que ser procesado y otros factores
VI.
CONCLUSION
VII.
La ventaja de la inmovilización es que aumenta su resistencia a la desnaturalización haciendo que su uso y a plicación se extiendan, especialmente a niveles industriales. Se conoció uno los principales métodos para inmovilización de enzimas. enzimas. Se aprendió a trabajar con uno de los métodos de inmovilización de enzimas. Se logró inmovilizar a las enzimas con un método tradicional, las cuales a estas condiciones lograron consumir el sustrato(azúcar) hasta dejarlo a un nivel constante
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICOS http://farmacia.ugr.es/ars/pdf/125.pdf(12/11/14) http://ri.ues.edu.sv/6058/1/10102929.pdf(12/11/14) 1. López, E., 1999. Tratamientos Tratamientos enzimáticos en la Industria. UNED pp 23-40. http://www.ciiq.org/varios/peru_2005/Trabajos/I/2/1.2.11.pdf(12/11/14)
ANEXOS Atrapamiento Consiste en la retención física de la enzima en las cavidades interiores de una matriz sólida porosa constituida generalmente por prepolímeros fotoentrucruzables o polímeros del tipo poliacrilamida, colágeno, alginato, carraginato o resinas de poliuretano. El proceso de inmovilización se lleva a cabo mediante la suspensión de la enzima en una solución del monómero. Seguidamente se inicia la polimerización por un cambio de temperatura o mediante la adición de un reactivo químico. El atrapamiento puede ser en geles o en fibras, que suelen ser más resistentes que los geles. En el primer caso, la enzima queda atrapada en el interior de un gel, mientras que en el segundo caso la enzima se encuentra ocluida dentro de las microcavidades de una fibra sintética. El atrapamiento, de gran sencillez desde el punto de vista experimental, requiere poca cantidad de enzima para obtener derivados activos. Como ventaja adicional, la enzima no sufre ninguna alteración en su estructura. De todas formas, el atrapamiento requiere un control riguroso de las condiciones de polimerización, así como la comprobación de que la naturaleza química del proceso no altera los grupos reactivos de la proteína.
