Práctica No. 10 Prueba de inhibición bacteriana OBJETIVO: Conoce Conocerr y aplica aplicarr cada cada una de las técnicas técnicas para que nos permitan permitan poner poner a prueba prueba la inhibició inhibición n bacteriana a partir de sustancias para probar su poder antibacteriano. INTRODUI!N: Los patrones de resistencia de las bacterias intestinales cambian en respuesta a una mayor e xposición a los antibióticos o desinfectantes. La desinfección consiste en la destrucción selectiva de los organismos que causan enfermedades. No todos los organismos se destruyen durante el proceso, punto en el que radica la principal diferencia entre la desinfección y la esterilización, proceso que conduce a la destrucción de la totalidad de los organismos. n el campo de las aguas residuales, las tres categor!as de organismos entéricos de origen humano de mayores mayores consecuencias consecuencias en la producción producción de enfermedades enfermedades son las bacterias, bacterias, los virus y los quistes amebianos. Las enfermedades bacterianas t!picas transmitidas por el agua son" el tifus, el cólera, el paratifus y la disenter!a bacilar, mientras que las enfermedades causadas por los virus incluyen, entre otras, la poliomielitis y la hepatitis infecciosa. s importante que los desinfectantes sean seguros en su aplicación y mane#o, y que su fuerza o concentración en las aguas tratadas sea medible y cuantificable. Los métodos m$s empleados para llevar a cabo la desinfección son" %&' agentes qu!micos( %)' agentes f!sicos( %*' medios mec$nicos, y %+' radiación.
"1# $%ente& 'u()ico&: Los agentes qu!micos utilizados para la desinfección incluyen" • • • • • • • • • • • •
l cloro y sus compuestos l bromo l yodo l ozono l fenol y los compuestos fenólicos Los alcoholes Los metales pesados y compuestos afines Los colorantes Los #abones Los compuestos amoniacales cuaternarios l agua oxigenada cidos y $lcalis diversos.
Los desinfectantes desinfectantes m$s corrientes corrientes son los productos qu!micos qu!micos oxidantes, oxidantes, de los cuales cuales el cloro es el m$s universalmente empleado, aunque también se ha utilizado, para la desinfección del agua residual, el bromo y el yodo. l ozono es un desinfectante muy eficaz cuyo uso va en aumento, a pesar de que no de#a una concentración residual que permita valorar su presencia después del tratamiento. l agua muy $cida o muy alcalina también se ha empleado para la destrucción de bacterias patógenas, ya que el agua con p- inferior a * o superior a && es relativamente tóxica para la mayor!a de las bacterias.
"*# $%ente& +(&ico: Los desinfectantes f!sicos que se pueden emplear son" la luz y el calor. l agua caliente a la temperatura de ebullición, por e#emplo, destruye las principales bacterias causantes de enfermedades y no formadoras de esporas. l calor se suele emplear con frecuencia en las industrias l$cticas y de bebidas, pero su aplicación al agua residual no es factible debido al alto coste que supondr!a. in embargo, la pasteurización del fango es una pr$ctica habitual en toda uropa. La luz solar también es un buen desinfectante, especialmente la radiación ultravioleta. n la esterilización de peque/as cantidades de agua, el empleo de l$mparas especiales ha resultado exitoso. La eficacia de este proceso depende de la penetración de los rayos en el agua. La geometr!a de contacto entre la fuente emisora de luz ultravioleta y el agua es de gran importancia debido a que la materia en suspensión, las moléculas org$nicas disueltas y la propia agua, adem$s de los microorganismos, absorber$n la radiación. 0or lo tanto, la aplicación de la radiación ultravioleta como mecanismo de desinfección no resulta sencilla en sistemas acuosos, especialmente por la presencia de materia particulada.
",# -ecani&)o& de acción de o& de&in+ectante&: La acción de los desinfectantes se ha pretendido explicar por cuatro mecanismos" • • • •
1a/o a la pared celular 2lteración de la permeabilidad de las células 2lteración de la naturaleza coloidal del protoplasma 3nhibición de la actividad enzim$tica
l da/o o destrucción de la pared celular da lugar a la lisis celular y a la muerte de la célula. 2lgunos agentes, como la penicilina, inhiben la s!ntesis de la pared celular de las bacterias. Los agentes tales como los compuestos fenólicos y los detergentes alteran la permeabilidad de la membrana citoplasm$tica. stas sustancias destruyen la permeabilidad selectiva de la membrana y permiten que se escapen algunos nutrientes vitales, como el nitrógeno y el fósforo.
"/# Radiación l calor, la radiación, y los agentes fuertemente $cidos o alcalinos alteran la naturaleza coloidal del protoplasma. l calor coagula la prote!na celular y los $cidos o bases desnaturalizan las prote!nas, produciendo un efecto letal. 4actores que influyen en la acción de los desinfectantes" 2l aplicar los medios o agentes de desinfección descritos, se deben tener en cuenta los siguientes factores" •
• • • • •
5iempo de contacto 5ipo y concentración del agente qu!mico 3ntensidad y naturaleza del agente f!sico 5emperatura N6mero de organismos 5ipo de organismos
•
Naturaleza del medio liquido
De&in+ección de a%ua Las aguas utilizadas en los procesos productivos retornan contaminadas a los cursos de agua( en la mayor!a de los casos se deteriora su calidad para usos posteriores, inclusive la irrigación. 1ependiendo del grado de contaminación, el agua residual puede ser nociva para la vida, causando por e#emplo, la mortandad de peces. 5ambién puede producirse una liberación de compuestos vol$tiles, que provocan mal olor y sabor acentuado, y que podr!an traer problemas en una nueva operación de purificación y tratamiento del agua. eg6n el 7anco Nacional de 1esarrollo conómico y ocial 7rasile/o, el 89: de las internaciones hospitalarias de ni/os menores de &; a/os est$n asociadas a la falta de saneamiento b$sico. n los pa!ses en desarrollo, se estima que el <;: de las enfermedades y m$s de un tercio de las muertes est$n asociadas a la utilización y consumo de aguas contaminadas. La hepatitis infecciosa, el cólera, la disenter!a y la fiebre tifoidea son e#emplos de enfermedades de transmisión h!drica, que representan un serio problema de salud p6blica. Las enfermedades infecciosas son transmitidas primariamente por la contaminación de las fuentes de agua con deposiciones de animales, las cuales pueden ser agentes muy activos para el transporte de enfermedades. l uso de tales aguas para beber o cocinar, el contacto con la misma durante ba/os, o la inhalación de peque/as gotitas %aerosoles' pueden resultar en infecciones. La desinfección de aguas de abastecimiento se define como el proceso integrante de una estación de tratamiento de agua que tiene como ob#etivo la inactivación de microorganismos presentes en el medio, minimizando la probabilidad de transmisión h!drica de enfermedades, y el mane#o del agua tratada.
Tio& de )icroor%ani&)o& e reconoce que el agua es uno de los principales veh!culos transportadores de microorganismos causante de enfermedades provenientes del aparato digestivo del hombre y de otros animales. Las coliformes fecales son un grupo grande de microorganismos, habitantes usuales de los intestinos de los animales superiores. stos microorganismos son de f$cil identificación comparados con los microorganismos patógenos, que normalmente se encuentran en mucho menor n6mero y cuya identificación es laboriosa. La presencia de coliformes en una muestra no siempre indica que el agua est$ contaminada con microorganismos patógenos, sino que, en términos estad!sticos, su concentración puede y debe servir como par$metro para alertar sobre la existencia de contaminación fecal y de microorganismos patógenos. Los microorganismos patógenos est$n relacionados con enfermedades espec!ficas de transmisión h!drica. La fiebre tifoidea, las fiebres paratifoideas, la disenter!a bacteriana y el cólera son causadas por bacterias, la amibiosis o disenter!a amebiana por protozoarios, la esquistosomosis por gusanos %helmintos' y larvas, en tanto que ciertos virus originan la hepatitis infecciosa y la poliomielitis.
-$RO TE!RIO l termino muerte se define en microbiolog!a como la perdida irreversible de la capacidad de reproducción. Los microorganismos viables tiene la facultad de multiplicarse( en cambio los muertos no se desarrollan ni se multiplican. 0ara determinar la muerte se requiere técnicas de laboratorio que rebelen el crecimiento cuando se siembra la muestra en medio del cultivo l!quidos o sólidos. C=N13C3=N >? 2CC3@N N L2 2CC3=N 2N53A3CB=732N2 n la aplicación de un agente f!sico o qu!mico usando para inhibir o destruir poblaciones microbianas, es necesario valorar cada situación por separado para seleccionar el método que ha demostrado el resultado deseado A5=1=1 2CC3@N 1 L= 2DN5 A3CB=732N= Los muchos procedimientos y sustancias usadas como agentes antimicrobianos manifiestan su actividad de diferentes modos, por ellos es importante saber cómo se inhiben o matan los microorganismos. Conocer la manera de actuar de un agente en particular, hace posible predecir las condiciones ba#o las cuales lo ara me#or, as! como la clase de microorganismos contra los cuales ser$ m$s eficaz. l da/o de estas estructuras inicia las alteraciones que llevan a la célula a la muerte. s necesario tomar en cuenta que hay muchos sitios vulnerables de la célula y que el da/o lo causa una o m$s de una, variedad de agentes. 2L5B2C3@N 1 L2 0BA273L3121 CL?L2 La membrana citoplasm$tica preserva la integridad de los constituyentes celulares y tiene a su cargo el transporte selectivo de nutrientes al interior de la célula. 1el da/o de esta membrana resulta de una inhibición del desarrollo y la muerte celular. La actividad antimicrobiana de los compuestos fenólicos, detergentes sintéticos, #abones y compuestos cuaternarios y amonio se atribuyen a sus afectos sobre la permeabilidad celular. stas sustancias anulan la permeabilidad selectiva de la membrana, permitiendo la salida de los constituyentes celulares. 3N-373C3@N 1 L2 2CC3@N NE3A53C2 Cada uno de los cientos de enzimas que hay en una célula es un banco potencial para un inhibidor. La disminución de las reacciones que suministran energ!a son particularmente da/inas( mucho agentes afectan enzimas que son v!as claves, como el sistema glucol!tico, el ciclo de Frebs y el sistema del citocromo. Los agentes oxidantes fuertes, como los halógenos y el peróxido de hidrógeno llegan a da/ar tanto a los constituyentes celulares que éstos ya no pueden afectar sus funciones metabólicas normales.
3N-373C3@N 1 L2 GN53 1 C31= N?CL3C= xisten sustancias qu!micas sintéticas y otras naturales que son inhibidores as poderosos de la s!ntesis de BN2 y de 1N2. -ay dos categor!as de sustancias que inhiben la s!ntesis del $cido nucleico" a' compuestos que infieren con la formación de los bloques estructurales de los $cidos nucleicos y b' compuestos que infieren con la polimerización de los nucleótidos en $cido nucleico. l papel vital del 1N2 y del BN2 en los procesos normales de la ida de la célula se/ala que toda interferencia con su formación y su función ha de da/ar gravemente a la célula.
1. -ecani&)o& de acción de de&in+ectante& onencionae& Aecanismos de acción del cloro La capacidad germicida del cloro se basa en que puede penetrar la pared celular, alterar funciones espec!ficas de las prote!nas e inhibir procesos metabólicos de bacterias y virus. 2lgunos grupos de par$sitos son resistentes al cloro, como los quistes de protozoarios Cryptosporidium parvum y Giardia lamblia , para los cuales se han aplicado dosis hasta de <; mgHL por &); min para lograr sólo * unidades de inactivación. 0or lo que respecta a su capacidad ovicida sobre los huevos de helmintos, los compuestos de cloro no son efectivos para inactivarlos, ni con &;,;;; mgHL de cloro Aecanismos de acción de la luz ?I l blanco principal de la desinfección mediante la luz ultravioleta es el material genético. Los microorganismos son destruidos por la radiación ultravioleta cuando la luz penetra a través de la célula y es absorbida por dicho material genético, lo que provoca una reordenación de la información genética, que interfiere con la capacidad reproductora de la célula y por consiguiente los microorganismos son inactivados m$s que destruidos. i bien el empleo de radiaciones ?I ha sido efectivo para eliminar bacterias y algunas esporas y quistes, no lo espara los huevos de helmintos. Aecanismos de acción del ozono l ozono es un oxidante muy fuerte y germicida de virus, bacterias, protozoarios y huevos de helmintos %aunque éstos 6ltimos con dosis muy altas'. Los mecanismos de desinfección asociados con el uso del ozono incluyen" La oxidación o destrucción directa de la pared de la célula con la salida de componentes celulares. l da/o a los componentes de los $cidos nucléicos %purinas y pirimidinas'. La ruptura de las uniones de carbonoJnitrógeno que conduce a la despolimerización.
*. -ecani&)o& de acción de de&in+ectante& no conencionae& Los sistemas de filtración tienen la venta#a de no causar alguna alteración en el agua ni producir compuestos secundarios que afectan a los seres vivos pero sólo concentran a los microorganismos, es decir, no los eliminan por lo que en este caso el problema de la desinfección se pasa al agua de lavado de filtros, as! como a los lodos producidos. l método de sedimentación se usa exclusivamente en agua residual y por gravedad remueve huevos de helmintos con eficiencias del *;: en sedimentadores primarios y de K9 a KK : en sedimentadores ubicados después de un proceso fisicoqu!mico o tratamiento primario avanzado, no separa patógenos de menor tama/o como quistes de protozoarios, bacterias y virus. l $cido peracético es esporicida a ba#as temperaturas y adem$s, su efectividad permanece inalterable ante la presencia de alg6n material org$nico. e ha visto que es efectivo para eliminar virus, bacterias y algunos protozoarios excepto Cryptosporidium sp, Giardia sp. y huevos de helmintos.
l peróxido de hidrógeno por s! solo produce radicales libres - y =-, por lo que oxida y reduce los grupos funcionales de las enzimas, se ha visto que es efectivo para eliminar virus, bacterias y algunos protozoarios, es esporicida a ba#as temperaturas y adem$s tiene alta actividad contra bacterias Dram y Dram. Los iones plata act6an como veneno protoplasm$tico al combinarse con las prote!nas de las células bacterianas. l cobre puede trastornar la estructura enzim$tica y su funcionamiento por enlaces con el grupo sulfhidrilo de las prote!nas moleculares. Cationes divalentes como el Cu) cuando quelatan con un fosfato, pueden ocasionar concentraciones que rompen los puentes de hidrógeno que unen las bases de los filamentos de la doble hélice del 1N2. sto puede alterar el proceso de replicación de la célula *. Cinética de desinfección n todos los casos se debe obtener una dosis para poder hacer una comparación entre la dosis, el tiempo de contacto y la reducción logar!tmica necesaria de cada desinfectante que act6e sobre determinado microorganismo. Las dosis necesarias para inactivar microorganismos var!an significativamente de un desinfectante a otro, incluso entre microorganismos al aplicar un mismo desinfectante #emplos Aodo de acción A Virus Bacterias Protozoarios HH
-ETODO2O34$: -edio& de cutio 5 reactio& $%ar -ueer 6inton. Prearación de $%ar -ueer 6inton 0reparar el medio a partir de la base deshidratada de acuerdo a las indicaciones del fabricante. sterilizar en autoclave y de#ar enfriar en ba/o de agua hasta que alcance los +9MC J 9;MC y verter en placas 0etri. Prearación de e&tándar "078 -c. 9arand# ara e inócuo: 0ara estandarizar la densidad del inóculo se usa una suspensión de sulfato de bario %;,9 de la escala de Aac 4arland' como est$ndar. Prearación de e&tándar de turbide: J2gregar ;,9 ml de una solución de 7aCl ) ;,;+< A a KK,9 ml de una solución de - )=+ ;,&< A en constante movimiento para mantener la suspensión. J 1istribuir de + ml a 8 ml en tubos con tapa de rosca, similares a los que se usar$n para preparar el inóculo. J 2#ustar bien las tapas o tapones y conservarlos en la oscuridad a temperatura ambiente y anotar la fecha de preparación. J 2ntes de ser usado agitar vigorosamente dicho est$ndar de preferencia, en un agitador mec$nico. J Ierificar mensualmente la densidad de los est$ndares de sulfato de bario, y reemplazarlo cuando sea necesario. Prearación de inócuo: 0uede realizarse de dos formas" 2. Aétodo de desarrollo previo a. eleccionar cuatro a cinco colonias bien aisladas, del mismo tipo morfológico, de un cultivo en placa. b. 5ocar la superficie de cada colonia con un asa de siembra y transferirlo a un tubo que contiene de + a 9 ml de caldo apropiado. c. 3ncubar el caldo a una temperatura entre *9MC a *MC, hasta que alcance o exceda la turbidez del est$ndar ;,9 de la escala de Ac. 4arland. d. 2#ustar la turbidez del inóculo con solución salina o caldo apropiado hasta el tubo ;.9 de la escala de Ac. 4arland, por comparación visual con el est$ndar. 0ara realizar este paso correctamente usar una luz apropiada y mirar los tubos contra un fondo blanco con l!neas negras como contraste. e. La suspensión preparada contendr$ aproximadamente & a ) x &; < ?4CHmL para E. coli 25CC )9K)). 7. Aétodo directo de inoculación a partir de colonias aisladas a. 1e una placa de cultivo con agar no selectivo e incubada por &< J )+ h, seleccionar colonias aisladas y preparar una suspensióm directa en solución salina ó caldo. b. La suspensión debe ser inmediatamente a#ustada a la escala ;,9 de Ac. 4arland.
. Inocuación de a& Paca& a. 1entro de los &9 minutos siguientes al a#uste de la turbidez del inóculo, sumergir un hisopo estéril en la suspensión, rotar el hisopo varias veces presionando firmemente sobre la pared interior del tubo por encima del nivel del l!quido para remover el exceso de inóculo. b. 3nocular la superficie seca de la placa de Aueller -inton, estriando con el hisopo en tres direcciones para asegurar una distribución uniforme del inóculo. 2ntes de colocar los discos de#ar secar la placa a temperatura ambiente durante * a 9 minutos para que cualquier exceso de humedad superficial sea absorbido.
$icación de o& di&co& a. Colocar los discos individuales o multidiscos sobre la superficie del agar con la ayuda de una pinza estéril o la punta de una agu#a presionando suavemente sobre cada disco para asegurar un contacto completo con la superficie del agar. b.1istribuir los discos uniformemente, de modo que estén a una distancia m!nima de 9; mm uno del otro %el di$metro de los discos seg6n las normas de la =rganización Aundial de la alud %=A' debe ser de 8 mm'. No deben colocarse m$s de &) discos en una placa de &9; mm, ni m$s de 8 en una placa de &;; mm de di$metro interno, para evitar la superposición de las zonas de inhibición. ?n disco no debe ser removido una vez que tomó contacto con la superficie del agar debido a que algunos antibióticos se difunden r$pidamente.
Incubación a. 3ncubar lar placas en posición invertida a *9MC dentro de los &9 minutos posteriores a la aplicación de los discos. b. 1espués del tiempo recomendado de incubación examinar cada placa y medir los di$metros de los halos de inhibición alrededor de cada disco. Lectura de las placas e interpretación de los resultados a. Aedir los di$metros de las zonas de inhibición completa %incluyendo el di$metro del disco', usando una regla o calibrador. e debe mantener iluminada la parte posterior de la placa petri con una luz refle#ada localizada a unos cuantos cent!metros sobre un fondo negro. b. l punto final debe tomarse como el $rea que no muestra un crecimiento obvio, visible, que puede ser detectado mediante observación visual, no incluyendo velo de crecimiento o colonias muy peque/as que puedan ser detectadas solo con mucha dificultad en el borde de la zona. c. Los di$metros de inhibición son interpretados bas$ndose en lo siguiente" la sensibilidad de la cepa bacteriana ser$ reportada como sensible %', intermedio %3', o resistente %B'.
Princiio de );todo: laborar una suspensión bacteriana con base en el est$ndar ;.9 de Aac 4arland, sembrar masivamente en un medio de prueba y colocar los discos impregnados con las soluciones inhibidoras que se desea poner a prueba su capacidad inhibidora del crecimiento microbiano. -acer una interpretación de los resultados en función a los siguientes par$metros" ensible %halo de inhibición de aproximadamente )+mm', 3ntermedio %halo de inhibición de aproximadamente &9mm' y Besistente %no hay halo de inhibición'.
-ateriae&7 e'uio& 5 reactio& -ateriae& ara a rearación de a& &oucione& 5 )edio de cutio: 1 arria 1 e&átua * )atrace& eren)e5er de *80 ) * )atrace& a+orado& de 100 ) 1 )atrá de *00 ) 1 )atra a+orado de 80 ) 1 aria de idrio 1 robeta de 100 ) 1 baana %ranataria / tubo& de 1, < 100 )) 1 %radia 1ieta de 1 ) 1 ieta de 8 ) 1 eria * a&o& de reciitado& de *00 ) * hi&oo& e&t;rie& Pee +itro ara a eaboración de o& &en&idi&co& 1 ina ara coocar o& &en&idi&co& 1 )echero 1 arria 1 órte<
E&tándare& de )etae& e&ado& a 1000 ) "Po)o7 $r -ercurio 5 ro)o# ?oución con 6 , ?oución con 6 / -edio& de cutio: $%ar -ueer 6inton $%ar -ac one5 ado Tritica&a de ?o5a
Reactio&: $coho oruro de Bario " Ba *# =cido &u+>rico "6*?O/# oruro de &odio "Na#. Prearar co)o &oución &aina i&otónica. Soluciones inhibidoras:
Per)an%anato de Pota&io a *@7 A-nO/ 9eno a 8@ ?oución de hiocorito de &odio a 1,@7 NaO. 2u%o
-ateria or e'uio: erio& 1 re%a Pae )ania 1 9ra&co %rande ara )ue&trear 8 +ra&co& e'ueCo& -a&in% tae 9ranea aa& Petri -ateria Indiidua ubreboca& 3uante& Bata banca 5 anchada7 con todo& o& botone& $&a bacterioó%ica
Procedi)iento &. 0reparar el nefelómetro ;.9 de Aac 4arland ). 0reparar los medios de cultivo Aueller -inton *. 0reparar la solución salina fisiológica estéril %NaCl" <.9 g en un litro de agua destilada', colocar 8 ml en tubos de ensayo y esterilizar. +. 0reparar el inóculo. 9. embrar masivamente con hisopos estériles en el medio de Aueller -inton 8. Colocar los sensidiscos %previamente esterilizados' impregnados con las soluciones a probar, usar un sensidisco por cada solución a probrar, y colocar en la placa. . 3ncubar por )+ h a *9MC <. Bealizar la lectura utilizando una regla para medir halos de inhibición. Ob&eracione&: Para llevar a cabo cada una de nuestras pruebas se hizo uso de los siguientes productos: a) Fabuloso. Desinfectante . b) Clarasol . c) !ab"n antibacterial . d) Pinol. Cada uno de ellos con diferentes caracter#sticas f#sicas $ %u#&icas'
Re&utado&
Paca No. 1
Paca No.*
Paca No.,
ustancias a'4abuloso b'Clarasol c'Oabón antibacterial d'0inol
0laca No. &
0laca No. )
0laca No. *
Solución desinfectante
Tamaño del diámetro
Inhibición
A
Fabuloso
(. &&
*esistente
B
Clorale+
,. c&
-ensible
C
!ab"n l#%uido para &anos
c&
/ediana&ente sensible
D
Pino
(.0 c&
*esistencia
$nái&i& de re&utado&
oncu&ione&: Las condiciones de salud de población est$n determinadas por el control de poblaciones de microorganismos. la purificación del agua y preservación de alimentos son algunos métodos. 5odo ello permite prevenir la trasmisión de infecciones y enfermedades. 0or lo cual es de suma importancia la eliminación o inhibición de microorganismos por medio de agentes f!sicos o qu!micos. Los procedimientos son muy espec!ficos sin embargo son de suma importancia para el control de infinidad de enfermedades. 2dem$s que el uso adecuado de estos es un factor que influye al igual en el cuidado propio y de la sociedad en general.
ue&tionario: &. >ué es un halo de inhibiciónP
Eona alrededor de un disco de antibiótico en un antibiograma en el que no se produce crecimiento bacteriano en una placa de agar inoculada con el gérmen. s una medida de la potencia del antibiótico frente al gérmen ). Cu$les son las caracter!sticas del medio Aueller -intonP 7a#a concentración de inhibidores, condición cr!tica para evaluar sulfonamidas, trimetoprim y tetraciclina. l crecimiento satisfactorio de patógenos no exigentes. xistir ya gran experiencia en estudios de susceptibilidad *. Cu$l es la función de la solución salina fisiológicaP l CL=B?B= 1 =13= es la sal principal usada para producir iones de sodio.
+. >ué significa CA3 %concentración m!nima inhibitoria' Corresponde a la concentración m$s débil de un antibiótico capaz de inhibir el crecimiento visible de una cepa bacteriana al cabo de &< Q )+ horas de incubación.
Bibio%ra+(a &. Aicrobiolog!a. Aichael O. 0elczar, Or. Boger 1. Beid. dit. AcDraRJ-ill ). 7iolog!a celular. structura, bioqu!mica y función. heeler. ditorial Limusa. *. 7iolog!a de los microorganismos. 5homas 1. 7rocS, Aadigan, AartinSo, 0arSer. dit. 0renticeJ -all
$NEO? 32O?$RIO: De1niciones $ abreviaturas: Para los prop"sitos de la presente pr2ctica' $ a &anera de repaso de conceptos se aplican las siguientes de1niciones: Antibiótico: Agente biol"gico o %u#&ico %ue inhibe el creci&iento de los &icroorganis&os. Bioseguridad: Con3unto de &edidas preventivas para proteger la salud $ la seguridad hu&ana $ del a&biente' frente a diferentes riesgos producidos por agentes biol"gicos' f#sicos' %u#&icos o &ec2nico. Cepa: Cultivo puro for&ado por bacterias descendientes de un solo aisla&iento. Colonia: Creci&iento visible bacteriano' general&ente en &edios s"lidos' originada por la &ultiplicaci"n de una sola bacteria pree+istente. Concentraci"n inhibitoria &#ni&a 4C5/): Corresponde a la concentraci"n &2s d6bil de un antibi"tico capaz de inhibir el creci&iento visible de una cepa bacteriana al cabo de 78 9 horas de incubaci"n. Crioconservación: Congela&iento $ al&acena&iento de c6lulas vivas a &u$ ba3as te&peraturas Disco de sensibilidad: Discos i&pregnados con alg;n anti&icrobiano usados para deter&inar la susceptibilidad anti&icrobiana por disco difusi"n.
scala de !c" #arland: rganis&o %ue crece $ se reproduce &e3or en la presencia de una tensi"n de 0? de o+#geno' 7(? de anh#drido carb"nico $ 80? de nitr"geno. &egistro: Docu&ento %ue provee evidencias ob3etivas de las actividades efectuadas o de los resultados obtenidos.
