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CURSO:
FARMACOLOGIA GENERAL Y ESPECIALIZADA INFORME:
FARMACOLOGIA DEL SISTEMA NERVIOSO AUTONOMO
2 ÍNDICE INTRODUCCION ............................................................................................................................. 3 I.
MARCO TEORICO ................................................................................................................... 4 SISTEMA NEVIOSO AUTONOMO ............................................................................................... 4 Función Simpática: ................................................................................................................ 4 Función Parasimpática: ......................................................................................................... 4 RECEPTORES DEL SNA ............................................................................................................... 5 A.
RECEPTORES COLINERGICOS: ........................................................................................ 6
II.
Los sistemas simpático y parasimpático. ...................................................................... 7
Acetilcolina como Neurotransmisor.......................................................................................... 7 FARMACOLOGIA DE ATROPINA................................................................................................. 7 FARMACOLOGIA DE LA NEOSTIGIMINA .................................................................................... 8 RECEPTORES ADRENERGICOS: .................................................................................................. 9 1.
Los receptores a1 adrenergicos .................................................................................... 9
2.
Receptores a2- adrenergicos: ..................................................................................... 10
Receptores a2 presinapticos: ................................................................................................. 10 Receptores b-adrenérgicos: .................................................................................................... 10 Receptores b1 ..................................................................................................................... 10 Receptores b2. .................................................................................................................... 11 FARMACOLOGIA DE LA ADRENALINA ..................................................................................... 11 SOLUCION DE KREBS HENSELEIT ............................................................................................. 11 III. MATERIAL .............................................................................................................................. 12 III. V.
PROCEDIMIENTO ............................................................................................................. 13 DISCUSION DE RESULTADOS
............................................................................................... 16
VI.
EXPLICACIÓN DE LOS RESULTADOS................................................................................. 17
VII.
BIBLIOGRAFIA: ................................................................................................................. 19
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INTRODUCCION En el cuerpo humano tenemos diferentes tipos de musculo, uno de ellos es el musculo liso que lo podemos encontrar en el estómago o intestino y se dividen en musculo liso unitario y musculo liso multiunitario. El musculo liso unitario, se dispone en grandes conjuntos laminares de fibras acopladas eléctricamente mediante uniones comunicantes. Por tanto están agrupadas eléctricamente en haces formados por unidades funcionales, lo que permite que los PA pasen de unas a otras generando una onda de contracción que viaja a lo largo de las células y se contraen de forma coordinada como si se tratara de una sola unidad. El musculo liso multiunitario está formado por células individuales, sin uniones comunicantes entre ellas o muy escasas; multiunitario quiere indicar que las células musculares actúan de forma independiente a su vecina. A nivel de músculo liso también tenemos varios factores que contribuyen a su contracción y a su relajación, y entre ellos tenemos a los neurotransmisores, como lo son la noradrenalina y la acetilcolina Y receptores específicos, que pueden ser de dos tipos: receptores adrenérgicos alfa o receptores beta. Los receptores alfa intervienen en la relajación intestinal, la vasoconstricción y la dilatación de las pupilas. La acetilcolina es un agonista de receptores muscarínicos y nicotínicos. El Nicotínico es un receptor preganglionar, y no se encuentra en el íleon, sino en el ganglio donde sinaptan las neuronas que inervan el intestino. Esto quiere decir que mientras que el órgano Aislado (sin inervación) no responde a la estimulación del receptor nicotínico, en el animal Entero, esta estimulación sí provocaría respuesta. ACh hace que los músculos de los órganos digestivos se contraigan con más fuerza y empujen mejor los alimentos y líquidos a través del tracto digestivo. La atropina es una droga anticolinérgica natural compuesta por ácido trópico y tropina, una base orgánica compleja con un enlace ester. Parecida a la acetilcolina, las drogas anticolinérgicas se combinan con los receptores muscarínicos por medio de un lugar catiónico. Las drogas anticolinérgicas compiten con la acetilcolina en los receptores muscarínicos, localizados primariamente en el corazón, glándulas salivales y músculos lisos del tracto gastrointestinal y genitourinario. Las drogas anticolinérgicas actúan como antagonistas competitivos en los receptores colinérgicos muscarínicos, preveniendo el acceso de la acetilcolina. Esta interacción no produce los normales cambios en la membrana celular que son vistos con la acetilcolina. Una parte importante de nuestra formación y práctica clínica consiste en adquirir conocimientos y habilidades para manejar o utilizar los efectos que tienen sobre el SNA la gran diversidad de fármacos existentes, todo esto en diversas condiciones pato fisiológicas. El éxito de cualquier acto farmacológico depende en gran medida del
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mantenimiento de la homeostasia, que refleja en gran medida el estado y la función del SNA.
I.
MARCO TEORICO SISTEMA NEVIOSO AUTONOMO El SNA es la parte del sistema nervioso que controla gran diversidad de funciones viscerales del organismo y su función es la de mantener la compleja homeostasia del organismo en respuesta tanto a las alteraciones del medio interno como a los estímulos exteriores; llega virtualmente a todas las partes del organismo, afectando directa o indirectamente a todos los órganos y sistemas. El SNA forma el soporte visceral para el comportamiento somático ajustando el organismo anticipadamente para responder al estrés y su actividad ocurre de forma independiente de la voluntad. Tiene un control parcial sobre la tensión arterial, la motilidad y secreciones gastrointestinales, el vaciamiento de la vejiga urinaria, la sudoración, la temperatura corporal, la regulación del músculo cardíaco, del músculo liso y muchas otras funciones viscerales del organismo. Una de las características más llamativas es la rapidez y la intensidad con la que puede cambiar las funciones viscerales. Por ejemplo, en 3 a 5 segundos, puede duplicar la frecuencia cardiaca, y en 10 a 15 segundos la tensión arterial. Función Simpática: Los efectos más importantes del SNS están relacionados con la circulación y la respiración. La estimulación adrenérgica produce un aumento del gasto cardíaco, así como una broncodilatación. Se inhiben las secreciones gastrointestinales y se estimula el metabolismo en general. El SNS juega un papel fundamental en la preservación del organismo, ya que ocasiona de forma rápida y muy efectiva una respuesta a estímulos exteriores que puedan amenazar la integridad del indivíduo. Función Parasimpática: La activación del sistema parasimpático está orientada, al contrario de la del simpático, a la conservación de la energía. La estimulación del SNP produce una disminución de la frecuencia cardíaca y de la velocidad de conducción auriculo-ventricular. Origina constricción del músculo liso con afectación bronquial, miosis, etc. Los signos de descarga parasimpática son: náusea, vómito, movimientos intestinales, enuresis, defecación. También origina un aumento de las secreciones.
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La integración de la actividad del SNA puede ocurrir a todos los niveles del eje cerebroespinal. La actividad eferente puede ser iniciada a nivel de la medula espinal, tronco encefálico e hipotálamo. El principal centro esta localizado en el hipotálamo. Las funciones del SNS están controladas por el núcleo posterolateral del hipotálamo. La estimulación de este núcleo, resulta en una descarga masiva del sistema simpático. Las funciones del SNP están controladas por los núcleos medios y parte del anterior del hipotálamo. La regulación de la temperatura depende del núcleo anterior del hipotálamo; el núcleo supraoptico del hipotálamo esta relacionado con la regulación del metabolismo del agua y está anatómica y funcionalmente unido a la hipófisis posterior. Esta conexión entre la neurohipófisis, el hipotálamo y el centro del SNA afectan al riñón a través de la hormona antidiurética y el control a largo plazo de la tensión arterial, bien como las reacciones físicas a las emociones y al estrés, el sueño y los reflejos sexuales. En el tronco encefálico y en las amígdalas cerebrales están localizados los centros de respuesta aguda del SNA. En conjunto integran los ajustes hemodinamicos momentáneos y mantienen la automaticidad de la ventilación. La integración de los impulsos aferentes y eferentes a este nivel es responsable por la actividad tónica que presenta el SNA, siendo la resistencia vascular periférica y por tanto la tensión arterial resultado de este tono. Esta actividad basal del SNA mantiene los órganos viscerales en un estado de actividad intermedio que puede aumentar o disminuir. El núcleo del tracto solitario localizado en la medula, es la zona donde llegan la información de los quimio y baroreceptores a través de los nervios glosofaríngeo y vago. El sistema nervioso autónomo periférico es el componente motor eferente del SNA y se divide en dos partes: Sistema Nervioso Simpático y el Sistema Nervioso Parasimpático. Así, el sistema nervioso autónomo, esta dividido de forma natural en dos partes complementarias, con anatomía, fisiología y farmacología distintas. La mayor parte de órganos reciben fibras de las dos divisiones del SNA (las glándulas sudoríraparas son una excepción ya que solo están inervadas solo por fibras del SNS). Las acciones son en general, opuestas. El SNA, al contrário de lo que ocurre en el sistema nervioso somático, está compuesto por una cadena de dos neuronas (sistema bipolar), desde el SNC hasta el órgano donde se producirá el efecto. La primera neurona de ambos sistemas, simpático y parasimpático, tiene origen en el SNC, pero no realiza sinapsis directa con el órgano efector, sino que transmite el impulso hasta una 2ª neurona denominada postganglionar; la sinapsis ocurre a nivel de unas estructuras denominadas ganglios autónomos, en el SNS o en la pared del mismo órgano, en el caso del SNP. Así, las vías motoras, aferentes de las dos divisiones del SNA consisten, en una cadena de dos neuronas, la neurona preganglionar y la neurona postganglionar efectora. Las preganglionares son mielinizadas con velocidad de conducción del impulso de 3-15 m.s-1. Las postganglionares son no mielinizadas de conducción lenta (<2 m.s -1). RECEPTORES DEL SNA
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Los neurotransmisores consiguen un determinado efecto, interactuando a nivel sináptico con los receptores del SNA. Estos receptores del SNA se dividen en Colinergicos y Adrenergicos. Se pueden encontrar localizados en la membrana presináptica y/o en la postsináptica.
A. RECEPTORES COLINERGICOS: Se dividen en muscarinicos y nicotinicos; el nombre deriva de la estimulación selectiva de estos receptores por la muscarina y por la nicotina respectivamente. Receptores muscarinicos: localizados en las sinapsis de las neuronas postganglionares del sistema nervioso parasimpático. La estimulación de los receptores muscarinicos ocasiona bradicardia, inotropismo negativo, broncoconstricción, miosos, salivación, hipermotilidad gastrointestinal y aumento de la secreción gástrica. La atropina es el prototipo de bloqueante muscarinico. También pueden ser encontrados a nivel presináptico de las terminaciones nerviosas del SNS (receptores muscarinicos adrenérgicos) y su estimulación disminuye la liberación de noradrenalina de a forma similar al efecto a2.
Agonistas muscarínicos directos:
Esteres de colina: Acetilcolina, Metacolina, Carbamilcolina estimulan receptores muscarinicos y nicotinicos. Alcaloides: Muscarina, Betanecol, Pilocarpina, Arecolina que estimulan receptores muscarinicos.
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Agonistas muscarinicos indirectos:
Anticolinesterásicos: Reversibles Fisiostigmina, Neostigmina, Piridostigmina, Edrofonio,Ecotiopato. Irreversibles: Organos fosforados (paration, malation). Antagonistas muscarinicos:
Atropina, Escopolamina, Glicopirrolato, butil bromuro de hioscina I.
II.
Receptores nicotinicos: se encuentran en las sinapsis entre las neuronas pre y ostganglionares tanto del sistema simpático como del parasimpático. Así, las sustancias que estimulan los receptores nicotinicos, excitan las fibras postganglionares de ambos l Los sistemas simpático y parasimpático . La unión neuromuscular contiene receptores nicotínicos pero que son de un tipo diferente. Acetilcolina como Neurotransmisor La síntesis de AC tiene lugar en las varicosidades citoplasmáticas de las terminaciones neriosas parasimpáticas pre y postganglionares. La combinación de colina con la AcetilCoA, se realiza a través de la acetil-colina-transferasa. La colina entra a la terminación nerviosa a partir del espacio extracelular, mediante un transporte activo y la Acetil-CoA se sintetiza en las mitocondrias que se encuentran en las terminales nerviosas. La AC se almacena en las vesículas sinápticas y se libera como respuesta a un potencial de acción. Aproximadamente unas 100 vesículas se unen con la membrana y expulsan su contenido al espacio sináptico, de forma simultánea como respuesta al estímulo. La despolarización inicial permite la entrada de calcio iónico, que es esencial para la liberación de la AC. La AC es un éster que hidroliza espontáneamente cuando se encuentra en soluciones alcalinas, produciéndose colina y acetato, que son metabolitos inactivos. Dicha inactivación se realiza en milisegundos. La colina es reutilizada siendo transportada de forma retrógrada por la terminación parasimpática para la síntesis de nueva AC. FARMACOLOGIA DE ATROPINA La atropina es una droga anti colinérgica natural compuesta por ácido trópico y tropina, una base orgánica compleja con un enlace ester. Parecida a la acetilcolina, las drogas annticolinérgicas se combinan con los receptores muscarínicos por medio de un lugar catiónico. Las drogas anticolinérgicas compiten con la acetilcolina en los receptores muscarínicos, localizados primariamente en el corazón, glándulas salivales y músculos lisos del tracto gastrointestinal y genitourinario. Las drogas anticolinérgicas actúan como antagonistas competitivos en los receptores colinérgicos muscarínicos, previniendo el acceso de la acetilcolina. Esta interacción no produce los normales cambios en la membrana celular que son vistos con la acetilcolina. Los efectos de las drogas anticolinérgicas pueden ser superados por el aumento de la
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concentración local de acetilcolina en el receptor muscarínicos. Hay diferencias entre la potencia de las drogas anticolinérgicas (atropina, escopolamina, y glicopirrolato), que pueden ser explicadas por las subclases de receptores muscarínicos colinérgicos (M-1, M 2, M-3) y por la variación en la sensibilidad de los diferentes receptores colinérgicos. Por ejemplo los efectos de la atropina en el corazón, músculos lisos bronquiales y tracto gastrointestinal son mayores que con la escopolamina. La atropina, como la escopolamina, es una amina terciaria lípido soluble capaz de atravesar la barrera hematoencefálica y ejercer algunos efectos sobre el SNC. La vida media de eliminación de la atropina es de 2.3 horas, con solo el 18% de la atropina excretada sin cambios. La atropina parece que experimenta hidrólisis en plasma con la formación de metabolitos inactivos de ácido trópico y tropina. La duración de acción es de 45 minutos a 1 hora cuando es dada por vía intramuscular o SC, y menos cuando es dada por vía IV. Los anti colinérgicos se utilizan como medicación preoperatoria por sus propiedades antisialogogas y sedativas. Para la sedación se elige frecuentemente la escopolamina que es 100 veces más potente que la atropina en deprimir la activación del sistema reticular, también tiene propiedades amnésicas. La atropina es usada también como antiespasmódico para aliviar el piloroespasmo, la hipertonicidad del intestino delgado, la hipermotilidad del colon, la hipertonicidad del músculo uterino, el cólico biliar y ureteral y para disminuir el tono de la vejiga urinaria. Para el uso en pacientes obstétricas, la atropina se sabe que cruza la placenta, sin embargo, no parece tener efectos significantes sobre la frecuencia cardiaca. La atropina es clasificada como una droga de categoria C en el embarazo. FARMACOLOGIA DE LA NEOSTIGIMINA La neostigmina es un anticolinesterásico amonio cuaternario que actúa inhibiendo la enzima colinesterasa. El uso primario en la práctica anestésica está relacionado con la reversión del bloqueo neuromuscular producido por los relajantes neuromusculares no depolarizantes. La estructura de la neostigmina se ve más adelante. La acetilcolinesterasa, o colinesterasa, es una enzima sumamente eficiente que normalmente hidroliza la acetilcolina a colina y a ácido acético. En la unión neuromuscular esta enzima actúa fisiológicamente decreciendo la cantidad de acetilcolina presente en la vecindad de la unión. Durante el bloqueo muscular, la acetilcolina compite con una droga bloqueante neuromuscular por ocupar el receptor colinérgico nicotínico. Algunas drogas bloqueantes neuromusculares también reducen la liberación de acetilcolina presinápticamente. Ambas acciones dejan a pocas moléculas de acetilcolina que puedan actuar sobre los receptores colinérgicos, de esta forma se produce el bloqueo muscular. La neostigmina produce una inhibición de la acetilcolinesterasa mediante la formación reversible de un complejo estercarbamil en la porción ester de la parte activa de la colinesterasa. Esto aumenta los niveles de acetilcolina en la vecindad, favoreciendo la
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interacción entre la acetilcolina y el receptor consecutivamente, revertiendo el bloqueo neuromuscular. La neostigmina actúa como un inhibidor competitivo de la acetilcolinesterasa mediante un mecanismo de unión similar a la de la misma acetilcolina. Hay una transferencia subsiguiente, sin embargo, del grupo carbamato de la molécula de neostigmina a la parte ester de la acetilcolinesterasa. Tanto como esta unión se alargue, la acetilcolinesterasa es incapaz de hidrolizar su sustrato natural. La neostigmina también se piensa que tiene una acción pre sináptica, produciendo un aumento del nivel de liberación de acetilcolina. Ambas acciones tienen resultados similares, como se ha mencionado arriba. Como la acetilcolina actua dentro de la unión neuromuscular, el mecanismo competitivo por el receptor colinérgico eventualmente se inclina en favor de la acetilcolina más bien que por el relajante muscular no despolarizante. La neostigmina debe ser utilizada con precaución en pacientes con asma bronquial, bradicardia, oclusión coronaria reciente, vagotonía, hipertiroidismo, arritmias cardiacas, o ulcus péptico. RECEPTORES ADRENERGICOS: se dividen en a, B y dopaminérgicos. Receptores a-adrenérgicos: existen dos tipos a1 y a2.
1. en:
Los receptores a1adrenergicos: son receptores postsinápticos y se encuentran
a) Músculo liso vascular, iris, uréter, pilomotor, útero, trígono vesical, gastrointestinal y esfínteres vesicales. Su acción en el músculo liso es de constriciion excepto a nivel gastrointestinal donde provocan relajación. En los vasos sanguíneos, coexisten en el sistema venoso y arterial pero predominan en el sistema arterial (así un fármaco agonista a1 como la metoxamina tiene un efecto predominantemente vasoconstrictor arterial). b)
Corazón (nodos SA, AV y ventrículos): efecto crono e inotropico positivo
c)
Glándulas salivales : aumento de secreción
d)
Glándulas sudoríparas : aumento de secreción
e)
TTúbulos proximales del riñón: reabsorción de sodio
f)
Metabolismo: Aumento de la glicogenolisis, glucogenesis y gluconeogenesis.
Agonistas a1: Noradrenalina, Adrenalina, Dopamina, Isoproterenol, Metoxamina Antagonistas a2: Fenoxibenzamina, Fentolamina, Alcaloides ergotamina, Prazozina, Labetalol
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2. Receptores a2- adrenergicos: Se encuentran tanto a nivel presináptico como postsináptico y están presentes en el SNA central y periférico. También están presentes en el SNP, donde ejercen una actividad moduladora del SNP, potenciando los efectos parasimpáticos. A nivel periférico los receptores a2 postsinápticos se localizan en las terminaciones nerviosas adrenérgicas y su estimulación tiene un efecto vasoconstrictor arterial y venoso, tal como sucede con la estimulación de los a1 postsinapticos; sin embargo su distribución es más importante a nivel venoso, por lo que los fármacos con efecto agonista a2 o mixto provocan una constricción venosa importante. También se encuentran en las plaquetas, tejido adiposo, páncreas y riñón y los efectos de su estimulación son respectivamente la agregación plaquetária, la inhibición de la lipolisis, la inhibición de la liberación de insulina y la inhibición de liberación de renina. La estimulación de los receptores a2 postsinapticos sistema nervioso central esta relacionada con la liberación de la hormona de crecimiento e inhibición de la liberación de la hormona antidiurética. Receptores a2 presinapticos: se encuentran distribuidos a nivel del sistema nervioso central (cerebral y medular) y a nivel en las terminaciones adrenérgicas. Su estimulación provoca una inhibición de la liberación de noradrenalina en la hendidura sináptica, funcionando como un mecanismo de feed-back negativo, del SNS. Así, la estimulación de estos receptores lleva a una reducción del influjo simpático con un aumento concomitante del parasimpático. Así, la estimulación de estos receptores provoca bradicardia, vasodilatación y efecto inotrópico negativo con disminución del gasto cardíaco e hipotensión. Su bloqueo provoca una vasoconstricción ya que se anula el efecto feed-back negativo de inhibición de liberación de noradrenalina, aumentando de esta forma el efecto adrenérgico. Es bastante probable que sea responsable también, a nivel central de efectos tan importantes en anestesiología como ansiolísis, sedación, analgesia e hipnosis. agonista a2 : Clonidina, Noradrenalina, Adrenalina, Fenilefrina. Antagonista a2: Yoimbina, fentolamina, fenoxibenzamina, labetalol. Receptores b-adrenérgicos: se dividen en dos subtipos principales b1 y b2. Receptores b1: son fundamentalmente postsinapticos y se encuentran en el miocardio en el nodo sinoauricular y sistema de conducción ventricular y son estimulados tanto por la adrenalina como por la noradrenalina. Son receptores postsinápticos y su estimulación provoca un efecto crono e inotropico positivo, bien como aumento de la velocidad de conducción. También se encuentran en el tejido adiposo y su estimulación provoca lipolisis. Agonistas b1:Isoproterenol, Adrenalina, Noradrenalina, Dopamina, Dobutamina Antagonistas b1: Acebutolol, Practolo, Propranolol, Metoprolol, Alprenolol, Esmolol.
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Receptores b2: presinápticos y postsinapticos; los presinápticos tienen un efecto opuesto a la estimulación de los a2 aumentando la liberación de noradrenalina endógena en la sinapsis, representando un mecanismo de feed-back positivo del SNS. Los postsinapticos se encuentran en el músculo liso de los vasos sanguíneos, piel, bronquios, útero, gastrointestinal, vejiga y páncreas. Son más sensibles a la adrenalina que a la noradrenalina. La estimulación de estos receptores provoca relajación del músculo liso, vasodilatación, broncodilatación, relajación uterina, etc. Se encuentran también en el páncreas endocrino, estimulando la secreción de insulina y en el hígado donde estimulan la glicogenolisis y la gluconeogénesis; en las glándulas salivares aumentan la secreción de amilasa. A nivel renal están presentes los dos tipos de receptores, predominando los b1. El efecto de la estimulación de estos receptores es el aumento de liberación de renina y los betabloqueantes inhiben esta liberación. FARMACOLOGIA DE LA ADRENALINA Catecolamina endógena. Se produce a partir de la tirosina (tirosina-dopa- dopaminanoradrenalina-adrenalina). Hay otras vías de producción, pero la antes señalada es la principal. En el adulto la adrenalina forma el 80% de las catecolaminas de la médula suprarrenal, el resto es noradrenalina. Activa receptores alfa y beta adrenérgicos. Administrado a dosis terapéuticas tiene efecto prominentemente beta, es decir: inotrópico y cronotrópico positivo, relaja la musculatura lisa del árbol bronquial, provoca vasodilatación del músculo esquelético y disminución de las resistencias periféricas. A dosis más altas, predomina el efecto alfa mimético, y hay un incremento de las resistencias periféricas. La adrenalina produce incremento en la actividad uterina, vasoconstricción uterina disminuyendo el flujo sanguíneo uterino y placentario. SOLUCION DE KREBS HENSELEIT Es una solución de perfusión que se utiliza en el estudio de órganos o tejidos in vitro en el llamado baño de órganos. Baño de órganos Son varios elementos que constituyen un sistema que intenta reproducir las condiciones físico-químicas fisiológicas necesarias para que el órgano responda: a) Copa de Tejido: Es un vaso de cristal de volumen fijo (50 ml), en el que se dispone la pieza de tejido mediante un sistema de sujeción (varilla). Esta copa se llena de solución nutricia y se sitúa inmersa en el “baño” propiamente dicho.
Recibe una entrada para aireación y una conducción regulable para el medio de incubación. Se debe comprobar que el llenado de la copa se efectúa siempre al mismo nivel. Los fármacos se administran con una pipeta o una jeringa en el interior de la copa. El volumen de solución de fármaco añadido total no debe ser superior al 10% del volumen total de la copa.
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b) Aireación: Se realiza a través de conducciones adecuadas, regulables, a partir de aireadores (aire) o botellas de gas (oxígeno o carbógeno, que contiene 95% O2 y 5% CO2). Habitualmente se utiliza carbógeno, salvo en caso de mayor requerimiento metabólico (músculo esquelético) en el que se utiliza oxígeno. Cuando el medio contiene NaHCO3 como tampón, conviene utilizar carbógeno, ya que el oxígeno puro haría perder CO2 y el pH se elevaría hasta valores mayores de 8, con el consiguiente deterioro de la actividad del órgano. c) Temperatura: El control de la temperatura se realiza mediante un “baño maría” con un termostato, en el cual se encuentra introducida la copa de tejidos. La solución nutricia se hace circular a través de un serpentín sumergido, antes de alcanzar la preparación. Se debe evitar administrar las disoluciones de fármaco aún frías. En nuestro experimento colocamos el órgano en una placa petri conteniendo la Solución de Krebs-Henseleit a temperatura ambiente, procediéndose a la eliminación del tejido superfluo y limpieza intraluminal. La solución Krebs-Henseleit, cuya composición milimolar es la siguiente: NaCl
......................118 mM KCl........
................4.75 mM NaHC
O3...................25 mM MgSO4
....................1.2 mM CaCl2...
...................1.8 mM KH2PO
4...................1.2 mM Glucosa...................11mM III. MATERIAL 1. Material biológico: 1 rata/grupo. 2. Material farmacológico: Acetilcolina, sol. 2 x 10 -4M, 2x10-5M, 2x10-6M. Neostigmina, sol. 10 -5M Atropina, sol. 10-6M. Adrenalina, sol. 2x10-3M Solución de Krebs-Henseleit
3.
Materiales: - Equipo de disección Baño para órganosaislados a 38º C Bomba de aire. Quimógrafo.
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Papel ahumado. Jeringas descartables de 1 ml. Guantes descartables. III.
PROCEDIMIENTO
1. Sacrificar a las ratas. 2. Identificar y extraer la porción terminal del íleon. 3. Colocar el órgano en una placa petri conteniendo Solución de Krebs-Henseleit a temperatura ambiente, procediéndose a la eliminación del tejido supérfluo y limpieza intraluminal. 4. Una vez limpio, se procede a cortar el segmento a montar en el baño de órganos. 5. Colocar 2 puntos opuestos de sujeción (hilo) donde uno de los cuales se fija a la parte inferior dentro del baño de órganos y el otro se acopla a la varilla que contacta con el quimógrafo. 6. La sujeción se realiza con la ayuda de una aguja; por el extremo que se unirá a la varilla que contactará con el quimógrafo se introduce el hilo pinchando tan solo una vez en el órgano de manera que el medio nutritivo pueda penetrar a la luz del íleon (pico de flauta), mientras que en el otro extremo se pincha 2 veces en el tejido, dejándose un asa de hilo antes de atarlo para no estrangular el órgano. 7. El baño de órganos debe contener solución de Krebs-Henseleit con aireación continua. 8. La preparación se deja estabilizar durante 30 minutos. 9. Una vez conseguida una línea basal estable, se puede añadir al baño 0.2 ml. de los fármacos a ensayar en el siguiente orden:
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a) Acetilcolina 2x10-6M (1) b) Acetilcolina 2x10-5M (2) c) Acetilcolina 2x10-4M (3) Renovar la solución y una vez que vuelve a su estado basal, dejar estabilizar por 15 minutos d) Neostigmina 10-5M e) Acetilcolina 2x10 -6M (1)Renovar la solución y una vez que vuelve a su estado basal, dejar
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estabilizar por 15 minutos f) Atropina 10-5M g) Acetilcolina 2x10 -4M (3)Renovar la solución y una vez que vuelve a su estado basal, dejar estabilizar por 15 minutos h) Acetilcolina (1) y en el pico de contracción agregar adrenalina 2x10 -3M. Registrar la gráfica en la tabla de resultados.
IV.
RESULTADOS OBTENIDOS EN LA PRÁCTICA
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GRAFICA DE LA MOTILIDAD INTESTINAL FÁRMACO
BASAL
CAMBIO
ACETILCOLINA (1) ACETILCOLINA (2) ACETILCOLINA (3) NEOSTIGMINA ACETILCOLINA (1) ATROPINA ACETILCOLINA (3) ACETILCOLINA (3)-ADRENALINA
V.
DISCUSION DE RESULTADOS
Sabemos que la acetilcolina es sintetizada a partir de Colina y Acetil CoA, derivados del metabolismo de la glucosa a través de la enzima Colina acetiltransferasa. Cuando se une a los muchos receptores de acetilcolina de las fibras musculares, las estimula para contraerse. La acetilcolina tiene su uso también en el cerebro, donde tiende a causar acciones excitatorias. Entonces en el caso de los 3 primeros resultados podemos corroborar la acción excitatoria de la acetilcolina. Luego podemos observar que se aplicó el acetilcolina junto con neostigmina, esta es un agente colinérgico indirecto (Anticolinesterasico) pues actúa a nivel de Acetilcolinesterasa; ya que normalmente, la acetilcolina se elimina rápidamente una vez realizada su función; esto lo realiza la enzima acetilcolinesterasa que transforma la acetilcolina en colina y acetato. La inhibición de esta enzima provoca efectos devastadores en los agentes nerviosos, con el resultado de una estimulación continua de los músculos, glándulas y el sistema nervioso central. Podemos entender que al actuar bloqueando a esta enzima no va a haber degradación de la acetilcolina por ende su concentración se acumulara potenciando su efectividad (Función colinérgica aumentada). También se aplicó atropina con acetilcolina, esta primera es un antagonista de receptores muscarìnicos; y al tener su efecto sobre estos no permite que la acetilcolina su acople a
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ellos y en consecuencia no permitirá que se produzcan los efectos propios de la acetilcolina. Finalmente, se administró acetilcolina y adrenalina; esta es una catecolamina, también llamada epinefrina y suprarrenina. Actúa sobre diversos órganos y sistemas facilitando la transmisión del impulso nervioso de una fibra a otra. Se pudo observar que se produjo un efecto contrario, relajación. VI. EXPLICACIÓN DE LOS RESULTADOS. El Quirógrafo nos evidencio el registro de las contracciones peristálticas del músculo liso del intestino delgado específicamente el íleon de la rata demostrando una disminución y/o aumento del registro.
En el intestino y en particular del íleon primero se observó el movimiento peristáltico del músculo liso sin ningún tipo de fármaco administrado.
El primer fármaco utilizado fue acetilcolina , un neurotransmisor responsable de aumentar la motilidad y el tono muscular del TGI, en este caso se utilizó íleon de rata.
Se añadió tres veces acetilcolina en un intervalo de 2 minutos, cada una de ellas de mayor concentración y se pudo notar un pequeño aumento en las ondas que graficaba el quimógrafo, pero este aumento fue de muy corto tiempo, pues la acetilcolina tiene una duración de efecto muy corto, regresando así a su estado basal.
Algo muy curioso que se presentó durante todo el experimento fue el aumento de la onda cada vez que se extraía la solución de Krebs henseleit la cual contenía al órgano y posteriormente la disminución cada vez que se añadía una nueva solución al íleon.
El segundo fármaco administrado fue neostigmina y acetilcolina con intervalo de 2 minutos cada uno.
La neostigmina es un agonista colinérgico de acción indirecta, es decir no actúa en los receptores muscarinicos, sino que actúa sobre la acetilcolinesterasa, inhibiendo la degradación de acetilcolina, de esta manera la neostigmina potencia los efectos de acetilcolina, es decir aumenta la motilidad y el tono muscular del íleon. De igual manera se notó un leve aumento de las ondas de la gráfica.
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El tercer fármaco utilizado fue la atropina y la acetilcolina.
La atropina es una antagonista muscarinico por excelencia, es decir bloquea los receptores colinérgicos disminuyendo o anulando el efecto del agonista (acetilcolina) al impedir la formación del complejo agonista – receptor; en la gráfica se observa una pequeña disminución en la motilidad del íleon.
El cuarto fármaco utilizado fue acetilcolina y adrenalina.
Primero se usó la acetilcolina y se esperó que se formara en la gráfica un pico de contracción, este pico fue muy pequeño en nuestro experimento, posteriormente se añadió adrenalina que es un neurotransmisor simpaticomimético que disminuye la motilidad y el tono muscular del íleon, esto se pudo observar en la gráfica pues hubo una disminución en las ondas graficadas por el quimógrafo.
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VII.
BIBLIOGRAFIA: GUSTAV KUSCHINSKY y HEINZ LULLMANN, Manual de Farmacologia. 5ta Edicion, Editorial Martin, S.A. Barcelona, 1972. GOOMAN Y GILMAN. Las bases farmacológicas de la terapéutica. Undécima edición, pag. 33 KATZUNG, B.G. Farmacología Básica y Clínica, 10a ed. Ed. Mc Graw Hill Interamericana, 2009, 18-21 p. MANUEL LITTER, Farmacología experimental y clínica ALVARADO ALVA, JUAN C. Apuntes de Farmacologia, 8va edicion, http://www.imbiomed.com.mx/1/1/articulos.php?method=showDetail&id_revista =91&id_seccion=1130&id_ejemplar=3336&id_articulo=32458 http://www.uam.es/departamentos/medicina/farmacologia/especifica/F_General/ FG_T7d.pdf
