MANTENIMIENTO Y CALIBRACIÓN DE MICROPIPETAS Castellanos Laura; Hernández Deissy; Jaimes Jessica; Torres Erika Universidad de pamplona. Facultad de Ciencias ásicas. Departamento de !icro"iolo#$a. %amplona& 'orte de (antander. Colom"ia& )*+,. Ta"la Ta"la +. -esultados -esultados o"tenidos en la cali"racin de micropipetas micropipetas modelo %+***& %+** y %+*.
DATOS Modelo de pipeta Rango Marca Teperatura !alor " !OL#MEN
Glicerol
Agua
/-U%0 + %+***
/-U%0 ) %+**
/-U%0 1 %+*
+**2+*** µl %ipet lite +4*C *&6513
3*2+** µl %ipet lite +5*C +&**)37
,2+*µl oeco 2 /ermany +4*C +&**)7,
$%% µl
&%%% µl
'% µl
&%%
( µl
&% µl
µl
)& )* )$ )+ )( PROMEDIO DES!IIACION ESTANDAR !OL#MEN MEDIO COE,ICIENTE DE !ARIACION -./ COE,ICIENTE DE !ARIACION-N/ E)ACTIT#D -./ E)ACTIT#D-N/
171&,
++5)
,5&5
55&)
7&4
5&5
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55&1
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2*&57 +&11
DISC#SIÓN DE RES#LTADOS El uso uso ruti rutina nario rio de micr microp opip ipet etas as en los los ensa ensayo yos s de la"o la"ora rato torio rio 8ace 8ace importante el reconocimiento de las condiciones reales de las mismas al mome moment nto o de tra" tra"a9 a9ar ar&& de"id de"ido o a esto esto&& la cali cali"ra "raci cin n del del impl implem emen ento to volum:trico se convierte en una práctica importante para la o"tencin de resu result ltad ados os eac eacto tos s y preci preciso sos s en el la"o la"ora rato tori rio& o& #ara #arant ntiz izan ando do as$ as$ su
calidad. Las prue"as #ravim:tricas son el m:todo recomendado para la compro"acin del rendimiento de las micropipetas con
ue especi?ca el coe?ciente de eactitud @AEB y coe?ciente de variacin @ACB >ue estas de"en tener @!ettler Toledo& )*++B. Las micropipetas se ue aporta en la medicin de volmenes pe>ueos. %or eso es necesario veri?car estos dos parámetros pues su uso ue pierda su cali"racin& arro9ando mediciones errneas. En la cali"racin se compara el volumen real >ue dosi?ca la micropipeta contra el estándar& si la diuea se puede decir >ue esta cali"rada pero si es muy #rande entonces no lo está @%L& )**5B. %or medio del m:todo #ravim:trico se realiz el dia#nstico del estado actual de cali"racin de las micropipetas marca %ipet lite y oeco2 2/ermany& modelos %+***& %+** y %+* utilizando diue pudo darse por la necesidad de transue siempre >ue se trans?era materia de un recipiente a otro se pierden trazas de la misma >ue >uedan ad8eridas a las paredes de los recipientes. (i a esto le sumamos el 8ec8o de >ue al momento de pur#ar la micropipeta& la ue las diue la densidad y viscosidad del l$>uido es mayor >ue la del a#ua& por ende es más <ácil >ue >ueden residuos en las puntas durante la transue se o"tiene a partir de las mediciones repetidas de una ma#nitud& se ve ree9ada en el Coe?ciente de variacin @Contreras& )*+,B. Gs$ pues& podemos o"servar >ue en la micropipeta marca pipet lite& modelo %+*** con la cual se tomaron volmenes de +*** l y 1** l& los valores en porcenta9e de eactitud o"tenidos son mayores >ue los valores de tolerancia @estipulados se#n el ue su coe?ciente de variacin& ya >ue los volmenes tomados de #licerol eceden el volumen nominal& se consideran deue los valores de volumen están muy dispersos entre s$ y aun>ue no son tan le9anos del volumen nominal& la micropipeta de"e
cali"rarse. (in em"ar#o 8ay >ue tener en cuenta las caracter$sticas del l$>uido utilizado @#licerolB y el mane9o de la micropipeta por parte del manipulador ya >ue el volumen de l$>uido tomado en una punta depende del án#ulo con el >ue se su9ete la pipeta y la proue se sumer9a al tomar el l$>uido& por esto cada persona consi#ue una precisin y eactitud al#o diue ue el valor nominal pero ya >ue todos los valores están muy 9untos entre si y >ue están cerca al valor nominal& se considera >ue la micropipeta tiene "uena eactitud y precisin ya >ue tiene una m$nima desviacin sistemática y una estrec8a dispersin. %ara la pipeta modelo %+* y marca oeco2/ermany& los datos o"tenidos tanto de porcenta9e de eactitud y coe?ciente de variacin son mayores a los valores de tolerancia para los dos volmenes nominales tra"a9ados& , y +* l& siendo este ltimo el >ue presenta mayor dispersin en los valores o"tenidos& lo >ue indica una mala reproduci"ilidad. %or lo anterior la pipeta de"e cali"rarse& aun>ue teniendo en cuanta la dispersin de los valores se consideran ue #eneralmente son reutiliza"les y son sometidas a esterilizacin& por ello 8ay >ue revisarlas& ya >ue son esenciales para la eactitud de las medidas @!ettler Toledo& )*++B. Tam"i:n puede de"erse a un pro"lema con el pistn de la micropipeta el cual al parecer no su"e completamente para producir la succin del l$>uido y permitir la entrada del volumen de?nido @ Harris& )**1B.
Hay muc8os ue de"en tomarse en cuenta a la 8ora de cali"rar micro volmenes& como las condiciones am"ientales& las t:cnicas de pipeteo del operario >ue de"en ser las correctas& los instrumentos con los >ue se 8acen las prue"as& tales como la "alanza anal$tica& >ue de"en estar cali"rados @!etri& )*+,B. La precisin y eactitud >ue ten#a una micropipeta dependerá en #ran parte de la ue las manipulen de"en sa"er 8acerlo. Gdemás ya >ue las micropipetas tienen un intervalo de volumen >ue puede ser medido& su mal uso al medir cantidades de volmenes di
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