CONTROL BIOLOGICO I.
INTRODUCCIÓN
En el presente informe se experimentara con trichoderma sp. En placas Petri con alimento de PDA. Con lo cual se buscara una competencia con diferentes patógenos como son los sclerotium sp. Pero mas que todo se trabajara con sclerotium rolsfii, con el cual trichoderma competirá por espacio y por alimento y al final de 3 o 4 días obtendremos los resultados y sabremos si trichoderma logra controlar a sclerotium o si es vencido por el esclerote. Las mediciones se realizaran diariamente y con la ayuda de un plumón y regla marcaremos cuanto avanza por día y cualquier ocurrencia que pueda presentarse. En otros grupos se trabajara también con sclerotium sclerotiorum y con bacillius subtilis. En los cuales el procedimiento será el mismo, medir día a día. Pero antes de colocarlos a competir primero se prepara el PDA, luego se lleva a cámara húmeda y se comienza a colocar los antagonistas. Luego de eso se le tiene que aislar y por ultimo llevárnoslo a nuestras casas para comenzar a tomar las medidas.
II.
II.
OBJETIVO Aplicar los conceptos vertidos en las clases teóricas y analizar situaciones que pueden ocurrir a nivel de práctica. Medir la rapidez con la que se desarrolla los antagonistas.
REVISIÓN BIBLIOGRAFICA
Control Biológico De forma generalizada se admite actualmente la definición del control biológico enunciada por Baker y Cook (1974) hace más de 20 años. Según estos autores se entiende por control biológico la reducción de la densidad o de las actividades productoras de enfermedades de un patógeno o parásito, en su estado activo o durmiente, lograda de manera natural o a través de la manipulación del ambiente, del hospedero o de antagonistas del patógeno o plaga que se quiere controlar. Se trata de una definición defini ción muy amplia que abarca practicamente a todo tipo de control fuera del químico. A los efectos del presente curso utilizaremos una definición más acotada: Hablaremos de Control Biológico haciendo referencia r eferencia a la utilización de microorganismos antagonistas para el control de enfermedades, entendiéndose por antagonistas, aquellos organismos que interfieren en la supervivencia o desarrollo de los patógenos.
Mecanismos mediante los cuales los antagonistas ejercen su acción No es fácil determinar con precisión los mecanismos que intervienen en las interacciones entre los antagonistas y los patógenos sobre la pl anta o en las heridas. En general los antagonistas no tienen un único modo de acción y la multiplicidad de modos de acción es una característica a seleccionar en un antagonista. Se han descrito varios mecanismos de acción de los antagonistas para controlar el desarrollo de patógenos sobre fruta. Ellos son: antibiosis, competencia por espacio o por nutrientes, interacciones directas con el patógeno (micoparasitismo, lisis enzimática), e inducción de resistencia (Cook and Baker 1983).
Antibiosis Se refiere a la producción por parte de un microorganismo de sustancias tóxicas para otros microorganismos, las cuales actúan en bajas concentraciones (menores a 10 ppm.). La antibiosis es el mecanismo de antagonismo entre microorganismos más estudiado.
Competencia Se puede definir competencia como el desigual comportamiento de dos o más organismos ante un mismo requerimiento, siempre y cuando la utilización del mismo por uno de los organismos reduzca la cantidad disponible para los demás. Un factor esencial para que exista competencia es que haya "escasez" de un elemento, si hay exceso no hay competencia. La competencia más común es por nutrientes, oxígeno o espacio.
Interacción directa con el patógeno Existen dos tipos de interacciones directas entre los antagonistas y l os patógenos. Ellas son el parasitismo y la predación.
Parasitismo El término parasitismo se refiere al hecho de que un microorganismo parasite a otro. Puede ser definido como una simbiosis antagónica entre organismos. El parasitismo consiste en la utilización del patógeno como alimento por su antagonista. Generalmente se ven implicadas enzimas extracelulares tales como quitinasas, celulasas, b-1-3-glucanasas y proteasas que lisan o digieren las paredes de los hongos. (Melgarejo 1989, Ulhoa 1996).
Predación En el caso de la predación el antagonista se alimenta de materia orgánica entre la cual ocasionalmente se encuentra el patógeno. No ha sido un mecanismo de acción muy importante en el desarrollo de agentes de biocontrol. Los reportes más conocidos citan la presencia de amoebas en suelos supresores de enfermedades las cuales se alimentan de las hifas (cuerpos) de hongo s patógenos entre otras fuentes de alimento (Campbell 1989).
Inducción de resistencia Las plantas como otros seres vivos del planeta han pasado por un proceso evolutivo desde su aparición sobre la tierra lo que les llevó a desarrollar mecanismos de defensa muy poderosos contra sus invasores. De esta forma se acostumbra a postular que la resistencia es la regla mientras que la susceptibilidad es la excepción. Si elegimos una planta cualquiera y comparamos el inmenso número de microorganismos que existe en su entorno sobre la tierra con el limitado número de microorganismos patógenos de ella debemos concluir que esto es así. Las plantas presentan entonces mecanismos bioquímicos y físicos o estructurales de resistencia. Todos ellos gobernados genéticamente. Se puede inducir resistencia en productos cosechados mediante el uso de diferentes inductores como bajas dosis de luz ultravioleta, compuestos naturales de las plantas como quitosano (producto de la deacetilación de la qu itina), y también mediante el uso de microorganismos antagonistas. Trichoderma sp. es un hongo benéfico que se encuentra naturalmente en todos los suelos. De este hongo se aislaron varias sepas siendo la más común la Trichodermaharzianum . Comercialmente hay varios productos a base d e Trichoderma sp. que se encuentran localmente como TrichoZam, Mycobac y Promot.
Cómo Trabaja? Al aplicar este hongo a las semillas, medio de vivero, plantas en vivero, recién transplantadas o plantas establecidas, este coloniza las raíces formando una capa protectora sobre ellas con la ventaja que el hongo crece con las raíces formando una especie de guante, protegiéndolas siempre. El hongo y las raíces forman una simbiosis. El hongo se alimenta y vive del exudado que producen las raíces pero el hongo al colonizar las raíces les confiere una protección.
Esta protección la hace de tres maneras: · El primer tipo protección la logra al consumir ese exudado que liberan las raíces. Este exudado es el alimento inicial que usan los hogos patógenos para infectar la planta y muchos de estos hongos patógenos usan este exudado para encontrar las raíces que ellos infectan. · El segundo tipo de protección del Trichoderma sp. se debe a que es un hongo antagonista, por lo que cualquier hongo patógeno que atraviesa el “Guante” protector es destruido, consumiéndolo y usándolo como alimento. · El tercer tipo de protección es por exclusión. Esto es por que el Trichoderma sp. ocupa todos los espacios cercanos a las raíces dando una barrera física y excluyendode esa área a cualquier hongo patógeno que se encuentre en esos espacios.
Otros beneficios del
Trichoderma sp.
· Coloniza el suelo alrededor de las raíces (rhizosfera) ayudando a la planta en sunutrición por que vuelven los nutrientes más disponibles para la planta. · Provee una protección más duradera ya que crece con las raíces durante el ciclo de vida de la planta. (Aunque se recomienda realizar una aplicación cada 4 a 6 meses para cultivos de ciclo largo o permanentes) · Protege las raíces de infecciones secundarias. Como po r ejemplo, cuando insectos causan daños a las raíces, el Trichoderma sp. no permite que los hogos patógenos tengan acceso a estas lesiones. · Protegen de patógenos como bacterias por exclusión y por que muchas de las bacterias penetran después de daños que causan insectos, hogos o labores de campo. · · · ·
Las raíces se desarrollan más rápido. Las plantas producen sistemas radiculares más grandes. No compite por nutrientes del suelo con la planta. Ayuda a reducir el estrés de las plantas.
¿En que medio se desarrolla mejor el Trichoderma sp.?: · En suelos con pH de 4 a 8 · Temperaturas de suelo entre 48oF a 95oF ¿Que enfermedades controla el Trichoderma sp.?: · De suelo: Phythium, Rhizoctonia, Fusarium y Sclerotinia. · Del Follaje: Botrytis, Mildeu Polvoso,
Las enfermedades que controla es de manera preventiva.
El Trichoderma sp. es un organismo vivo por lo cual se debe de tener ciertos cuidados en su manejo y aplicación. · Se debe de manejar refrigerado cuando esté almacenado para no perder viabilidad de las esporas. De no ser así podría durarentre 2-3 meses, hay que recordar que amedida que pasa el tiempo pierden viabilidad las esporas. · Cuando se hace una mezcla para aplicar el producto diluido en agua no debe de estar más de 4 horas sin aplicarlo. · Se puede aplicar a las semillas con tratamiento de fungicidas como Captan, Apron y/o Demosan. · Se puede aplicar con los insecticidas y fertilizantes comunes. · Se puede aplicar con los fertilizantes en la solución arrancadora. · Si se aplica foliarmente se debe de usar un adherente el cual es indispensable con el uso de este producto. · Cuando se aplica Trichoderma sp. Foliar se debe de aplicar en horas frescas de la mañana (hasta las 9:00 o 10:00 AM) o preferiblemente en horas de la tarde (después de las 3:00 PM)
Colonia de Trichodermaspp.
Bacillus subtilis Bacillus subtilis es una bacteria Gram positiva, Catalasa-positiva, aerobio facultativo1 comúnmente encontrada en el suelo. Miembro del Género Bacillus, B. subtilis tiene la habilidad para formar una resistente endospora protectora, permitendo al organismo tolerar condiciones ambientalmente extremas. Patogénesis B. subtilis no es considerado patógeno humano; sin embargo puede contaminar los alimentos, pero raramente causa intoxicación alimenticia. Sus esporas pueden sobrevivir la calefacción extrema que a menudo es usada para cocinar el alimento, y es responsable de causar la fibrosidad en el pan estropeado.
IV.
MATERIALES Y METODOS
MATERIALES:
14 PLACAS PETRI PDA. CINTA AISLANTE Trichoderma sp. Bacillus subtilis Sclerotium rolsfsii y sclerotinia REGLA
.
METODOS: PROCEDIMIENTO a) En 14 placas Petri se sembro sclerotium r. mas trichoderma con tres repeticiones, mas testigo. b) se inocula los esclerotes de sclerotium rolfsii. c) Teniendo los siguientes tratamientos generales: T1=4 testigos absolutos T2= 4 sclerotium rofsii + trichoderma T3=4 sclerotium rofsii + basillus subtilis T4=4 Sclerotium sclerotinia +trichoderma T5=4 Sclerotium sclerotinia + basillus subtilis
V.
RESULTADOS
Estos son los crecimientos que se observaron y midieron durante 4 dias. tri 2 mm
sr 4 mm
dia 1
tri 19 mm
sr 8 mm
dia 2
tri 27 mm
sr 14 mm
dia 3
tri 31 mm
sr 16 mm
dia 4
tri 16 mm
sr 3 mm
dia 1
tri 23 mm
sr 7.5 mm
dia 2
tri 32 mm
sr 13.5 mm
dia 3
tri 36 mm
sr 16 mm
dia 4
VI.
DISCUSIONES
No se pudo contar con los datos de los demás compañeros , por mas que se les paso los datos a ellos ellos no nos entregaron los suyos y no se pudo completar el trabajo con éxito.
VII.
RECOMENDACIONES
Las pruebas no nos salieron muy bien que digamos, no hubo buen control por los feriados y por no tener el acceso al laboratorio de fitopatología,pero por lo demás estuvo bien.
VIII.
CONCLUSIONES
IX.
Se aplico los conocimientos aprendidos en clase teórica sobre el control biológico. Se tomo nota de los avances de que se notaban en la placa Petri.
BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA
www.controlbiologico.com/pp_revista_entomologia.htm www.controlbiologico.com/bp_aplicacion_trichobiol.htm www.infoagro.com/.../microorganismos_beneficiosos_cultivos.htm www.avocadosource.com/WAC5/.../WAC5_Abstract_p268_s.pdf www.oocities.org/ecologialuz/trichoderma.htm es.wikipedia.org/wiki/Bacillus_subtilis www.madrimasd.org/blogs/microbiologia/2008/01/28/83418
