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RECOMENDACIONES QUE DEBEN OBSERVARSE PARA EL BUEN USO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO: 1. El microscopio es un instrumento costoso y de precisión, con muchas partes delicadas, por lo tanto, debemos darle el mejor cuido posible. 2. Si su Microscopio presenta algún defecto, consulte con su profesor. No trate de arreglarlo sted. !. "as lentes del microscopio cuestan casi tanto como todas las dem#s partes juntas. Mantenga las lentes limpias. No to$ue las lentes con los dedos, ya $ue el sudor las da%a. Nunca limpie las lentes con otra cosa $ue no sea papel especial para lentes. &. No permita $ue l'$uidos, especialmente #cidos o alcoholes, se pongan en contacto con su microscopio. (. se siempre cubre)objetos cuando obser*e en agua u otros l'$uidos +. "ocalice siempre el objeto con el objeti*o de menor aumento . -uando no se est usando el microscopio, debe mantenerse siempre cubierto con una funda. /. Al finalizar sus actividades de laboratorio, tenga en cuenta lo siguiente: ) 0ntes de apagar la fuente de lu, lle*ar el dispositi*o $ue regula la intensidad luminosa hasta 3cero4. ) 5ejar el microscopio con el objeti*o de menor aumento en la posición de enfo$ue y la platina en su m#6ima posición superior. ) 5esenchufar el microscopio y colocarle la funda protectora.
MANEJO DEL MICROSCOPIO:
-onectar el enchufe a la red elctrica.
7irar el conmutador o interruptor de la l#mpara hasta lograr la iluminación óptima.
-olocar el objeti*o de menor menor aumento en el eje óptico del microscopio. microscopio. Se detecta por un sonido 8clic9 del re*ól*er.
Subir la platina y subplatina al tope m#6imo superior. 0brir completamente completamente el diafragma. diafragma.
:egular la separación de las lentes oculares de acuerdo a la separación de sus o jos.
bser*ar por los oculares y ajustar la separación de ellos hasta $ue el campo de iluminación obser*ado, sea uno solo homogneo y circular.
"impiar muy bien la preparación entregada, preferentemente la ona donde se halla la muestra.
-olocar el preparado en la platina con el cubreobjeto hacia arriba.
bser*ar por los oculares y usando el tornillo macromtrico proceda a bajar lentamente la platina hasta obtener una imagen, apro6imadamente, n'tida n'tida y enseguida muy n'tida accionando el tornillo micromtrico. micromtrico. Si no la obtiene, nue*amente desplace la platina al tope m#6imo superior y repita el paso anterior.
Sin desplaar ni accionar el tornillo macromtrico y micromtrico girar el re*ól*er y reemplaar el objeti*o menor por el objeti*o 1;6 3posición 8clic94.
:ecorr :ecorra a su muestr muestra a e identi identifi fi$ue $ue las estructu estructuras ras $ue desea desea obser* obser*ar ar con mayor mayor clari claridad dad,, una *e encontradas, pase a un aumento mayor girando el re*ól*er.
Mirar por los oculares y *erificar $ue la imagen es borrosa, luego precise la nitide de ella accionando el tornillo micromtrico. micromtrico. Si no lo consigue regrese al objeti*o &6, suba la platina platina al tope m#6imo y comience de nue*o.
Posición cero< -ompruebe $ue el objeti*o menor est# en posición de enfo$ue, $ue la platina y la subplatina
se hayan en tope superior y $ue e l carro est# centrado. =or último, cubra el microscopio con la funda de protección.
EL MICROSCOPIO El microscopio 3del prefijo prefijo micro) y el sufijo )scopio, y estos del prefijo prefijo griego >?@AB) >?@AB) micro-, Cmuy Cmuy pe$ue%oD, y la ra' griega @BF) scop-, C*erD4 es un instrumento $ue permite obser*ar objetos $ue son demasiado pe$ue%os para ser *istos a simple *ista. El tipo m#s común y el primero $ue se in*entó es el
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microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico $ue contiene dos o m#s lentes $ue permiten obtener una imagen aumentada del objeto y $ue funciona por refracción. "a ci encia $ue in*estiga los objetos pe$ue%os utiliando este instrumento se llama microscop'a. El microscopio fue in*entado por Gacharias Hanssen en 1(I;. En 1++( aparece en Kar*e y sobre la ci rculación sangu'nea al mirar al microscopio los capilares KooLe publica su obra Micrographia.
la obra de J illiam sangu'neos y :obert
En 1++( :obert KooLe obser*ó con un microscopio un delgado corte de c orc ho y notó $ue el material era poroso, en su conjunto, formaban ca*idades poco profundas a modo de celditas a las $ue llamó células. 0 mediados del si glo OO un holands, 0nton *an "eeuPenhoeL, utiliando microscopios simples de fabricación propia, describió por primera *e prot ooos, bact erias, e spe rm ato o id es y glóbulos rojos. El microscopista "eeuPenhoeL, sin ninguna preparación cient'fica, puede considerarse el fundador de la bact eriolog'a. Q
1+;/ Gacharias
Hansen construye
un
microscopio
con
dos
lentes con*ergentes.
Q
1+11 H oh an ne s Re ple r sugiere la manera de fabricar un microscopio compuesto.
Q
1++( :obert KooLe utilia un microscopio compuesto para estudiar cortes de c orc h o y describe los pe$ue%os poros en forma de celdas a los $ue l llamó clul as. =ublica su libro Micrographia.
Q
1+& " eeuPenhoeL informa su descubrimiento de protooarios. bser*ar# bacterias por primera *e I a%os despus.
Q Q
1/2/ J. Nicol desarrolla la microscop'a con lu polariada. 1/!/ Schleiden y Sc hP an n proponen la teor'a de la clula y declaran $ue la clula nucleada es la unidad estructural y funcional en plantas y animales.
EL MICROSCOPIO ÓPTICO: Es un microscopio basado en lentes ópticos. Tambin se le conoce como microscopio de !", 3$ue utilia lu o fotones4 o microscopio de c#mpo c#ro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de 0nton *an "eeuPenhoeL. "os microscopios de "eeuPenhoeL constaban de una única lente pe$ue%a y c on *e 6a, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material $ue se iba a e6aminar 3la muestra o espcimen4. Este uso de una única lente con*e6a se conoce como m icroscopio si mp le, en el $ue se incluye la lu pa, entre otros aparatos ópticos.
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PARTES DE MICROSCOPIO ÓPTICO Y SUS
$UNCIONES
1 U O c! # r : "ente situado cerca del ojo del obser*ador. -apta y ampl'a la imagen formada en los objeti*os. 2 U O% &e 'i (o: "ente situado en el re*ól*er. 0mpl'a la imagen, es un elemento *ital $ue permite *er a tra*s de los oculares. !
U Co ) de) s# do r: "ente
$ue
concentra
los rayos
luminosos sobre
la preparación.
& U Di #*r#+m#: :egula la cantidad de lu $ue llega al condensador. ( U $oc o: 5irige los rayos luminosos hacia el condensador. + U T!%o: Es la c#mara oscura $ue porta el ocular y los objeti*os. =uede estar unida al brao mediante una cremallera para permitir el enfo$ue. U Re(,(er: Es el sistema $ue porta los objeti*os de diferentes aumentos, y $ue rota para poder utiliar uno u otro, aline#ndolos con el ocular. / U Tor)i os m#cro - mi c rom . 'rico: Son tornillos de enfo$ue, mue*en la platina o el tubo hacia arriba y hacia abajo. El macromtrico permite desplaamientos amplios para un enfo$ue inicial y el micromtrico desplaamientos muy cortos, para el enfo$ue m#s preciso. =ueden lle*ar incorporado un mando de blo$ueo $ue fija la platina o el tubo a una determinada altura.
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I UP#'i)#: Es una plataforma horiontal con un orificio central, sobre el $ue se coloca la preparación, $ue permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo. 5os pinas sir*en para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera $ue permite mo*er la preparación. =uede estar fija o unida al brao por una cremallera para permitir el enfo$ue. 1; UBr#" o < Es la estructura $ue sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfo$ue asociados al tubo o a la platina. "a unión con la base puede ser articulada o fija. 11 U B#se o pie: Es la parte inferior del microscopio $ue permite $ue ste se mantenga de pie.
EL MICROSCOPIO COMPUESTO: Tiene m#s de una lente objeti*a. "os microscopios compuestos se utilian especialmente para e6aminar objetos transparentes, o cortados en l#minas tan finas $ue se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las im#genes de objetos y organismos no *isibles a simple *ista. El microscopio óptico común est# conformado por tres sistemas< Q
El sistema mec#nico est# constituido por una palanca $ue sir*e para sostener, ele*ar y detener los instrumentos a obser*ar.
Q
El sistema de iluminación comprende producen las ranuras de lu.
Q
El sistema óptico comprende las partes del microscopio $ue permiten un aumento de $ue se pretenden obser*ar mediante filtros llamados de antigel subsecuente.
un
conjunto
de
instrumentos, dispuestos de tal manera $ue los
objetos
SISTEMA O PARTES MEC/NICAS DEL MICROSCOPIO "a parte mec#nica del microscopio comprende el pie, el tubo, el re*ól*er, el asa, la platina, el carro y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminaciónV adem#s, permiten los desplaamientos necesarios para el enfo$ue del objeto. Q
E pie - sopor'e: -ontiene la base sobre la $ue se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de W o bien es rectangular.
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Q
Q Q
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L# co!m)# o %r#"o: "lamada tambin asa, es una piea en forma de -, unida a la base por su parte inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinación del tubo para mejorar la captación de lu cuando se utilian los espe jos. Sostiene el tubo en su porción superior y por el e6tremo inferior se adapta al pie. E '!%o: Tiene forma cil'ndrica. El tubo se encuentra en la parte superior de la columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten $ue el tubo se mue*a mediante los tornillos.
E 'or)io m#crom.'rico o m#croscopico: 7irando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, desli#ndose en sentido *ertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos mo*imientos largos permiten el enfo$ue r#pido de la preparación.
Q
E 'or)io microm.'rico o microscopico: Mediante el ajuste fino con mo*imiento casi imperceptible $ue produce al desliar el tubo o la platina, se logra el enfo$ue e6acto y n'tido de la preparación. "le*a acoplado un tambor graduado en di*isiones de ;,;;1 mm, $ue se utilia para precisar sus mo*imientos y puede medir el espesor de los objetos.
Q
L# p#'i)#: Es una piea met#lica plana en la $ue se coloca la preparación u objeto $ue se *a a obser*ar. =resenta un orificio, en el eje óptico del tubo, $ue permite el paso de los rayos luminosos a la preparación. "a platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmó*ilV en otros casos puede ser giratoriaV es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir mo*imientos circulares.
Q
L#s pi)"#s: Son dos pieas met#licas $ue sir*en para sujetar la preparación. Se encuentran en la platina.
Q
E re(,(er: Es una piea giratoria pro*ista de orificios en los $ue se enroscan los objeti*os. 0l girar el re*ól*er, los objeti*os pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, lo $ue se nota por el ruido de un pi%ón $ue lo fija.
PARTE O SISTEMA ÓPTICO DEL MICROSCOPIO: Es el encargado de reproducir y aumentar las im#genes mediante el conjunto de lentes $ue lo componen. Est# formado por el ocular y los objeti*os. El objeti*o proyecta una imagen de la muestra $ue el ocular luego ampl'a. Q E oc!#r: Se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la cercan'a de la piea con el ojo del obser*ador. Tiene como función aumentar la imagen formada por el objeti*o. "os oculares son intercambiables y sus poderes de aumento *an desde ( hasta 2;. E6isten oculares especiales de potencias mayores a 2; y otros $ue poseen una e sc ala micromtricaV estos últimos tienen la finalidad de medir el tama%o del objeto obser*ado.
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Q
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Los o%&e'i(os: Se disponen en una piea giratoria denominada re*ól*er y producen el aumento de las im#genes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparación $ue se e6amina. "os objeti*os utiliados corrientemente son de dos tipos< objeti*os secos y objeti*os de inmersión
PARTE O SISTEMA DE ILUMINACIÓN: Este sistema tiene como finalidad dirigir la lu natural o artificial de tal manera $ue ilumine la preparación u objeto $ue se *a a obser*ar en el microscopio de la manera adecuada. -omprende los siguientes elementos< Q
$!e)'e
de
i!mi)#ci,): se
Q
E espe&o: Necesario si la fuente de iluminación no est# construida dentro del microscopio y ya
trata cl#sicamente de una l#mpara incandescente de tungsteno sobre*oltadaV en *ersiones m#s modernas con leds. =or delante de ella se sitúa un condensador 3una lente con*ergente4 e, idealmente, un diafragma de campo, $ue permite controlar el di#metro de la parte de la preparación $ue $ueda ilumina da, para e*itar $ue e6ceda el campo de obser*ación produciendo luces par#sitas
alineada con el sistema óptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos caras< una cónca*a y otra plana. 7oa de mo*imientos en todas las direcciones. "a cara cónca*a se emplea de preferencia con iluminación artificial, y la plana, para natural 3lu solar4. "os modelos m#s modernos no poseen espejos sino una l#mpara $ue cumple la misma función $ue el espejo. Q
Co)de)s#dor: Est# formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación, formando un cono de lu con el mismo #ngulo $ue el del campo del objeti*o. El condensador se sitúa debajo de la platina y su lente superior es generalmente planocon*e6a, $uedando la cara superior plana en contacto con la preparación cuando se usan objeti*os de gran abertura 3los de mayor ampliación4V e6isten condensadores de inmersión, $ue piden $ue se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparación. "a abertura numrica m#6ima del condensador debe ser al menos igual $ue la del objeti*o empleado, o no se lograr# apro*echar todo su poder separador. El condensador puede desliarse *erticalmente sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo, baj#ndose para su uso con objeti*os de poca potencia.
Q
Di#*r#+m#: El condensador est# pro*isto de un diafragma)iris, $ue regula su abertura para ajustarla a la del objeti*o. =uede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo $ue se hace cerr#ndolo m#s de lo $ue con*iene si se $uiere apro*echar la resolución del sistema óptico.
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ACTIVIDADES PR/CTICAS: Actividad 1:
bjeti*o< Montar muestra de Tejido epitelial de re*estimiento de la boca. Materiales< =alo de helado, una tinción o colorante $ue en este caso corresponde a 0ul de metileno, 0gua destilada, =orta objetos, y cubre objetos 5escripción de la muestra< Este es el tejido $ue como su nombre indica re*iste la boca por dentro. Es este tejido las clulas se agrupan del mismo modo $ue en la p iel e6terna. Onstrucciones<
012 -on el palillo frotamos la parte interna de la boca sin hacernos da%o. 312 Echamos una gota de agua 3mejor destilada4 en el portaobjetos y con el palillo $ue nos frotamos la boca lo aplicamos a esa gota de agua como si lo estu*iramos reboando.
412 5espus de esto muchas clulas muertas estar#n en el portaobjetos, aplicamos un poco de aul de metileno y despus con un mechero y con cuidado de no $uemar el portaobjetos se lo pasamos por la p arte inferior para $ue el agua se se$ue.
512 Montar la muestra en el microscopio para comenar a obser*arla.
Nombre de la preparación<
=ropósito
Tinción< 0umento Total<
5escripción<
Actividad 2:
bjeti*o< Montar muestra de Tejido epitelial de la cebolla Materiales< Epidermis de -ebolla, -olorante 30ul de metileno4, agua destilada, porta objetos, cubre objetos. 5escripción de la muestra< El tejido epitelial de la cebolla est# compuesto por millones de clulas entrelaadas, Estas se agrupan en forma poligonal y protegen el interior de la cebolla. Onstrucciones<
012 E6traer de la cebolla un troo de este tejido. 312 E6ponerlo en el portaobjetos y la*arlo con agua destilada. 412 0plicar aul de metileno para $ue sus clulas sean *isibles y colocar el cubreobjetos. 512 0cto seguido e6poner en el microscopio la muestra y obser*ar primero con su objeti*o de rango menor subiendo paulatinamente.
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Nombre de la preparación<
=ropósito
Tinción< 0umento Total<
5escripción<
Actividad :
bjeti*o< Montar muestra de Tejido epitelial de la cebolla Materiales< Epidermis de -ebolla, :eacti*o de lugol, agua destilada, porta objetos, cubre objetos. 5escripción de la muestra< El tejido epitelial de la cebolla est# compuesto por millones de clulas entrelaadas, Estas se agrupan en forma poligonal y protegen el interior de la cebolla. Onstrucciones<
012 E6traer de la cebolla un troo de este tejido. 312 E6ponerlo en el portaobjetos y la*arlo con agua destilada. 412 0plicar una 'nfima porción del reacti*o de lugol para $ue los núcleos de las clulas sean *isibles y colocar el cubreobjetos.
512 E6poner en el microscopio la muestra y obser*ar primero con su objeti*o de rango menor subiendo paulatinamente.
Nombre de la preparación<
=ropósito
Tinción< 0umento Total<
Actividad ! :
5escripción<
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bser*ación de muestra de papel milimetrado en el $ue est# escrito el numero + bjeti*o< :econocer e identificar $u tipo de imagen es la $ue obser*amos en el microscopio según lo mencionado en la parte teórica de la gu'a. Materiales< Muestra fijada de papel milimetrado con número +. Onstrucciones< bser*e su muestra en el microscopio con los aumentos se%alados por la profesora.
Nombre de la preparación<
=ropósito
Tinción< 0umento Total<
5escripción<
-olo$ue los nombres correspondientes a las partes del microscopio se%aladas en el es$uema<
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CUESTIONARIO: 1. -olo$ue los nombres a las diferentes partes del microscopio numeradas e in*estigue las funciones de cada una de ellas. 2. XYu otros tipos de microscopios se utilian en la in*estigación biológicaZ !. XYu son objeti*os secosZ &. XYu son objeti*os de inmersiónZ (. XYu son los colores complementarios y $ue utilidad tendr'an en microscop'a óptica.
