UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL
USO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO PRIMER LABORATORIO DEL CURSO MICROBIOLOGÍA
LOPEZ CARPIO MIJAIL NILS – 20161044D DOCENTE: ING. JORGE GILBERTO TELLO CEBREROS CEBREROS
Lima, Perú 2018
USO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO
RESUMEN ............................................................................................................................ 3 INTRODUCCIÓN................................................................................................................... 3 OBJETIVOS ........................................................................................................................... 4 MARCO TEÓRICO ................................................................................................................ 4 __EL MICROSCOPIO ........................................................................................................ 4 __PARTES DE UN MICROSCOPIO .................................................................................... 5 SISTEMA MECÁNICO ................................................................................................... 5 SISTEMA ÓPTICO ......................................................................................................... 6 __COMO SE USA EL MICROSCOPIO ................................................................................ 6 __PARA OBSERVAR CON EL OBJETIVO DE INMERSION .................................................. 7 __CUIDADOS DEL MICROSCOPIO.................................................................................... 7 __ACEITES DE INMERSION .............................................................................................. 8 __AUMENTOS DE UN MICROSCOPIO ............................................................................. 8 RESULTADOS: ...................................................................................................................... 9 Muestras ......................................................................................................................... 9 CONCLUSIONES ................................................................................................................. 12 RECOMENDACIONES ......................................................................................................... 12 CUESTIONARIO .................................................................................................................. 13 Bibliografía ........................................................................................................................ 14 ANEXOS ............................................................................................................................. 14 APENDICE .......................................................................................................................... 17
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USO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO
En este laboratorio de microbiología se aprendió a utilizar el microscopio desde recocer sus partes ópticas y mecánicas. Luego se procedió a enfocar muestras que ya había sido preparada en el laboratorio, empezando primero por el enfoque siguiendo todas las indicaciones de la guía desde la colocación del microscopio hasta la calibración de la luz. También se dio pautas de los cuidados que se debe tener en cuenta al usar el microscopio.
EL microscopio es un instrumento óptico que aumenta la imagen de los objetos. En los últimos tres siglos ha permitido ampliar el campo de las investigaciones biológicas. La lupa puede considerarse como el microscopio más simple y fue usada inicialmente por algunos investigadores para adquirir los primeros conocimientos del mundo microscópico. Posteriormente se perfeccionó y en la actualidad existen varios tipos de microscopios, algunos de ellos altamente especializados para una gran variedad de usos. Entre los diferentes tipos podemos citar: microscopio simple, compuesto y electrónico. El microscopio, al aumentar la imagen de los objetos, nos permite analizar la estructura, forma y tamaño de diferente tipo de muestras. En esta práctica se utilizará el microscopio compuesto en el cual se combinan dos lentes, el ocular y el objetivo, para aumentar la imagen.
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USO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO
Conocer las diferentes partes del microscopio compuesto y sus respectivas funciones.
Aprender a utilizar de manera correcta un microscopio.
Es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser observados a simple vista. El tipo más común y el primero que fue inventado es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene dos lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopía. (Española, 2018)
Fig.1 El microscopio y sus partes
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Base o pie: Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio y sobre la cual se montan el resto de elementos. Acostumbra a ser la parte más pesante para proporcionar suficiente equilibrio y estabilidad al microscopio
Brazo: El brazo constituye el esqueleto del microscopio. Es la pieza intermedia del microscopio que conecta todas sus partes. Principalmente conecta la superficie donde se coloca la muestra con el ocular por donde ésta se puede observar.
Platina: Esta es la superficie donde se coloca la muestra que se quiere observar. Su posición vertical con respecto a las lentes del objetivo se puede regular mediante dos tornillos para generar una imagen enfocada. La platina tiene un agujero en el centro a través del cual se ilumina la muestra.
Pinzas: Las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación una vez esta se ha colocado sobre la platina.
Tornillo macrométrico: Este tornillo permite ajustar la posición vertical de la muestra respecto el objetivo de forma rápida. Se utiliza para obtener un primer enfoque que es ajustado posteriormente mediante el tornillo micrométrico
Tornillo micrométrico: El tornillo micrométrico se utiliza para conseguir un enfoque más preciso de la muestra. Mediante este t ornillo se ajusta de forma lenta y con gran precisión el desplazamiento vertical de la platina.
Revólver: El revólver es una pieza giratoria donde se montan los objetivos. Cada objetivo tiene proporciona un aumento distinto, el revólver permite seleccionar el más adecuado a cada aplicación. Habitualmente el revólver permite escoger entre tres o cuatro objetivos distintos.
Tubo: El tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio que conecta el ocular con los objetivos.
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Foco o fuente de luz: Este es un elemento esencial que genera un haz de luz dirigido hacia la muestra. En algunos casos el haz de luz es primero dirigido hacia un espejo que a su vez lo desvía hacia la muestra. La posición del foco en el microscopio depende de si se trata de un microscopio de luz transmitida o de luz reflejada.
Condensador: El condensador es el elemento encargado de concentrar los rayos de luz provenientes del foco a la muestra. En general, los rayos de luz provenientes del foco son divergentes.
Diafragma: El diafragma es una pieza que permite regular la cantidad de luz incidente a la muestra. Normalmente se encuentra situado justo debajo la platina. Regulando la luz incidente es posible variar el contraste con el que se observa la muestra.
Objetivo 10X, 43X, 97X: El objetivo es el conjunto de lentes que se encuentran más cerca de la muestra y que producen la primera etapa de aumento. El objetivo suele tener una distancia focal muy corta. Este permite seleccionar el objetivo adecuado para el aumento deseado. El aumento del objetivo junto con su apertura numérica suele estar escrito en su parte lateral.
Ocular: Este es el elemento óptico que proporciona la segunda etapa de ampliación de imagen. El ocular amplia la imagen que ha sido previamente aumentada mediante el objetivo. Es a través del ocular que el usuario observa la muestra. (Anonimo, 2014)
Lo primero es preparar lo que queremos mirar a través del microscopio. A esto se le llama montar la preparación. Para montar la preparación debemos colocar lo que queremos ver encima de un cristal (portaobjeto) y poner encima otro cristal (cubreobjetos). A veces se hecha un líquido entre los 2 cristales para que se vea mejor (depende lo que se quiera ver). a) Encendemos la luz del microscopio y comprobamos que vemos la luz a través del ocular.
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b) Colocamos la preparación sobre la platina y movemos el revólver para poner sobre ella el objetivo de menor aumento. c) Enfocamos la muestra: Giramos el tornillo macrométrico hasta que el objetivo esté lo más cerca posible de la preparación. - Mirando por el ocular, giramos el tornillo para ir separando el objetivo de la preparación hasta ver una imagen los más enfocada posible. - Movemos el tornillo micrométrico para conseguir una imagen más enfocada. Podemos observar la muestra con más aumentos, cambiando el objetivo (mediante el revólver) y ajustando el enfoque con el tornillo micrométrico. (Anonimo, Ciencias Naturales, 2017)
Centre la preparación y levante el tubo portalentes por medio del tornillo macrometrico y gire el revolver para colocar el objetivo de inmersión (97X).
Coloque una gota de aceite de cedro sobre la preparación.
Mirando por el ocular enfoque cuidadosamente utilizando el tornillo macrometrico, afinando con el micrométrico.
Recuerde que mirara a través del microscopio requiere no solamente el uso de ojos, sino también de las dos manos, una en el tornillo micrométrico y la otra en la platina para mover la preparación.
Es importante tener en cuenta los siguientes cuidados y precauciones al usar el microscopio:
Cuando se transporte el microscopio tómelo siempre con las dos manos. Nunca tenga objetos adicionales en sus manos.
Al colocar el microscopio sobre la mesa, sitúelo a unos 10 o 15 cm del borde.
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Si se requiere limpiar los lentes utilice sólo el papel y solución destinada para tal fin. No utilice ningún otro tipo de papel.
Después de usar el objetivo de inmersión limpiarlo con el papel lente humedecido con alcohol isopropilico.
Cuando termine de trabajar deje el microscopio en el lente objetivo de 10X. (Anonimo, Ambient@l ENS, 2010)
Los aceites de inmersión son sustancias transparentes con las propiedades ópticas y las características de viscosidad necesarias para su uso en microscopía. Los aceites típicos utilizados suelen tener un índice de refracción de alrededor de 1,515. Se utiliza colocando una gota en el objetivo para facilitar la visión del microscopio al entrar en contacto con el cubre-objetos. Su falta o secado puede producir una mala visión en el microscopio. Para usos de laboratorio, análisis, investigación y química fina.
Fig.2 aumentos de un microscopio
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Célula de cebolla
10X: Se observaron celdas con una tendencia a formar rectángulos alargados, apenas y se distinguían unos pequeños puntos dentro de las celdas de la epidermis de la cebolla(nucleo)
43X: Se aprecian mejor manera los núcleos de las células de la cebolla que antes parecían puntos X10 pues la imagen se amplió a 430X ya que el ocular para el microscopio N°12 tenía en el ocular un lente que amplificaba la imagen del objeto 10X.
Fig.3 Célula de cebolla vista a través de un microscopio
Balantidium coli
Fig.4 Balantidium coli visto a través de un microscopio
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Hilo
10X: Se pudo observar al hilo rojo de una manera distante no se notaba la presencia de células tan claramente como la de la epidermis de la cebolla sino más bien resaltaba el color rojo de las fibras
43X: Se acercó tanto que apenas y se logró ver una fibra de las muchas que componían el hilo rojo
Fig.5 Hilo visto a través del microscopio
Pulex irritans
10X: Se observó el escamoso cuerpo entero del artrópodo (cabeza abdomen y 6 patas) de color rojizo.
43X: Se logró ver los pelos de las patas
Fig.6 Pulex irritans visto a través de un microscopio
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Xenopsylla cheopis
10X: Se obtuvo una vista de cuerpo completo del exoparásito (Siphonaptera o Pulga ).
43X: la vista dada por este objetivo nos mostró una imagen con mucho más detalle de la parte delantera del cuerpo de la Siphonaptera
Fig.7 Xenopsylla cheopis vista a través de un microscopio
Trichoderma sp.
10X: Se observó filamentos con forma irregular delgados que salen de otro más grueso de color verde oscuro.
Fig.8 Trichoderma sp. vista a través de un microscopio
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El microscopio es un elemento fundamental en el estudio de los microorganismos.
Se logró el correcto uso del microscopio por los alumnos, ya que lograron enfocar las muestras.
Se apreciaron mejor las características de las muestras.
El microscopio es un instrumento delicado debe ser utilizado cuidadosamente.
Utilizar el diafragma para regular la cantidad de luz sobre la muestra (varios grupos pasaron por alto esto).
Observar que el espejo del microscopio este limpio.
Conectar la lámpara solo al momento de visualizar la muestra (se sobrecalienta), y apagar cuando ya no se está observando la muestra.
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Uso de microscopio 1. Establecer la diferencia entre el poder de resolución y abertura numérica. El poder de resolución se encarga de distinguir dos puntos distintos mientras que la apertura numérica es la capacidad de para recolectar luz.
El poder de resolución es la capacidad para determinar con claridad dos puntos separados, este depende de la longitud de la luz utilizada y la apertura numérica del objetivo.
La apertura numérica se define como la medida de su capacidad para colectar la luz. Los rayos de luz pasan a través de la muestra para formar la imagen, y entran en el objetivo en un cono invertido como se ilustra en la 2. Completar la siguiente tabla Partes del microscopio
Función
Ocular
Proporciona la segunda etapa de ampliación de imagen. Es a través del ocular se observa la muestra.
Objetivo
Produce la primera etapa de aumento. El objetivo suele tener una distancia focal muy corta.
Condensador
Es el elemento que concentra los rayos de luz provenientes del foco a la muestra.
Diafragma de Iris
Permite regular la cantidad de luz incidente a la muestra.
Tornillo de ajuste fino / micrométrico
Se utiliza para conseguir un enfoque más preciso de la muestra.
Tornillo de ajuste grueso /
Permite ajustar la posición vertical de
macrométrico
la muestra respecto el objetivo de forma rápida.
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Anonimo. (11 de 04 de 2010). Ambient@l ENS. Recuperado el 11 de 04 de 2018, de https://tutorbastom.wordpress.com/2010/04/10/practica-de-laboratorion%C2%B0-1-el-microscopio/ Anonimo. (23 de 06 de 2014). Mundo Microscopico. Recuperado el 11 de 04 de 2018, de https://www.mundomicroscopio.com/partes-del-microscopio/ Anonimo. (14 de 05 de 2017). Ciencias Naturales. Recuperado el 11 de 04 de 2018, de http://www.areaciencias.com/El_Microscopio.htm Española, R. A. (08 de 04 de 2018). wikipedia. Recuperado el 11 de 04 de 2018, de https://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio
Fig.1 El microscopio y sus partes Recuperado: https://www.mundomicroscopio.com/partesdel-microscopio/
Fig.2 aumentos de un microscopio Recuperado: https://www.mundomicroscopio.com/microsc opio-monocular/
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Fig.3 Célula de cebolla vista a través de un microscopio Recuperado: https://inakiresa.wordpress.com/tag/cebolla/
Fig.4 Balantidium coli visto a través de un microscopio Recuperado: https://es.wikipedia.org/wiki/Balantidium_coli
Fig.5 Hilo visto a través de un microscopio Recuperado: http://jheysonngilromero.blogspot.pe/2012/06/labo ratorio-n-2-microscopia.html
Fig.6 Pulex irritans visto a traves de un microscopio Recuperado:https://thumb7.shutterstock.com/di splay_pic_with_logo/342406/170722091/stockphoto-human-flea-pulex-irritans-permanent-
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slide-plate-under-high-magnification-170722091.jpg
Fig.7 Xenopsylla cheopis vista a traves de un microscopio Recuperado:http://sameens.dia.uned.es/Trabaj os11/Trab_Publicos/Trab_2/Castrillejo_Perez_2 /Caracterizacion4.htm
Fig.8 Trichoderma sp. vista a traves de un microscopio Recuperado: https://es.wikipedia.org/wiki/Trichoderma_harzi anum
Esquema del microscopio
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Microscopio utilizado en laboratorio
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