Guia de Farmacobotanica y Farmacognosia 2015-II Marin

INTRODUCCIÓN La farmacobotánica es la ciencia que estudia las plantas desde diversos enfoques, ya sea de la botánica pura o aplicada. La botánica pura estudia las plantas desde un enfoque teórico, desde los aspec tos de taxon omía y también de la fisiología y la citogenética de los vegetales. La botánica aplicada está basada en lo anterior y también consi dera los usos práctico s que se le pueden dar a las plantas para lograr su adecuada utilización, que pueden ser disciplinas como la forestal la agrícola, la farmacéutica y la naturista. La Farmacognosia es una ciencia que tiene por obeto el estudio científico de las drogas naturales de origen vegetal y animal, de sus constituyentes químicos, principios activos y productos relacionados.

UNIVERSIDAD NORBERT WIENER

!n la presente asignatura se considera como "betivo #eneral$ proporcionar al estudiante los

FACULTAD DEinvestigación FARMACIA Y BIOQUÍMICA conocimientos básicos, necesarios para el estudio, y maneo con calidad de las plantas y de las drogas naturales utilizadas como recursos terapéuticos.

CURSO DE FARMACOBOTÁNICA FARMdesarrolle ACOGN&abilidades OSIA %omo obeto específico se tiene en primer lugar que elyestudiante y destrezas en el conocimiento de las estructuras internas y externas de las plantas que contribuyan a la

GUÍAy DE PR ÁCTICAS identificación de las mismas y en el maneo utilizac ión de los diferent es 'étodos y (écni cas )nalíticas para la extracción, aislamiento, identificación y cuantificación de los principios activos responsables de las acciones farmacológicas que se encuentran en las drogas$ y en segundo término motivar el interés del estudiante al estudio e investigación de las especies vegetales. %on esta guía se pretende contribuir a un meor desarrollo de las prácticas.

Las autoras.

Smallanthus sonchifolius

AUTORES:

Q.F. Berth !"r#$ Te%&e%r Q.F. E' R($) LL%* Q.F. E+%,-eth C$)"e+$ Orte/ R$(er$ PRÀCTICAS DE LABORATORIO

LIMA0 1234

Tema

F-CV3-3B-2 Semana Práctica | *

*

-

-

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1

1

4

4

5

5

6

6

Rev. Junio 2007 !laboración de diversos cortes y preparados microscópicos para la caracterización de las drogas vegetales +%itología. !laboración de diversos cortes y preparados para la caracterización microscópica de las drogas vegetales +istología. 0econocimiento de los caracteres macroscópicos en las drogas vegetales +'orfología. %ontrol 2otánico en una especie vegetal peruana. 3rocedimientos de recolección, selección, secado, almacenamiento y conservación de drogas. )nálisis de drogas vegetales. %ontrol de calidad de drogas vegetales. !nsayos botánicos, )nálisis cualitativo de constituyentes químicos, tamizae fitoquímico en extracto acuoso. 3reparación del extracto etanólico. )nálisis farmacognóstico y tamizae fitoquímico preliminar en extractos estandarizados. 'étodo de separación y purificación de drogas vegetales. %romatografía en %apa Fina. !xtracción e identificación de carbo&idratos simples, oligósidos y polisacáridos a partir de drogas naturales. 0eacciones generales y particulares de carbo&idratos.

Primera evaluación de ráctica

7

7

0econocimiento de %ompuestos fenólicos simples y compuestos antraquinónicos.

8

0econocimiento de flavonoides, antocianinas y taninos. :aloración de taninos en drogas vegetales.

**

*9

!xtracción y reconocimiento de aceites esenciales.

*-

**

;rogas con alcaloides de n
*/

*-

8 *9

*1 *4

!"

F-CV3-3B-2

*/ *1

>nvestigación Farmacognóstica de los extractos de la planta medicinal estudiada +)nálisis Fitoquímico? (amizae fitoquímico, p, @ndice de 0efracción, densidad y cromatografía en capa fina. Lípidos, identificación y control de calidad de aceites. :itaminas liposolubles e &idrosolubles, extracción, identificación y cuantificación.

Se#unda evaluación de ráctica

Rev. Junio 20072

PR$CTICA N % ! CARACTERI&ACIÓN 'ICROSCÓPICA DE LAS DRO(AS )E(ETALES* CITOLO(+A,C-LULA )E(ETAL. PARED CELULAR. N/CLEO 0 CO'PONENTES PROTOPLAS'$TICOS*

'ARCO TEÓRICO, !l estudio de la estructura interna de las plantas requiere de adecuadas preparaciones microscópicas de muestras que nos permitan la observación detallada de los diferentes teidos y estructuras vegetales$ éstas se elaboran preparando láminas &istológicas de diferentes tipos de cortes &ec&os en plantas. La célula vegetal presenta entre sus principales caracter ísticas una estructura celulósica complea +pared celulary diferentes componentes no protoplasmáticos primarios +substancias que se producen como consecuencia del metabolismo primario y comprenden a los polisacáridos +almidones así como a los lípidos y proteínas de reserva +aleurona, mientras que los denominadas inclusiones celulares +diversas formas drusas, rafidios, maclas, arenilla cristalífera constituyen las formaciones cristalinas de oxalatos+diversas formas drusas, rafidios, maclas, arenilla cristalífera$todas estas sustancias tienen su importancia farmacognóstica en la identidad de la droga vegetal. CO'PETENCIAS, %apacitar al estudiante para que adquiera &abilidad en cortes &istológicos en órganos vegetales. >dentificar la célula y paredes celulares, los componentes de reserva, almidones y aleurona así como los cristales de oxalato presentes en la célula vegetal. Láminas y laminillas, 3apel lente 3apel &igiénico, Franela limpia 3laca petri, 'ATERIAL )E(ETAL, Solanum tuberosum ApapaB +tubérculo Allium cepa AcebollaB +bulbo Capsicum pendulum Aaí amarilloB +fruto Ficus elástica “cauc&oB +&oa Daucus carotaAzana&oriaB +raíz 'uestra? raíces, tallos y &oas

OTROS 'ATERIALES,

gotero, oa deestiletes. afeitar nueva. 0eactivos? lugol, glicerina, safranina. 'icroscopios %ámara Fotográfica Tradescantia zebrina Aorea de gatoB +&oa Phaseolus vulgarisAfreolB+fruto yCo semilla Opuntia ficus AtunaB +tallo

PROCEDI'IENTO, Prearación de c1rte2,Los cortes se realizan a mano alzada, con una &oa de afeitar a %ortes que com. C1rte 2uer3icial? De secciona paralelamente a la superficie de la &oa. >>. C1rte tran2ver2al ? De secciona perpendicularmente a la vena media. b %ortes que com
C1n3ección de una rearación micr12cóica, Dobre una lámina portaobeto se deposita una gota de agua y luego se coloca mediante una pinza o estilete el material a examinar, se recubre el material con una laminilla cubreobeto. O72ervación de la2 rearaci1ne2, %olocar su lámina preparada en la platina del microscopio para su observación, primero con el obetivo de menor aumento +19x luego en +*99x y después a mayor aumento +199x. %orte transversal de tallo

%orte longitudinal

5i#* 8* Ti12 de c1rte2 u2and1 c1l1rante2

%orte paradermal +superficial

C9lula2 de eidermi2 en catá3il1 de ce71lla

C9lula 9trea en 3rut1 de mem7rill1

Inclu2i1ne2 celulare2

;rusas

Ci2t1lit1 en :1;a de cauc:1

Su2tancia2 de re2erva, #ran12 de almidón

0afidios

). 3apa Solanum tuberosum !" )rroz Or#za sativa C" Friol Phaseolus vulgaris D" 'aíz $ea ma#s %" !sferocristales de inulina. F. #ranos de aleurona 5i#* < Cit1l1#=a e inclu2i1ne2 cit1la2mática2

8* COLORACIÓN DE LOS CORTES SELECCIONADOS De usan los cortes más delgados realizados a mano libre o con micrótomo Ena vez realizados los cortes, se recogen en una placa petri con agua destilada$ se selecciona bao la lupa los meores cortes. COLORACIÓN DIRECTA, SA5RANINA T-CNICA, (eir los cortes safranina diluida al *4G durante -=4 minutos seg
<* CITOLO(+A e INCLUSIONES CITOPLAS'$TICAS ). 0ealizar cortes transversales muy delgados de la parte carnosa del membrillo y del aí. "bserve a menor aumento las c9lula2 9trea2. ) mayor aumento, reconocer la pared secundaria lignificada, el lumen y los canalículos porales.

2. 0ealizar un raspado del tubérculo de papa, semilla de freol y depositarlo en una lámina con una gota de agua, cubrir con la laminilla y observar con el obetivo de mayor aumento. >dentifique los diferentes tipos de granos de almidón? simples y compuestos, con sus estratificaciones e &ilio excéntrico. ) mayor aumento dentro de las célula s algo redondeadas. De identifican amil1la2t12 de formas peculiarmente características luego aadir lugol y sealar lo ocurrido. %. 0ealizar corte transversal de &oa de sábila y colo car en un portaobeto, realizar el montae con una gota de agua. "bserve? los ra3idi12* ;. 0ealice un corte transversal del tallo modi ficado de tuna o en corte transversal de peciol o de begonia, realice el montae con una gota de agua. "bserve? células isodiamétricas conteniendo un agregado cristalino de aspecto asteroideo? la dru2a . !. 0ealice el corte transversal de la raíz de Az ana&oriaB y montar con una gota de agua. "bservar células de contorno redondeado en cuyo interior presenta pequeos corp
RESULTADOS, acer esquemas de sus observaciones en la >O?A DE OBSER)ACIONESy elaborar el informe de su práctica mediante un PROTOCOLO DE AN$LISIS BOT$NICOseg
ACTI)IDAD BIBLIO(R$5ICA, *. H!n qué consiste la erborización de muestras vegetalesI ;esarrolle un mapa concep tual con gráficos o dibuos. -. 'encione mediante un cuadro *9 plantas medicinales endémicas o nativas del 3er<, con los sig uientes datos? Jombre %omntroducción a la 2iología :egetal. >mpresiones ;avid, Lima -. Dtrasburger. *881. 2otánica. !diciones "mega D.). 2arcelona. /. #ola #.$ Jegri #.$ %appelletti %. *854.(ratado de 2otánica 2arcelona, 5. 'ostacero, K. (axonomía de las Fanerógamas. -99-.tiles del 3er<. *ra. !dición. Lima. 6. #reulac& :.$ )dams ). *889. Las plantas? introducción a la botánica moderna. 'éxico 8. 0eynaud, K.-99-. La flora del farmacéutico. !spaa. Revi2ta2

*. Fieldmuseum? &ttp?CCfm*.fieldmuseum.orgCvrrcC -. /. 1. 4. 5.

Flora de %&ina? &ttp?CCflora.&u&.&arvard.eduCc&inaC 0aintreeMs (ropical 3lant ;atabase? &ttp?CCNNN.rain=tree.comCplistbot.&tmO.Ex8n;;84J3> 0evista peruana de biología? &ttp?CCrevistasinvestigacion.unmsm.edu.peCindex.p&pCrpb (&e 3lant List? NNN.t&eplantlist.org (rópicos, 'issouri 2otanical #arden? NNN.tropicos.org

>O?A DE OBSER)ACIONESDE PR$CTICA N % ! CARACTERI&ACIÓN 'ICROSCÓPICA DE LAS DRO(AS )E(ETALES* CITOLO(+A, C-LULA )E(ETAL. PARED CELULAR. N/CLEO 0 CO'PONENTES PROTOPLAS'$TICOS* ;ibue o esquematice sus observaciones

F!%)?.......C...........C........

'uestra (ipo de corte? "bservación












FORMATO: PROTOCOLO DE ANÁLISIS BOTÁNICO Nombre común:

Analistas:

Nombre científico:

TEMA: Feca:

!

!

FOTOGRAFÍAS *E CORTE FOTOGRAFÍAS PLANTA COMPLETA

ESEMA /*BJO A MANO SN COLOREAR *E LA OBSERVAC1N *EL CORTE

Nombre cient"#ico: Familia:

Ti+o #e 'o"&e

Lu!" #e O"ien:

Co(o"!'i)n

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Au,en&o

Lu!" #e "e'o(e''i)n: NTERPRETAC1N *E RESLTA*OS

REFERENCAS BBLOGRFCAS:

PR$CTICA N% 8 >ISTOLO(+A )E(ETAL, Te;id12 Paren@uimátic12. 'ecánic12. Pr1tect1re2. C1nduct1re2  Secret1re2 'ARCO TEÓRICO, Los teidos vegetales encargados de la protección de la planta se caracterizan especialmente por carecer de espacios intercelulares y conformar una capa uni o pluricelular en la parte externa del órgano vegetal, se diferencian en su srcen primario + Eidermi2 o secundario + Peridermi2. !l teido mecánico está conformado por el c1l9n@uima, de células vivas y paredes primarias desigualmente engrosadas y el e2cler9n@uima, conformado por células muertas y paredes secundarias lignificadas, uniformemente engrosadas. !l ilema es un teido vascular conformado por células muertas y de paredes secundarias

lignificadas con una serie de engrosamientos característicos. Los diferentes subproductos del metabolismo celular secundario que se producen en las plantas generalme nte se encuentran localizados en células y estructuras secretoras en los distintos órgan os vegetales, por eemp lo los latic=3er12 y la s cavidade2 2ecret1ras. Los diferentes órganos vegetales presentan una serie de teidos vegetales que conforman una estructura interna propia del desarrollo en las plantas, los cuales se describen como parte de la caracterización botánica de las drogas vegetales.

TIPOS DE COL-NUI'A TE?IDO 'ERISTE'$TICO CAMBM MO*ELO *E CRECMENTO SECN*ARO

) 2olsa oleífera esquizógenaTE?IDO SECRETOR 2 2olsa oleífera lisígena % %anal secretor ; (ubo laticífero no articulado ramificado ! (ubo laticífero articulado no ramificado

) 2 % ;

%olénquima angular %olénquima laminar %olénquima anular %olénquima lagunar

>ACES CONDUCTORES ) az conductor colateral cerrado 2 az conductor colateral abierto

TIPOS DE TRICOMAS

A Pluicelula B C!nico unicelula C "lan#ula la$o

% "lan#ula coto & "lan#ula 'luicelula F (i)to " &stella#o * +ticante

0econocer y caracterizar los principales (eidos CO'PETENCIAS, 'eristemáticos, 3arenquimáticos, 'ecánicos, 3rotectores, %onductores y Decretores vegetales de valor diagnóstico.

'ATERIALES, 'aterial )e#etal - Pelargonium hortorum AgeranioB +&oa - Cucurbita pepo AzapalloB +talloo C" ma&ima AcalabazaB - Citrus aurantium AnaranaB +fruto Ficus elastica Acauc&oB +pecíolo - Sambucus peruviana ADa
TE?IDO 'EC$NICO -. 0ealizar cortes transversales del tallo de zapa llo o calab aza o &inoo o sauco , &acer el montae con una gota de safranina y observe? debao de la epidermis, reconocer células de forma poliédrica, con engrosam iento en los ángulos y débilmente teida s? C1l9n@uima an#ular. !n las mismas muestras, por debao del parénquima se presentan células con paredes engrosadas y teidas intensamente, fibras de E2cler9n@uima* TE?IDO CONDUCTOR O )ASCULAR /. 0ealizar cortes longitudinales y transversal del tallo de zapallo, el montae en una gota de safranina y observe? el &elicoidal por las tráqueas con engrosamientos ilema formado espiralado, y reticulado. P los &aces vasculares ordenados.que los tipifican en anillado,

TE?IDO SECRETOR 1. 0ealizar cortes longitudinales del pecíolo de la &oa de cauc&o, preparar el montae con una gota de agua y observar? a mayor aumento células alargadas conteniendo látex? LATIC+5ERO NO ARTICULADO. reconocidos por su contenido de color gris. !n corte sub=paradermal de cáscara de narana se observará las cavidades lisígenas y en cortes transversales de &inoo reconocer los canales secretores.

= = = =

ESTRUCTURA INTERNA DE TALLO 0 >O?A 4. 0ealizar cortes transversales en sauco, &acer el montae en una gota de safranina. ) mayor aumento reconocer la estructura secundaria de tallo +dicotiledónea y los siguientes teidos? 3eridermis +con vestigios de epidermis = %ambium vascular 3arénquima cortical clorofiliano = Qilema primario y secundario. Líber primario +floema esclerosado = 0adios medulares, células de parénquima. Floema secundario ='édula, células de parénquima incoloro 5.= 0ealzarlacortes transversales &oacon de c&irimoya, &acer el montae en agua. "bservar estructura bifacial deen&oa, las epidermis abaxial y adaxial y el mesófilo compuesto por el parénquima clorofiliano en empalizada y el parénquima lagunar.

RESULTADOS, acer esquemas de sus observaciones en la oa de "bservaciones y elaborar el informe de su práctica mediante un 3rotocolo de análisis botánico seg
ACTI)IDAD DE IN)ESTI(ACIÓN BIBLIO(R$5ICA *. !n qué consiste la (axonomía vegetal, de un eemplo. -. Rué función realizan los diferentes tipos de teidos vegetales, grafique y seale el uso mediante un cuadro. (ipo de (eido

Función

3resentes en especies vegetales. Jombre com
RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS, *. )L;):!, )., '"D()%!0", K. *887. 2otánica Farmacéutica, Lima. -. )J#EL", 3., ;>)S, F. *886. La medicina tradicional en el desarroll o de fitomedicamentos, el enfoque etnofarmacológico. Lima.

1. 4. 5. 6. 7. 8.

/. 20)%T !., ). *88 8. ;ic cionario enci clopédico de las plantas LL", !. -996. 'anual de Fitoterapia. 3rimera !dición. !ditorial !lsevier. 2arcelona. %EL(E0)L. -994. )tlas de 2otánica? !l 'undo de las 3lantas. ED). ;>)S, (. -991. %urso de 2otánica. !D)E, T. -997. )natomía vegetal. (ercera !dición. !ditorial "mega. 2arcelona. F)J, ). *881. )natomía vegetal. !dit. 2lume, 'adrid. F"J( RE!0, 3ío *88/. ;iccionario 2otánica, !dit. Labor, 2arcelona.

OBSER)ACIONES DE LA PR$CTICA N% 8 >ISTOLO(+A )E(ETAL, Te;id12 Paren@uimátic12. 'ecánic12. Pr1tect1re2. C1nduct1re2  Secret1re2 ;ibue o esquematice sus observaciones

F!%)?.......C...........C........













PR$CTICA N% < 'OR(OLO(+A )E(ETAL Ra=6. Tall1. >1;a2. 5l1r. 5rut1  2emilla 'ARCO TEÓRICO, La morfología estudia los órganos de la planta y las partes que los forman. !stos órganos son la raíz, el tallo y las &oas que llamamos órganos vegetativos y la flor y el fruto, que son los órganos reproductivos. Las raíces se pueden clasificar de acuerdo a su srcen, al medio en que viven por su forma, por su duración y por su consistencia.) diferencia de las raíces, el tallo presenta geotropismo negativo, tiene nudos +lugares donde se srcinan las &oas y entrenudos +regiones entre dos nudos consecutivos, yemas +áreas del tallo situadas usto por encima del punto de inserción de la &oa apical y axilares y por lo com
CO'PETENCIAS, Flor, Fruto y semilla 'ATERIALES,

0econocer y caracterizar los principales órganos de la planta +0aíz, (allo, oas,

;iferentes tipos de +0aíz, (allo, oas, Flor, Fruto y Demilla Lupas oa de afeitar 0eglas 3lacas 3etri

PROCEDI'IENTO, >dentificar seg
SEMILLA

TALLO

RESULTADOS, acer esquemas de sus observaciones en la oa de "bservaciones y elaborar el informe de su práctica mediante un 3rotocolo de análisis botánico seg%".

6O!AS TIPOS DERAÍ5 RAÍ5 INFLORESCENCIA

ACTI)IDAD DE IN)ESTI(ACIFN BIBLIO(RÀ5ICA *. ;e - eemplos de 0aíces, oas, (allos, Flores, Frutos y Demillas con usos medicinales mediante un cuadro. Jombre %om
Jombre %ientífico

Vrgano de la planta

Re3erencia2 Bi7li1#rá3ica2

*. (&e 3lant List? NNN.t&eplantlist.org -. (&e 3lants ;atabase? &ttp?CCplants.usda.govCavaC /. (rópicos, 'issouri 2otanical #arden? NNN.tropicos.org

Eso medicinal

FLOR

1. )sociación Latinoamericana de 2otánica? &ttp?CCNNN.botanica=alb.orgClinXs.p&p 4. 0eal Kardín 2otánico? &ttp?CCNNN.rb.csic.esCardinbotanicoCardinCindex.p&pI %abY***ZlenYes

FRUTO

OBSER)ACIONES DE LA PR$CTICA N% < 'OR(OLO(+A )E(ETAL Ra=6. Tall1. >1;a2. 5l1r. 5rut1  Semilla ;ibue o esquematice sus observaciones

F!%)?.......C...........C.......

'uestra (ipo de 0aíz "bservación




'uestra (ipo de (allo "bservación




'uestra (ipo de &oa "bservación




'uestra (ipo de Flor "bservación




'uestra (ipo de Fruto "bservación




'uestra (ipo de Demilla "bservación




PR$CTICA N% G CONTROL BOT$NICO EN UNA ESPECIE )E(ETAL PERUANA A IN)ESTI(AR

'ARCO TEÓRICO, Las plantas constituyen un recurso valioso en los sistemas de salud de los países en desarrollo. La "rganización 'undial de la Dalud +"'D &a estimado que más del 79G de la población mundial utiliza, rutinariamente, la medicina tradicional para satisfacer sus necesidades de atención primaria de salud y que gran parte de los tratamientos tradicionales implica el uso de extractos de plantas o sus principios activos +)Xerele, *88/$ D&eldon et al., *886$ D&rest&a y ;&illion, -99/$ TateNa et al., -991. ;e acuerdo a la "'D +*868 una planta medici nal es definida como cualquier especie vegetal que contiene sustancias que pueden ser empleadas para propósitos terapéuticos o cuyos principios activos pueden servir de precursores para la síntesis de nuevos fármacos. !stas plantas también tienen importantes aplicaciones en la medicina moderna. !ntre otras, son fuente directa de agentes terapéuticos, se emplean como materia prima para la fabricación de medicamentos

semisintéticos más compleos, la estructura química de sus principios activos puede servir de modelo para la elaboración de drogas sintéticas y tales principios se pueden utilizar como marcadores taxonómicos en la b
CO'PETENCIAS,

=0ealizar el análisis 2otánico 'acroscópico de la especie vegetal a investigar, 0econociendo morfológicamente los diferentes órganos de la especie. =0econocer y caracterizar los principales órganos de la planta a nivel microscópico mediante cortes &istológicos +0aíz, (allo, oas, Flor, Fruto y semilla con ayuda de la &istoquímica. = 0ealizar el análisis organoléptico de los diferentes órganos de la especie vegetal. 3lacas 3etri %ámara Fotográfica

'ATERIALES, !specie vegetal a investigar y sus órganos . Lupas oa de afeitar 0eglas

Láminas y laminillas, gotero, estiletes oa de afeitar nueva, papel lente. Dafranina. Lugol, !tanol al 49G y agua destilada. 'icroscopio

PROCEDI'IENTO, *. 0ealizar el )nálisis 'acroscópico, organoléptico +olor, sabor, color, textura de los diferentes órganos de la especie.

Ta7la Nr1* !* Análi2i2 macr12cóic1. caracter=2tica2 1r#an1l9tica2 de Ra=6. Tall1. >1;a. 5l1r. 5rut1  Semilla

-. 0ealizar el análisis microscópico de la especie vegetal a estudiar con ayuda de la &istoquímica y identificar los diferentes tipos de teido presentes en la especie.

Ta7la Nr1* 8* Análi2i2 micr12cóic1. Cit1l1#=a e >i2t1l1#=a de Ra=6. Tall1. >1;a. 5l1r. 5rut1  Semilla Ór#an1 de la E2ecie ve#etal 0aíz

Ti1 de C1rte

>i2t1@u=mica T9cnica de Tinción

%.(.

Fresco, Dafranina y Lugol

(allo

%.(. %.L.

Fresco, Dafranina y floroglucinol Fresco, Dafranina y floroglucinol

oa

%.3. %.(.


Flor

%.L. %.3.

Fresco, Dafranina Fresco, Dafranina Lugol

Fruto

%.3.

Fresco,

%.(.

Dafranina y Lugol

0aspado

Fresco y Lugol

Demilla

O72ervación

ACTI)IDAD DE IN)ESTI(ACIFN BIBLIO(RÀ5ICA *. ;esarrolle un Fluograma de las etapas para realizar un estudio 2otánico en especies vegetales con uso medicinal.

Re3erencia2 Bi7li1#rá3ica2

*. D"0>), 0., %)0E)3"'), '. -994. 'anual de prácticas de 2otánica #eneral y Distemática. Lima -. D"ETE3, K. *86*. :ocabulario de Jombres :ulgares de 3lantas 3eruanas, !d. Dalesiana, Lima. /. D(0)D2E0#!0, !. J"LL, F. -991. (ratado de 2otánica. /4\ ed. !diciones "mega. 2arcelona. 1. ("')D=;"']J!%, K.'. *886. )tlas (emático de 2otánica. 2arc elona. 4. ("D%" E. *88/ )tlas de 2otánica. !dit. 2arcelona. 5. :)L;>S)J .$ ')L;"J);" ). *8--. La 'edicina 3opu lar 3eruana >mp. (orres )guirre, Lima. 6. :)LL), K. -9**. 2otánica. 'orfología de las plantas superi ores. 3rimera !dición. !ditorial emisferio Dur. 7. :!J(E0), ". -9*9. Las 3lantas )romáticas y 'edicinales. 3rimera !dición. Lima 8. :>LL)0, E. -991. Fitoterapia. 3rimera !dición. !ditorial )cribia. Saragoza *9. ^!2!02)E!0 ). *814. !l 'undo :egetal de los )ndes 3eruanos. 'inisterio de )gricultura. Lima. **. Flora de %&ina? &ttp?CCflora.&u&.&arvard.eduCc&inaC *-. Kournal of Jatural 3roducts? &ttp?CCNNN.ournalofnaturalproducts.comC */. Jature 'edicine? &ttp?CCNNN.nature.comCnmCindex.&tml *1. 3&ytoc&emistry? &ttp?CCNNN.ournals.elsevier.comCp&ytoc&emistryC *4. 0aintreeMs (ropical 3lant ;atabase? &ttp?CCNNN.rain=tree.comCplistbot.&tmO.Ex8n;;84J3> *5. 0evista peruana de biología? &ttp?CCrevistasinvestigacion.unmsm.edu.peCindex.p&pCrpb *6. 0evistas de investigación EJ'D'? &ttp?CCrevistasinvestigacion.unmsm.edu.peC

OBSER)ACIONES DE LA PR$CTICA N% G CONTROL BOT$NICO DE LA ESPECIE )E(ETAL 'EDICINAL 'OR(OLO(+A )E(ETAL CITOLO(+A e >ISTOLO(+A. Ra=6. Tall1. >1;a2. 5l1r. 5rut1 Semilla.

;ibue o esquematice sus observaciones

F!%)?.......C...........C........

'uestra 0aíz "bservación




'uestra (allo "bservación




'uestra &oa "bservación

'uestra Flor "bservación







'uestra Fruto "bservación




'uestra Demilla "bservación




PR$CTICA N% H CONTROL DE CALIDAD DE DRO(AS )E(ETALES* ENSA0OS BOT$NICOS. AN$LISIS CUALITATI)O DE CONSTITU0ENTES U+'ICOS. TA'I&A?E 5ITOU+'ICO EN ETRACTO ACUOSO* PREPARACIÓN DEL ETRACTO ETANÓLICO* 'ARCO TEÓRICO, Las plantas a nivel mundial ocupan un lugar importante en el comercio de medicamentos y en los preparados fitoterapéuticos y por ende es necesario garantizar su control de calidad con aplicaciones de técnicas modernas y el uso de patrones adecuados que den seguridad y eficacia al utilizarlas. Las Farmacopeas describen métodos de ensayos generales para evaluar o valorar las drogas oficiales. La "rganización 'undial de la Dalud +"'D &a recomendado la realización de monografías y la implantación de normas o especific aciones de calidad, basadas en la experienci a de cada país, para aquellas drogas no incluidas en las Farmacopeas y que son ampliamente utilizadas en 'edicina (radicional.

3ara evaluar o valorar las drogas es necesario identificarlas y determinar su calidad y pureza, lo cual se traduce en su valor intrínseco, o lo que es lo mismo, en la cantidad de principios activos presentes en ella. Los ensayos botánicos son importantes y se deben realizar al inicio de la investigación de la planta medicinal para determinar su identificación taxonómica y tener la certeza de la planta a investigar.

(e#icamento

Plantas me#icinales

(ateia 'ima , F!mula ma$istal 

CONTROL Se$ui#a# / eficacia #enti#a#

Cali#a#

El C1ntr1l de Dr1#a2 )e#etale2 inv1lucra, _

En2a12 B1tánic12, C1ntr1l de identidad, ;eterminación de sus características macroscópicas y microscópicas.  ;eterminación cualitativa de sus principios activos +&istoquímico.



_

C1ntr1l de calidad, ;eterminación cualitativa de sus principios activos.  %uantificación de sus principios activos.  "tras determinaciones cuantitativas  ;eterminación de su actividad farmacológica. 

_

!stos ensayos se realizan de acuerdo a las Farmacopeas.

CO'PETENCIAS, =0ealizar el análisis botánico macroscópico de la especie vegetal a investigar, reconociendo morfológicamente los diferentes órganos de la especie. =0econocer y caracter izar los principales órganos de la planta a nivel microscópico mediante cortes &istológicos +0aíz, (allo, oas, Flor, Fruto y semilla con ayuda de la &istoquímica. =0ealizar el análisis organoléptico de los diferentes órganos de la especie vegetal. =3reparar el extracto acuoso y etanólico de la especie a investigar para &acer los análisi s cualitativos correspondientes. 'ATERIALES, _ _ _

!specie vegetal a investigar con los órganos de la especie a investigar. Lupas oa de afeitar

_ _ _ _ _

_ 0eglas 3lacas 3etri Láminas y laminillas, gotero, estiletes  oa de afeitar nueva, papel lente. Dafranina. Lugol, Fast #reen, verde Kanus, 0oo de metilo, azul de toluidina, &ipoclorito de Dodio, !tanol al 49G y agua destilada. 'icroscopio 0eactivos para el análisis cualitativo. +tamizae fitoquimico

PROCEDI'IENTO, *. el )nálisis macroscópico, organoléptico +olor, sabor, color, textura de los diferentes órganos de0ealizar la especie.

Ta7la Nr1* !* Análi2i2 macr12cóic1. caracter=2tica2 1r#an1l9tica2 de Ra=6. Tall1. >1;a. 5l1r. 5rut1  Semilla

-. acer el )nálisis microscópico de los diferentes órganos de la especie y de la droga vegetal. /. >dentificar los principios activos en los cort es &istológicos mediante reacciones &istoquímicas.

Ta7la Nr1* 8* Análi2i2 micr12cóic1. Cit1l1#=a e >i2t1l1#=a de Ra=6. Tall1. >1;a. 5l1r. 5rut1  Semilla Ór#an1 de la E2ecie ve#etal 0aíz

Ti1 de C1rte

>i2t1@u=mica T9cnica de Tinción

%.(.


(allo

%.(.


Rec1n1cimient1 de caractere2 dia#nó2tic12

oa

%.3.

Flor

%.(. %.3.

Fruto Demilla

%.3. %.(. 0aspado


Fresco, Dafranina y Lugol Fresco, Dafranina y Lugol Fresco, Dafranina y Lugol

3reparación del extracto acuoso y etanólico de la especie a investigar para &acer los análisis cualitativos correspondientes? *. 3reparar el extracto acuoso de -9 g de la especie medicinal en *99 mL de agua destilada y llevar a decocción en 2' por *4 minutos y realizar el tamizae fitoquímico. -. 3reparar con -9 g de la espec ie medicinal el extracto etanólico en *99 mL +eta nol de 85` en maceración por 6 días para realizar el tamizae fitoquímico.

TA'I&A?E 5ITOU+'ICO !l tamizae fitoquímico o A Screening fitoquímicoB es una de las etapa s iniciales de la inv estigación fitoquímica, que permite determinar cualitativamente los principales grupos de constituyentes químicos de la planta, a partir del cual se puede orientar las extracciones yCo el fraccionamiento de los extractos eligiendo los grupos de mayor interés para el investigador.

ETRACTO ACUOSO, CARBO>IDRATOS, 4 Reacción de '1li2 c: #otas de muestra problema  gotas de D. 0. de 'olisc& A)B +alfa naftol -G en alco&ol, agitar  -D"1 conc. por las paredes del tuboanillo color violeta.+ para carbo&idratos +az
C1mue2t12 3enólic12,

#otas de muestra problema  gotas de Fe%l/ +Dol. al *G en agua o alco&ol color verde o azul. + presencia de compuestos fenólicos, taninos.

TANINOS, =Reacción de (elatina #otas de muestra problema  gotas de D.0. gelatinapp blanco+ (aninos 4Reacción de A#ua de Br1m1 #otas de muestra problema  gotas de agua de bromopp. taninos condensados y no pp taninos &idrolizables.+ (aninos A'INO$CIDOS 0 PROTEINAS 4Reacción de Nin:idrina #otas de muestra problema  D.0. de Jin&idrina +Jin&idrina al *G en etanol  calor 2' *9 minutos color violáceo. + 3ara aminoácidos libres y amino grupos +calentar en algunos casos. 5LA)ONOIDES 4Reacción de S:in1da #otas de muestra problema  D.0. D&inoda +'g metálico  gotas de %lconc.  color roo. + presencia de flavonoides, c&alconas, auronas$ catequina e isoflavona no dan color. ESTEROIDES 0KO TRITERPENOIDES 4Reacción de Lie7erman4Burc:ard #otas de muestra problema  D.0. de Lieberman=2urc&ard+gotas de cloroformo  gotas de an&ídrido acético  gotas de -D"1 conc.color verde, azul, narana, roo. + presencia de esteroides y triterpenoides. UINONAS 4Reacción B1rntra#er #otas de de muestra problema  D.0. 2orntrager +gotas de &idróxido de sodio quinonas

4Gcolor roo. +

ALCALOIDES 4Reacción de Dra#end1r33 #otas de muestra problema  gotas de D.0. ;ragendorff pp narana o roo narana + alcaloides +medio ligeramente ácido. =Reacción de 'aer#otas de muestra problema  gotas de 0. 'ayerpp. blanco.+ alcaloides

4Reacción de S1nnen2c:ein#otas de muestra problema+ alcaloides 4Reacción de Bertrand#otas de muestra problema  gotas de D.0. 2ertrand pp blanco+ alcaloides ANTOCIANINAS 4Reacción de R12en:eim #otas de muestra p roblema  gotas de D.0. 0osen&eim +D.0. Podo Poduradaroo oscuro.+ antocianinas y flavonoides catéquicos. CARBONILO =(RUPO Reacción de >idr1ilamina #otas de muestra problema  gotas de D.0. &idroxilaminapp coloreado+ presencia de grupo carbonilo. SAPONINAS 4Reacción ara Sa1nina2

* g de muestra problema  *9 mL de agua destilada. )gitar fuertemente por * minutoproducción de espuma por *4 minutos de 9.4 a * cm+ presencia de saponinas.

(LICÓSIDOS .4Reacción de )ainill=n 2ul3ric1 #otas de muestra problema  gotas de D.0. :ainillín sulf
ACTI)IDAD DE IN)ESTI(ACIFN BIBLIO(RÀ5ICA *. Rue análisis seg
RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS Libros:

*. 2runeton, K. Farmacognosia U Fitoquímica U 3lantas 'edicinales. /ra. !d. )cribia, Saragoza, !spaa -99*. -. (reasse, #., !vans, ^. 3&armacognosy. !d. 2ailliere(indall, Londres *881. /. 0eynaud, Kol. La flora del farmacéutico. !spaa, -99-. 1. LocX de Egaz ". %olorantes naturales. *ra !dición. Lima, *886. 4. ED3, 3&armacopeia, Jational Formulary +ED3 JF.Q:>>, Q>Q, QQ, QQ>, QQ>> , QQ>>>, QQ>Q, QQQ. Revistas

Kournal of Jatural 3roducts U ED) Lloydia U )soc. )mericana de Farmacognosia de ED). 3&armacognosy (itles U Londres U >nglaterra 3&ytoc&emistry U Londres = >nglaterra 2iblioteca virtual !2D%" "D( 0esearc&;atabases+&ttp?CCsearc&.ebsco&ost.comC Kournal of )nalytical %&emistry %&emical2iologyZ;rug;esig RESULTADOS DE LA PR$CTICA Nr1* H

A* Realice el análi 2i2 1r# an1l9tic1, %olor? "lor? Dabor? B* C1mlete el Cua dr1 2e#n l a2 Reacci1ne2 del Tami6a;e 3it1@u=mic1 MESTRA PROBLEMA

REACC1N

RESULTADOS

TPO *E A4CAR

LEYENDA: (-) Nulo(-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante

PR$CTICA N% "

AN$LISIS 5AR'ACO(NÓSTICO 0 TA'I&A?E 5ITOU+'ICO PRELI'INAR EN ETRACTOS ESTANDARI&ADOS +!Q(0)%(" !()JVL>%" '-TODO DE SEPARACIÓN 0 PURI5ICACIÓN DE DRO(AS )E(ETALES +%0"')("#0)F@) !J %)3) F>J) 'ARCO TEÓRICO, ETRACTO ESTANDARI&ADO 0 TA'I&A?E 5ITOU+'ICO 'uc&os principios activos presentan una estructura química perfectamente definida, mientras que otros, al formar parte de mezclas compleas resulta difícil determinar cuál es el compuesto activo. La !xtracción obtiene porciones medicinalmente activas a partir de los teidos de las plantas y animales, de los componentes inertes de los mismos, mediante el uso de solventes selectivos, utilizando procedimientos establecidos y correctamente estandarizados. 3ara poder realizar el ai2lamient1 de un rincii1 natural en condiciones óptimas, se debe tener en cuenta una serie de dificultades, in&erentes a la propia planta o materia prima como al tipo de compuesto a extraer. 3or esta razón la planta se some te a una serie de 1eraci1ne2 revia2 que facilitan y meoran el rendimiento de la extracción. !xisten una serie de métodos que &an sido desarrollados y aplicados para una detección de los diferentes constituyentes químicos en las plantas, basadas en la extracción de éstos con solventes apropiados y en la aplicación de pruebas de coloración o precipitación llamado (amizae Fitoquímico.

CRO'ATO(RA5+A EN CAPA 5INA CC5 1 TLC La cromatografía en capa fina +en inglés t&in layer c&romatograp&y o (L% es una técnica analítica rápida y sencilla que permite?

_ _ _

_ ;eterminar el grado de pureza de un compuesto. De puede determinar así, por eemplo, la efectividad de una etapa de purificación. %omparar muestras. Di dos muestras cor ren igual en plac a podrían ser idénticas. Di, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia. 0ealizar el segu imiento de una reac ción. !s posib le estudiar cómo desaparecen los r eactivos y cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cuándo la reacción &a acabado. La muestra a analizar se deposita cerca de un ex tremo de una lámina de plástico o aluminio que previamente &a sido recubierta de una fina capa de adsorbente +fase estacionaria. !ntonces, la lámina se coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclado +eluyente o fase móvil.) medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente, se produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.

5i#* !* Prearación de la Cr1mat1#ra3=a en Caa 5ina

CO'PETENCIAS, - 0ealizar el (amizae Fitoquímico en el extracto etanólico de la especie a investigar. - 0ealizar el análisis cualitativo mediante método de separación? %romatografía en %apa Fina. 'ATERIALES, _ !xtracto etanólico de la !specie vegetal a investigar. _ 0eactivos para el análisis cualitativo +(amizae Fitoquímico _ 0eactivos para el análisis cualitativo +%romatografía en %apa Fina PROCEDI'IENTO, *. Prue7a de 21lu7ilidad frente a diferentes solventes de menor a mayor polaridad.  Filtrar el extracto el extracto etanólico del método de maceración de 4 a 6 días y colocar * mL del extracto fluido o filtrado en cada tubo de vidrio, luego llevarlo a 2ao 'aría &asta sequedad.  )gregar * mL del solvente de menor a mayor polaridad +agua destilada, etanol, metanol, acetato de etilo, cloroformo, diclorometano y éter de petróleo sobre cada tubo del extracto seco. )gitar por 4 minutos &asta disolver el extracto y anotar los resultados. -. Tami6a;e 5it1@u=mic1 en el etract1 etanólic1* 0ealizar el tamizae fitoquímico &aciendo uso de 0eactivos de coloración y precipitación para identificar la presencia de los principios bioactivos presentes en el extracto y anotar los resultados en el %uadro correspondiente. /. Análi2i2 cualitativ1 mediante m9t1d1 de 2earación, Cr1mat1#ra3=a en Caa 5ina* - 3roceder a colocar el sistema de solvente +acetato de etilo? metanol? agua +*99?*/.4?*9 o %loroformo? metanol +/?*, colocar una tira de papel filtro para crear el sistema, tapar la cuba. - Dembrar el extracto etanólico con ayuda de capilares en los cromatofolios de silica gel F-41 en capa de aluminio, luego colocarla placa en la cuba cromatográfica, observar en luz visible, luz

-

ultravioleta, anotar sus observaciones y luego proceder a revelar la placa con solución etanolica de %loruro férrico, vainillin sulfodo. %alcular el 0f? La distancia recorrida por el compuesto se mide desde el centro de la manc&a 0f Y distancia recorrida por el compuesto +Q C distancia recorrida por el eluyente +P

Fi. C5('u(o #e( R6

TA'I&A?E 5ITOU+'ICO METABOLTO

REACC1N Mo(i8 /!(6! n!6&o( 29 en !('o8o(

An&"on! CARBO$*RATOS

/!n&"on! en $2SO< '' !( 29 

PROCE*MENTO  o&! #e MP;  o&! #e Mo(i8 !i&!";  o&! #e $2SO< CC

REACC1N POSTVA Ani((o vio(e&!

 o&! #e MP ;  o&! #e An&"on!

Co(o"!'i)n ve"#e

 o&! #e MP ;  o&! #e Fe8(in A;  o&! #e Fe8(in B ; '!(en&!" en B.M

Co(o"!'i)n "oo (!#"i((o

Fe8(in /A: CuSO<= B: &!"&"!&o ,i>&o #e +o&!io ? o#io /@N!C<$
COMPESTOS FEN1LCOS TANNOS

FeC(3

 o&! #e MP ;  o&! #e FeC(

3

D0 9

Ge(!&in!

 o&! #e MP ;  o&! #e e(!&in!

FLAVONO*ES

S8ino#!

 o&! #e MP ; D-2 vi"u&! #e M ,e&5(i'o ;  o&! #e $C( ''

ANTOCANNAS  FLAVONO*ES CATCOS

Roen8ei, /So(. o#o o#u"!#!

 o&! #e MP ;  o&! #e Roen8ei,

Co(o"!'i)n ve"#e o !u( P"e'i+i&!#o #eno %(!n'o Chalconas, auronas, isoflavanonas: No 8!? 'o(o"!'i)n. A,!"i((o "oio. Isoflavanonas ! ,!en&!. Flavanonoles:: Roo Flavonas y flavonoles: A,!"i((o ! "oo Co(o"!'i)n"oo o'u"o

AMNOC*OS LBRES  GRPOS AMNO

 o&! #e MP ;  o&! #e nin8i#"in! ; '!(en&!" en B.M D0 ,in.

*"!en#o"66

Sonnen'8ein

 o&! #e MP ; ev!+o"!" e( o(ven&e B.M ; V o&! #e $C( D09;  o&! #e *"!en#o"66  o&! #e MP ; ev!+o"!" e( o(ven&e B.M ; V o&! #e $C( D09; ;  o&! #e M!?e"  o&! #e MP ; ev!+o"!" e( o(ven&e B.M ; V o&! #e $C( D09; ;  o&! #e Be"&"!n#  o&! #e MP ; ev!+o"!" e( o(ven&e B.M ; V

/5'i#o 6o6o,o(I%#i'o

o&! #e $C( D09;;  o&! #e Sonnen'8ein

verdoso

 o&! #e MP ;  o&! #e Bo"n&"!e"

Co(o"!'i)n"o!

/?o#u"o +o&5i'o- %i,H&i'o  M!?e" /?o#u"o +o&5i'o ,e"'H"i'o

Be"&"!n# /5'i#o

ALCALO*ES

i(I'o&Hn&i'o

NAFTANONAS ANTRANONAS  ANTRANONAS

Co(o"!'i)n vio(5'e!

Nin8i#"in!/0.D9 en e&!no(

Bo"n&"!e" /N!O$ K9

TRTERPENO*ES  ESTERO*ES

Lie%e",!n-Bu"'8!"#

SAPONNAS

Gene"!'i)n #e e+u,!

GLC1S*OS

B!(e&

LACTONAS

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CMARNAS

N$
 o&! #e MP ; ((ev!" ! eue#!# en B.M ;  o&! #e '(o"o6o",o;  o&! #e !n8I#"i#o !'&i'o; $2SO< '' en on! /+o" (! +!"e#e #e &u%o in !i&!". D ,L #e MP ; K ,L #e !u! #e&i(!#! ; !i&!" 6ue"&e,en&e +o" D ,in.  o&! #e MP ; V o&! #e 5'i#o +I'"i'o D 9 ; V o&! #e N!O$ !( K 9.  o&! #e MP ; V o&! #e #eni&"o+"ui!&o #e o#io 0.K9 ; V o&! #e @O$ 2N.  o&! #e MP ; +!+e( 8u,e#e'i#o 'on N$
P"e'i+i&!#on!"!n! P"e'i+i&!#o %(!n'o Precipitado blanco Precipitado amarillo-

Esteroides: ve"#e-!u( Triterenoides: "oo-n!"!n! Fo",!'i)n #e 0.K ! D ', #e e+u,! e&!%(e +o" DK ,in. Co(o"!'i)n !n!"!n!#! Co(o"!'i)n "oo o'u"o F(uo"e'en'i! 'e(e&e

ACTI)IDAD DE IN)ESTI(ACIÓN BIBLIO(R$5ICA *. Rue reacciones químicas se dan en el (amizae Fitoquímico.

RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS *. :illar del Fresno, ). Farmacognosia #eneral. !d. Díntesis, D). 'adrid, !spaa *888. -. (reasse, #., !vans, ^. 3&armacognosy. !d. 2ailliere(indall, Londres *881. /. #attuso, #attuso. 'anual de 3rocedimientos para el )nálisis de ;rogas en 3olvo. *ra ed. ) rgentina? !ditorial Eniversidad Jacional de 0osario Erquiza.*888. 1. 2runeton, K. Farmacognosia, Fitoquímica, 3lantas medicinales -\ !d. )cribia, Saragoza, !spaa. -99*. 4. TuXlinsXi, %. Farmacognosia, !studio de las drogas y sustancias medicamentosas de srcen natural. !d. "mega, 2arcelona, !spaa -99/. 5. D&arapin J. Fundamentos de (ecnología de 3roductos FitoterapéuticosDanta fe 2ogota %olom bia -999. 6. 'iranda '. 'étodos de )nálisis de ;rogas y !xtractos, abana %uba -99-. 7. LocX de Egaz. >nvestigación Fitoquímica, 'étodos en el estudio de productos naturales en línea. 3er
&ttp?CCbooXs.google.com.peCbooXsI idYJ/5g-R"ccQX%ZpgY3)-76ZdqYpruebacondragendorffZ&lY esZsaYQZeiYd6bJEaz0sQ1)D8oP2RZvedY9%!)R5)!N2)OvYonepageZqYpruebaG-9conG-9d ragendorffZfYfalse.

PROTOCOLO RESULTADOS DE LA PR$CTICA Nr1* "

_

Prueba de solubilidad

Solventes

E#tracto seco $"%&

A%ua destilada Etanol 'etanol n()utanol Acetato de etilo Dicloro"etano Clorofor"o Eter de etr*leo

_



LEYENDA: soluble

(-) $nsoluble

ami!a"e fito#uímico (+) li%eramente soluble

(+++) &oluble (+++) 'u

$%ella

Cromato&r'#ica P"e+!"!'i)n #e ,ue&"!: Pe!" 0.D  #e e>&"!'&o e'o ? o(u%i(i!" en K ,L #e o(ven&e /o e,%"!" e( 6i(&"!#o #e( e>&"!'&o. F!e e&!'ion!"i!: SI(i'! e(

Es!ue"a de resultado Calcul1 de R3

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS, PR$CTICA N% M ETRACCIÓN E IDENTI5ICACIÓN DE CARBO>IDRATOS SI'PLES 0 OLI(ÓSIDOS A PARTIR DE DRO(AS NATURALES* REACCIONES (ENERALES 0 PARTICULARES DE CARBO>IDRATOS 'ARCO TEÓRICO, #l
osas i$uales P1SAC R%S m6 s #e 0 osas *&&R" 45&S osas #ifeentes

6ETER 7SIDOS osa 8 a$lic !n

%lasificación de %arbo&idratos ;0"#)D RE! %"J(>!J!J %)02">;0)("D =;isacáridos? Dacarosa, lactosa. =3olisacáridos? )lmidones, dextranos, celulosa, pectinas.

=#omas? #oma arábica, goma tragacanto, goma guar. ='ucílagos? )gar, carragaen, alginatos, algas marinas de la costa patagónica. ='onosacáridos y derivados? #lucosa, fructosa, manitol, sorbitol, xilitol, lactulosa.

CO'PETENCIAS,%apacitar al estudiante para que adquiera &abilidad de realizar el análisis cualitativo y el (amizae Fitoquímico en el extracto etanólico de la especie a investigar y en drogas vegetales para determinar la presencia de los %arbo&idratos. >dentificar y diferenciar los carbo&idratos. 'ATERIALES  REACTI)OS, _ !xtracto etanólico de la !specie vegetal a investigar. _ 0eactivos para el análisis cualitativo +(amizae Fitoquímico?'olis&, )ntrona, Fe&ling, 2enedict, (ollens, Delivanoff, Ja", Fenil&idrazina, Podo -.4G, -D"1 cc, T" 4G, !tanol absoluto, 2a+"- *9G, %l diluido, )cetato de plomo neutro y básico, lugol _ "tros materiales necesarios +(ubos de ensay o, gradillas, embudo, cocinilla, beacXers grande y c&icos, baguetas, goteros, pipetas, papel filtro, capsula de porcelana, mec&ero y balanza _ 'iel de abea, )z
*io(ve" 2  en 20 ,L #e !u! #e&i(!#!

'iel de abea

*io(ve" 2  en 20 ,L #e !u! #e&i(!#!

3apa +)L'>;"J

R!((!" e( &u%"'u(o en un %e!'e" 'on&enien#o !u! (ueo e>+"i,i" ! &"!v #e (! !! "e'oien#o e( (Iui#o en un %e!'e" #e!" e#i,en&!" ? (!v!" +o" #e'!n&!'i)n v!"i! ve'e. &i(i!" (! o(u'i)n #e !(,i#)n #e +!+! +!"! (! "e!''ione.

)lgodón +%!LEL"D)

Sin &"!&!,ien&o

'anzana +3!%(>J)D

Pe!" 2  #e ,!n!n! &"o!#! o "!((!#! e'!" en e&u6! > DK ,in ! DK0 C (ueo (!v!" (! ,ue&"! 'on D0 ,L !('o8o( 3 ve'e A( "ei#uo !"e!" D0 ,L $C( !( D09 > DK ,inu&o. Fi(&"!" ? &"!%!!" 'on (! o(u'i)n.

Linaza +'E%@L)#"D

Pe!" D0 "!,o #e e,i((! #e (in!! !"e!" K0 ,L #e !u! #e&i(!#! ? o,e&e" ! e%u((i'i)n > DK ,inu&o #e'!n&!" ? &"!%!!" 'on (o ,u'I(!o #e (in!!.

H* Tami6a;e 5it1@u=mic1 en el etract1 etanólic1*

_

_ 0ealizar el tamizae fit oquímico &ac iendo uso de 0eactivos de coloración y precipitación para identificar la presencia de %)02">;0)("D presentes en el extracto y anotar los resultados en el %uadro correspondiente. 0ealizar el tamizae Fitoquímico con los extractos acuosos de las 'uestras 3roblemas? 'iel de abea, )z
TA'I&A?E 5ITOU+'ICO Reali6ar la2 2i#uiente2 reacci1ne2 2e#n el ti1 de 'ue2tra Pr17lema REACC1N REACCIONES (ENERALES Mo(i8 /!(6! n!6&o( 29 en !('o8o(

An&"on! /!n&"on! en $2SO< '' !( 29 

REACCI)N DE A*+CARES RED+CTORES Fe8(in /A: CuSO<= B: &!"&"!&o ,i>&o #e +o&!io ? o#io /@N!C<$
PROCE*MENTO  o&! #e MP;  o&! #e Mo(i8 !i&!";  o&! #e $ 2SO< CC

Ani((o vio(e&!

 o&! #e MP ;  o&! #e An&"on!

Co(o"!'i)n ve"#e - !u(!#!

 o&! #e MP ;  o&! #e o(u'i)n #e Fe8(in; '!(en&!" en B.M

P"e'i+i&!#o "oo (!#"i((o

Bene#i'& /Ci&"!&o #e N! ; CuSO< ; N!CO3

 o&! #e MP ;  o&! #e Bene#i'&; '!(en&!" en B.M

To((en /ANO3 ; N$
 o&! #e MP ;  o&! #e To((en; '!(en&!" en B.M PROCE*MENTO

REACCIONES DE ALDOSAS , CETOSAS Se(iv!no66 /Reo"'in! ; $C( REACCIONES DE SACAROSA $e"!i( /D ,( Ni&"!&o 'o%!(&oo ; D ,( N!O$ K09 Po--i.scott /Mo(i%#!&o #e A,onio DK9 Pelo%-e /NaO$ 0123

REACC1N POSTVA

 o&! #e MP ;  o&! #e Se(iv!no66 ; '!(en&!" en B.M

Precipitado amarilloverdoso

Fo",!'i)n #e e+eo #e +(!&! REACC1N POSTVA P"e'i+i&!#o "oo /CETOSA

 o&! #e MP ;  o&! #e o(u'i)n $e"!i(

Co(o" vio(e&! -!u(!#!

 o&! '' #e en MPon! ;  o&! #e Re!'&ivo; $2SO<

Fo",!'i)n !ni((o !u(

 o&! #e MP ;  o&! N!O$ D09 ; '!(en&!"

Co(o" !,!"i((o

POLISACÁRIDOS $OMO(4NEOS So(u'i)n #e ?o#o 2.K9

o#o en 5'i#o u(6H"i'o So(u%i(i#!# en $2SO< So(u%i(i#!# en @O$ K9

POLISACÁRIDOS $ETERO(4NEOS

 o&! #e MP /ALM*ON *E PAPA ; V o&! #e o#o 2.K9 Fi%"! #e ALGO*1N ; V o&! (uo( e'!" ; o&! #e $2SO< '' Fi%"! #e ALGO*1N ; Vo&! #e $2SO< '' Fi%"! #e ALGO*1N ; V o&! #e

Co,+(eo !u( #e!+!"e'e +o" '!(o" ? "e!+!"e'e +o" en6"i!,ien&o. O%e"v!" 'o(o" !u( So(u%(e no(u%(e

@O$ K9 P"e'i+i&!#o !,!"i((o e(!&inoo

N!O$ 3N

 o&! #e MP /PECTNAS ;  o&! N!O$ 3N

Fo",!'i)n #e e(

 o&! #e MP /PECTNAS ; 2.K ,L #e !('o8o(

Fo",!'i)n #e e( in'o(o"o

A'e&!&o #e P(o,o %5i'o

 o&! #e MP /MCÍLAGOS ; V o&! #e "e!'&ivo

P"e'i+i&!#o e(!&inoo %(!n'o

Luo(

 o&! #e MP /MCÍLAGOS ; V o&! #e "e!'&ivo

P"een'i! #e !(,i#one /!u( ? #e>&"in! /"oo

ACTI)IDAD DE IN)ESTI(ACIÓN BIBLIO(R$5ICA *. !xplique la 0eacción química para la determinación de %arbo&idratos mediante el (amizae Fitoquímico 'encione 1 -. 'ediante una (abla mencione 7 especies medicinales endémicas o nativas del 3erh, que contengan %arbo&idratos Jombre %om
Jombre %ientífico

Familia

Fotografía

Esos y (ipo de %arbo&idrato presentes.

*. -

RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS *. 2runeton, K. Farmacognosia, Fitoquímica, 3lantas medicinales !spaa. -99*

-\

!d. )cribia, Saragoza,

-. #attuso, #. 'anual de 3roce dimientos para el )nálisis de ;rogas en 3olvo . *ra ed. )rgentina? !ditorial Eniversidad Jacional de 0osario Erquiza.*888. /. TuXlinsXi, %. Farmacognosia, !studio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural. !d. "mega, 2arcelona, !spaa -99/ 1. 'iranda '. 'étodos de )nálisis de ;rogas y !xtractos, abana %uba -99-. 4. "bregón, L.'aca. 3lanta medicinal y nutritiva del 3er<. Lima *877.

6. 7. 8. *9.

5. D&arapin J. Fundamentos de (ecnología de 3roductos Fitoterapéuticos Danta fe 2ogota %olombia -999. (reasse, #., !vans, ^. 3&armacognosy. !d. 2ailliere(indall, Londres *881. :illar del Fresno, ). Farmacognosia #eneral. !d. Díntesis, D). 'adrid, !spaa *888. âllis, (. 'anual de Farmacognosia. !d. %eosa, 'éxico. *88*. Libro roo de plantas endémicas &ttp?CCsisbib.unmsm.edu.peCbvrevistasCbiologiaCv*/n-Ccontenido.&tm RESULTADOS DE LA PR$CTICA Nr1* M

A* Realice el análi 2i2 1r# an1l9tic1, %olor? "lor? Dabor?

B* C1mlete el Cua dr1 2e#n l a2 Reacci1ne2 del Tami6a;e 3it1@u=mic1 MESTRA PROBLEMA

REACC1N

RESULTADOS

TPO *E A4CAR


INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS,

PR$CTICA N%  RECONOCI'IENTO DE CO'PUESTOS 5ENÓLICOS SI'PLES0 CO'PUESTOS ANTRAUINÓNICOS* 'ARCO TEÓRICO, C1mue2t12 3enólic12 2imle2 Los fenoles simples consisten en un anillo fenólico sustituido porgrupos&idroxilos,alde&ídicos o carboxílicos, son relativamente raros en plantas. !l fenol, catecol +fenol divalente,resorcinol +fenol divalente, floroglucinol +fenol tri&idroxilado y pirogalol &an sido reportados raras veces. * !n contraste, la &idroquinona se distribuye en muc&as familias y se &alla como arbutina +&idroquinona="=glucósido. Dr1#a2 c1n C1mue2t12 3enólic12 Dauce Eva ursi +Arctostaph#los uva ursi (Sali& alba) )rbusto de &oas perennes, produce bayas roas. Wrbol caducifolio

Salicina %o$a 9 ho:as

A;utina %o$a 9 ho:a s

C1mue2t12 antra@uinónic12 3oseen una molécula de az
0uibarbo (*heumpalmatum) 3lanta &erbácea perenne con &oas basales, palmeado= partidas

. !modina ;roga? raiz

Den (Cassia angustifolia) )rbusto

Denósido ),2,%,; y aloeemodina ;roga ? &oas

%áscara Dagrada (*hamnuspurshiana) Wrbol de 5=*- m, con ramas redondas y pubescentes.

)loínas ) y 2, ;roga? corteza

S8-%+ 9 A+$e 'er  Planta #e foma aoseta#a< ho:as $an#es< canosas< anchas< s=siles< con una fuete es'ina en el / es'inas m6s 'e>ue?as a lo la$o #e los m6$enes 1as ho:as #e colo ve#e '6li#o con manchas ;lancas en la su'eficie< estia#as@ a veces el ve#e '6li#o cam;ia a o:io< e)halan olo caactes &n el 'a=n>uima se foma un :u$o viscoso / es'eso #e sa;o ama$o< #enomina#o ac;a o aloe< 'inci'io activ o es la a lona >ue 'osee 'o'ie#a#es tea'=uticas

Alonas Aloe- emo#ina %o$a9 ho:as CO'PETENCIAS,%apacitar al estudiante para que adquiera &abilidad de realizar el análisis cualitativo y el (amizae Fitoquímico en drogas vegetales para determinar la presencia decompuestos fenólicos y antraquinónicos 'ATERIALES  REACTI)OS, _ !xtracto etanólico de la !specie vegetal a investigar. _ 0eactivos para el análisis cualitativo +(amizae Fitoquímico

_ "tros materiales necesarios +(ubos de ens ayo, gradillas, embudo, morteros, cocinilla, beacXers grande y c&icos, 2aguetas, goteros, pipetas, papel filtro, capsula de porcelana, mec&ero y balanza

PARTE EPERI'ENTAL >. )nálisis cualitativo 5en1le2 2imle2 _ Sauce +Sali& alba OBTENCIÓN DE SALICINA !xtracción? 3esar * g de corteza pulverizada, agregar -9 mL de agua y someter a decocción por /9 min. Filtrar y concentrar. IDENTI5ICACIÓN 0eacción 3rocedimiento 0esultado Wcido sulf
4 mLdeextracto  : gotas de Fe%l

0x. Fe&ling

_

/

%oloración azul=verde

4 mL de extracto  : gotas de Fe&ling ) y 2 calor

3recipitado roo ladrillo

Uva ur2i+Arctostaph#los uva ursi

OBTENCIÓN DE ARBUTINA !xtracción? 3esar * g de corteza pulverizada, agregar *9 mL de agua y someter a decocción por /9 min. Filtrar y concentrar. IDENTI5ICACIÓN 0eacción 3rocedimiento 0esultado 'icrosublimación

Fe%l/ J1" conc. :ainillín clor&ídrico (aninos

%olocar en cápsula, 4 mg de droga en polvo. %ubrir con luna de relo y calentar &asta desprendimiento gaseoso. )l residuo enfriado agregar? >> gotas de J1"

%oloración pardo roiza

9.4 mLdeextracto  : gotas de Fe%l / %oloración azul=verde 9.4 mLdeextracto  : gotas de J1" conc. %oloración pardo roiza 9.4 mLdeextracto  : gotas de :ainillín %oloración azul clor&ídrico 9.4 mLdeextracto  : gotas de gelatina 3recipitado blanco

C1mue2t12 antra@uinónic12 _ >dentificación 3rocedimiento

ruibarbo

sen

'icrosublimación %olocar en cápsula, 4 mg de droga en polvo. %ubrir con luna de relo y calentar &asta desprendimiento gaseoso. )l residuo enfriado agregar >> gotas de J1".

%oloración roa intensa

%oloración roa pardo

cáscara sagrada %oloración narana

sábila =

0. 2orntrager *g '3 *9 mLagua>>> gotas de Ja". Filtrar  Q gotas de %lconc. )gregar - mL de cloroformo y separar la fase cloroformo y agregar Q gotas de J1" cc. )gitar

Fase polar? 0oo cereza Fase apolar? amarillo

%oloración rosada roiza

Fase polar roo narana

Fase polar? roo cereza Fase apolar? amarillo

Sol" alcoh+lica amoniacal 9.4 g de '3 4 mL de etanol decocción por 4 min.: gotas

=

%oloración roa pardo

=

=

=

=

=

Fluorescen cia a luz E:

0. Tlunge = 9.4 g '3 4 mL de agua  2' a 19` % x *4 min. mg de talco. Filtrar.)l filtrado aadir >> gotas de %uD" 1  >> gotas de Ja%l  4 mL etanol.

=

=

%oloración roo grosella

J1" cc. 0. Dc&onteten mL del ensayo anterior +Sol" alcoh+lica amoniacal  borato de sodio saturado.

Irid1ide2 'uestras 3roblemas? Filtrado del extracto de la especie a investigar *9=-9G 3C: 'acerado alco&ólico de Plantagoma,orL. +llantén.= pesar *9 g de &oas de llantén. %olocar en un matraz y agregar 49 mL de alco&ol de 69`. 'acerar 17 &. ;ecocción por *9 minutos +!xtracto acuoso de la droga vegetal con >ridoides. >dentificación de iridoides 0eacción con vainillin clor&ídrico

3rocedimiento Dembrar en papel filtro 19 veces, previo secado entre cada siembra. Decar y agregar >: gotas de reactivo :ainillínclor&ídrico +secar entre gota y gota

0esultado %oloración grosella

CUESTIONARIO *. ;escriba el fundamento de las reac ciones de coloración para la identificación de compuestos fenólicos y antraquinónicos. -. 'ediante una (abla mencione *9 especies nativas del 3er<, que presenten compuestos fenólicos y antraquinónicos. Jombre %om
Jombre %ientífico

Familia

Fotografía

Esos y (ipo de compuestos fenólicos y antraquinónicos.

RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS *. TuXlinsXi, %., Farmacognosia., !d. "mega D), 2arcelona, !spaa +-999 -. 2runeton, K. Farmacognosia U Fitoquímica U 3lantas 'edicinales. /ra. !d. )cribia, Saragoza, !spaa +-99* /. #ibaa "viedo D. 3igmentos naturales. Ruinónicos. Lima +*887. 1. :illar ;el Fresno, ). Farmacognosia general. 'adrid +-9*9

PROTOCOLO N5 6 COMP+ESTOS FEN)LICOS SIMPLES , ANTRA7+IN)NICOS F!%). '!D) ;! (0)2)K" ..

'E!D(0)?

0!DEL();"D I8

ANÁLISIS C+ALITATI9O COMP+ESTOS FEN)LICOS SIMPLES , ANTRA7+IN)NICOS


PR$CTICA N%  RECONOCI'IENTO DE 5LA)ONOIDES 0 TANINOS 'ARCO TEÓRICO, 5LA)ONOIDES Los flavonoides son compuestos polifenólicos ubicuos en la naturaleza, se clasifican, de acuerdo a su estructura química, en? flavonoles, flavonas, flavanonas, isoflavonas, catequinas, antocianidinas y c&alconas. 'ás de 1 999 flavonoides &an sido identificados muc&os de ellosen frutas y verduras. Los flavonoides &an despertado un considerable interés por sus potenciales efectos beneficiosos sobre la salud. De &a reportado actividad antiviral, antialérgica, antiplaquetaria, antitumoral antiinflamatoria, y antioxidantes.

Los flavonoides pertenecen a un de compuestos naturales en un sistema %5 =%/o=%5, el que dos anillos aromáticos ) ygrupo 2 están unidos por una unidaddispuestos de tres carbonos que pueden no en formar un tercer anillo %. Los flavonoides pueden &allarse como aglicón o bao la forma de glicósidos con una o tres unidades de az
TANINOS

Los taninos son compuestos polifenólicos de peso molecular alto que se encuentran enlas plantas superiores, incluyendo muc&as plantas utilizadas como alimentos, el peso molecular oscila entre 499 y / 999, de estructura amorfa, sabor astringente y débilmente ácidos. La mayoría de ellos solubles en agua$ pueden ser amarillos, roos o marrones, y se localizan en el citoplasma o en las vacuolas de las células$ conformados principalmente por restos de ácido gálico unidos a glucosa a través de enlaces glucosídicos. Los taninos ingeridos en la dieta pueden afectar la asimilación de proteínas y &ierro, al formar compleos insolubles. !n las especies vegetales los taninos act y varios tipos de cáncer. La b
CO'PETENCIAS _ %onoce la importancia de flavonoides y (aninos en Farmacognosia _ >dentifica flavonoides y (aninos cualitativamente _ %uantificar taninos en muestras de tara + Caesalpiniaspinosa 'ETODOLO(+A _ %romatografía en capa fina _ 'étodo volumétrico ? Podometría _ _

0eacciones de precipitación 0eacciones de coloración

'ATERIAL 0 EUIPOS _ 'aterial de vidrio _ 0eactivos de coloración _ 'aterial de vidrio _ !stufa _ 'ortero pilón I*

Análi2i2 cualitativ1 de 5LANONOIDES

PARTE EPERI'ENTAL>. Análi2i2 cualitativ1 de 5LA)ONOIDES >eteró2id12 3lav1n1ide2 DRO(A REACCIÓN esperidósido

Naranja Citrus sinensis Fam. Rutaceae

-D"cc 1

mg de &esperidina gotas de -D"1 cc

REACCIÓN POSITI)A %oloración narana

%l cc

mg de &esperidina gotas de %l cc

3recipitado blanco

J"/

PROCEDI'IENTO

mg de &esperidina gotas de J"/

%oloración pardo roizo

Ja" /9G

0utinósido

Ruda Ruta graveolens Fam. Rutaceae

îlson +Wc.boricocitrato de sodio

9.4mLîlson )  9.4mLîlson 29.4mL de extracto +/9 min. en oscuridad

D&inoda

9.4mL de extracto virutas de 'g gotas %l cc

Fe%l/

Ruercetinósido

Cebolla Allium cepa L. FamiliaLiliac

3b+%/%""-

Fe%l/

eae

)ntocianósido

mg de &esperidina gotas de Ja" /9G

Maíz morado -D"cc 1 Zea Mays L Fam. Poaceae

Ja" /9G

9.4mL de extracto gotas Fe%l/

9.4mL de extracto gotas 3b+%/%""-

%oloración amarillo narana

%oloración amarilla. "bservación en E:? Fluorescencia verde %oloración rosada %oloración verde

3recipitado color amarillo

9.4mL de extracto gotas Fe%l/

%oloración verde en frio, roo oscuro en caliente

9.4mL de extracto  gotas -D"1 cc

%oloración roa

9.4mL de extracto  gotas Ja" /9G

%oloración verde

Prearación de etract12 de 5lav1n1ide2  Tanin12 3esar 4 g de droga vegetal, agregar 49 mL de agua destilada y llevar a decocción x *9 minutos, filtrar. %on el extracto de la droga vegetal que presenta Flavonoides seg
II* Análi2i2 C ualitativ1 de TANINOS a 0eacción de di ferenciación Reactiv1 Pr1cedimient1

Reacción 12itiva

9.4 ml '3  gotas

5eCl< !Q

deFe%l/ *9G

(. &idrolizables? azul (. condensados? verde

b 0eacciones de identificación REACTI)O PROCEDI'IENTO REACCIÓN POSITI)A Fe%l/ 9.4 mL '3 gotas de Fe%l / coloración azulCverde T-%r-"4G 9.4 mL'3 gotas de T 4G pp. pardo 6 -%r-"6 3b+%/%""9.4 mL '3 gotas de 3b+% /%""pp. blanco lec&oso )gua de cal 9.4 mL '3 gotas de agua de cal pp. amarillo pálido T%J 4G 9.4 mL '3 gotas de T%J 4G pp. amarillo ipoclorito de sodio 9.4 mL'3 gotas de &ipoclorito de sodio coloración narana T1Fe+%J5  J1" 9.4 mL'3 gotas de T1Fe+%J5  gotas de J1" coloración roiza #elatina 9.4 mL '3 gotas de gelatina pp. blanco T'n"1 9.4 mL'3 gotas de T'n" pp. pardo 1 )lcaloide 9.4 mL '3 gotas de alcaloide pp. lec&oso blanco >>>. )nálisis cuantitativo 3esar * g de tara, llevar a decocción con -9 mL de agua destilada. Filtrar, y completar el volumen de *99 mL en fiola y medir *9 mL para la titulación. _

Prearación de atrón #)D("? A)B



Prearación del 7lanc1 #)D("? A2B

o#o 2.DE

0 m1 soluci!n #e 6ci#o t6nico E 8 2m1 #e 5a*C3 8 c.s.' 'aa 20 m1 con a$ua #estila#a

_

o#o 2.DE

2 m1 #e 5a*C 3 8 c.s.' 'aa 20 m1 con a$ua

Prearación de la mue2tra #)D("? A%B

o#o 2.DE

0

m1 soluci!n nuesta 'o;lema8 2m1e# 5a*C3 8 c.s.' 'aa 20 m1 con a$ua #estila#a

Jota? !l punto final de la valoración se determina con tiras de papel almidonado +indicador externo, vira a violeta intenso en el punto de equivalencia. a Cálcul12

3)(0VJ Y#)D("? A)B 2L)J%" Y#)D("? A2B 'E!D(0) Y#)D("? A%B )= 2 %=2

9.* g Q

QY contenido de taninos +g en *9 mL de muestra problema Jota? expresar los resultados en porcentae de taninos en la muestra.

CUESTIONARIO

*. !xplique el fundamento de la valoración de taninos realizada en práctica. -. 'ediante una (abla mencione *9 especies nativas del 3er<, que presenten flavonoides y (aninos

RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS *. T&anbabaee T, :an 0ee (. (annins? %lassification and ;efinition. Jat. 3rod. 0ep., -99*$ *7. p. 51*U518. ;isponible en? http-..siba"unipv"it.farmacia.art./arrubini.0at123Prod123*ep1232334"pdf citado -- de marzo -9*/ -. %&ung T(, ông (P , êi %> , uang P^ , Lin P . (annins and &uman &ealt&? a revieN.%rit 0ev Food Dci Jutr. *887 )ug$/7+5?1-*=51. /. 0eed K;. Jutritional (oxicology of (annins and 0elated 3olyp&enols in Forage Legumes. K )nimDci *884, 6/?*4*5=*4-7. citado -- de;isponible en? http-..555",ournalofanimalscience"org.content.67.8.4849"full"pdf marzo -9*/. 1. artzfeld 3^, ForXner 0, unter ';, ager man )!. ;etermination of ydrolyzable (annins +#allotannins and !llagitannins after 0eaction Nit& 3otassium >odate. K. )gric. Food%&em. -99-, 49, *674j*689. ;isponible en? http-..mdhunter"m#5eb"uga"edu.publications.:A;%*/A0"PDF citado -- de marzo -9*/. 4. %linton %. 3lant tannins? ) novel approac& to t&e treatment of ulcerative colitis. Jat'ed K. -998$ *?+/. p. *=/. ;isponible en? http-..naturalmedicine,ournal"net.pdf.nm,citado 22 de marzo-9*/. 5. (amilselvi J, Tris&namoort&y 3, ;&amot&aran 0, )rumugam 3, Dagadevan !. )nalysis of total p&enols,total tannins and screening of p&ytocomponents in >ndigoferaaspalat&oides +D&ivanar:embu :a&l !Q ;%. K. %&em. 3&arm. 0es., -9*-, 1+5?/-48=/-5-. ;isponible en? http-..,ocpr"com.vol? @iss9 @2342.CP*@2342 @? @9 @728= @7292"pdf citado -- de marzo -9*/. 6. #arro # K et al. )nalytical Dtudies on (ara (annins. olzforsc&ung. *886$ 4*+/. ;isponible en? http-..555"fpl"fs"fed"us.documnts.pdf4==6.galve=6a"pdf citado -- de marzo -9*/. 7. %abello L>. 'onografía para el cultivo de la tara %aesalpiniaspinosa +'olina Tuntze.3er
PROTOCOLO Nº 09 RECONOCI'IENTO DE 5LA)ONOIDES 0 TANINOS

"0)0>".. F!%). '!D) ;! (0)2)K" .. 0!DEL();"D



PRÁCTICA Nº 10 EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ACEITES ESENCIALES. INTRODUCCIÓN

Aceite2 E2enciale2 Los aceites esenciale s son compuestos formados por sustancias orgánicas volátiles, como alco&oles, cetonas, éteres y alde&ídos, se producen y almacenan en los canales secretores de las plantas y normalmente son líquidos a temperatura ambiente, y por su volatilidad, son extraídos por destilación en corriente de vapor de agua.

Fuentes-%oníferas +pino, abeto, 'irtáceas +eucalipto, 0utáceas +Citrus spp , )steraceae +manzanilla, Labiadas +menta, lavanda, tomillo, espliego, romero y umbelíferas +anís, &inoo.3ueden estar en diferentes órganos? raíz, rizoma +engibre, leo +alcanfor, &oa +eucalipto, fruto +anís y sumidades floridas +clavo de olor. Propiedades terapButicas? antiséptica +conservación de alimentos, antiespasmódica, expectorante$ carminativa y eupéptica. Din embargo a dosis elevadasson tóxicos, principalmente a nivel del sistema nervioso central y pueden ocasionar alergias e irritación. Caractersticas fsicas Los aceites esenciales sonson volátiles,líquidos a temperatura ambiente +a excepción y elDon mentol, recién destilados incoloros o ligeramente amarillos, de densidad inferiordel a laalcanfor del agua. solubles en alco&ol y disolventes orgánicos +éter, cloroformo, poco solubles en agua pero arrastrables por el vapor de agua. 3oseen poder rotatorio e índice de refracción característico. Caractersticas umicas Los aceites esenciales contienen compuestos? =Jo terpenoides? sustancias alifáticas de cadena corta, sustancias aromáticas, sustancias con azufre y sustancias nitrogenadas. =(erpenoides? derivan delisopreno +%4 unidas en cadena, principalmente monoterpenos +%*9, sesquiterpenos +%*4 y los diterpenos +%-9 que pueden ser alifáticos, cíclicos o aromáticos. *,-

CO'PETENCIAS _ %onoce la extracción de aceites esenciales _ !val
PARTE EPERI'ENTAL Etracción de Aceite2 E2enciale2 =!xpresión en frío? presenta la ventaa de no someter los aceites esenciales a temperaturas elevadas y se toma directamente la muestra problema. =;estilación? colocar la muestra problema sobre la criba ubicada a cierta dista ncia del fondo del alambique, el calentamiento se produce con vapor saturado proveniente de una fuente de calor que componen el equipo, fluye y a presión baa, penetrando a través del material vegetal, los componentes se

volatilizan, y condensan en un refrigerante, se acumulan y se separan el agua del aceite por diferencia de densidad.

I*

AN$LISIS CUALITATI)O

Análi2i2 1r#an1l9tic1 Color  Olor  Sabor  Te&tura Pe21 e2ec=3ic1 a 3esar el picnómetro vacío y seco+3 b cuidadosamente Llenar el picn ómetro +3*con la '3 a -9k% por *4 min. , austar el volu men si es nece sario y pesar c 0epetir la operación con agua destilada a -9 k% +3- !l peso específico a -9k % se calcula de la siguiente manera?

P*E 8  P!4PKP84P +ndice de re3racción a %alibrar el refractómetro con > gota de agua destilada +inyectable a *./// b Decar el equipo con papel tissu c %olocar  gota de muestra problema sobre el prisma de medición y realice la lectura.

Análi2i2 cr1mat1#rá3ic1 Fase estacionaria? %romatofolios de silica gel 59 F-41 de 5.4 cm por -.4 cm Fase móvil? (olueno? acetato de etilo +8 ?* Luz E: 0evelador? :ainillina U )c. Dulf
REACCIONES DE IDENTI5ICACIÓN DE TERPENOS 0!)%%>VJ 30"%!;>'>!J(" 0!DEL();" Lieberman =2uc&ard X gotas de MP + llevar a Esteroides verdesequedad en B.M + X a(ul gotas de cloroformo+ III riterpenoides gotas de an!drido ro,onaran,a ac"tico+ #$%&' cc en (ona )por las paredes de tubo* sin agitar. CUESTIONARIO *. 'ediante un diag rama de Fluo esq uematice y descr iba el proceso de contr ol de cali dad para aceites esenciales y describa sus análisis. -. HRué otras técnicas de extracción de aceites esenciales conoceI.

RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS *. :arro, !., (yler, L. Farmacognosia. !d. !l )teneo, 2s. )s, )rgentina +*88/ -. TuXlinsXi, %., Farmacognosia., !d. "mega D), 2arcelona, !spaa +-999 /. 2runeton, K. Farmacognosia U Fitoquímica U 3lantas 'edicinales. /ra. !d. )cribia, Saragoza, !spaa +-99* 1. 2ravo ;íaz, L. Farmacognosia. !d. !lsevier D). 'adrid, !spaa. +-99/ 4. 'arco,K. )lberto. Ruímica de los productos naturales. )spectos fundamentales del metabolismo secundario. *a ed. 'adrid + -995 5. #ibaa "viedo D. 3igmentos naturales. Ruinónicos. Lima +*887. 6. :illar ;el Fresno, ). Farmacognosia general. 'adrid +-9*9 7. López '(. Los aceites esenciales? )plicaciones farmacológicas, cosméticas y alimentarias. "FF)0'.-991$ -/? +6. 8. )lbaladeo R'. !l )ceite !sencial de limón producido en !spaa. %ontribución a su evaluación por "rganismos >nternacionales.Eniversidad de 'urcia. *888. ;isponible en? http-..555"td&"cat.bitstream.handle.43E37.4438=.Albalade,o"pdf,sessionidG27=F4D%=!?8?7?C7?6=EA%%! F3F36332"td&2HseuenceG4citado -/ de marzo de -9*/

*9. Degovia 2. et al. %omposi ción química del aceite esencial de Tagetes elliptica Dmit& Ac&inc&oB y actividades antioxidante, antibacteriana y antifnvestigación -9*9$ */+-? 7*=75. **. EJ>;", F)".erbs, spices and essential oils. )ustria, -994.;isponible en http-..555"unido"org.fileadmin.user
PROTOCOLO Nº 10 EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ACEITES ESENCIALES. "0)0>".. F!%). '!D) ;! (0)2)K" ..

I* AN$LISIS CUALITATI)OACEITES ESENCIALES !nsayo Análisis organolBptico

0esultado "lor %olor Dabor (extura

Peso especifico

Indice de refracci+n

0!)%%>"J!D ;! >;!J(>F>%)%>VJ 0!)%%>VJ

0!DEL();"

Lieberman =2uc&ard

LE+EDA: $(& ulo $(& oco $-& Leve $--& "oderado $---& a)undante %0"')("#0)F@) !J %)3) F>J) ;escripción

0f


PR$CTICA N% !! DRO(AS CON ALCALOIDES DE 5ENANTRENO* N/CLEO TROP$NICO. INDÓLICO. OINDÓLICO. ETRACCIÓN $CIDA4ALCALINA. IDENTI5ICACIÓN. OBTENCIÓN 0 )ALORACIÓN* Los alcaloides son sustancias orgánicas nitrogenadas con carácter básico y mayoritariamente de srcen vegetal.Don compuestos orgánicos. De forman generalmente a partir de aminoácidos. ;e srcen vegetal. Dustancias nitrogenadas. %ontienen nitrógeno &eterocíclico. (ienen estructura complea. Don tóxicos.

%on actividad fisiológicas incluso a dosis muy baas. Los alcaloides son un grupo muy &eterogéneo de compuestos con estructuras muy variadas y generalmente compleas, contienen %, , J. La mayoría de los alcaloides tienen reacciones que se aprovec&an para su detección. ay reactivos generales que detectan alcaloides en general y &ay otros que detentan un grupo específico.!stas reacciones se pueden clasificar en reacciones de precipitación, cristalización y de color.

CLASI5ICACIÓN DE ALACALOIDES _ )lcaloides derivados de ornitina _ )lcaloides derivados de lisina _ _

del fenilalanina triptófano y tirosina )lcaloides derivados de )lcaloides de n
/Erythro#ylu" coca 'o'!: 'o'!In!

CO'PETENCIAS _ !xtrae los alcaloides a partir de un polvo seco pulverizado por medio ácido y alcalino. _ >dentifica cuali=cuantitativamente los alcaloides.  0econoce el origen biológico de los alcaloides. 'ATERIALES 'ateriale2 de vidri12  1tr12 2alón de -49 mL 3era de separación de 499 mL Fiola de 499 mL (ubos de ensayo de *9 mL 3ipetas de * mL, 4 mL

Reactiv12 )gua destilada 2utanol etílico

)cetona )lco&ol amílico ]ter de petróleo

!tanol 'etanol 2encenon=exano

!tilacetona %loroformo ]ter

Wcido clor&ídrico ;iclorometano idróxido de sódio idróxido de amnio 0eactivo;ragendorff Wcido perclórico 9.9- J Wcido acético glacial%ristal violeta Wcido clor&ídrico )gua destilada idróxido de sodio ;iclorometano 'etanol %loroformo idróxido de amonio.

E@ui1 'olino manual )gitador con magneto 3era de bromo 2alanza analítica

%entrífuga 0otavapor

PROCEDI'IENTO !* Sen21rial De verifica el aspecto, color y olor del polvo fino de acuerdo a las partes de la planta. 8* 5i 2ic1 @u=micde 1 21lu7ilidad 8*!* Prue7a De pesan *9 mg del extracto seco y se introduce en un tubo al cual se le adiciona * mL de solvente en orden de polaridad decreciente + aguadestilada,metanol,etanol,n=propanol,acetona,acetato de etilo,cloroformo,tolueno,éter

La finalidad del ensayo de solubilidad es determinar el comportamiento del extracto en soluciones de diferente polaridad, permitiendo encontrar el sistema apropiado para el análisis cromatográfico.

<* Etracción  A i2lamient1 'ue2tra en e2tudi1 ;rogas vegetales que contienen alta cantidad de alcaloides Pr1ce21 de Etracción 5undament1 La extracción se realiza previamente en un medio ácido formando sales de clor&idrato, y posteriormente se alcaliniza con la finalidad de convertir los alcaloides en bases libres y poder extraerlos con un solvente no polar. Método alcalino, la droga se &umedece con agua y se mezcla con cal y amoniaco. Los

alcaloides se extraen con solventes orgánicos +éter de petróleo, cloroformo, benceno. La fase orgánica se separa y evapora. !l residuo de la droga también se puede agitar con agua acidulada, se aade solvente orgánico, luego dear reposar para su separación en capas. Las sales de alcaloides están en la fase acuosa y en la fase orgánica las impurezas. Método ácido. la droga se extrae con agua o alco&ol, en medio ácido. De agrega un solvente

orgánico, otros productos indeseables se eliminan en la agitación con cloroformo u otros solventes orgánicos. Luego los alcaloides libres son precipitados por adición en exceso de bicarbonato de sódico o amoniaco, separándose por filtración o extracción con disolventes orgánicos.

Pr1cedimient1, 3esar 4 g de la droga vegeta l en un matraz y aadir 49 mL de %l *9G, so meter a 2' por /9 agitar, enfriar y filtrar. (ransvasar a pera de decantación y alcalinizar con J 1", extraer con cloroformo / veces y separar las fases. %oncentrar la fase clorofórmica a casi sequedad aadir %l *9G y reconocer con reacciones generales y específicas.

Cr1mat1#ra3=a en caa 3ina Si2tema de 21lvente2, ). %loroformo? metanol? ácido acético glacial +16.4?16.4?4 %loroformo? metanol? amoniaco +8?*9?*

Detección, Revelad1r ;ragendorff modificado ). *6 g de subnitrato de bismuto, -99 g de ácido tartárico csp 799 mL agua. 2. *59 g de Poduro de potasio csp 199 mL de agua. De mezclan solución )  Dol 2 +*?* Cr1mat1#ra3=a en caa 3ina de Ba2e2 ántica2 'uestra !xtracto clorofórmico

I*

!stándar

Dol. %afeína? 9.*G en cloroformo Dol. (eofilina? 9.- G en amoniaco

Dolventes

Dol. (eobromina? 9.- G en &idróxido metanol de sodio+*9?89?19 tetracloruro de carbono? cloroformo?

0evelador

vapores de yodo +antes de revelar, calentar la placa

REACCIONES (E NERALES 0ealizar las reacciones generales y particulares

0!)%%>VJ 01dad12 1li1dat12 c1mle;12 ;ragendorff+yoduro potásico= bism
30"%!;>'>!J("

0!)%%>VJ 3"D>(>:)

9.4 mL 3recipitado del extracto narana llevar a sequedad a 3recipitado blanco 2', luego agregar 3recipitado pardo oscuro *mL de %l *G, disolver >>> gotas 3recipitado blanco de reactivo. 3recipitado amarillo=verdoso

3opoff+ácido pícrico  (aninos

%ristales característicos 3recipitado blanco

II* REACCIONES PARTICULARES ATROPINA +Datura stramoniumL, !rugmansiaarborea L. REACCIÓN

0eacción de :itali

0eacción de âsicXy +p=dimetilaminobenzalde&ido

PROCEDI'IENTO mg de '3  J"/ conc. calentar en 2.' &asta residuo amarillo, enfriar y agregar gotas de T" alco&ólico *9G

REACCIÓN POSITI)A coloración violeta

mg de '3  gotas de 0vo. âsicXy  calentamiento suave

coloración violeta roiza brillante

mg de '3 gotas de -D"1  JaJ"-  T" al *9G

violeta roizo +fugaz.

-D"1cc

0eacción de )rnold

COCA+NA+%r#thro&#lum coca L.

REACCIÓN %loruro de bario *9G

PROCEDI'IENTO ;isolver mg de muestra en agua destilada, medir el p y acidificar con gotas de %l *9G )gregar >= >> gotas del reactivo 2a%l- *9G

de mg de extracto desecado>> gotas de tiocianato de

0eacción Poung

cobalto.

Jitrato de plata ;isolver mg de muestra en agua destilada, medir p y acidificar +si es necesario con gotas de ácido *9G / nítrico. )gregar desecado >=>> gotas de>>)gJ" mg de extracto gotas de T'n" 1

T'n"1

REACCIÓN POSITI)A 3recipitado blanco

%oloración turquesa +tiocianato de cocaína 3recipitado blanco %ristales característicos

N/CLEO INDÓLICO 0 OINDÓLICO 0eacción :an ErX +dimetilaminobenzalde&ido  ácido sulf
3rocedimiento mg de '3 >>> gotas de reactivo de :an ErX

BASES ANTICAS 0!)%%>VJ 30"%!;>'>!J(" Wcido Dolución saturada de cafeína  : gotas de tánico ácido tánico 4G Dolución saturada de cafeína  : gotas de Podo reactivo de yodo +no precipita, se aade >>>

'urexida

êidel

#erard

gotas %l *9G mg dede muestra  J"/ fumante. %alentar a sequedad en bao maría y observar la formación de un residuo amarillo. Dometer el residuo a vapores de amoniaco. mg de muestra  mg de T%l"/ +clorato de potasio  agregar %lconc, calentar &asta sequedad en bao maría

0eacción positiva coloración azul

0!)%%>VJ 3"D>(>:) Formación de precipitado, soluble en exceso de reactivo 3recipitado café roizo que en exceso de Ja" desaparece. %ambio de amarillo a violeta y al agregar Ja" la coloración violeta desaparece.

Formación de residuo amarillo. Dometer el residuo a vapores de amoniaco y observar el cambio de amarillo a violeta. mg de muestra  gotas de Ja" *9G  gotas Formación de precipitado. de amoníaco conc.  gotas de )gJ"/ *9G 0!)%%>VJ ;! ;>F!0!J%>)%>VJ

!XXert

0!D>;E" ;! L) 0!)%%>VJ ;! %afeína? azul violeta 'E0!Q>;) " ^!>;!L, someter a completa (eobromina? roo violeta evaporación el amoniaco  mg de codeína (eofilina? violeta -D"1conc.

CUESTIONARIO !* 'encione las especies en que se distribuyen los alcaloides RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS *. )nd<ar >, 0ecio '%, #iner 0', 0íos KL. %ocoa polyp&enols and t&eir potential benefits for &uman &ealt&. "xid'ed%ellLongev. -9*-$-9*-?895-4-. -. )s&i&ara , Tato ', %rozier ). ;istribution, biosynt&esis and catabolism of met&ylxant&ines in plants. andb!xp3&armacol. -9**$+-99?**=/*. /. )s&i&ara , Dano , %rozier ). %affeine and related purine alXaloids? biosynt&esis, catabolism, function and genetic engineering. 3&ytoc&emistry. febrero de -997$58+1?71*=45. 1. 2runeton, K. Farmacognosia U Fitoquímica U 3lantas 'edicinales. /ra. !d. )cribia, Saragoza.-99*. 4. 2utt 'D, Dultan '(. %offee and its consumption? benefits and risXs. %rit 0ev Food Dci Jutr. abril de -9**$4*+1?/5/=6/. 5. Ferrazzano #F, )mato >, >ngenito ), ;e Jatale ), 3ollio ). )nti=cariogenic effects of polyp&enols from plant stimulant beverages +cocoa, coffee, tea. Fitoterapia. ulio de -998$79+4?-44=5-. 6. ooper L, Tay %, )bde l&amid ), Tr oon 3), %o&n KD, 0imm !2, et al. !ffe cts of c&oc olate, cocoa, and flavan=/=ols on cardiovascular &ealt&? a systematic revieN and meta=analysis of randomized trials. )m K %linJutr. marzo de -9*-$84+/?619=4*. 7. TuXlinsXi, %. Farmacognosia, *era edición, 2arcelona, -999 8. "bregón :ilc&ezL.Ea de #ato %atMs%laN? género uncaria, estudios botánicos, químicos y farmacológicos de Encaria tomentosa y Encariaguianensis. !d. >nst. de Fitoterapia )mericano. Lima *886 *9. Delecciones del 0eaderMs;igest. Decretos y virtudes de las plantas medicina les. 'adrid, *87-. **. :arro, !., (yler, L. Farmacognosia. !d. !l )teneo, 2s. )s, )rgentina *88/. *-. înX ', 'eibner %, îtte L. 3atterns of quinolizidina alXaloids in 45 species of t&e genusJupinus. 3&ytoc&emistry *884$ /7?*/8=*4/.

DROGAS CON ALCALOIDES "0)0>".. F!%). '!D) ;! (0)2)K" ..

I*4 '-TODO DE ETRACCIÓN, II* AN$LISIS CUALITATI)O, 0!)%%>"J!D #!J!0)L!D

REACCIÓN ;0)#!J;"0FF 2!0(0)J; 2"E%)0;)( " ^)#J!0 ')P!0 D"JJ!JD%!>J

RESULTADO

3"3"FF ()J>J"D 0!)%%>"J!D 3)0(>%EL)0!D

ATROPINA REACCIÓN

RESULTADO

:>()L> ^)D>%TP )0J"L;

COCA+NA REACCIÓN %L"0E0" ;! 2)0>"

RESULTADO

0!)%%>VJ ;! P"EJ# J>(0)(" ;! 3L)() *9G T'n"1 N/CLEO INDÓLICO 0 OINDÓLICO

REACCI7N

VA5 +R

0eacción 0. 'urexida 0. êidel 0. #erard 0. Podo 0. ácido tánico

BASES %afeína $NTICAS (eofilina

)JWL>D>D %0"')("#0WF>%" 0f?


RESULTADO

(eobromina

PR$CTICA N% !8 IN)ESTI(ACIÓN 5AR'ACO(NÓSTICA DE LOS ETRACTOS DE LA PLANTA 'EDICINAL ESTUDIADA AN$LISIS 5ITOU+'ICO, TA'I&A?E 5ITOU+'ICO. P>. +NDICE DE RE5RACCIÓN. DENSIDAD 0 CRO'ATO(RA5+A EN CAPA 5INA* La investigación de plantas medicinales es muy importante porque se utilizan en la elaboración de medicamentos y también y como materia prima para formulaciones magistrales. 3or esta razón se deben trabaar con extractos estandarizados que tengan un control de calidad en cuanto al control de identidad mediante una certificación taxonómica y de calidad mediante ensayos microbiológicos, fisicoquímicos y farmacológicas que aseguren su calidad, seguridad y eficacia.

FASE I: Recolecci!" co!#e$%&ci! 'e '$o(&# ) el&*o$&ci! 'e e+,$&c,o#

&GRACCH5

Recolecci!n
Cetificaci!n ta)on!mica

Selecci!n %esecaci! (olien#a

Pe'aaci!n #el e)tacto acuoso

Pue;a #e solu;ili#a#

S*ree%/ ;%t$<"=(%*$ Comato$afa columna

Comato$afa &n ca'a fina

An6lisis comato$6fico

&nsa/os en la;oatoio

Aislamiento / 'uificaci! n

Cistaliaci !n

An6lisis es'ectosc!'ico

An6lisis es'ectosc!'ico

FASE II: El&*o$&ci! 'e e+,$&c,o# e#,&!'&$i-&'o# _

Parmetros físico-#uímicos

.roiedad Olor Color Sa)or 1

E#tracto An/lisis or%anol0tico .ael Indicador

Densidad relativa 2ndice de refracci*n _

.icn*"etro Refract*"etro

Prueba de solubilidad LE+EDA: $(& Insolu)le $-& li%era"ente solu)le $--& solu)le $---& 'uy solu)le

Solventes

E#tracto seco $"%&

A%ua Etanoldestilada 'etanol n()utanol Acetato de etilo Dicloro"etano Clorofor"o 

Distri)uir e!uitativa"ente e#tracto seco en cada tu)o"% dede ensayo y a%re%ar 3 %otas de cada solvente, a%itar or 4 "in y evaluar solu)ilidad5

$%ella Cromato&r'#ica *. P"e+!"!'i)n #e ,ue&"!: Pe!" 0.D  #e e>&"!'&o e'o ? o(u%i(i!" en K ,L #e o(ven&e. -. F!e e&!'ion!"i!: SI(i'! e( F 2K< /'"o,!&o6o(io /. F!e ,)vi(: So(ven&e +o(!"e ? !+o(!"e <. *e&e''i)n: V!+o"e #e ?o#o Q Lu V 'ue2tra

!xtracto clorofórmico

Dolventes 0evelador

(olueno? acetato de etilo? dietilamina +6?-?* ;ragendorff

 ami!a"e fito#uímico

METABOLTO

CARBO$*RATOS

LE+EDA: $(& ulo $-& Leve $--& "oderado $---& a)undante REACC1N PROCE*MENTO REACC1N POSTVA Mo(i8  o&! #e MP;  o&! #e Mo(i8 Ani((o vio(e&! /!(6! n!6&o( 29 en !('o8o( !i&!";  o&! #e $2SO< CC An&"on!  o&! #e MP ;  o&! #e An&"on! Co(o"!'i)n ve"#e /!n&"on! en $2SO< '' !( 29 

Fe8(in /A: CuSO<= B: &!"&"!&o ,i>&o #e +o&!io ? o#io /@N!C<$
COMPESTOS FEN1LCOS

FeC(3

 o&! #e MP ;  o&! #e Fe8(in A;  o&! #e Fe8(in B ; '!(en&!" en B.M

Co(o"!'i)n "oo (!#"i((o

 o&! #e MP ;  o&! #e FeC( 3 D0 9

Co(o"!'i)n ve"#e o !u(

TANNOS

Ge(!&in!

 o&! #e MP ;  o&! #e e(!&in!

FLAVONO*ES

S8ino#!

 o&! #e MP ; D-2 vi"u&! #e M ,e&5(i'o ;  o&! #e $C( ''

ANTOCANNAS  FLAVONO*ES

Roen8ei,

CATCOS AMNOC*OS LBRES  GRPOS AMNO

Nin8i#"in!/0.D9 en e&!no(

/So(. o#o o#u"!#!

*"!en#o"66 /?o#u"o +o&5i'o- %i,H&i'o 

M!?e" /?o#u"o +o&5i'o ,e"'H"i'o

ALCALO*ES

Be"&"!n# /5'i#o i(I'o&Hn&i'o

Sonnen'8ein /5'i#o 6o6o,o(I%#i'o

NAFTANONAS ANTRANONAS

Bo"n&"!e" /N!O$ K9

 ANTRANONAS TRTERPENO*ES  Lie%e",!n-Bou"'8!"# ESTERO*ES

SAPONNAS


GLC1S*OS

B!(e&

LACTONAS

Le!(

CMARNAS

N$
P"e'i+i&!#o #eno %(!n'o Chalconas, auronas, isoflavanonas: No 8!? 'o(o"!'i)n. Isoflavanonas: A,!"i((o "oio. Flavanonoles: Roo ! ,!en&!. Flavonas y flavonoles: A,!"i((o ! "oo

 o&! #e MP ;  o&! #e Roen8ei,

Co(o"!'i)n"oo o'u"o

 o&! #e MP ;  o&! #e nin8i#"in! ; '!(en&!" en B.M D0 ,in.

Co(o"!'i)n vio(5'e!

 o&! #e MP ; ev!+o"!" e( o(ven&e B.M ; V o&! #e $C( D09;  o&! #e *"!en#o"66  o&! #e MP ; ev!+o"!" e( o(ven&e B.M ; V o&! #e $C( D09; ;  o&! #e M!?e"  o&! #e MP ; ev!+o"!" e( o(ven&e B.M ; V o&! #e $C( D09; ;  o&! #e Be"&"!n#  o&! #e MP ; ev!+o"!" e( o(ven&e B.M ; V o&! #e $C( D09;;  o&! #e Sonnen'8ein  o&! #e MP ;  o&! #e Bo"n&"!e"

P"e'i+i&!#on!"!n! P"e'i+i&!#o %(!n'o Precipitado blanco

Precipitado amarillo-verdoso

Co(o"!'i)n"o!

 o&! #e MP ; ((ev!" ! eue#!# en B.M ;  o&! #e '(o"o6o",o;  Esteroides: ve"#e-!u( o&! #e !n8I#"i#o !'&i'o; $ 2SO< '' Triterenoides: "oo-n!"!n! en on! /+o" (! +!"e#e #e &u%o in !i&!". D ,L #e MP ; K ,L #e !u! #e&i(!#! Fo",!'i)n #e 0.K ! D ', #e e+u,! ; !i&!" 6ue"&e,en&e +o" D ,in. e&!%(e +o" DK ,in.  o&! #e MP ; V o&! #e 5'i#o +I'"i'o D 9 ; V o&! #e N!O$ !( K 9.  o&! #e MP ; V o&! #e #eni&"o+"ui!&o #e o#io 0.K9 ; V o&! #e @O$ 2N.  o&! #e MP ; +!+e( 8u,e#e'i#o 'on N$
Co(o"!'i)n !n!"!n!#! Co(o"!'i)n "oo o'u"o F(uo"e'en'i! 'e(e&e

REFERENCIAS BIBLIO(RÁFICAS *. :illar del Fresno, ). Farmacognosia #eneral. !d. Díntesis, D). 'adrid, !spaa +*888.

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2ailliere(indall, Londres *881. /. âllis, (. 'anual de Farmacognosia. !d. %eosa, 'éxico. *88*. 1. 2runeton, K. Farmacognosia U Fitoquímica U 3lantas 'edicinales. /ra. !d. )cribia, Saragoza, !spaa -99*. 4. "bregón, L.'aca. 3lanta medicinal y nutritiva del 3er<.Lima *877.

PROTOCOLO TRAA/O DE INESTIGACIÓN RESLTADOS MESA DE TRAA/O: 2222222.. DIA DE LAORATORIO: 222222.

FASE I: Co!#e$%&ci! 'e '$o(&# ) el&*o$&ci! 'e e+,$&c,o#  *btencin  conservacin de la dro%a

$Dia%ra"a de Flu6o&

FASE II: El&*o$&ci! 'e e+,$&c,o# e#,&!'&$i-&'o# _

Parmetros

.roiedad

E#tracto etan*lico

Olor Color 1 Densidad relativa 2ndice de refracci*n _

Prueba de solubilidad

Solventes A%ua Etanoldestilada 'etanol n()utanol Acetato de etilo Dicloro"etano

E#tracto seco $"%&

Clorofor"o Leyenda: $(& Insolu)le $-& li%era"ente solu)le $--& solu)le $---& 'uy solu)le

_

ami!a"e fito#uímico

CARBO$*RATO

METABOLTO

REACC1N Mo(i8

S

An&"on!

CA'7IOS O7SER8ADOS

Fe8(in FeC(3 COMPESTOS FEN1LCOS TANNOS

Ge(!&in!

FLAVONO*ES

S8ino#!

ANTOCANNAS  FLAVONO*ES CATCOS

Roen8ei, Nin8i#"in!

AMNOC*OS LBRES  GRPOS AMNO ALCALO*ES

*"!en#o"66 M!?e" Be"&"!n# Sonnen'8ein

NAFTANONA S ANTRANONA S ANTRANONAS TRTERPENO*E

Bo"n&"!e" Lie%e",!n-Bu"'8!"#

S  ESTERO*ES SAPONNAS


GLC1S*OS LACTONAS

B!(e& Le!(

CMARNAS

N$
)

ITER.RETACI9

RESULTADOS

LEYENDA:(-) Nulo(+) Leve (++) moderado (+++) abundante



$%ella Cromato&r'#ica

P"e+!"!'i)n #e ,ue&"!: Pe!" 0.D  #e e>&"!'&o e'o ? o(u%i(i!" en K ,L #e o(ven&e. F!e e&!'ion!"i!: SI(i'! e(

Calculo de Rf

Es!ue"a de resultado

PR$CTICA N% !< L+PIDOS. IDENTI5ICACIÓN 0 CONTROL DE CALIDAD DE ACEITES !l aceite vegetal es un compuesto orgánico obtenido a partir de semillas u otras partes de las plantas en cuyos teidos se acumulan como fuente de energía. !stán conformados por lípidos definidos como grupo &eterogéneo de compuestos insolubles en agua, y solubles en solventes apolares como? éter, cloroformo, benceno o acetona. Las grasas y aceites son ésteres formados por la condensación de ácidos grasos con glicerol.*=4

'9t1d12 de etracción de aceite2 Esualmente en la extracción de aceites se aplican procesos mixtos y se elige seg
!xtracción mediante fluidos supercríticos +%"- !xtracción con !tanol 3rensado estándar

!xtracción con &exano

:entaas 0etiene compuestos menores volátiles,

;esventaas

0efinación, deodorización y blanqueo

2ao rendimiento de aceite

J"

Los rendimientos pueden ser menores a los obtenidos con &exano

opcional

;ifícil de remover extractos no lipídicos de la miscela y la &arina 'enor rendimiento que la extracción con &exano, las altas temperaturas causan algunos cambios químicos en el aceite y la &arina.

D>

)ceite de grano de maíz

D>

)ceites comunes

3roblemas para la salud y de Deguridad.

D>

)ceites comunes

como

compuestos fenólicos y clorofila. 3roceso no tóxico y más seguro que la extracción con &exano. Jo requiere eliminar solventes de la miscela o &arina residual. Dolvente menos tóxico y más seguro que el &exano (ecnológicamente simple y económico para producción a gran escala industrial

2ao costo, altos rendimientos

!emplos )ceite de oliva virgen, aceite de palta, aceite de cáamo )ceite de avena

3re=prensado  extracción con &exano !xtracción acuosa enzimática

2ueno para semillas con 0equiere más equipamiento -9G aceite.

D>

(écnica suave, ambientalmente limpia

"pcional

)ltos costos de las enzimas, rendimiento menor a la extracción con &exano.

)ceites comunes !n desarrollo

Etracción de aceite2 %&tracci+n por solventes orgánicos La extracción con solventes, principalmente &exano, es uno de los procesos más tradicionales empleados en la obtención de aceites de semillas oleaginosas. !l principio de extracción con solvente se basa en el &ec&o que un componente +soluto se distribuye entre dos fases seg
Cla2i3icación de aceite2 Degdentifica cualitativamente los aceites vegetales _ )naliza la calidad de los aceites 'ETODOLO(+A

_ _ _

_ !xtracción por solventes orgánicos )nálisis cualitativo @ndice de acidez

!xtracción por prensado en frio

'ATERIALES 0 EUIPOS _ 'ateriales de vidrio _ Dolventes orgánicos _ 0eactivos de precipitación PARTE I* EPERI'ENTAL Reacci1ne2 #enerale2 de caracteri6ación 0!)%%>VJ eidenreic& auc&ercorne

2ellier

!laidínica

30"%!;>'>!J(" (omar : gotas de -D"1 concentrado en tubo de ensayo y verter por las paredes gotas del aceite. %olocar : gotas de aceite y aadir reactivo deauc&ercorne, agitar por - min. %olocar : gotas de aceite en un tubo de ensayo, : gotas de J"/ concentrado y : gotas de solución saturada de resorcina en benzol, agitar por *9 segundos, %olocar en un tubo de ensayo seco * mL de aceite más Q gotas de J" / concentrado, agitar por - minutos, aadir mg de mercurio

0!DEL();"D "bservar coloración pardaroiza. "bservar color, luego someter a bao maría por -9 minutos. "bservarcoloración pardaroiza. Los aceites vegetales dan coloraciones roas, verdes o violetas. "bservar.

metálico, agitar y dear en reposo. PARTE EPERI'ENTAL ACEITE PROCEDI'IENTO 'AN+ Reacción de Blare6 1 ara@uidat1 de 1ta2i1, tomar *.4 mL de aceite de maní en un matraz de -49 mL, adicionar *4 mL de potasa alco&ólica al 4G, adaptarle un refrigerante de refluo, colocar a bao maría por -9 min, enfriar el matraz. OLI)A Reacción de >auc:erc1rne? tomar * mL de aceite y agregar *mL de J"/ y : gotas de agua, agitar por - minutos y después de *4 minutos en reposo, observar el color.

RESULTADO POSITI)O Formación de precipitado

Luego someter a bao maría por -9 min. "bservar la coloración? el aceite de oliva puro permanece inalterable mientras que los demás aceites varían del amarillo al pardo. Reacción de 5lu1re2cencia, tomar : gotas "bservar fluorescencia azulada de aceite y diluir en *mL de cloroformo

AL'ENDRA

de / Reacción de Bie7er, :mezclar -D"1 concentrado, gotas :degotas J" concentrado y : gotas de agua con * mL de aceite de almendras.

Di el aceite de almendras es puro, se forma una emulsión amarilla que al cabo de alg
A?ON?OL+ S-SA'O

LINA&A

RICINO

BACALAO

O

Reacción de Be:ren2, %oloración verde. mezclar en un tubo de ensayo : gotas de -D"1 concentrado y : gotas de J"/ concentrado, luego aadir : gotas de aceite. Reacción de Bellier, colocar : gotas de %oloración verde que persiste algunos minutos. aceite en un tubo de ensayo, : gotas de J"/ concentrado y : gotas de solución saturada de resorcina en benzol, agitar por *9 min y observar. Reacción Baud1vin, %olocar : gotas de %oloración roiza. aceite en un tubo de ensayo, miligramos de sacarosa y : gotas de  -D"1 concentrado, agitar y dear en reposo por 4 a *9 minutos. R* )illavecc:ia  5a7ri2 +detecta &asta 9.-4= %oloración del rosado al roo. 9.4G de aceite? colocar >> a >>> gotas de una solución alco&ólica de furfurol, : gotas de aceite y : gotas de  -D"1 concentrado, agitar y dear en reposo. R* >eidenreic:, colocar en una cápsula de %oloración anaranada y luego se porcelana, : gotas de  -D"1 concentrado y forma una película negra. verter por las paredes gotas del aceite. R* >auc:erc1rne, colocar * mLde aceite y %oloración roo castao. aadir J"/? agua +/?* , agitar y después de minutos observar el color, luego someter a bao maría por -9 minutos. R* Brulle, colocar *9mL de aceite de ricino, / %oloración amarilla. mL de J"/ diluido más 9.* g de alb>> gotas del aceite en el cloroformo, %oloración violeta que pasa a aadir >>> gotas de -D"1 cc pardo.

+ndice 1d1 4 '9t1d1 de >anu2 !s elI* peso de yodode absorbido por la muestra, se expresa en gramos de yodo por *99 g de muestra. !l índice de yodo indica la proporción de dobles enlace s en los ácidos grasosque constituyen la grasa o aceite y se expresa como miligramos de yodo que se fian por adición en *99 g de aceite. 0eactivos _ Dolvente? cloroformo

_ _ _

_ Poduro de potasio al /9G 0eactivo de anus? solución reactivo de yodo bromuro (itulante? tiosulfato de sodio Ja -D-"/ 9.*J >ndicador? D. 0. engrudo de almidón

(écnica operatoria *. 3esar 9.- U 9./ g de la muestra problema en un matraz con tapa esmerilada. -. )adir *9 mL del solvente y agit ar &asta completa disolución y agreg ar exactamente -4 mL del reactivo de anus$ tapar, agitar y colocar el matraz al abrigo de la luz /9 min. /. )gregar *9 mL de solución de yoduro de potasio al /9G y *99 mL de agua. 1. :alorar con la disolución de tiosulfato sódico 9.* J &asta la decolo ración del color amarillo producido por el yodo, aadir gotas de D.0 engrudo de almidón y continuar la valoración con agitación intensa &asta que desaparezca la coloración azul. 4. Se efectúa paralelamente el ensayo en blanco !l índice de yodo se expresa?

5  n G .27  I

P

II*

Determinación de la acide6

La acidez de un producto natural se considera como su contenido en sustancias ácidas. abitualmente se determina mediante técnicas de valoración ácido=base y se puede expresar como la cantidad equivalente de un ácido característico de ese producto natural. !n el caso de aceites fios y grasas el índice de acidez puede expresar como el n
R4COO>  O> 8O @ndice de acidez +ácidos grasos libres ;efinición? mg de &idróxido de potasio necesarios para neutralizar los ácidos grasos libres contenidos en *.9 gramos de aceite o grasa.

%!n#e9 0eactivos _ (itulante ? KO: 34 0 _ >ndicador? fenolftaleína al 9,*G en etanol. _ 'ezcla disolvente? alco&ol ? cloroformo +*?* (écnica "peratoria *. 3esar de - ó / g de aceite en un matraz !rlenmeyer, previamente tarado. -. (omar /9 mL mezcla disolvente +alco&ol=cloroformo -?* y neutr alizar con T" 9,9* &as ta coloración rosada persistente del indicador.

/. %argar la bur eta con la di solución de T"  9,* J, enrasar e iniciar la valoración, agitando continuamente, &asta virae del indicador. )notar los mL de T" gastados.

3.1> 9V3? V1

P

P9

'eso #e la muesta V9 volumen en m1 #e hi#!)i#o #eso#io $asta#o

CUESTIONARIO *. HRué recursos naturales son fuente promisoria de aceites vegetalesI -. ;escriba otros métodos para el análisis en aceites.

RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS *. )zócar L, %iudad #, eipieper K, Javia 0. 2iotec&nological processes for biodiesel production using alternative oils. )ppl'icrobiol2iotec&nol. octubre de -9*9$77+/?5-*=/5. -. %odex alimentarius? Fats, oils and related products. :olume 7. Food Z )griculture "rg.$ -99*. /. !spaol %). )nálisis. 'étodos "ficiales de aceites, grasas, cereales y derivados, productos lácteos y derivados de la uva. 2oletín "ficial del !stado, 2"!, del. *6. 1. F)". #rasas y ácidos gras os en nutrición &umana %onsulta de expertos >nternet. F)"$ -9*-. 0ecuperado a partir de? &ttp?CCNNN.fao.orgCdocrepC9*6Ci*84/sCi*84/s.pdf 4. ernández J, %odony Dalc edo 0, 0afec as'artínez ', 2oatella 0iera K. %onte nidos de isomerostrans de los acidos grasos en productos carnicos +>. !mbutidos. #rasas y )ceites, *88*, vol 1-, num -, p *1/=*16 >nternet. *88* citado -/ de agosto de -9*/$ 0ecuperado a partir de? &ttp?CCdiposit.ub.eduCdspaceC&andleC-114C/--5* 5. >xtaina :. %a racterización de la semilla y el aceite de %&ía +Dalv ia &ispanica L.obtenido mediante distintos procesos. )plicación en tecnología de alimentos. Eniversidad Jacional de La 3lata$ -9*9. p. /8U49. 6. Lafont KK, 3ortacio )). !xtracción y %aracterización Fisicoquímica del )ceite de la Demilla +)lmendra del 'araón +)nacardiumoccidentale L. >nformación tecnológica. -9**$--+*?4*= 7. 7. Li R, ;u ^, Liu ;. 3erspectives of microbial oils for biodiesel production. )ppl'icrobiol2iotec&nol. octubre de -997$79+4?618=45. 8. Lu %, Japier K), %lemente (!, %a&oon !2. JeN frontiers in oilseed biotec&nology? meeting t&e global demand for vegetable oils for food, feed, biofuel, and industrial applications. %urr"pin2iotec&nol. abril de -9**$--+-?-4-=8. *9. 3anreac Ruímica D). 'étodos )nalíticos en )limentarias. 'étodos "ficiales de )nálisis )ceites y #rasas. *888$*4.

PROTOCOLO N3 14 L+PIDOS. IDENTI5ICACIÓN 0 CONTROL DE CALIDAD DE ACEITES >ORARIO**

5EC>A*

'ESA DE TRABA?O ** DRO(AS CON LIPIDOS I*

RESULTADOS 'E!D(0)D?. 0!)%%>"J!D #!J!0)L!D 0!)%%>VJ 0. eidenreic& 0. auc&ercorne 0. 2ellier 0. !laidínica

@J;>%! ;! P";" %WL%EL"D

0!DEL();"D

0!DEL();"D

@J;>%! ;! )%>;!S %WL%EL"D

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

0!DEL();"D

IDENTIFICACIÓN DE ACEITES *.)ceite de maní?

-. 0eacción 0. auc&ercorne

4. )ceite de linaza 0eacción "bservación 0eacción de 2larez "bservación )ceite de oliva "bservación 0eacción 0. eidenreic& 5. )ceite de ricino 0. auc&ercorne

/. 0eacción 0. 2ieber

)ceite de almendras "bservación 0eacción "bservación *. )ceite de sésamo Dolubilidad 0. fusión 0!)%%>VJ potásica 0. 2rulle

"2D!0:)%>VJ

6. )ceite de bacalao

"bservación

0. :illavecc&ia y Fabris 0. 2e&rens 0. 2audovin 0. 2ellier

INTERPRETACIÓN DE

0eacción cloroformo

RESULTADOS

PRÁCTICA Nº 15 ANÁLISIS DE ITAMINAS INTRODUCCIÓN Las vitaminas son compuestos orgánicos que cumplen funciones vitales relacionadas con el metabolismo y con la fabricación de &ormonas, neurotransmisores, células sanguíne as o material genético. 3oseen función enzimática acelerando reacciones químicas. Deg
)itamina2 :idr121lu7le2* _ _ _ _

 2*  :itamina 2/ :itamina 25  Wcido fólico  Wcido pantoténico

_

2iotina

)itamina2 li121lu7le2*  :itamina ) !  :itamina 2:itamina T :itamina 2*-.  :itamina %.

:itamina ;

CO'PETENCIA _ )naliza cualitativamente vitaminas liposolubles e &idrosolubles 'ETODOLO(+A _ 0eacciones de coloración 'ATERIALES 0 EUIPOS _ 'ateriales de vidrio _ Dolventes orgánicos _ 0eactivos de precipitación PARTE EPERI'ENTAL I* Análi2i2 cualitativ1

vitamina A

vitamina D

)itamina C

C1mle;1 B :itamina B ! o (iamina

)ITA'INA LIPOSOLUBLES procedimiento 0. de %arr=3rice? evaporar / mLdel extracto etéreo, disolver en cloroformo y adicionar gotas de D.0 Db%l/.

Reacción 12itiva %oloración azul fugaz.

0. de Liebermann? evaporar 9.4 mL del %oloración roa que extracto etéreo, adicionar * mL de pasa al violeta, azul y cloroformo, * mL de an&idro acético y gotas finalmente al verde. de -D"1 cc en zona.

)ITA'INAS >IDROSOLUBLES (ratar : gotas de filtrado con : gotas mLde D.0 3recipitado roo de óxido Fe&ling o 2enedict, calentar. cuproso ;iluir * mL de ácido ascórbico al -G con pocosmLde -,5 diclorofenolindofenol.

;ecoloración del reactivo

(ratar : gotas del filtrado con D.0. Podo.

;ecoloración del reactivo

0. del tiocromo? disolver mg de la muestra en :>>> gotas de Ja" 9.4 J adicionar * mL de Ferrocianuro de potasio al *9G, * mLde alco&ol isobutílico y agitar por - min.

;a fluorescencia azul que se observa en la luz ultravioleta que desaparece al adicionar gotas de ácidos diluidos y se regenera al adicionar gotas de soluciones alcalinas.

:itamina B8 o 0iboflavina

:itamina B" o 3iridoxina

3recipitación con el ácido silicot
3recipitado característico.

3recipitado blanco. 3recipitado roo pardo Fluorescencia verde.

(ratar * mL de solución de vitamina 25 con D.0 %oloración rosada que Fe%l/. pasa al roo 

CUESTIONARIO *. 'encione especies que presentan vitaminas -. ;escriba otros métodos de cuantificación de vitamina %. RE5ERENCIAS BIBLIO(R$5ICAS *. )lonso 3, Dalucci ', Lázaro 0, 'alani #, Fer ro=Luzzi ). %apacidad antioxidante y potencial de sinergismo entre los principales constituyentes antioxidantes de algunos alimentos. 0ev %ubana )lim Jutric. *888$*/+-?*91=**. -. Flórez K. :itaminas liposolubles e &idrosolubles. Farmacología &umana +/rd ed, !ditorial 'asson, D), 2arcelona. *888$88*=*994. /. 2enítez Sequeira ;!. :itaminas y oxidorreductasas antioxidantes? defensa ante el estrés oxidativo. 0evista cubana de investigaciones biomédicas. -995$-4+-?9=9.

PROTOCOLONº 15 ANÁLISIS DE ITAMINAS >ORARIO**

5EC>A*

'ESA DE TRABA?O **

I*

RESULTADOS 

0!)%%>VJ

AN$LISIS CUALITATI)O 0!)%%>"J!D ;! >;!J(>F>%)%>VJ vitamina A

vitamina D

vitamina C

vitamina B

'UESTRA

PROBLE'A

INTERPRETE SUS RESULTADOS

Guia de Farmacobotanica y Farmacognosia 2015-II Marin

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