Manual Farmacognosia.

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA: QUÍMICA Y FARMACIA GUÍA DE PRACTICAS DE LABORATORIO DE LA ASIGNATURA FARMACOGNOSIA Y FOTOQUÍMICA ELABORADO POR: DR. M.S.c OSWALDO PESANTES DOMÍNGUEZ

Q.F M.S.c NORMA ALEXANDRA LARREA IDIARTE Q.F Mg. KATHERINE BUSTAMANTE PESANTES AÑO 2017 - 2018

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS ASIGNATURA: FUNDAMENTOS DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUIMICA

Práctica # 1

Tema Introducción e Importancia de la Materia Fitoquímica F itoquímica y Farmacognosia


Práctica # 1

Tema Introducción e Importancia de la Materia Fitoquímica F itoquímica y Farmacognosia

Objetivo: 

 

Tener una apropiada introducción sobre el concepto, importancia y usos del laboratorio de Fitoquímica y Farmacognosia Conocer las instalaciones instalaciones del laboratorio Conocer e identificar identific ar los Equipos y Aparatos que se encuentran en ella

Marco Teórico RAMAS DE LA FARMACOGNOSIA F ARMACOGNOSIA

El estudio de la Farmacognosia se lleva a cabo a través de sus diferentes secciones.

1. Farmacohistoria: Estudia la relación relación en el tiempo, tiempo, de los sucesos sucesos importantes ocurridos ocurridos durante la evolución evolución las ciencias farmacéuticas, relacionada relacionada con la preparación de fármacos.

2. Farmacogeografía: Distribución Distribución geográca de las plantas productoras de drogas o con actividad biola.

3. Farmacoetimologia: Género de los nombres con que se designan las drogas.

4. Farmacoergasia: Cultivo, recolección preparaciones preparaciones las plantas y sus usos utilizados en terapéutica.

5. Farmacobotánica: Comprende la citología histología morfología anatomía fisiología y t axonomía vegetal.

6. Farmacoemporia: Producción, comercio, exportación, importación de drogas.

7. Farmacodiascomia: Los procedimientos empleados en embalajes de drogas.

8. Farmacozoología: Fármacos provenientes del reino animal.

9. Farmacoquímica:

Trata de la extracción, separación, purificación, identificación de los principios activos de los productos naturales.

10. Farmacoetnología: Estudia las diversas maneras como se han usado las plantas y productos naturales, medicina y costumbres populares. Pero también debe preocuparse de los aspectos relacionados con la recolección cultivo y mejoramiento de las plantas que nos conducen hacia una mejor producción mercado. En efecto, de una buena recolección depende el valor de las drogas. En un comienzo se recolectan las plantas.

Fitoquímica: Este vocablo proviene del griego: Phyton= planta o vegetal, literalmente significa: “Quca de las plantas”.

Estudio de las sustancias vegetales: extracción, separación, purificación determinaciones de las estructuras moleculares. La Fitoquímica permite resolver problemas en varias disciplinas científicas: genética, fisiología vegetal, taxonomía reconocimiento de metabolitos secundarios. La Farmacognosia y la Fitoquímica tienen muchos puntos de contacto .

Producto natural: Es toda sustancia de origen orgánico o inorgánico que se encuentre en la naturaleza y que pueda ser aislada y procesada por el hombre.

Droga: En farmacognosia vamos a entender por droga todo producto natural empleado en terapéutica y que no ha sido sometido a preparación farmacéutica. Puede tratarse de una planta entera (vinca) o de una parte de ella.

Trata de la extracción, separación, purificación, identificación de los principios activos de los productos naturales.

11. Farmacoetnología: Estudia las diversas maneras como se han usado las plantas y productos naturales, medicina y costumbres populares. Pero también debe preocuparse de los aspectos relacionados con la recolección cultivo y mejoramiento de las plantas que nos conducen hacia una mejor producción mercado. En efecto, de una buena recolección depende el valor de las drogas. En un comienzo se recolectan las plantas.

Fitoquímica: Este vocablo proviene del griego: Phyton= planta o vegetal, literalmente significa: “Qucade las plantas”.

Estudio de las sustancias vegetales: extracción, separación, purificación determinaciones de las estructuras moleculares.


Práctica # 2

Tema Normas de Seguridad

Objetivo: Tener conocimiento de las normas de seguridad que se deben seguir en el Laboratorio.

Marco Teórico El trabajo en el laboratorio requiere la observación de una serie de normas de seguridad que eviten posibles accidentes debido a desconocimiento de lo que se está haciendo o a una posible negligencia de los alumnos que estén en un momento dado en el laboratorio.

Normas Personales: 

Cada grupo de práctica se responsabilizara de su zona de trabajo y de su material

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Es Conveniente la Utilización de bata

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Recogerse el Cabello

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No Fumar ni tomar bebidas ni comer

Normas y precauciones en un Laboratorio 

La bata en el Laboratorio es Imprescindible para evitar deterioros en la ropa por quemaduras, manchas, etc. Deberá ir siempre abrochada.

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No Fumar ni comer en el laboratorio.

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No se calentarán líquidos en recipientes de vidrio no resistente al calor (como probetas, matraces aforados, frascos, pipetas, etc.) ni aquellos cerrados herméticamente.



Nunca se pipeteara con la boca, sino con los dispositivos que se facilitaran al efecto.



No Introducir pipetas, varillas de vidrio ni cualquier otro objeto en los frascos de los reactivos, pues se contaminan.



Los mecheros se apagaran en el mismo momento de terminar su Uso.



Los Alumnos no realizaran experimentos no autorizados ni modificaran los propuestos.



No echar en ningún caso papeles o productos sólidos en las pilas de desagüé.



Las Quemaduras por calor se tratan con abundante agua y una pomada adecuada. Las quemaduras por ácidos o bases concentrados se tratan lavando la zona afectada con agua durante 3-4 minutos, pudiéndose aplicar

después una disolución diluida de bicarbonato sódico o ácido acético, respectivamente. 

En el laboratorio hay que trabajar con las gafas de seguridad. Por otra parte, el llevar lentes de Contacto no es recomendable, pues si hay vapores irritantes se pueden acumular entre la lente y el ojo ocasionando lesiones en este.



No deben olerse directamente los vapores desprendidos en ningún proceso, ni probar ningún producto.



Cuando se trabaja con sustancias que producen vapores tóxicos se utilizara la campana extractora.



Antes de abandonar el laboratorio, compruebe que el agua y el gas están completamente cerrados.



Una vez terminada la práctica deje el puesto ocupado y el material empleado perfectamente limpios.



Al abandonar el laboratorio se lavaran las manos.

Medidas de Seguridad en el Laboratorio. Explosivas Sustancias Muy sensibles a la llama, al calor y a la fricción (choques roces). Ejemplos: Gas Natural (metano), Gas de Garrafas (propano, butano), partículas de polvo de semillas. Estas sustancias deben ser almacenadas en lugares frescos, aislados de fuentes de calor y tomas eléctricas.

Inflamables Sustancias que a temperatura ambiente pueden encenderse en el aire sin aporte de Energía. En general desprenden gases y vapores, Ejemplos: Hexano (solvente de extracción), naftas, solventes de uso general, etileno. No permita que una sustancia de esta índole este cerca de mecheros, toma de corriente, rayos del sol, aparatos eléctricos, bombillos o cualquier fuente de calor y no las ubique cera de las comburentes.

Tóxicas Son aquellas sustancias químicas, que en determinadas concentraciones, pueden dañar en forma inmediata la salud de las personas afectadas, pudiendo incluso producir la Muerte. Ejemplos: Monóxido de carbono. Los tóxicos no solo entran a nuestro cuerpo a través de la boca, también lo hacen a través de las vías respiratorias y de la piel. Por ello al manipular estos materiales es indispensable que la persona que lo haga se proteja adecuadamente según el caso, utilizando guantes, bata, careta para vapores o polvo, gafas y zapatos adecuados. En los sitios de almacenamiento de estas sustancias no deben trabajar personas solas; si es necesario que lo hagan, otras personas deben saber que ella está allí y deben estar pendientes a auxiliaría en caso de emergencia.

Irritantes Sustancias no Corrosivas que por contacto inmediato, prolongado o repetido con la piel o las mucosas pueden provocar una reacción inflamaroria. Ejemplos: Tierra Filtrantes, solventes de uso general, pinturas, polvo particulado, resinas epoxi, dióxido de nitrógeno. Las sustancias nocivas e irritantes son aquellas que en contacto con nuestro organismo producen molestias de menor trascendencia. No menos precie su peligrosidad, pueden convertirse en toxicas por contacto prolongado.

Corrosivas Sustancias que en contacto con los materiales de cañerías, equipos y con el tejido vivo (piel, mucosas) ejercen una acción destructiva. Ejemplos Soda caustica, ácido fosfórico, ácido sulfúrico cloruro de hidrogeno. Estas Sustancias atacan los metales por lo cual se recomienda su almacenamiento en estantería de madera o, mejor aún, de cemento. Atacan la piel por lo cual es indispensable manipularlos con guantes resistentes a ellos y protegiendo los ojos y vías respiratorias con los elementos adecuados.

Comburentes Son sustancias que ayuda a que otra sustancia que sea combustible arda fácilmente. No mezcle ni almacene sustancias comburentes con sustancias combustibles puede generar un incendio.

Sustancias Cancerígenas, Mutagénicas y Teratogenicas Frente a estas sustancias se deben tener en los cuidados que se tienen al manipular sustancias toxicas, teniendo en cuenta que los efectos en este caso no se ven de inmediato sino que aparecen con el tiempo, incluso después de muchos años, lo que las hace de más cuidado. Algunas de estas sustancias producen alteraciones genéticas que se manifiestan en las generaciones siguientes: se conocen como Mutagénicas. Cuando el contacto con el producto afecta al embrión humano, la sustancia se denomina teratogénica. Uno de los efectos de una sustancia radiactiva puede ser la alteración de los factores genéticos hereditarios o la inducción de cáncer.

Sustancias Radioactivas Las radiaciones emitidas por estas sustancias pueden afectarnos aunque no las manipulemos directamente; todo depende del tipo de empaque y de la cantidad de radiaciones emitidas por la sustancia. Estos materiales es recomendable guardarlos en armarios con recubrimiento de plomo. El acceso a estas áreas debe ser restringido solo personal entrenado. No manipule una sustancia que lleve en su etiqueta este símbolo si no ha recibido entrenamiento especial. Nunca la almacene en cantidades peligrosas ( un Kilo o más) y mantenga alejada de curiosos e imprudentes. Usted no verá ni sentirá el efecto de este producto, pero puede ser mortal.

¿Qué Significan los Símbolos? Aparte de los Pictogramas presentes en las etiquetas, aparecen los siguientes Símbolos:

¿Qué Agentes Infecciosos Pueden crecer en un Laboratorio? En general son, todos los agentes representados por organismos vivos (la mayoría suelen que ser microorganismos como bacterias, virus, hongos etc.) Antrax, Tuberculosis, enfermedades causadas por hongos, brucelosis, fiebre, tifoidea, fiebre amarilla, paludismo anquilostomiasis, neumonía y otras enfermedades respiratorias son amenazas de la salud causada por agentes biológicos.


Práctica # 3

Tema Tamizaje Fitoquímico o Screening Fitoquímico

Objetivo: 



Poder Diferenciar un Metabolito Primario de un secundario. Identificar los Metabolito Secundarios presentes en una planta determinada mediante un Screening Fitoquimico.

Consideraciones Teóricas Son Reacciones rápidas sensibles y que requieren de poca cantidad de reactivos y de la muestra se utilizan reactivos específicos para la determinación cualitativa de metabolitos secundarios en lo cual la presencia de ellos y el observar alguna reacción dependerá de la proporción en que estos se encuentren en las plantas. En todos los laboratorios de investigación de cualquier parte del mundo cuando llega una planta a analizarse se la somete a extracciones con alcohol o con agua luego se filtra el material vegetal o seco y se toma de aquí diferentes fracciones para hacerlas reaccionar con los reactivos específicos , las pruebas positivas serán cuando exista cambio de color entre el reactivo y el extracto o también cuando se forme algún precipitado formado, si estos son en gran cantidad se reportara en forma de cruces de 1 a 4 cuando la reacción sea positiva y si el extracto no tiene metabolitos se reportara con negativo con el signo menos.

Metabolitos Primarios y Secundarios Todos los seres vivos se desarrollan y sobreviven gracias a un conjunto completo de reacciones químicas a lo que se le da el nombre general de metabolismo. Las Reacciones que permiten la síntesis y el uso de sustancias esenciales para la vida como los azucares, aminoácidos, los nucleótidos y los polímeros que derivan de ellos (polisacáridos, proteínas, ácidos nucleótidos, etc.) Forman parte de lo que se llama Metabolito primario. Es importante constatar que todos los seres vivos, desde la bacteria al ser humano utilizan los mismos tipos de metabolismo primario en todos los seres vivos constituye un poderoso argumento a favor del origen común de toda la vida terrestre. La mayoría elaboran también sustancias que contrariamente a los metabolitos primarios, no parecen ser indispensables para la sobrevivencia del organismo, estos compuestos se llaman metabolitos secundarios. Es evidente que la distinción entre los 2 tipos de metabolismo no es siempre clara y que por otra parte, encuentran frecuentemente implicados. El metabolismo primarios suministra un cierto número de pequeñas moléculas (acetatos, ácido shikimico, ciertos aminoácidos) que son los materiales que permiten la síntesis de metabolitos secundarios: alcaloides terpenos, policetidos, aromáticos, etc. Mientras que los metabolitos primarios expresan en términos moleculares de profunda unidad del mundo viviente, los metabolitos secundarios traducen su diversidad. En efecto, cuando se estudia la distribución de metabolitos secundarios, se constata que mucho de ellos están limitados a un solo género, incluso a una sola especie.

Hasta muy recientemente los metabolitos secundarios eran considerados residuos del metabolismo que no presentan ningún interés por el organismo que los sintetizaba, hoy se sabe que estas sustancia frecuentemente cumplen el papel de mensajeros químicos que determinan las reacciones de seres vivos con su medio. En particular estas sustancias ayudan a la supervivencia de organismos aumentando su competitividad en un medio muy a menudo hostil.

Diferencia entre Metabolitos Primarios y Secundarios Los Metabolitos Primarios: son universales todos los vegetales los tienen en diferentes proporciones así tenemos por ejemplo: Las proteínas, carbohidratos, Vitaminas y Minerales. Los Metabolitos secundarios: están presentes en pequeñas cantidades, microgramo, miligramos, nano gramos o menos y no todos los vegetales los tienen a diferencia de los primarios estos tiene acción f armacológica. Ejemplo:

Alcaloides (Familia solanácea, apocinaceae) la vimblastina y vincristina las cuales son alcaloides anti-leucemicos, dentro de la familia Rubeaceaae podemos citar la uña de Gato.

Aceites Esenciales: los cuales solo están presentes en pocos grupos botánicos y en las plantas aromáticas entre estos podemos citar al mentol que proviene de la menta, el alcanfor que proviene del árbol alcanforero el ocimemo que proviene de la albahaca, el citral de la hierba luisa entre otros. Un Ejemplo de metabolitos secundarios son los Flavonoides que son el grupo más numeroso de estos metabolitos tenemos como ejemplo: Kaemferol, La Quercetina, la apigenina, etc. Y también los encontramos en los cítricos.

Clasificación de los Metabolitos Secundarios (Principios Activos) de Acuerdo a su origen Biosintético a. Compuestos que derivan de la ruta del ácido Shikimico. 

Comprende casi todos los compuestos aromáticos:

Lignanos

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Cumarinas

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Compuestos Fenólicos Simples

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Alcaloides derivados de las AA triptófano, fenilamina

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Quinonas Benzoquinonas y naftoquinonas

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Compuestos C6 C6-C1, C6-C2

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Fenil Propanoides C6-C3

b. Compuestos que derivan de la ruta del acetato-malonato.

También se forman compuestos de la naturaleza aromática. 

Compuestos Fenólicos simples

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Antroquimonas

c. Compuestos que derivan de la ruta del acetato-mevalonato.

Terpenoides

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Esteroides

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d. Compuestos que se forman por la combinación de 2 o más de las rutas antes mencionadas. 

Flavonoides (shikimico+acetato)



Furano Cumarinas (shikimico+acetato mevalonato)

Materiales 

Tubo de Ensayo

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Cuchillo



Mortero



Fiola



Apio

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Capsula de Porcelana

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Taza



Papel Filtro

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Pipetas



Tabla de picar

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Gradilla



Homilla

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Pinzas



Secador



Luz Ultravioleta

Reactivos 

Alcohol



Agua Destilada



Dragendorff



Wagner



Bouchardat



Mayer



Hidroxido de sodio (Na OH)



Cloruro Ferrico (CI3 Fe)



Fehling A



Fehling B



Reactivo de Benedict



Ácido Clorhidrico (HCI)



Benceno



Ac Sulfurico (SO4H2)



Cloroformo



Anhidrido Acético



Hidróxido de potasio



Limaduras de Magnesio

Procedimientos Para realizar el Screening Fitoquimico se procede a recolectar la muestra, recogida ya sea la hoja, flor, fruto raíz o ramas. Se puede trabajar con muestras secas o frescas.

Extracto Acuoso Para la determinación de alcaloides Saponinas y Cumarinas. Se pulveriza la muestra si esta es seca o se la tritura cuando la muestra vegetal sea fresca, se coloca de 58 a 8 g de la muestra más 8-10 ml. De agua destilada luego se filtra y se toman de este extracto las alícuotas correspondientes para los siguientes en sayos:

Alcaloides

A cada tubo se le agrega 2 ml de muestra (Extracto acuoso) 2 gotas de HCL al 5 o 10% se homogeniza y se adiciona una gota de: 

Reactivo de Dragendorff



Reactivo de Wagnerm se formara un precipitado flatulento marrón



Reactivo de Bouchardat, se formara un precipitado marrón



Reactivo de Mayer, se formara una opalescencia blanca.

Saponinas 

Se mide 2 ml del extracto acuoso y agitar vigorosamente, la presencia de saponinas se indica por la formación de una espuma persistente que debe durar entre 6 minutos o más en caso de que la prueba sea positiva,



Se denomina reacción de Liberman-Boucharddat se añade a una solución reciente una gota de H2SO4 en 1 ml y anhídrido acético helado, 1 ml de extracto clorofórmico de material pulverizado se observara la presencia de color entre 2, 5, 20,6º minutos realizada la mezcla.

Cumarinas 

Se coloca en un tubo de ensayo de 3-4ml del extracto acuoso de la muestra vegetal luego se cubre el tubo con un papel filtro humedeciendo en solución de Na (OH) al 10%, Se coloca el tubo en baño maría por varios minutos (5 Minutos) a continuación se retira el papel filtro del tubo y se lo expone a la luz ultravioleta. Se observa la presencia de una Fluorescencia, amarilla, verdosa, rosado.

Extracto Alcoholico Para taninos, Flavonoides, glucósidos cardiotónicos, glucósidos cianogenéticos, triterpenoides, esteroides. Se pulveriza la muestra si esta seca p se lo tritura cuando la muestra vegetal se seca, se coloca la muestra vegetal con 8-10 ml de alcohol o hasta 30 ml dependiendo de la muestra, luego se filtra y se toma de este extracto las alícuotas correspondientes para los siguientes ensayos.

Taninos A 2ml del extracto etanoico añadir 1 gota de cloruro férrico al 5 o al 10% se obtiene una coloración azul, verde, pardo o negro.

Glucósidos 

Reacción Fehling A solución cuprosa



Reacción Fehling B solución alcalina

Se toma 2 ml del extracto y se pone 10 gotas de Fehling A y 10 gotas de Fehling B. se calienta a baño maría si es positivo se observara un precipitado color ladrillo (naranja, rojo intenso, rojo ladrillo), en caso de ser negativo se mantendrá el color azul.

Glucósidos Cardiotónicos Tomar 2 ml del extracto alcohólico y adicionar 0.5 ml del reactivo de Benedict, se calienta por 5 minutos en baño maría la formación de un precipitado color amarillo (naranja o a veces rojizo) indicara que es positivo si se mantiene azul será negativo.

Reactivo de Legal: Al extracto etanoico se le adiciona de 2 a 3 g de piridina mas solución de nitro prociato de sodio al 25% en agua y luego de 1 a 2 gotas de NAOH 2n. Como resultado se observara un color rojo intenso.

Reactivo de Raymond: Al extracto etanoico se le adiciona de 5 a 8 gotas de etanol al 50% mas 1 a 2 gotas de solución de meta dinitro benceno también se adiciona de 2 a 3 gotas de NAOH al 20% se Observara un color entre violeta y azul.

Glucósidos Ciaogeneticos El extracto alcohólico se lleva a ebullición con HCI al 5 % o más gotas se prueban con papel pricosodado, observar si hay cambio de coloración en el papel. Se puede tapar al tubo de ensayo con el papel para que el ácido cianhídrico liberado lo atraviese.

Aceites esenciales Para trabajar con aceites esenciales preferiblemente se lo hace material fresco pero también se podrá trabajar con material seso como por ejemplo: La canela.

Técnica para aceites esenciales Triturar una parte de la planta fresca si hay olor aceites esenciales se han liberado, poner de 2 a 3 g de la planta fresca triturada en 1 tubo y hervir con agua, observar si hay incremento en el aroma o formación de gotas aceitosas.

Flavonoides Reacción de Schinoda: Se toma 2 ml de la muestra que está en extracto alcohólico se añade limaduras de magnesio y se adiciona de 0.5 ml de HCI concentrado, tonos rojos o coloraciones rojas será positivo para flavonas. 

Una coloración roja será positivo para flavonoides



Una coloración rosada intensa será positiva para flavonas



Una coloración roja será positiva para las charconas y auronas.

En el mortero colocamos de 2-3g de la muestra se le agrega 5 a 8 ml de alcohol se tritura luego se filtra y se procede a trabajar con el extracto preparado.

Triterpenos A una porción del extracto etanoico evaporar a sequedad, tratarle con reactivo de anhídrido acético, ácido sulfúrico, cloroformo en una porción (3:01:2.5) por 1 a 2 minutos luego observar el aparecimiento de colores rojo, rosa, purpura o azul. 

1ro: 6 a 8 gotas Anh, Acetico

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2do: 2 gotas Ac Sulfurico



3ro: 2 a 3 gotas Cloroformo

Antraquinona 





Al material seso y pulverizado macerar con 2 ml de benceno por 20 minutos luego al filtro se le agrega 0.5 ml de NaOH al 10% por las paredes. Observar si se forma una coloración rojo o un anillo a la mitad rosado todo esto será positivo. Reacción de Bumtrager: hervir 0,3g de la planta pulverizada con 10ml de KOH al 5% mas 1 ml de H202 al 6% se enfria la solución se filtra luego al filtrado se adiciona CH3COOH y benceno para extraer, 5 ml de solución bencenica se agita con NaOh acuoso o NH3 acuoso se observara la coloración roja en una capa acuosa en caso positivo. Glicosidos antraquinomicos: se pesa 0.5 g del material; luego se extrae con 30 ml de cloro formo


Práctica # 4


Práctica # 5

DESCRIPCION DE LAS DIFERENTES PARTES


Práctica # 6

Gráficos

Gráficos


Práctica # 7

Tema Elaboración de un Preparado Cosmético


Práctica # 8


Práctica # 9 TEMA




PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO






Manual Farmacognosia.

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