GERMINACI GERMI NACIÓ ÓN DE ESPOR E SPORAS AS INTRODUCCIóN Alguna Algunas s bacter bacterias ias tienen tienen la propie propiedad dad de formar formar dentro dentro del cuerpo cuerpo celular, una estructura con características diferentes a las de la celula de orig origen en (cel (celul ula a veget egetat ativ iva) a) y que que se deno denomi mina na espo espora ra o endo endosp spor ora a bacteriana. La celula madre que rodea a la espora recibe el nombre de espo espora rang ngio io.. Es nece necesa sari rio o dest destac acar ar las las prop propie ieda dade des s que que pose poseen en esta estas s endosporas, tales como: -
Hipome Hipometab taboli olia: a: casi casi no no pres present entan an metab metaboli olismo smo..
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Dorman Dormancia cia:: puede pueden n perma permanec necer er años años o siglo siglos s en reposo reposo..
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Alta Alta resi resist sten enci cia a al calor calor:: se atr atrib ibuy uye e al bajo contenido de agua (aprox. 15%) y al contenido de ácido dipicolínico.
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Alto Alto grad grado o de desh deshid idra rata taci ción ón:: el ácid ácido o dipi dipico colí líni nico co,, que que tien tiene e una una acción acción quelante quelante (capta calcio); formará el dipicolinato dipicolinato de calcio, que se deposita en el citoplasma haciendo que se pierda gran cantidad de agua.
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Resi Resist sten enci cia a a los los rayo rayos s UV UV..
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Resi Resist sten enci cia a a agen agente tes s quím químic icos os (anti (antisé sépt ptic icos os): ): La resis resiste tenc ncia ia al efecto de los los productos químicos debe atribuirse a la impermeabilidad que que pres presen enta ta en esos esos caso casos s la cubi cubier erta ta de la espora.
Las bacterias que forman esporas se encuentran habitualmente en el suelo uelo,, y pert ertene enecen cen prin princ cipal ipalm ment ente a los los géne éneros: ros: Streptomyces, Clostridium y Bacillus.
Cuan Cuando do una una célul célula a bact bacter erian iana a capa capaz z de espo esporu rular lar aban abando dona na su crecimiento exponencial debido a la deprivación de nutrientes esenciales en su hábitat debe tomar la decisión de esporular o arriesgarse a continuar creciendo como tal y correr el riesgo de morir. Si la celula elige esporular se embarcará en un proceso irreversible de diferenciación celular que dará como como result resultado ado una forma forma de vida vida inacti inactiva va que permanec permanecerá erá como como tal indefinidamente hasta que mejoren las condiciones de su medio externo, las cuales le permitirán germinar y volver a crecer. La germinación es el proceso general que convierte una espora en una célula vegetativa, se distinguen 4 etapas: 1) Prea Preact ctiv ivac ación ión.. 2) Ac Acti tiva vaci ción ón.. 3) Inicia Iniciació ción n (germina (germinació ción). n). 4) Crec Crecim imie ient nto. o.
En el presente informe se describe la actividad realizada en el laboratorio sobre germinación de esporas bacterianas. La bacteria que se utilizo fue: Bacillus cereus, este es un bacilo gram (+) aerobio, formador de esporas responsable de intoxicaciones alimentarias, siendo su hábitat natural el suelo, contamina con frecuencia cereales, leche, budines pasteurizadas y especias, entre otros alimentos. Objetivo: Observar el proceso de germinación de la endospora bacteriana en periodos de tiempos determinados e identificar sus principales características.
DISCUSION Los procesos de esporulación vienen generalmente determinados por la ausencia de una fuente de carbono o nitrógeno. Por lo que se ha sugerido que el agotamiento de nutrientes estimula la formación de la espora bacteriana. Cuando la espora se encuentra en un medio favorable para el crecimiento de las células vegetativas, germina. El primer paso fue la activación de la espora mediante una corta exposición a temperaturas altas (80°C por 10 min.), es decir, se sometió a la suspensión de esporas a un shock térmico, permitiendo que se acelerará el tiempo para darle las condiciones optimas para llevar a cabo la germinación. Luego del shock térmico se enfriaron bruscamente produciendo así un daño en las cubiertas de estas esporas. Es importante destacar que la esporulación es un proceso asincrónico, por lo que habrá esporas que al final del shock térmico seguirán en ese estado. Una vez dañada las cubiertas, se necesita la presencia de agua, así como de un agente activador de la germinación, que son metabolitos como Lalanina, glucosa, adenosina, iones inorgánicos, etc., que activan enzimas que permiten la hidrólisis de la corteza. Las condiciones que permitieron que se llevara a cabo esta etapa se las otorgo el medio de cultivo, que en este caso fue Agar Glucosa – levadura – triptosa, ya que este posee componentes fundamentales para darle las condiciones nutritivas a las esporas para que germine, como lo son la glucosa y el agua, además de darle un temperatura adecuada en la sala de medios de cultivos. En la etapa de iniciación, la germinación se hace irreversible. Los principales acontecimientos bioquímicos que ocurren son: -Se pierde ácido Dipicolínico (DPA), lo que supone perdida de Ca ++. -El 3 fosofoglicerato (3-PG) se convierte en 2-PG, y este en PEP (fosfo-enolpiruvato), que a su vez dona su fosfato de energía para producir ATP.
-Las pequeñas proteínas SASPs hidrolizan por una proteasa especifica (GRP), por lo que se va a obtener gran cantidad de aminoácidos que utilizara la espora para la germinación. -La ARN polimerasa comienza a sintetizar RNA. En esta etapa comienza a aumentar de tamaño la espora, ya que empieza a captar agua; esto se observa a partir del tiempo ----------- además la primera evidencia microscópica de la germinación es un cambio de la refractabilidad de la espora, acompañada de un incremento de la permeabilidad a colorantes (cristal violeta, en este caso) y una perdida de l a resistencia al calor. Esto se observa en los tiempos ----- Ya en la ultima etapa, la de crecimiento, la espora puede tomar nutrientes del exterior (medio de cultivo) y metabolizarlos, sintetiza DNA, la pared (PG) de la espora sirve como cebador (enganche) para la formación de la célula vegetativa naciente. Esta etapa se pudo apreciar en los tiempos ---Finalmente pasado ya días de la germinación se pueden observar al microscopio como el bacilo se ha distribuido en cadenas (dibujo ------) Como conclusión es necesario señalar la importancia de este proceso en las bacterias, pues es de real importancia para la supervivencia de estas mismas, de allí la relevancia de como se lleva a cabo este proceso, evidenciar las características de cada etapa y observarlas al microscopio. En el desarrollo de este practico se destaca una de las principales habilidades del tecnólogo medico, como es la observación a través del microscopio además de adquirir conocimientos microbiológicos y poderlos ver materializados por medio de dicha observación.
BIBLIOGRAFIA 1.- Brooks, G., Butel, J. y Morse S., http://depa.pquim.unam.mx/amyd/archivero/2g.Endosporas_6857.pdf
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