SKRINING FITOKIMIA DAN UJI ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL BUAH KAWISTA ( Limonia acidissima L.) DARI DAERAH KABUPATEN ACEH BESAR TERHADAP BAKTERI Escherichia coli
Skripsi diajukan untuk melengkapi tugas-tugas dan memenuhi syarat-syarat guna memperoleh gelar Sarjana Pendidikan oleh Audia Anda Rini
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS SYIAH KUALA DARUSSALAM, BANDA ACEH 201
1
LEMBAR PERSETUJUAN
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL BUAH KAWISTA ( Limonia acidissima L.) DARI DAERAH KABUPATEN ACEH BESAR TERHADAP BAKTERI Escherichia coli
Skripsi oleh Nama : Audia Audia Anda Anda Rini Nim : 1206103010031 1206103010031 Program Studi: Pendidikan iologi disetujui!
Pem"im"ing #!
Pem"im"ing ##!
Supriatno! $%Si%! Ph%& N#P% N#P% 1(620)131(*( 1(620)131(*(03100+ 03100+
'ardiah! S%Pd%! $%io N#P% 1(*01106620060+20 1(*01106620060+200 0
diketahui! &ekan!
,etua urusan.Prodi!
&r% &ju/ri! $%Si% N#P% N#P% 1(6311 1(631111 111(*(0310 1(*(031001 01
Supriatno! $%Si%! Ph%& N#P% N#P%
LEMBAR PERSETUJUAN
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL BUAH KAWISTA ( Limonia acidissima L.) DARI DAERAH KABUPATEN ACEH BESAR TERHADAP BAKTERI Escherichia coli
Skripsi oleh Nama : Audia Audia Anda Anda Rini Nim : 1206103010031 1206103010031 Program Studi: Pendidikan iologi disetujui!
Pem"im"ing #!
Pem"im"ing ##!
Supriatno! $%Si%! Ph%& N#P% N#P% 1(620)131(*( 1(620)131(*(03100+ 03100+
'ardiah! S%Pd%! $%io N#P% 1(*01106620060+20 1(*01106620060+200 0
diketahui! &ekan!
,etua urusan.Prodi!
&r% &ju/ri! $%Si% N#P% N#P% 1(6311 1(631111 111(*(0310 1(*(031001 01
Supriatno! $%Si%! Ph%& N#P% N#P%
LEMBAR PENGESAHAN
Skripsi Audia Anda Rini ini telah dipertahankan di depan tim penguji pada 2016 dan telah direisi sesuai dengan saran-saran dari tim penguji% T!" P#$%&'!,
1%
KATA KATA PENGANTAR PENG ANTAR
Segala puji "agi Allah S' yang telah melimpahkan rahmat! kasih sayang dan karunia kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang "erjudul S!$!$% F!*+!"! -$ U'! A$*!*#! E/* E*$+ B& K!/* D! K&3*#$ A4# B#/ T#-3 Eschericia
coli
ini se"agai salah satu syarat
untuk memperoleh gelar sarjana kedokteran% Salaat dan salam penulis sanjungkan ke pangkuan Rasulullah SA' yang mulia% &engan selesainya skripsi ini penulis uapkan terima kasih dan penghargaan setinggi-tingginya Penulis persem"ahkan kepada yang terhormat: 1% &r% &ju/ri! $%Si selaku &ekan 4akultas ,eguruan #lmu Pendidikan 5niersitas Syiah ,uala yang telah mem"erikan kesempatan kepada saya untuk menulis skripsi% 2% &rs% Supriatno! $%Si%! Ph%& selaku &osen Pem"im"ing # yang dengan sepenuh hati telah meluangkan aktunya untuk mem"erikan "im"ingan! arahan! maupun dorongan moril hingga terselesaikannya skripsi ini% 3% &r% a/nati Rahmatan! $%Si% selaku selaku &osen Pem"im"ing ## yang dengan sepenuh hati telah meluangkan aktunya untuk mem"erikan "im"ingan! arahan! maupun dorongan moril hingga terselesaikannya skripsi ini% +% &r% &ju/ri! $%Si selaku selaku &osen Penguji # yang telah mem"erikan kritikan dan saran serta meluangkan aktunya untuk mem"eri arahan dan per"aikan hingga terselesaikannya skripsi ini% )% 'ardiah! $% S%%% selaku &osen Penguji ## yang telah mem"erikan kritikan dan saran serta meluangkan aktunya untuk mem"eri arahan dan per"aikan hingga terselesaikannya skripsi ini% 6% &rs% Supriatno! $%Si%! Ph%& selaku dosen ali yang selama tiga tahun ini "erkenan meluangkan aktu untuk menyalurkan ilmu serta mem"im"ing saya%
7% Ayahanda dan #"unda yang selalu mem"eri dukungan! doa yang tak pernah putus serta kasih sayang yang tiada tara% *% Saha"at ter"aik dan teman-teman seperjuangan mahasisa Program Studi iologi angakatan 2012% (% Seluruh dosen dan sta/ administrasi Program Studi iologi% 10% Semua pihak yang tidak dapat dise"utkan satu-persatu% Penulis telah "erusaha melakukan yang ter"aik dalam penulisan skripsi ini! namun penulis menyadari masih jauh dari kesempurnaan% 8leh karena itu sum"angan gagasan! kritikan! saran dan masukan yang mem"angun akan penulis terima dengan senang hati demi kesempurnaan skripsi ini% Semoga proposal penelitian ini menjadi karya ilmiah yang "erman/aat "agi perkem"angan ilmu pengetahuan kedokteran%
anda Aeh! 8kto"er 2016 Penulis Audia Anda Rini
ABSTRAK
Rini! Audia Anda% 2016% Skrining 4itokimia dan 5ji Anti"akteri 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< dari &aerah ,a"upaten Aeh esar terhadap akteri Escherichia coli% Skripsi% urusan Pendidikan iologi! 4akultas ,eguruan dan #lmu Pendidikan! 5niersitas Syiah ,uala% Pem"im"ing: 1< &rs% Supriatno! $%Si%! Ph%&%! 2< &r% a/nati Rahmatan! $%Si% K* &$4!5 9kstrak etanol "uah kaista! anti"akteri! Escherichia coli%
Penelitian tentang Skrining 4itokimia dan 5ji Anti"akteri 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< terhadap akteri Escherichia coli telah dilaksanakan pada uni 2016 sampai dengan Agustus 2016% Penelitian "ertujuan untuk mengetahui kandungan /itokimia ekstrak etanol "uah kaista dan pengaruh "er"agai konsentrasi ekstrak etanol "uah kaista terhadap pertum"uhan "akteri E. coli% uah kaista yang digunakan dalam penelitian "erasal dari daerah ,a"upaten
Aeh esar% asil uji /itokimia menunjukkan "aha ekstrak "uah kaista mengandung "er"agai senyaa akti/ seperti alkaloid! saponin! tanin! triterpenoid! dan poli/enol% #solat "akteri E. coli yang digunakan dalam penelitian ini diperoleh dari ;a"oratorium $ikro"iologi 4akultas ,edokteran ean 5niersitas Syiah ,uala% $etode yang digunakan dalam penelitian eksperimen la"oratorium jenis kuantitati/ menggunakan Ranangan Aak ;engkap RA;< yang di"agi dalam 7 kelompok! yaitu ) kelompok perlakuan ekstrak etanol "uah kaista< dan 2 kelompok kontrol menggunakan a=uades kontrol negati/< dan streptomisin kontrol positi/<% Analisis data dilakukan menggunakan AN8>A Analysis of Variance< kemudian dilanjutkan dengan uji N eda Nyata ujur< pada tara/ keperayaan )?% asil uji anti"akteri menunjukkan ekstrak "uah kaista mampu mengham"at pertum"uhan "akteri E. coli% @ona ham"at tertinggi diperoleh pada konsentrasi )00%000 ppm! yaitu rata-rata "erdiameter 16!1+1 mm% Simpulan penelitian ini adalah ekstrak "uah kaista Limonia acidissima ;%< memiliki aktiitas anti"akteri terhadap pertum"uhan "akteri E.coli% Semakin tinggi konsentrasi ekstrak "uah kaista! maka semakin "esar aktiitas anti"akteri terhadap pertum"uhan "akteri E.coli%
DAFTAR ISI KATA PENGANTAR %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% i iii ABSTRAK %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% i DAFTAR ISI %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% DAFTAR TABEL %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% i DAFTAR GAMBAR %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% ii DAFTAR LAMPIRAN %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% iii BAB I PENDAHULUAN %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 1%1 ;atar elakang %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 1%2 Rumusan $asalah %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 1%3 ujuan Penelitian %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 1%+ $an/aat Penelitian %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 1%) ipotesis Penelitian%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 1%6 Ruang ;ingkup%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 1%7 &e/enisi #stilah……………………………………………%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
1 1 3 3 3 + + +
BAB II KAJIAN PUSTAKA%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 2%1 Skrining.penapisan 4itokimia %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 2%2 9kstrak%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 2%3 Escherichia coli …………………………………%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 2%+ $etode skrining antimikro"a %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
) ) 10 11 1)
BAB III METODE PENELITIAN %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%1 enis Penelitian dan Ranangan Penelitian %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%2 empat dan 'aktu Penelitian%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%3 Alat dan ahan%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%+ Prosedur Penelitian %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%+%1 Pem"uatan 9kstrak uah ,aista %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%+%2 5ji 4itokimia%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%+%3 Sterilisasi Alat dan ahan%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%+%+ Pem"uatan Suspensi akteri%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%+%) 5ji Anti"akteri%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%) Parameter Penelitian…………………………………………%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3%6 Analisis &ata……………………………………………………%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
1* 1( 1( 17 20 20 21 22 23 23 2+ 2+
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% +%1 asil 9kstraksi dan Analisis 4itokimia uah ,aista $uda%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% +%2 asil 5ji Aktiitas Anti"akteri 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< erhadap Eschericia coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% +%3 asil Analisis &ata%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% +%+ Pem"ahasan%%%%%%%%%%%%%%%
26 26 27 2( 32
BAB V PENUTUP%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% )%1 Simpulan%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% )%2 Saran%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
37 37 37
DAFTAR PUSTAKA%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% LAMPIRAN %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
3* +2
DAFTAR TABEL
a"el
alaman
3%1 Ranangan penelitian%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
20
+%1 asil 5ji 4itokimia 9kstrak 9tanol uah ,aista%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
27
+%2 Pengukuran &iameter @ona am"at 9kstrak uah ,aista Limonia acidissima ;.< terhadap "akteri E. coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
2(
+%3 asil rans/ormasi &ata Pengukuran &iameter @ona am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima< terhadap E. coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% +%+ Analisis arian @ona am"at 9kstrak 9tanol uah kaista Limonia acidissima ;%< terhadap E.coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
31
31
+%) asil 5ji eda Nyata ujur N< @ona am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< terhadap E. coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%
32
DAFTAR GAMBAR
Bam"ar
alaman
2%1 Pohon ,aista%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
(
2%2 uah ,aista $uda%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
(
2%3 $or/ologi E.coli %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
1)
+%1 4oto hasil 5ji daya am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< erhadap E. coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
2*
+%2 Rata-Rata &iameter @ona am"t 9kstrak 9tanol uah ,aista erhadap E.coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
30
DAFTAR LAMPIRAN
;ampiran 1% Pem"uatan ,onsentrasi 9kstrak etanol uah ,aista%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 2% &ata mentah @ona am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista terhadap E. coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 3% Analisis >arian ANA>A< @ona am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista terhadap E. coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% +% Analisis eda Nyata ujur N< am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< terhadap E. coli%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% )% 4oto Penelitian%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
+3
+6
+7
)1 )3
6% Nilai aku 4 ta"el pada ara/ ,ritis ) dan 1? untuk AN8>A Analysis of variance<%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
)7
7% &a/tar Nilai aku C untuk 5ji eda Nyata ujur pada tara/ ,ritis )?%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
)(
*% Surat ,eputusan Penunjukan &osen Pem"im"ing%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
60
(% Surat #Din $engadakan Penelitian dari 4akultas%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
61
10% Surat keterangan telah selesai melakukan penelitian dari ketua la"oratorium mikro"iologi 4, 5nsyiah%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
62
11% Surat keterangan hasil pengumpulan data uji /itokimia%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
63
BAB I PENDAHULUAN
1.1
L* B#$% 8"at tradisional telah dikenal luas pemakaiannya di #ndonesia! "aik untuk
pemeliharaan kesehatan maupun untuk pengo"atan penyakit-penyakit tertentu ,airupan! 201+:(+<% $enurut '8 World Health Organization
yang perlu digali sehingga dapat diman/aatkan se"agai "ahan pengo"atan 'i"oo et al., dalam Nisah! 201+:1<% Salah satu tanaman yang "erpotensi se"agai o"at adalah tanaman kaista Limonia acidissima ;%<% ,aista merupakan tanaman yang termasuk anggota Rutaceae% Spesies ini telah dikenal se"agai tanaman o"at kuno Eunani dan Romai serta menjadi tanaman o"at paling penting di #ndia Phapale dan Seema!
2010:6*<%
mempunyai
anaman
kaista
mengandung
senyaa-senyaa
khasiat pengo"atan! yang dikenal se"agai
senyaa
yang
/itokimia%
erdasarkan penelitian se"elumnya! dise"utkan "aha "uah kaista mengandung senyaa alkaloid! saponin! /enol! dan /laonoid Pandey et al.! 201+:*+<% ampir semua "agian tanaman kaista seperti akar! kulit "atang! daun! getah dan "uahnya telah digunakan seara tradisional untuk mengo"ati "er"agai penyakit A"sar! 2010:((<% Salah satu ontoh peman/aatan tanaman kaista dalam pengo"atan yang menjadi ke"iasaan masyarakat adalah mengkonsumsi "uah kaista mentah untuk mengo"ati diare% $enurut Sukumaran 201+:73
&iare merupakan salah satu penyakit yang sering dialami ke"anyakan masyarakat! sehingga perlu dilakukan pengujian untuk mengham"at atau mem"unuh "akteri penye"a" diare! salah satunya adalah Escherichia coli% al ini dilakukan se"agai usaha pengem"angan tum"uhan yang "erkhasiat o"at dan usaha menemukan sum"er anti"akteri yang "erasal dari "ahan alam% Penemuan sum"er anti"akteri yang "erasal dari "ahan alam dapat mem"antu mengatasi masalah resistensi "akteri khususnya "akteri patogen 8roh dkk%! 201):)3<% $engingat senyaa /itokimia yang dikandung oleh "uah kaista "erman/aat se"agai pengo"atan! maka perlu dilakukan penelitian
untuk mem"uktikan "aha
"uah kaista
"erpengaruh
terhadap
pertum"uhan "akteri Escherichia coli%
1.2
R&"&/$ M/
1% Apa saja kandungan /itokimia yang terdapat pada ekstrak etanol "uah kaista Limonia acidissima ;%< dari daerah ,a"upaten Aeh esar F 2% Apakah "er"agai konsentrasi ekstrak "uah kaista Limonia acidissima ;%< dapat "erpengaruh terhadap pertum"uhan "akteri E.coliF
1.6
T&'&$ P#$#!*!$
ujuan penelitian ini adalah: 1% $engetahui "e"erapa kandungan /itokimia yang terdapat pada ekstrak etanol "uah kaista Limonia acidissima ;.<% 2% $engetahui pengaruh "er"agai konsentrasi ekstrak "uah kaista Limonia acidissima ;%< terhadap pertum"uhan "akteri E.coli.
1.7
M$8* P#$#!*!$ $an/aat penelitian ini adalah: 1% Penelitian ini mem"erikan in/ormasi mengenai daya ham"at ekstrak "uah
kaista terhadap pertum"uhan "akteri E.coli% 2% Penelitian ini dapat dijadikan dasar penelitian le"ih lanjut yang "erhu"ungan dengan aktiitas anti"akteri di "idang kesehatan%
1.9
K#$% P#"!!$
uah ,aista
$eningkatnya resisten "akteri patogen terhadap anti"iotik Re/danita d!! ! 200+:+2< Perlunya penemuan senyaa antimikro"a "aru $aserasi dengan etanol
$engandung senyaa alkaloid! saponin! /enol! dan /laonoid Pandey et al.! 201+:*+<%
9kstrak kental Skrining /itokimia dan uji anti"akteri terhadap E.coli &aya anti"akteri diamati dengan mengukur diameter Dona ham"at ekstrak etanol "uah kaista terhadap E.coli 1.
H!3+*#/!/ P#$#!*!$ ipotesis pada penelitian ini adalah: 1% er"agai konsentrasi ekstrak "uah kaista Limonia acidissima ;%< dapat
"erpengaruh terhadap pertum"uhan "akteri E.coli 1.:
R&$% L!$%&3 P#$#!*!$ Ruang lingkup penelitian ini meliputi mikro"iologi kesehatan%
1.;
D#8!$!/! I/*!
1% Skrining /itokimia adalah pemeriksaan kandungan kimia pada tum"uhan seara kualitati/% 2% ,aista adalah tanaman yang termasuk ke dalam /amili Rutaceae% uah kaista yang digunakan pada penelitian ini adalah "uah yang "elum matang! ditandai dengan daging "uah masih "erarna putih dan "iji kekuningan% 3% 9tanol adalah pelarut organik yang "ersi/at semipolar! sehingga pelarut dapat menarik kandungan kimia yang "ersi/at polar maupun non polar% +% akteri adalah organisme yang tidak mempunyai mem"ran inti sel% )% E. coli adalah salah satu "akteri gram negati/ yang dapat menye"a"kan diare apa"ila jumlahnya mele"ihi "atas normal% 6% @at antimikro"a adalah suatu Dat yang dapat mengham"at pertum"uhan "akteri BAB II LANDASAN TEORITIS
2.1
S!$!$%<3#$3!/$ F!*+!"! 4itokimia "erasal dari kata hytochemical % "hyto "erarti tum"uhan
atau
tanaman dan chemical sama dengan Dat kimia "erarti Dat kimia yang terdapat pada tanaman% Setiap tum"uhan atau tanaman mengandung sejenis Dat yang dise"ut /itokimia! merupakan Dat kimia alami yang terdapat di dalam tum"uhan dan dapat mem"erikan rasa! aroma atau arna pada tum"uhan itu% Sampai saat ini sudah sekitar 30%000 jenis /itokimia yang ditemukan dan sekitar 10%000 terkandung dalam makanan &aris! 2010:1<% Penapisan /itokimia adalah pemeriksaan kandungan kimia seara kualitati/ untuk mengetahui golongan senyaa yang terkandung dalam suatu tum"uhan% um"uhan se"agai makhluk hidup akan menghasilkan senyaa meta"olit sekunder se"agai "entuk adaptasinya dengan lingkungan sekitar% Senyaa ini memiliki /ungsi
se"agai alat pertahanan diri dan reproduksi% $eta"olit sekunder juga dikatakan memiliki si/at adapti/ agar tum"uhan dapat "ertahan hidup atau tidak musnah% Senyaa meta"olit sekunder yang terdapat pada tanaman di daerah yang satu dan daerah yang lainnya "er"eda-"eda alaupun dengan jenis tanaman yang sama% Penapisan /itokimia dilakukan untuk mengetahui komponen kimia pada tum"uhan seara kualitati/ Saleh 2007 dalam udi/aka! 201+:21<% Senyaa-senyaa akti/ "iologis atau senyaa "erman/aat dalam pengo"atan terdapat dalam simplisia na"ati% Senyaa-senyaa terse"ut adalah senyaa meta"olit sekunder%
2.1.1 K!/* ( Limonia acidissima L.)
,aista Limonia acidissima ;% syn #eronia limonia Single%< termasuk suku Rutaeae% anaman ini merupakan genus monotipe yaitu dalam satu genus hanya terdapat satu spesies% Single pertama kali mengajukan nama #. Limonia pada 1(1+ dan menyatakan "aha L. acidissima merupakan nama am"igu% Airy-Sha 1(3(< mendukung nama L. acidissima% Panigrahi 1(77< mengajukan penolakan terhadap nama L. acidissima dengan mengajukan nama L. elehantum! namun Stone dan Niolson 1(7*< menolaknya ,rueger G Naarro 2007 dalam Nugroho! 2012 :1<% anaman kaista dahulunya "erasal dari #ndia terutama di daerah-daerah kering% anaman ini "iasanya tum"uh di daerah troic mushon yang seaktu-aktu mengalami musim kering% $engenai adaptasinya! tanaman ini mempunyai adaptasi yang "aik pada daerah yang kering dan tanah yang "erpasir% &i #ndonesia! kaista umumnya ditanam di pekarangan pada daerah pantai% ,aista diperoleh di padang-
padang rumput yang kering terutama dekat laut dan ke arah daratan tanaman ini sering ditanam% anaman kaista memiliki nama-nama yang "er"eda tergantung kepada daerahnya masing-masing% Nama-nama terse"ut yaitu olifants ael elandaijayargia dan Rekha! 201+:1(2<% 2.1.2 T/+$+"!
Nama ;okal
: ,aista
&unia
: Plantae
Su"kingdom : raheo"ionta Superdiisi
: Spermatophyta
&iisi
: $agnoliophyta
,elas
: $agnoliopsida
Su" ,elas
: &illeniidae
angsa
: Rutales
Suku
: Rutaeae
$arga
: Limonia
Spesies
: Limonia acidissima ;. %yn #eronia limonia ;%< Single >ijayargia dan Rekha! 201+:1(1<
2.1.6 M+8++%!
,aista merupakan pohon yang meranggas! tinggi menapai 12 m% Pera"angan "erduri runing dan ramping! duri lurus panjangnya sampai + m% &aun majemuk menyirip dengan rakis dan tangkai daun yang "ersayapH anak daun saling "erhadapan dalam 2-3 pasang dan 1 anak daun di "agian ujung! anak daun "undar telur ter"alik! panjang sampai + m! terdapat "erak-"erak kelenjar minyak yang apa"ila diremas "er"au aromatik% Posisi "unga aksiler atau terminal% unga "erarna merah "iasanya dengan malai longgar! kepala sari "erarna merah! terletak di ujung ranting atau di ketiak daun dan "erumah dua dioseus<%
uah "uni
"er"entuk "ulat panjang! "ergaris tengah sampai 10 m! "erkulit keras! daging "uah aromatik dan mengandung "anyak "iji yang kotor% Panjang "iji )-6 mm! "eram"ut dan "erkulit te"al! "erkotiledon hijau% ,aista termasuk pohon yang tum"uhnya lam"at% Pohon yang "erasal dari "iji memerlukan aktu hingga 1) tahun untuk "er"uah ones! 1((2 dalam Nugroho! 2012 :1<%
Bam"ar 2%1 Pohon kaista Sum"er: ,oleksi pri"adi
Bam"ar 2%2 uah kaista yang "elum matang Sum"er: ,oleksi pri"adi<
2.1.7 K$-&$%$ -$ M$8*
,aista Limonia acidissima syn% #eronia limonia< "erkera"at dekat dengan maja dan termasuk suku jeruk-jerukan Rutaeae<% Asalnya dari #ndia Selatan! kemudian menye"ar ke Asia enggara termasuk aa% uah kaista "erman/aat se"agai minuman penyegar jus atau sirop
2010:101<% #lango et al., 200( dalam &ei 2013:3< mengatakan "aha "uah kaista dapat digunakan dalam pengo"atan tumor! asma! sem"elit! lemah jantung dan hepatitis% Seratus gram daging "uah kaista mengandung 1+0 kkal% uah ini juga mengandung kar"ohidrat dan protein% uah kaista kaya akan "eta karoten! itamin ! itamin I! thiamin dan ri"o/lain% uah yang kaista tum"uh di alam liar enderung memiliki le"ih "anyak tannin daripada yang di"udidayakan untuk tujuan komersial >ijayargia dan Rekha! 201+:1(2<% uah kaista mengandung asam "uah! itamin dan mineral% &aging "uah yang telah dikeringkan mengandung 1)? asam sitrat! dan terdiri dari kalium! kalsium dan Dat "esi% iji dan daging "uah mengandung minyak dan protein! terdiri dari palmitat! oleat! linoleat! asam linolenat! asam palmitoleat dan stearat A"sar! 2010:101<% $enurut &ei 2013:1+ijayargia dan Rekha! 2013:1(2<%
2.2
E/* 9kstrak adalah sediaan kering! kental atau air yang didapat dari penyarian
simplisia na"ati atau heani dengan ara yang ook dan proses penyarian dilakukan diluar pengaruh ahaya matahari langsung $enkes! 200*:26<% 2.2.1 E/*/! 9kstraksi merupakan salah satu metode pemisahan "erdasarkan per"edaan kelarutan% Seara umum ekstraksi dapat dide/inisikan se"agai proses pemisahan dan isolasi Dat dari suatu Dat dengan penam"ahan pelarut tertentu untuk mengeluarkan komponen ampuran dari Dat padat atau Dat air 'ahyuni dkk%! 200+:2<%
e"erapa metoda ekstraksi simplisia yang umum digunakan dalam mengekstrak "ahan alam untuk memperoleh Dat yang diinginkan dipaparkan "erikut ini $usman! 2013:16<: a% omogenisasi simplisia omogenisasi simplisia dalam pelarut merupakan metoda ekstraksi yang umum digunakan% Simplisia! "aik kering maupun "asah! digiling dalam "lender untuk memperoleh ukuran yang le"ih keil% Simplisia yang telah halus terse"ut ditempatkan dalam suatu adah! kemudian tuangkan pelarut ke dalam adah dimaksud! dan "iarkan selama 2+ jam! lalu ampuran disaring% 4iltrat yang diperoleh dikeringkan dengan pengaa putar% Residu yang diperoleh disimpan dalam "otol untuk perlakuan selanjutnya $usman! 2013:16<% "% 9kstraksi "erseri $etoda ini meli"atkan penggunaan pelarut "erturut-turut dengan polaritas yang semakin meningkat dalam ekstraksi% $ula-mula menggunakan pelarut tankutu"! lalu pelarut semikutu"! dan terakhir dengan pelarut kutu" untuk mengam"il senyaa dalam simplisia% $etoda ini juga digunakan untuk mengam"il meta"olit dalam simplisia "erdasarkan meningkatnya konstanta dielektrika pelarut $usman! 2013:17<% % SoJhletasi SoJhletasi digunakan untuk mengam"il senyaa tertentu saja yang kelarutannya ter"atas dalam suatu pelarut tanpa melarutkan senyaa yang tidak diinginkan dari dalam simplisia% ika senyaa yang diinginkan memiliki kelarutan
yang tinggi dalam pelarut! /iltrasi sederhana dapat digunakan untuk memisahkan senyaa yang diinginkan terse"ut dari Dat yang tidak larut $usman! 2013:17-1*<% d% $aserasi $aserasi merupakan metode ekstraksi sederhana tetapi masih "anyak digunakan! prosedurnya meli"atkan perendaman "u"uk tanaman di dalam pelarut yang sesuai dalam adah tertutup pada suhu ruangan Sarker! et al.! 2006:32<% ,euntungan ekstraksi dengan ara maserasi adalah pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana! sedangkan kerugiannya yaitu ara pengerjaannya yang lama! mem"utuhkan pelarut yang "anyak dan penyaringan kurang sempurna% &alam maserasi untuk ekstrak airan
$etoda ini juga merupakan modi/ikasi metoda maserasi dimana sedikit panas di"erikan selama proses ekstraksi $usman! 2013:1*<% h% Perkolasi $etoda ini mem"utukan adah yang "agian samping "aahnya ada keran "uka tutup adah ini dise"ut perkulator<% Simplisia di"ungkus dengan kertas saring! s aring! dan ikat longgar "ungkusan terse"ut% Sisakan "enang untuk menggantung "ungkusan nantinya% ungkusan simplisia di"asahi dengan pelarut seukupnya! dan ditempatkan dalam dalam adah adah perkul perkulato ator% r% Setela Setelah h "atas "atas aktu aktu terapa terapai! i! /iltrat /iltrat dikelu dikeluark arkan an dari dari perkulator dengan perlahan-lahan melalui keran "uka tutup hingga tersisa sepertiga olume se"elumnya% Pelarut ditam"ahkan lagi ke dalam perkulator hingga "e"erapa sentim sentimeter eter di atas permuk permukaan aan "ungku "ungkusan san simplis simplisia! ia! dan "iarka "iarkan n selama selama 2+ jam% jam% Perlakuan seperti ini diulangi hingga tiga kali% 4iltrat yang diperoleh dari setiap kali perkulasi diga"ung! dan dieaporasi dieaporasi dengan pengaa putar $usman! 2013:1*-1(<% 2013:1*-1(<% i% Sonikasi $etoda ini menggunakan perangkat ultrasonik dengan /rekuensi mulai dari 20 kD sampai 2000 kD% Pada /rekuensi terse"ut! kemampuan menem"us dinding sel oleh pelarut meningkat dan menghasilkan lu"ang sehingga isi sel keluar% $etoda ini dilaporkan mem"erikan mem"erikan e/ek merusak dari energi ultrasound le"ih dari 20 kD< pada konstituen akti/
simplisia
melalui
pem"entukan radikal
"e"as yang
mengaki"atkan peru"ahan dalam molekul dimaksud $usman! 2013:1(<%
2.6
Escherichia coli
Escherichia coli adalah coli adalah anggota /lora normal usus! "erperan penting dalam sintesi sintesiss itamin itamin ,! koner konersi si pigmen pigmen-pig -pigmen men empedu empedu!! asam-asa asam-asam m empedu empedu dan penyerapan Dat-Dat makanan% E. coli coli termasuk ke dalam "akteri heterotro/ yang memperoleh makanan "erupa Dat organik dalam makanan menjadi Dat anorganik! yaitu I82! 28! energi! dan mineral% &i dalam lingkungan! "akteri pem"usuk ini "er/ungsi se"agai pengurai dan penyedia nutrisi "agi tum"uhan% E. coli coli menjadi patogen jika jumlah "akteri ini dalam saluran penernaan meningkat atau "erada di luar luar usu usus% E.coli menghasilka menghasilkan n enterotoksi enterotoksin n yang menye"a"kan menye"a"kan "e"erapa "e"erapa kasus diare% E.coli diare% E.coli "erasosiasi "erasosiasi dengan enteropatogenik menghasilkan enterotoksin pada sel epitel% E.coli epitel% E.coli memiliki memiliki sejumlah toksin dengan serotipe tertentu% Serotipe-serotipe ini memili memiliki ki "e"era "e"erapa pa adapta adaptasi si terspesi terspesialis alisasi asi dan menim" menim"ulk ulkan an penya penyakit kit melalu melaluii mekanisme yang "er"eda au/i= au/i= dkk%! dkk%! 201):6)6<% 2.6.1 T/+$+"!
,ingdom
: Prokaryota
&iisio
: Brailiutes
Ilass
: Soto"ateria
8rdo
: 9u"ateriales
4amili
: 9ntero"ateriaeae
Benus
: Escherichia : Escherichia
Speies
: Escherichia : Escherichia coli uliantina dkk%! dalam &ei ! 2010:1)<%
2.6.2 M+8++%!
Bam"ar 2%3 $or/ologi $or/ologi E. E. coli Aryal! 2016< $or/ologi sel "akteri E. "akteri E. coli adalah coli adalah "er"entuk "atang! gram negati/! te"al 0!) Km! Km! panj panjan ang g antar antaraa 1!01!0-3! 3!0 0 Km! Km! tida tidak k memili memiliki ki spor spora! a! memi memilik likii pili! pili! "ersi "ersi/a /att anaero"ik anaero"ik /akultati/! /akultati/! dan mempunyai mempunyai /lagella peritrik Ray dkk%! dala dalam m Anindya! 2012:13<% ,oloni ,oloni terlihat "asah! mengkilat mengkilat!! tidak "ening! "ulat "ulat dan tepi terlihat terlihat halus dan rata% ,oloni ,oloni muda terlihat granuler halus dan makin tua menjadi granuler kasar Anindya! 2012:1+<% 2.6.6 P#*&"&$
a"itat a"itat utama E.coli adalah E.coli adalah dalam saluran penernaan manusia tepatnya di saluran gastrointestinal dan juga pada hean "erdarah hangat% akteri ini umumnya hidup pada rentang 20-+0 0I! optimum pada 37 0I% otal otal "akteri ini sekitar 0!1? dari total "akteri dalam saluran usus deasa% Ray dkk%! dalam Anindya! 2012:1+<% E. coli tum"uh dengan dengan mudah pada medium nutrien sederhana Rostinaati! 200(:+<% E. 200(:+<% E. coli dapat coli dapat mem/ermentasikan laktosa dengan menghasilkan asam dan gas Pel PelDa Darr dan dan Ihan Ihan!! 200) 200) dalam Raynaldi! Raynaldi! 2013:1<% 2013:1<% ,eepatan ,eepatan "erkem"ang "erkem"ang"iak "iak "akteri ini adalah pada interal 20 menit jika /aktor media! derajat keasaman dan suhu tetap sesuai% Selain terse"ar di "anyak tempat dan kondisi! "akteri ini tahan
terhadap suhu! "ahkan pada suhu ekstrim sekalipun% 8leh karena itu! "akteri terse"ut dapat hidup pada tu"uh manusia dan erte"rata lainnya Raynaldi! 2013:1<%
2.7
M#*+-# /!$!$% $*!"!+
$etode skrining yang sering digunakan untuk mendeteksi aktiitas antimikro"a produk alam di"agi menjadi 3 kelompok yaitu metode di/usi! dilusi dan "ioautogra/i% $etode di/usi dan "ioautogra/i merupakan teknik seara kualitati/ karena metode ini hanya akan menunjukkan ada atau tidaknya senyaa dengan aktiitas antimikro"a% $etode dilusi digunakan untuk kuantitati/ yang akan menentukan ,onsentrasi am"at $inimum ,$< Ihoma! 2010:1<% 2.7.1 M#*+-# D!8&/!
$etode di/usi di"agi lagi menjadi tiga! yaitu di/usi akram! di/usi silinder dan hole late% &alam prosedur akram! kertas akram "erdiameter L6 mm< yang mengandung senyaa uji ditempatkan pada permukaan agar yang se"elumnya diinokulasi dengan mikroorganisme uji% Senyaa uji "erdi/usi ke medium agar menye"a"kan pengham"atan pertum"uhan mikroorganisme kertas akram tidak "oleh ditenggelamkan di dalam media agar! melainkan hanya diletakkan pada permukaan media agar<% @ona ham"at tampak se"agai area jernih yang mengelilingi akram% &iameter Dona ham"at diukur dengan menggunakan jangka sorong atau penggaris Ihoma! 2010:1-2<% 2.7.2 M#*+-# -!&/!
,euntungan utama dari metode dilusi dapat memperkirakan konsentrasi senyaa uji dalam medium agar atau suspensi &roth! "iasanya digunakan untuk
penentuan nilai ,onsentrasi am"at $inimum ,$<% Pada metode dilusi agar! medium diinokulasi dengan organisme uji dan sampel yang diuji diampur dengan inokulum% $aterial yang dinokulasi dan pertum"uhan mikroorganisme dapat terlihat dan di"andingkan dengan kultur kontrol yang tidak mengandung sampel uji% Pengujian diulang dengan ariasi dilusi sampel uji dalam medium kultur dan menentukan
dilusi
yang
paling
penting
dapat
menegah
pertum"uham
mikroorganisme sampel% &alam ta"ung uji! "er"agai konsentrasi senyaa uji diampur dengan suspensi "akteri pada "e"erapa ta"ung! konsentrasi terendah menye"a"kan pengham"atan pertum"uhan mikroorganisme sesuai dengan nilai ,$ Ihoma! 2010:2<% 2.7.6 M#*+-# !+&*+%8!
Prosedur dalam metode "ioautogra/i mirip dengan yang digunakan dalam metode di/usi agar% Per"edaannya adalah "aha senyaa uji "erdi/usi dari kertas kromatogra/i ke media agar yang diinokulasi% $etode "ioautogra/i di"agi-"agi lagi menjadi "ioautogra/i kontak! imersi dan langsung Ihoma! 2010:2<%
BAB III METODE PENELITIAN
6.1
J#$!/ -$ R$4$%$ P#$-#*$ -$ J#$!/ P#$#!*!$
Pendekatan yang digunakan dalam penelitian ini adalah pendekatan kuantitati/% enis penelitian ini adalah eksperimental%
6.2
R$4$%$ P#$#!*!$
Ranangan dalam penelitian ini menggunakan Ranangan Aak ;engkap RA;< yang di"agi dalam 7 kelompok perlakuan! yaitu ) kelompok perlakuan ekstrak etanol "uah kaista terhadap "akteri Escherichia coli dan 2 kelompok kontrol% Adapun ketentuan jumlah ulangan dengan menggunakan Ranangan Aak ;engkap menurut ana/iah 200):(<: t-1<r-1< M 1) 7-1<r-1< M 1) 7r-1< M 1) 7r M 22 r M 3!1 r 3 ,eterangan: t jumlah perlakuan! r jumlah ulangan
Perlakukan P0 merupakan etanol se"agai kontrol negati/% Perlakuan P1 adalah ekstrak etanol "uah kaista 100%000 ppm% Perlakuan P2 adalah ekstrak etanol "uah kaista 200%000 ppm% Perlakuan P3 adalah ekstrak etanol "uah kaista 300%000 ppm% Perlakuan P+ adalah ekstrak etanol "uah kaista +00%000 ppm% Perlakuan P) adalah ekstrak etanol "uah kaista )00%000 ppm% Perlakuan P6 meruapakan steptomisin se"agai kontrol positi/% Pengulangan pada setiap perlakuan adalah 3 kali% Ranangan penelitian ditentukan "erdasarkan hasil perhitungan jumlah ulangan a"el 3%1<% a"el 3%1 Ranangan Penelitian No % 1% 2% 3% +% )% 6% 7%
Perlakuan P0 P1 P2 P3 P+ P) P6
# P 0# P 1# P 2# P 3# P +# P )# P 6#
,eterangan: P0: ,ontrol negati/ a=uades< P1 : 9kstrak etanol "uah kaista muda 100%000 ppm P2 : 9kstrak etanol "uah kaista muda 200%000 ppm P3 : 9kstrak etanol "uah kaista muda 300%000 ppm P+ : 9kstrak etanol "uah kaista muda +00%000 ppm P) : 9kstrak etanol "uah kaista muda )00%000 ppm P6 : ,ontrol positi/ streptomisin 10 Kg<
6.6
T#"3* -$ W*& 3#$#!*!$
5langan ## P0## P1## P2## P3## P+## P)## P6##
### P0### P1### P2### P3### P+### P)### P6###
Penelitian ini dilakukan di ;a"oratorium $ikro"iologi 4, 5nsyiah dan ;a"oratorium ayati $#PA ,imia 5nsyiah &arussalam! anda Aeh pada tanggal 10-2( uni 2016%
6.7
A* -$ B$
6.7.1 A* Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah erlenmeyer "yre'
reaksi "yre'
*oshi&a
rotary
evaorator
)uchi
spektro/otometer
*hermo%cientific
ahan yang digunakan adalah ekstrak "uah kaista muda yang diperoleh dari daerah ,a"upaten Aeh esar! #solat "akteri E.coli diperoleh dari la"oratorium $ikro"iologi 4akultas ,edokteran ean 5nsyiah% ahan-"ahan lainnya adalah kertas akram diameter 6 mm 8Joid
6.9
P+/#-& P#$#!*!$
6.9.1 P#"&*$ #/* & !/* "#$%%&$$ 3#&* #*$+ =>
Proses ekstraksi pada "uah kaista menggunakan pelarut etanol (6?% Pelarut etanol (6? merupakan pelarut pengekstraksi yang terpilih untuk pem"uatan ekstrak se"agai "ahan "aku sediaan o"at her"al Ari/ianti! 201+:1<% Pem"uatan ekstrak etanol (6? "uah kaista dilakukan seara maserasi hakur et al %! 2010 dalam &ei 2013:(<% Pemilihan metode ini karena murah! sederhana! tidak memerlukan peralatan yang rumit! dan penarikan senyaa kimia akan le"ih sta"il di"andingkan dengan metode estraksi panas% Se"anyak )00 g ser"uk simplisia "uah kaista ditim"ang kemudian dimaserasi dengan 2)00 m; etanol (6? pada suhu kamar selama + hari! lalu disaring% 9kstrak yang didapat selanjutnya disaring menggunakan kertas saring! kemudian pelarut dihilangkan menggunakan rotary evaorator pada suhu 70 0I hingga diperoleh ekstrak kental dan digunakan untuk uji pengham"atan pertum"uhan "akteri E.coli dan uji /itokimia Aliana! 2016:+< ,onsentrasi ekstrak "uah kaista muda yang digunakan pada penelitian ini yaitu 100%000 ppm ! 200%000 ppm ! 300%000 ppm ! +00%000 ppm ! dan )00%000 ppm% ,ontrol positi/ yang digunakan yaitu streptomisin dan a=uades se"agai kontrol negati/% 6.9.2 U'! F!*+!"! ? U'! A+!-
Sampel se"anyak 1 m; ditam"ahkan ammonia 10? se"anyak 10 m;! selanjutnya ditam"ahkan kloro/orm seukupnya sehingga ter"entuk dua lapisan% ;apisan kloro/orm atas< dipisahkan! kemudian ditam"ahkan I; 2N% Sampel
dipisahkan menjadi 3 "agian untuk ditam"ahkan masing-masing 2 tetes pereaksi ager! pereaksi &ragendro/! pereaksi 'agner! dan pereaksi $ayer% Apa"ila sampel mengandung alkaloid! dengan pereaksi ager menghasilkan peru"ahan arna! pereaksi
&ragendro/ menghasilkan larutan
oklat jingga!
pereaksi
'agner
menghasilkan endapan oklat! dan pereaksi $ayer menghasilkan arna kuning iari et al.! 2011:103<% ? U'! T!*#3#$+!- -$ S*#+!-
Sampel se"anyak 1 m; ditam"ahkan 2 tetes ;ie"erman-urhard% er"entuk inin keoklatan atau iolet pada per"atasan larutan menunjukkan adanya triterpenoid! sedangkan "ila munul inin "iru
kehijauan menunjukkan adanya
steroid ones and ,inghorn! 2006H 9ans! 200(! dalam &ei dkk! 2013:2<% ? U'! T$!$
Sampel dipanaskan selama ) menit! kemudian diam"il "agiannya se"anyak 1 m;! selanjutnya ditam"ahkan gelatin 10?% Apa"ila sampel mengandung tanin! larutan
akan "eru"ah menjadi putih keruh $usman! 2013:23<% ? U'! F@+$+!-
Sampel dipanaskan selama 5 menit dalam tabung reaksi. Selanjutnya
ditambahkan
3
tetes
HCL
pekat.
Kemudian
ditambahkan 0,2 g bubuk g. Hasil p!siti" ditunjukkan dengan timbulnya #arna !ranye$merah tua selama 3 menit iari et al.! 2011:10+<% ? U'! S3+$!$
Sampel dipanaskan selama ) menit ! kemudian diam"il "agiannya se"anyak 0!) m;! selanjutnya ditam"ahkan a=uades 2 m;! kemudian dikook seara ertikal akan menghasilkan gelem"ung% ika gelem"ung."usa tetap "ertahan hingga 10 menit! maka sampel terse"ut menunjukkan adanya saponin $usman! 2013:23<%
6.7.6 S*#!!//! A* -$ B$
Alat-alat yang digunakan terle"ih dahulu diui "ersih dan dikeringkan% Alatalat yang ter"uat dari gelas ta"ung reaksi! aan petri! kapas lidi< disterilkan di dalam oen selama 2 jam pada suhu 160 0I! sedangkan "ahan air seperti media agar! a=uadest! NaIl 0!(?! dan ekstrak sampel disterilisasi di dalam autokla/ dengan suhu 1210I selama 1) menit% arum ose disterilkan dengan ara pemijaran langsung di atas nyala api Rahmah dkk%! 2010:30<% 6.9.7 P#"&*$ /&/3#$/! *#!
#solat "akteri E.coli diremajakan pada media NA miring selama 1J2+ jam pada suhu 370I% Selanjutnya diam"il 1 ose dan disuspensikan ke dalam ta"ung reaksi yang "erisi NaIl 0!(? se"anyak 10 m;% ,emudian dihitung a"sor"ansi menggunakan spektro/otometer dengan panjang gelom"ang 62) nm hingga diperoleh a"sor"ansi 0!0*-0!10% Nilai a"sor"ansi terse"ut setara dengan standar kekeruhan $ 4arland 0!) pada konsentrasi "akteri 10 * I45.m; colony forming unit <% Selanjutnya dipipet larutan terse"ut se"anyak 0!1 m; lalu dimasukkan ke dalam la"u ukur 10 m; dan ditam"ahkan NaIl 0!(? sampai garis tanda! sehingga diperoleh konsentrasi "akteri 106 I45.m; $eilisa! 200( dalam Nurina! 201+:21<%
6.9.9 U'! A$*!*#!
Suspensi "akteri yang telah sama dengan standar kekeruhan dengan $ 4arland 0!) diinokulasi pada medium $A (ueller Hinton Agar < menggunakan metode aan gores% ,ertas akram masing-masing direndam ke dalam aan Petri yang "erisi ekstrak "uah kaista muda! streptomisin! dan a=uades sehingga mem"asahi seluruh kertas akram% ,ertas akram yang telah direndam diletakkan di atas permukaan medium $A yang telah diinokulasi "akteri E. coli dan diinku"asi selama 1J2+ jam pada suhu 37 0I% ,emudian diamati Dona "ening yang ter"entuk untuk mengetahui daya ham"at dari ekstrak "uah kaista! dan diukur rata-rata diameter Dona ham"at menggunakan jangka sorong 'idiana! 2011 dalam Nurina! 201+:21<%
6.
P"#*# P#$#!*!$
Parameter yang diukur dalam penelitian ini adalah diameter Dona ham"at mm< yang ter"entuk di sekeliling kertas akram dan kandungan /itokimia "uah kaista dari daerah ,a"upaten Aeh esar! yang meliputi alkaloid! /laonoid! saponin! tanin! steroid dan triterpenoid%
6.:
A$!/!/ D*
&ata yang telah diperoleh dianalisis menggunakan Ranangan Aak ;engkap dengan persamaan se"agai "erikut: Eij K O i O Qij ,eterangan:
ana/iah! 200):33<
Eij Nilai pengamatan pada perlakuan ke-# kelompok ke-j
K Nilai tengah umum i Pengaruh perlakuan ke i Qij
Balat pero"aan pada perlakuan ke-# kelompok ke-j
i
1!2!3!+!)%%%%%p "anyaknya perlakuan<
j
1!2!3!+!)%%%%%r "anyaknya kelompok.ulangan<
&ata luas Dona ham"at ekstrak "uah kaista muda terhadap "akteri E.coli dianalisis dengan ANA>A Analisis o/ ariane< satu arah% ika nilai 4 hitung M 4 ta"el maka antar perlakuan terdapat per"edaan yang nyata dan hipotesis a< diterima% Se"aliknya jika nilai 4 hitung 4 ta"el maka antar perlakuan tidak terdapat per"edaan yang nyata dan hipotesis alternati/ a< ditolak% ika diantara perlakuan terdapat per"edaan yang nyata! maka dilanjutkan uji lanjutan dengan ketentuan: 1% ika ,, "esar minimal 10? maka kondisi homogen atau minimal 20? pada kondisi heterogen
,, ,oe/isien ,eragaman ,B ,uadrat engah Balat Ῡ
Rata-rata seluruh pero"aan ana/iah! 200):+1<
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
7.1
H/! E/*/! -$ A$!/!/ F!*+!"! B& K!/* M&- $etode ekstraksi yang digunakan pada penelitian ini adalah maserasi dengan
menggunakan etanol (6? se"agai larutan pengekstraksi% asil ekstraksi )00 g ser"uk "uah kaista kering dengan menggunakan 2!) ; pelarut menghasilkan ekstrak kental se"esar 37!12 g% 9kstrak etanol "uah kaista "erarna oklat muda setelah menjadi /iltrat! kemudian "eru"ah menjadi oklat tua setelah diuapkan pelarut% 9kstrak kental "uah kaista siap digunakan untuk skrining /itokimia dan uji anti"akteri% Skrining /itokimia dilakukan untuk mengetahui golongan senyaa yang terkandung dalam ekstrak etanol daging "uah kaista% ,andungan /itokimia yang terkandung di dalam ekstrak "uah kaista adalah alkaloid! saponin! tanin! triterpenoid! dan poli/enol% 5ji kuinon! /laonoid! dan steroid tidak ditunjukkan terkandung di dalam ekstrak "uah kaista a"el +%1<% a"el +%1 asil 5ji 4itokimia 9kstrak 9tanol uah ,aista No asi Senyaa ,imia ,eterangan % l Alkaloid a% &ragenddro/ O er"entuk arna oklat jingga 1% "% urhard O er"entuk arna oklat % $ayer O er"entuk larutan putih keruh 2% anin O er"entuk larutan putih keruh 3% Saponin O er"entuk gelem"ung tetap +% riterpenoid O er"entuk larutan "erarna merah keoklatan )% Poli/enol O er"entuk larutan "erarna "iru kehitaman 6% 4laonoid idak ter"entuk larutan "erarna merah 7% ,uinon idak ter"entuk larutan "erarna merah *% Steroid idak ter"entuk larutan "erarna merah atau "iru ,eterangan: O<: menunjukkan reaksi positi/! -< menunjukkan reaksi negati/ 7.2
H/! U'! A*!@!*/ A$*!*#! E/* E*$+ B& K!/* ( Limonia acidissima L.) T#-3 Eschericia coli
asil uji anti"akteri ekstrak etanol "uah kaista Limonia acidissima< terhadap Escherichia coli menunjukkan adanya daya ham"at terhadap pertum"uhan "akteri uji% al ini di"uktikan dengan ter"entuknya Dona "ening disekitar kertas akram yang mengandung ekstrak "uah kaista! Dona "ening terse"ut menunjukkan Dona ham"at pertum"uhan "akteri Bam"ar +%1<%
Bam"ar +%1 4oto asil 5ji daya am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< erhadap Eschericia coli @ona ham"at yang ter"entuk pada 5langan #! 5langan ##! dan 5langan ### dengan konsentrasi ekstrak masing-masing 100%000 ppm! 200%000 ppm! 300%000 ppm! +00%000 ppm! dan )00%000 ppm! rata-rata "erdiameter 7!)0* mm! *!*17 mm! 11!6(2 mm! 1+!3)* mm! 16!1+1 mm% @ona ham"at yang ter"entuk pada kontrol positi/ yang "erupa streptomisin 10Kg rata-rata "erdiameter *!(7) mm! sedangkan kertas akram yang mengandung a=uades steril se"agai kontrol negati/ tidak menunjukkan adanya Dona ham"at%
a"el +%2 asil Pengukuran &iameter @ona am"at 9kstrak uah ,aista Limonia acidissima< terhadap "akteri Eschericia coli 5langan
,onsentrasi 9kstrak
otal
Rata-rata mm<
1
2
3
,ontrol Negati/
0
0
0
0
0
100%000 ppm
*!12)
7!2)0
7!1)0
22!)2)
7!)0*
200%000 ppm
(!(2)
*!200
*!32)
26!+)0
*!*17
300%000 ppm
12!17)
11!12)
11!77)
3)!07)
11!6(2
+00%000 ppm
1)!+7)
1+!2)0
13!3)0
+3!07)
1+!3)*
)00%000 ppm
1)!(2)
16!37)
16!12)
+*!+2)
16!1+1
,ontrol Positi/
(!17)
(!)00
*!2)0
26!(2)
*!(7)
202!+7)
67!+(1
otal
Setiap konsentrasi mem"erikan diamater Dona ham"at yang "er"eda! hal ini mengindikasikan "aha setiap konsentrasi mem"erikan respon daya ham"at yang "er"eda terhadap pertum"uhan "akteri% Pada a"el +%2 terlihat! kertas akram yang mengandung a=uades steril se"agai kontrol negati/ tidak menunjukkan adanya daya ham"at terhadap pertum"uhan "akteri E.coli! ter"ukti dari diameter Dona "ening 0 mm! sedangkan rata-rata diameter Dona ham"at "akteri dengan menggunakan ekstrak "uah kaista "erkisar antara 7!)0*-16!1+1 mm% &iameter Dona ham"at terkeil diperoleh pada konsentrasi ekstrak "uah kaista 100%000 ppm dan yang ter"esar )00%000 ppm Bam"ar +%2<%
D!,"#*#A+$, H,".,*("")
P#0,&,$
,N: ,ontrol Negati/! ,P : ,ontrol Positi/
Bam"ar +%2 Rata-rata &iameter @ona am"at 9kstrak uah ,aista Limonia acidissima< terhadap Eschericia coli
7.6
H/! A$!/!/ D*
&ata yang diperoleh dari hasil penelitian ini tidak dapat langsung digunakan dalam analisis arian dikarenakan data tidak terdistri"usi seara normal% Salah satu penye"a"nya adalah data mengandung angka nol pada kontrol negati/! sehingga data pada a"el +%2 harus ditran/ormasi dengan menggunakan trans/ormasi akar kuadrat
√ x + 0,5 ana/iah! 200):211<% &ata hasil trans/ormasi terse"ut dapat dilihat pada a"el +%3 "erikut%
a"el +%3 asil rans/ormasi &ata Pengukuran &iameter @ona am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima< terhadap Eschericia coli 5langan
,onsentrasi 9kstrak
otal
Rata-rata mm<
1
2
3
,ontrol Negati/
0!707
0!707
0!707
2!121
0!707
100%000 ppm
2!(37
2!7*+
2!766
*!+*7
2!*2(
200%000 ppm
3!22(
2!()0
2!(71
(!1)0
3!0)0
300%000 ppm
3!)60
3!+0(
3!)0+
10!+73
3!+(1
+00%000 ppm
3!((7
3!*+1
3!722
11!)6
3!*)3
)00%000 ppm
+!0)3
+!10*
+!077
12!23*
+!07(
,ontrol Positi/
3!110
3!162
2!()*
(!23
3!076
63!2)(
21!0*)
otal
asil analisis data menggunakan Anoa analyses of variance< untuk diameter Dona ham"at ekstrak "uah kaista Limonia acidissima ;%< terhadap E. coli diperoleh "aha nilai 4 hitung 4 ta"el pada tara/ keperayaan 0!0)? 317!) 2!*)< a"el +%+% a"el +%+ Analisis >arian @ona am"at 9kstrak 9tanol uah kaista Limonia acidissima ;%< terhadap E. coli S,
&
,
,
4hitung
4ta"el 0!0)<
Perlakuan
6
22!2*7
3!71)
371!)T
2!*)
Balat
1+
0!136
0!010
otal 20 22!+23 ,eterangan: Ter"eda nyata erdasarkan a"el +%+ dapat dilihat "aha 4 hitung 4 ta"el pada tara/ uji )? % al ini menunjukkan "aha hipotesis alternati/
a< yang menyatakan
Uer"agai konsentrasi ekstrak "uah kaista Limonia acidissima ;%<
dapat
"erpengaruh terhadap pertum"uhan "akteri E.coliV dapat diterima% erdasarkan nilai koe/isien keragaman ,,< yang diperoleh se"esar 3!1)? yaitu
pada tara/ uji )? untuk menganalisa per"edaan antar tiap perlakuan!
dilanjutkan dengan uji N eda Nyata ujur<% a"el +%) asil 5ji eda Nyata ujur N< @ona am"at 9kstrak 9tanol uah kaista Limonia acidissima ;%< terhadap E. coli Perlakuan
Rata-Rata mm<
Nilai N0!0)< 0!266
P0
0!707
a
P1
2!*2(
"
P2
3!0)0
"
P6
3!076
"
P3
3!+(1
P+
3!*)3
d
P) +!07( d ,eterangan: Angka-angka yang diikuti oleh huru/ yang sama pada kolom yang sama tidak "er"eda nyata pada tara/ uji )?
erdasarkan hasil uji diketahui "aha daya ham"at pertum"uhan Eschericia coli yang paling "esar yaitu pada perlakuan P) "er"eda nyata dengan P0 kontrol negati/
7.7
P#"/$
Pada penelitian ini ekstraksi daging "uah kaista muda Limonia acidissima< dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol (6?% Prinsip maserasi adalah pelarut yang digunakan dalam proses maserasi akan masuk ke dalam sel tanaman meleati dinding sel! isi sel akan larut karena adanya per"edaan konsentrasi antara larutan di dalam dengan di luar sel melalui proses di/usi hingga terjadi keseim"angan antara larutan di dalam sel dan larutan di luar sel Ansel 1(*( dalam Sarasati! 201):37<% Pemilihan etanol se"agai pelarut karena etanol (6?< sangat e/ekti/ dalam menghasilkan jumlah "ahan akti/ yang optimal >oight! 1((+ dalam Sarasati! 201):37<% Pelarut etanol memiliki si/at yang dapat melarutkan seluruh "ahan akti/
yang terkandung dalam "ahan alami! "aik "ahan akti/ yang "ersi/at polar! semipolar maupun nonpolar% Selain itu! etanol ditemukan le"ih mudah untuk menem"us mem"ran sel untuk mengekstrak "ahan intraseluler dari "ahan tanaman iari! 2011:100< . 9tanol atau ampuran etanol dengan air digunakan se"agai pelarut karena kemampuan ekstraksi yang tinggi untuk hampir semua senyaa "ahan alam yang memiliki "erat molekul rendah! seperti alkaloid! saponin! dan /laonoid Samuelsson! 1((( dalam Andriani! 2011:2<% Skrining /itokimia adalah pemeriksaan kandungan kimia pada tum"uhan seara kualitati/% erdasarkan hasil uji /itokimia ekstrak etanol "uah kaista menunjukkan adanya kandungan senyaa meta"olit sekunder seperti alkaloid! tanin! saponin! poli/enol dan triterpenoid% al ini didukung oleh hasil uji /itokimia yang dilakukan ayashree 201+:732
triterpen!id. e"erapa senyaa meta"olit sekunder seperti glikosida /enol
sel "akteri dan &NA "akteri% Reaksi ini mengaki"atkan terjadinya peru"ahan struktur dan susunan asam amino! sehingga akan menim"ulkan peru"ahan keseim"angan genetik pada rantai &NA mengaki"atkan kerusakan dan mendorong terjadinya lisis sel "akteri yang akan menye"a"kan kematian sel pada "akteri anaka d!! %! 2006:2<% anin memiliki aktiitas anti"akteri% $ekanisme kerja senyaa tanin dalam mengham"at sel "akteri! yaitu dengan ara mendenaturasi protein sel "akteri! mengham"at /ungsi selaput sel transpor Dat dari sel satu ke sel yang lain< dan mengham"at sintesis asam nukleat sehingga pertum"uhan "akteri dapat terham"at RoDliDaaty! 2013:(3<% $ekanisme
kerja
saponin
se"agai
anti"akteri
adalah
dengan
ara
menye"a"kan ke"ooran protein dan enDim di dalam sel% Saponin dapat "erdi/usi melalui mem"ran luar dan dinding sel yang rentan kemudian mengikat mem"ran sitoplasma sehingga mengganggu dan mengurangi kesta"ilan mem"ran sel% al ini menye"a"kan sitoplasma "oor keluar dari sel yang mengaki"atkan kematian sel% Agen antimikro"a yang mengganggu mem"ran sitoplasma "ersi/at "akterisida Iaalieri! 200) dalam au/i=! 201):6)(<% $ekanisme kerja /enol se"agai anti"akteri yaitu dengan mendenaturasi protein sel% #katan hidrogen yang ter"entuk antara /enol dan protein mengaki"atkan struktur protein menjadi rusak% #katan hidrogen terse"ut akan mempengaruhi permea"ilitas dinding sel dan mem"ran sitoplasma se"a" keduanya tersusun atas protein% Permea"ilitas dinding sel dan mem"ran sitoplasma yang terganggu dapat menye"a"kan ketidakseim"angan makromolekul dan ion dalam sel sehingga sel menjadi lisis PelDar! 2010 dalam au/i=! 201):6)(<%
$ekanisme triterpenoid se"agai anti"akteri adalah "ereaksi dengan porin protein transmem"ran< pada mem"ran luar dinding sel "akteri! mem"entuk ikatan polimer yang kuat sehingga mengaki"atkan rusaknya porin% Rusaknya porin yang merupakan pintukeluar masuknya senyaa akan mengurangi permea"ilitas dinding sel "akteri yang akanmengaki"atkan sel "akteri akan kekurangan nutrisi sehingga pertum"uhan "akteri terham"at atau mati Ioan! 1((( dalam udi/aka! 201+:)0)1<% erdasarkan kandungan senyaa akti/ di dalam "uah kaista dan hasil uji anti"akteri maka diketahui "aha ekstrak etanol "uah kaista mampu mengham"at pertum"uhan "akteri E.coli% Pada hasil pengamatan memperlihatkan! Dona ham"at yang ter"entuk di sekeliling kertas akram seiring dengan semakin tinggi konsentrasi ekstrak% @ona ham"at tertinggi ditunjukkan pada konsentrasi )00%000 ppm yang "erdiameter 16!1+1 mm% al ini sesuai dengan pernyataan PeleDar dan Ihan 1(*6< dalam RoDliDaaty 2013:(3
keil di"andingkan Dona ham"at yang ter"entuk pada konsentrasi ekstrak )00%000 ppm% $enurut &ata I;S# linical and La&oratory %tandards -nstitute
konsentrasi ekstrak )00%000 ppm mampu mengham"at pertum"uhan E.coli dengan kategori kuat! yaitu "erdiameter 16!1+1 mm% $enurut $orales et al., 2003:3(< aktiitas anti"akteri oleh "ahan akti/ dikelompokkan menjadi + kategori! yaitu aktiitas lemah ) mm
BAB V PENUTUP
)%1
,esimpulan ,esimpulan dari penelitian ini adalah se"agai "erikut: 1% 9kstrak "uah kaista Limonia acidissima ;%< memiliki aktiitas anti"akteri terhadap pertum"uhan "akteri E.coli. 2% Semakin tinggi konsentrasi ekstrak "uah kaista! maka semakin "esar aktiitas anti"akteri terhadap pertum"uhan "akteri E.coli. 3% 9kstrak "uah kaista pada konsentrasi )00%000 ppm memiliki Dona ham"at yang le"ih "esar di"andingkan kontrol positi/ streptomisin 10Kg.disk<%
)%2
Saran
1% Perlunya pengujian le"ih lanjut mengenai pelarut yang ook untuk maserasi atau metode lainnya agar senyaa akti/ yang terkandung dalam "uah kaista dapat terisolasi seara maksimal sehingga e/ektiitas anti"akterinya dapat maksimal pula 2% Perlunya pengujian "agian tanaman kaista yang lain se"agai anti"akteri%
DAFTAR PUSTAKA
A"sar! Cureshi% 2010% #eronia limonia A Path ;ess raelled% -nternational ournal of Research in Ayurveda / "harmacy% 11<:(*-106% Adil! 'idiati % 2010% Prospek Per"anyakan uah ,aista seara -n Vitro. Warta "enelitian dan "engem&angan "ertanian. 32)<:*-(% Aliana! Nerissa% 2016% 5ji 9/ektiitas Anti"akteri 9kstrak 9tanol &aun ,risan hrysanthemum morifolium< erhadap %tahylococcus aureus dan Escherichia coli. %!risi. Eokyakarta: 5niersitas Atma aya% Andriani! Ary% 2011% Skrining 4itokimia dan 5ji Pengham"atan Aktiitas YBlukosidase Pada 9kstrak 9tanol &ari e"erapa tanaman yang &igunakan Se"agai 8"at &ia"etes% %!risi% &epok: 5niersitas #ndonesia% Anindya! &ahniar% 2012% 9/ek 9kstrak ,ulit $anggis 0arciana mangostana ;%< erhadap Pertum"uhan akteri %higella dysentriae dan Escherichia coli% %!risi% akarta: 5#N Syari/ idayatullah% Ari/ianti! ;usiana! Rie &isi 8ktarina! #dha ,usumaati% 201+% Pengaruh enis Pelarut Pengektraksi erhadap ,adar Sinensetin &alam 9kstrak &aun Orthosihon stamineus enth% E1ournal "lanta Husada% 21<:1-+%
Aryal!
Sagar% 2016% $orphology o/ E. coli% ersedia di: http:.."ateriologynotes%om.morphology-o/-e-oli! diakses pada tanggal 2 Agustus 2016<%
udi/aka! $uhammad e/riyanto% 201+% Pro/il 4itokimia Aktiitas Anti"akteri anaman 8"at &i Sulaesi enggara erhadap akteri %almonella tyhi EII% %!risi% ,endari! 5niersitas alu 8leo% Ihoma! #rena $! 9dyta $ BrDelak% 2010% ioautography &etetion in hin-layer Ihromatography% ournal of hromatograhy A Ihroma-3)170*% &aris! A%!2010! 4itokimia $enegah Penyakit &egenerati/% -ndonesian "harmacists Association% http:..%ikatanapotekerindonesia%net diakses 10 $aret 2016<% &ei! #%&%A%&%E% Astuti! ,%'%! 'arditiani! N%,% 2013 . Skrining 4itokimia 9kstrak 9tanol ()? ,ulit uah $anggis% urnal 2dayana% 2+<:1-7% &ei! Resina% 2013% ioaktiitas uah ,aista Limonia acidissima< ima &an Penentuan Sidik arinya $enggunakan ,romatogra/i ;apis ipis% %!risi% ogor: #nstitute Pertanian ogor% &ei! ,usuma 4ajar% 2010% Aktiitas Anti"akteri 9kstrak 9tanol uah $engkudu (orinda citrifolia! ;innaeus< erhadap akteri Pem"usuk &aging Segar% %!risi% Surakarta% 5niersitas Se"elas $aret% &jajadisastra! A%N% 2007% Penapisan ,omponen Anti"akteri dan 5ji oksisitas dari Spons Perairan aka onerate Sulaesi Selatan% %!risi% ogor% 5niersitas #nstitut Pertanian ogor% ana/iah! ,%A% 200)% Rancangan "erco&aan *eori dan Ali!asi% akarta: P Raja Bra/indo Persada% ayashree> ! Ramesh ;ondonkar% 201+% Iomparatie Phytohemial Studies And Antimiro"ial Potential 8/ 4ruit 9Jtrats 8/ #eronia limonia ;inn% -nternational ournal of "harmacy and "harmaceutic% 61<:731-73+% ,airupan! Ihristy Priskila! 4atimaali! 'idya A% ;olo% 201+% 5ji &aya am"at 9kstrak 9tanol &aun ,em"ang Sepatu Hi&iscus rosa1sinensis ;< erhadap Pertum"uhan akteri Escherichia coli. urnal -lmiah #armasi.32<: (3-(*% $enteri ,esehatan% 200*% #arma!oe Her&al -ndonesia% 9disi Pertama% ,eputusan $enteri ,esehatan Repu"lik #ndonesia Nomor 261.$9N,9S.S,.#>.200*% !rales,. ', (. Sierra, an)illa, *. (aredes, L.*., L!y!la, +. 'allard!, and . -!urue/. 2003. Se)!ndary metab!lits !" "!ur medi)inal plants
"r!m !thern Chiles, antimi)r!bial a)ti&ity, and bi!t!i)ity against Artemia salina. J. Chile Chem. 42635$1. ajibah, 7ia. 201. (!tensi *ntibakteri K!mbinasi Strept!misin dan *m!ksisilin dengan inyak *tsiri Kemangi 4Ocimum basilicum L. 8erhadap Salmonella thypi.Surakarta.Skripsi. 9ni&ersitas uhammadiyah Surakarta. ugr!h!, :r#ant! *dhi. 2012. Keragaman !r"!l!gi ;an *nat!mi Ka#ista 4Limonia acidissima L. ;i Kabupaten
61?$23. is#ah, Lukluatun. 201. 9ji *ntibakteri ;ari =kstrak -uah (arij!t! 4Mednilla speciosa -lume enggunakan et!de ;i"usi Cakram. Skripsi. akarta. 9: Syari" Hidayatullah. usman, usri. 2013. Kimia Bahan Alam Laut . Syiah Kuala 9ni&ersity (ress6 -anda *)eh.
8roh! Stery % 4e""y 9%4% ,andou! ohanis Pelealu! &ingse Pandiangan% 201)% 5ji &aya am"at 9kstrak $etanol %elaginella delicatula dan 3ilazium dilatatum erhadap akteri %tahylococcus aureus dan Escherichia coli. urnal -lmiah %ains%1)1<:)2-)*% (andey Shipra, '!uri Satpathy,
Rostinaati! ina% 200(% Aktiitas Anti"akteri 9kstrak 9tanol unga Rosella Hi&iscus sa&dariffa< erhadap Escherichia coli! %almonella tyhi dan %tahylococcus aureus &engan $etode &i/usi Agar% *esis% 5niersitas Padjadjaran% RosliDaaty! Nita Eulida Ramadani! 4akhrurraDi dan errial/ian% 2013% Aktiitas Anti"akterial 9kstrak 9tanol &an Re"usan Sarang Semut (yrmecodia %%< erhadap akteri Escherichia coli% urnal (edi!a Veterinaria% 72<:(1-(+ Sarasati! 4aradhila Nur% 201)% 5ji aktiitas Anti"akteri 9kstrak etanol (6? lim"ah kulit pisang kepok kuning (usa &al&isiana< terhadap "akteri penye"a" jeraat %tahylococcus eidermidis! %tahylococcus aureus! "roioni&acterium acne<. %!risi% akarta% 5#N Syari/ idayatullah% Sarker! S% &% @ahid ;ati/! AleJander #%Bray. 2006% +atural "roducts -solation% uman Press: Ne ersey% Sukumaran! selamony! hankappan Sarasa"ai Shynin rintha! Paulraj Su"itha! Eesuthangam Anlin Shee"ha! dan Solomon eea% 201+% 5sage o/ mediinal plants "y to ultural ommunities o/ ,anyakumari distrit! amilnadu! South #ndia Pharmaeutia Sienia% ournal of hemical "harmaceutical Research% 6*<:67-7(% anaka! %I%A%! I%I% da Sila! A%%% de 8lieira! I%>% Nakamura dan %P% &ias4ilho% 2006% Anti"aterial atiity o/ indole alkaloids /rom Asidoserma ramiflorum% )razilian 5ournal of (edical and )iological Research% 3(3<:3*7-3(1% au/i=! Sarah! umi Euniarni! Siti aDar% 201)% 5ji Aktiitas Anti"akteri 9kstrak 9tanol iji uah Pepaya arica aaya ;%< terhadap Eschericia coli dan Salmonella yphi% "rosiding "enelitian %esia 2nis&a% #SSN 2+60-6+72% iari! P% ,umar! #mlesh ,umar! $andeep ,aur! Burpreet ,aur% 2011% Phytohemial Sreening and 9Jtration: A Reie% -nternational "harmaceutica %ciencia% 11<: (*-106% >ijayargia! Pratima dan Rekha >ijayergia% 201+% A Reie on Limonia acidissima l%: $ultipotential $ediinal Plant% -nternational ournal of "harmaceutical %ciences. 2*1<:1(1-1()% 'ahyuni! A! Paskalina ariyantiasi Eamrea% 200+% 9kstraksi ,urkumin dari ,unyit% "rosiding %eminar +asional Re!ayasa 4imia% 1-7% #SSN:1+11 X +216% au/i=! Sarah! 5mi Euniarni! Siti aDar% 201)% 5ji Aktiitas Anti"akteri 9kstrak 9tanol iji uah Pepaya arica aaya ;%< erhadap Escherichia coli dan
%almonella tyhi% "rosiding "enelitian %esia 2nis&a% 6)+-661% #SSN 2+606+72%
L"3!$ 1. P#"&*$ K+$/#$*/! E/* E*$+ B& K!/* 1% ,onsentrasi )00%000 ppm 9kstrak etanol "uah kaista se"anyak 10 gram dienerkan dengan
menggunakan a=uades 20 m; dan didapatkan konsentrasi )00%000 ppm dengan perhitungan se"agai "erikut: mg 10.000 mg ppm L )00%000 ppm 0,02 L ;arutan ekstrak etanol "uah kaista )00%000 ppm kemudian dienerkan kem"ali dalam gelas uji menjadi +00%000 ppm! 300%000 ppm! 200%000 ppm! 100%000 ppm% >olume yang diinginkan untuk setiap gelas uji adalah + m; dengan menggunakan rumus pengeneran se"agai "erikut: ,eterangan: >1 >olume aal >2 >olume akhir I1 ,onsentrasi aal I2 ,onsentrasi akhir 2% ,onsentrasi +00%000 ppm >1%I1 >2% I2 >1 J )00%000 + J +00%000 >1% )00%000 1%600%000 >1 3!2 m; Penam"ahan a=uades >2 - >1 + - 3!2 0!* m; 5ntuk mem"uat + m; ekstrak "uah kaista dengan konsentrasi +00%000 ppm maka ditam"ahkan a=uades se"anyak 0!* m; ke dalam 3!2 m; konsentrasi ekstrak%
3% ,onsentrasi 300%000 ppm >1%I1 >2% I2 >1 J )00%000 + J 300%000 >1% )00%000 1%200%000 >1 2%+ m; Penam"ahan a=uades >2 - >1 + X 2%+ 1%6 m; 5ntuk mem"uat + m; ekstrak "uah kaista dengan konsentrasi 300%000 ppm maka ditam"ahkan a=uades se"anyak 1%6 m; ke dalam 2%+ m; konsentrasi ekstrak% +% ,onsentrasi 200%000 ppm >1%I1 >2% I2 >1 J )00%000 + J 200%000 >1% )00%000 *00%000 >1 1%6 m; Penam"ahan a=uades >2 - >1 + X 1%6 2%+ m; 5ntuk mem"uat + m; ekstrak "uah kaista dengan konsentrasi 200%000 ppm maka ditam"ahkan a=uades se"anyak 2%+ m; ke dalam 1%6 m; konsentrasi ekstrak% )% ,onsentrasi 100%000 ppm >1%I1 >2% I2 >1 J )00%000 + J 100%000 >1% )00%000 +00%000 >1 0%* m; Penam"ahan a=uades >2 - >1 + X 0%* 3%2 m; 5ntuk mem"uat + m; ekstrak "uah kaista dengan konsentrasi 100%000 ppm maka ditam"ahkan a=uades se"anyak 3%2 m; ke dalam 0!* m; konsentrasi ekstrak%
L"3!$ 2. D* M#$* +$ H"* E/* E*$+ B& K!/* *#-3 E. coli
5langan
#
##
###
,onsentrasi 9kstrak
oriDontal
>ertikal
@ona am"at mm<
,ontrol Negati/
0
0
0
100%000 ppm
*!2)
*
*!12)
200%000 ppm
(!*)
10
(!(2)
300%000 ppm
12!1)
12!20
12!17)
+00%000 ppm
1)!70
1)!2)
1)!+7)
)00%000 ppm
16
1)!*)
1)!(2)
,ontrol Positi/
(
(!3)
(!17)
,ontrol Negati/
0
0
0
100%000 ppm
7!+0
7!10
7!2)0
200%000 ppm
*!1)
*!2)
*!200
300%000 ppm
11
11!2)
11!12)
+00%000 ppm
1+!1)
1+!3)
1+!2)0
)00%000 ppm
16!+)
16!30
16!37)
,ontrol Positi/
(!)0
(!)0
(!)00
,ontrol Negati/
0
0
0
100%000 ppm
7!1)
7!1)
7!1)0
200%000 ppm
*!2)
*!+0
*!32)
300%000 ppm
11!7)
11!*0
11!77)
+00%000 ppm
13!2)
13!+)
13!3)0
)00%000 ppm
16!2)
16
16!12)
,ontro Positi/
*!2)
*!2)
*!2)0
;uas @ona am"at
L"3!$ 6. A$!/!/ V!$ (ANAVA) +$ H"* E/* E*$+ B& K!/* *#-3 E. coli
asil Pengukuran &iameter @ona am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< terhadap E. coli ,onsentrasi 9kstrak ,ontrol Negati/
5langan 1
2
3
0
0
0
otal
Rata-rata
0
0
100%000 ppm
*!12)
7!2)0
7!1)0
22!)2)
7!)0*
200%000 ppm
(!(2)
*!200
*!32)
26!+)0
*!*17
300%000 ppm
12!17)
11!12)
11!77)
3)!07)
11!6(2
+00%000 ppm
1)!+7)
1+!2)0
13!3)0
+3!07)
1+!3)*
)00%000 ppm
1)!(2)
16!37)
16!12)
+*!+2)
16!1+1
,ontrol Positi/
(!17)
(!)00
*!2)0
26!(2)
*!(7)
202!+7)
67!+(1
otal
asil rans/ormasi &ata Pengukuran &iameter @ona am"at 9kstrak 9tanol uah ,aista Limonia acidissima ;%< terhadap E. coli 5langan
,onsentrasi 9kstrak
1
2
3
,ontrol Negati/
0!707
0!707
100%000 ppm
2!(37
200%000 ppm
otal
Rata-ata
0!707
2!121
0!707
2!7*+
2!766
*!+*7
2!*2(
3!22(
2!()0
2!(71
(!1)0
3!0)0
300%000 ppm
3!)60
3!+0(
3!)0+
10!+73
3!+(1
+00%000 ppm
3!((7
3!*+1
3!722
11!)6
3!*)3
)00%000 ppm
+!0)3
+!10*
+!077
12!23*
+!07(
,ontrol Positi/
3!110
3!162
2!()*
(!23
3!076
63!2)(
21!0*)
otal &total
umlah seluruh pengamatan X 1 21- 1 20 & perlakuan umlah perlakuan X 1 7X16 &galat &total - & perlakuan 20 - 6 1+
( Total pengamatan)2 4,
Jumlahseluruh pengamatan 2
yij ¿
¿ ¿ ¿ 2
63,259 ¿
¿ ¿ ¿
1(0!))7 , otal Qyij2 X 4, 0!707<2 O 0!707< 2 O 0!707<2 O 2!(37<2 O 2!7*+< 2 O 2!766<2 O 3!22(<2 O 2!()0<2 O 2!(71< 2 O O 3!)60< 2 O 3!+0(<2 O3!)0+<2 O 3!((7< 2 O 3!*+1<2 O 3!722<2 O +!0)3< 2 O +!10*<2 O +!077<2 O 3!110< 2 O 3!162<2 O 2!()*<2 X 1(0!))1 0!+(( O 0!+(( O 0!+(( O *!626 O 7!7)1 O 7!6)1 O 10!+26 O *!703 O *!*27 O 12!67+ O 11!621 O 12!27* O 1)!(76 O 1+!7)3 O 13!*)3 O 16!+27 O 16!*76 O16!622 O (!672 O (!((* O *!7+( X 1(0!))1 212!(*0 X 1(0!))7 22!+23 2
Jumlah hasil perlakuan ¿ , pelakuan
¿ ∑¿ ¿
X 4,
4,499 + 72,029 + 83,723 + 109,684 + 133,634 + 149,769 + 85,193
3
4,
212!*++ X 1(0!))7 22!2*7 , galat
, perlakuan
, total X , perlakuan 22!+23 X 22!2*7 0!136 JKperlakuan DBperlakuan 22,287
6
3!71) ,galat
JKgalat DBgalat 0,136
14
0!010
X
4hitung
KTperlakuan KTgalat
3,715
0,010
371!)
S, Perlakua n
&
,
,
6
22!2*7
3!71)
Balat
1+
0!136
0!010
4hitung 371!)T
4ta"el 0!0)< 2!*)
otal 20 22!+23 5 er"eda nyata pada tara/ signi/ikan ) ?
Ῡ
yij r . t
63,259
21
3!012 ,,
√ KTgalat Ῡ
√ 0,010 3,012
J 100?
J 100?
0!033 J 100? 3!3? Nilai ,, yang diperoleh adalah 3!3?! uji lanjut yang digunakan adalah uji N eda Nyata ujur<
L"3!$ 7. A$!/!/ B#- N* J&'& (BNJ) H"* E/* E*$+ B& K!/* ( Limonia acidissima L.) *#-3 E. coli
NY
CY p!<
+!*3 J
√ √
Ktgalat r 0,010 3
+!*3 J 0!0)) 0!266 Rentang nilai rata-rata setiap perlakuan: 0!707 sampai 0!707 O 0!266< 2!*2( sampai 2!*2( O 0!266< 3! 0+( sampai 3!0)0 O 0!266< 3!076 sampai 3!076 O 0!266< 3!+(1 sampai 3!+(1 O 0!266< 3!*)3 sampai 3!*)3 O 0!266< +!07( sampai +!07( O 0!266<
0!707 sampai 0!(73 2!*2( sampai 3!0() 3! 0)0 sampai 3!316 3!076 sampai 3!3+2 3!+(1 sampai 3!7)7 3!*)3 sampai +!11( +!07( sampai +!3+)
asil 5ji eda Nyata ujur N< @ona am"at 9kstrak 9tanol uah kaista Limonia acidissima ;%< terhadap E. coli Perlakuan
Rata-Rata mm<
Nilai N0!0)< 0!26+
P0
0!707
a
P1
2!*2(
"
P2
3!0)0
"
P6
3!076
"
P3
3!+(1
P+
3!*)3
d
P) +!07( d ,eterangan: Angka-angka yang diikuti oleh huru/ yang sama pada kolom yang s ama "erarti tidak "er"eda nyata pada tara/ uji )? Nilai N menjadi pem"eda antar rata-rata dua populasi sampel! "ila rata-rata dua populasi sampel W nilai N! maka dinyatakan tidak "er"eda nyata%
,onsentras i 9kstrak
RataRata @ona am"a t
N 0!0)< 0!26 6 2
P0
0!707
P1
2!*2(
2!122 T
P2
3!0)0
0!220
P6
3!076
P3
3!+(1
P+
3!*)3
0!026 0!+1) T 0!362 T
P) +!07( 0!226 ,eterangan: Ter"eda nyata
3
+
)
6
7 a
2!3+2 T 0!2+7 0!++1 T 0!777 T 0!)** T
L"3!$ 9. F+*+ P#$#!*!$ P#"&*$ E/* B& K!/*
" -
"
2!36(T
-
0!662T
2!7*+T
-
0!*03T 1!003 T
1!02+T
3!1+6T 1!2)0 T
1!02(T
" 3!372 T
d d
Bam"ar )%1 uah kaista muda
Bam"ar )%2 Penghalusan "uah kaista
Bam"ar )%3 Ser"uk halus "uah kaista
Bam"ar )%+ $aserasi
Bam"ar )%) /iltrat ekstrak "uah kaista
Bam"ar )%6 9aporasi
Bam"ar )%7 9kstrak kental "uah kaista U'! D H"* E/* E*$+ B& K!/* *#-3 Eschericia coli
Bam"ar )%* Pem"uatan $edia $A
Bam"ar )%( Sterilisasi media dan alat
Bam"ar )%10 #solat E.coli
Bam"ar )%11 E.coli yang telah diremajakan
Bam"ar )%13 $em"uat suspensi "akteri
Bam"ar )%1) $eletakkan kertas akram
Bam"ar )%12 Pengeneran
Bam"ar )%1+ Standar $ 4arland
Bam"ar )%16 Pengukuran Dona ham"at
H/! S!$!$% F!*+!"!
Bam"ar )%17 5ji Alkaloid Peaksi &ragendro/! $ayer! dan urhard<
Bam"ar )%1* 5ji anin
Bam"ar )%1( 5ji Saponin
Bam"ar )%20 5ji Poli/enol
Bam"ar )%21 5ji riterpenoid
Bam"ar )%22 5ji ,uinon
Nilai aku 4 ta"el pada ara/ ,ritis ) dan 1? untuk ANA>A Analysis of variance<
&a/tar Nilai aku C untuk 5ji eda Nyata ujur pada tara/ ,ritis )?
G+/!&"
Skrining /itokimia
tahapan awal untuk mengidentifikasi kandungan
Anti"akteri
kimia yang terkandung dalam tumbuhan. Dat yang dapat mengganggu pertum"uhan atau "ahkan
9kstrak
mematikan "akteri sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi
9tanol
Dat akti/ dari simplisia na"ati atau simplisia heani pelarut organik yang "ersi/at semipolar! sehingga pelarut dapat menarik kandungan kimia yang "ersi/at
Sterilisasi
polar maupun non polar% pemusnahan atau eliminasi semua mikroorganisme!
Resistensi
termasuk spora "akteri! yang sangat resisten suatu si/at tidak terganggunya kehidupan
#nokulum
mikroorganisme oleh anti"iotik kultur mikro"ia yang diinokulasikan kedalam medium pada
saat
kultur
mikro"ia
terse"ut
pada
sel
/ase
$aserasi
pertum"uhan ara ekstraksi
$etode akram
menggunakan pelarut organik pada temperatur ruangan salah satu metode pengujian anti"akteri dengan
dengan
perendaman
sampel
menggunakan kertas akram yang dijenuhkan ekstrak Streptomisin
dengan "er"agai konsentrasi o"at yang dapat mematikan "akteri sensiti/! dengan menghentikan
Standar $ 4arland
produksi
protein
esensial
yang
di"utuhkan "akteri untuk "ertahan hidup suatu standar untuk memperkirakan kepadatan sel yang
akan digunakan
pada prosedur pengujian
angka sorong
antimikro"a alat ukur yang
#nku"asi
seperseratus milimeter% proses memelihara kultur "akteri dalam suhu tertentu
ketelitiannya
selama jangka aktu ppm art er million<
dapat
tertentu untuk
pertum"uhan "akteri% salah satu satuan konsentrasi
menapai
memantau
yang menyatakan
per"andingan "agian dalam satu juta "agian yang lain
RIWAYAT HIDUP Audia Anda Rini dilahirkan di ,a"upaten Pidie aya dulu ,a"upaten Pidie
LEMBAR KEASLIAN TULISAN
Eang "ertanda tangan di "aah ini Nama : Audia Anda Rini N#$ : 1206103010031 menyatakan "aha skripsi yang "erjudul USkrining 4itokimia dan 5ji Anti"akteri 9kstrak 9tanol uah ,aista &ari ,a"upaten Aeh esar erhadap Eschericia coliV ini "enar karya sendiri! "ukan jiplakan atau plagiat karya orang lain% ika suatu ketika ter"ukti "aha skripsi ini adalah jiplakan atau plagiat! saya "ersedia menanggung segala resikonya% &emikian pernyataan ini saya "uat dengan penuh kesadaran tanpa paksaan dari siapapun% &arusalam! 8kto"er 2016 Eang $em"uat Pernyataan!
Audia Anda Rini
