PRACTICA N°3 RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLOGICO DE LIPIIDOS Y PROTEINAS
I.INTRODUCCIÓN: En la elaboración de la presente prctica se !an a reali"ar reacciones para entender # conocer $s clara$ente las bio$ bio$ol ol%c %c&l &las as'' en es este te ca casso tra rata tarre$ e$os os ac acer erca ca de la lass prote(nas # los l(pidos) s&s propiedades # la presencia o no en al*& al*&no noss ali$ ali$en ento toss +&e +&e co cons& ns&$i $i$o $oss en n&es n&estr tra a !ida !ida diaria' ade$s de +&e estas $ol%c&las tienen &na presencia i$portante en los seres !i!os # son s&$a$ente i$portantes co$o ,&ente de ener*(a-
II. OBJETIVOS: •
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Reconocer +&e co$p&estos or*nicos co$o los l(pidos # prote(nas bio$ol%c&las $ediante reacciones e interacciones +&e interacciones +&e son constit&#entes con stit&#entes i$portantes en todos los seres !i!osConocer t%cnicas sencillas para la identi.cación de s&stancias esenciales para la !ida' co$o lo son los carbo/idratos' l(pidos # prote(nasAnali"ar la i$portancia de los co$p&estos or*nicos en ali$entos.
III.MARCO TERORICO: Es nota notabl ble e el /ec/ /ec/o o +&e +&e los los or*a or*ani nis$ s$os os !i!o !i!oss pres presen enta tan n la propiedad de &tili"ar la ener*(a contenida en $ateriales sencillos para
constr&ir # sostener s&s estr&ct&ras # reali"ar traba0os di!ersos- Dic/a ener*(a se obtiene a partir de los ali$entos +&e in*eri$osLa $a#or parte de los co$ponentes +&($icos de los or*anis$os son co$p&estos +&($icos del carbonoLos co$p&e Los co$p&esto stoss or*n or*nico icoss en *enera *enerall deter deter$in $inan an la estr& estr&ct& ct&ra ra # ,&nción de las c%l&las +&e inte*ran a los seres !i!os- as( tene$os +&e los princi principal pales es co$p&e co$p&esto stoss or*n or*nico icoss son1 son1 carbo/ carbo/idr idrato atos' s' l(pido l(pidos' s' prote(nas' cidos n&cleicos # !ita$inasson n s&st s&stan anci cias as +&e +&e so son n indi indisp spen ensa sabl bles es para para el Las proteí proteías as so or*anis$o sobre todo d&rante el desarrollo' creci$iento # e$bara"o' son co$p&estos +&e ,or$an parte de todas las estr&ct&ras cel&lares por lo +&e se le considera ele$entos ,or$adores de estr&ct&ras- Son co$p co $p&e &est stos os or* or*ni nico coss co co$p $ple le0o 0oss co cons nsti tit& t&id idos os por por ca cade dena nass de a$ino a$ inoc cid idos os +&e +&e se p&ed p&eden en co co$b $bin inar ar en &na &na *ran *ran !ari !aried edad ad de ,or$as para ori*inar $2sc&los' tendones' piel' &3as' /or$onas entre otras-
Los !íp"#os son s&stancias de reser!a de ener*(a en el or*anis$o # sir!en co$o aislantes' #a +&e lo prote*en de ca$bios de te$perat&ra # de4 $edio a$biente' son co$p&estos or*nicos de ori*en nat&ral insol&ble en a*&a # sol&bles en co$p&estos or*nicos- Los l(pidos $s ab&ndantes en los seres !i!os' son los tri*lic%ridos .
IV. MATERIALES POR MESA
Aceite co$estible
Alb2$ina al 56
Alco/ol
Cloro,or$o
7ter et(lico
Sol&ción alco/ólica de S&da$ III
8idró9ido de sodio al :;6
8idró9ido de sodio al 5;6
S&l,ato de cobre al <6
=cido n(trico concentrado
Tinta ro0a
T&bos T&bos de <> 9
T&bos T&bos <@9<;;$$<@9<;;$$-
Beaers de ?;$l
Mec/ero
Pipetas Paste&r de plstico de 5-?$l-
G&antes
Pin"a de $adera
Gradilla para t&bos
V.PROCEDIMIENTO: $. DETERMINACIÓN DE L%PIDOS A. So!&'"!"#a# #e !os Líp"#os Los l(pidos son insol&bles en a*&a # sol&bles en sol!entes or*nicos co$o el %ter # cloro,or$oPrepara("): <- Colocar < $l- de Aceite en cada t&bo de <@9<;;$$- # a*itar5- A*re*ar1 En el t&bo N <1 < $l de a*&a destilada En el t&bo N 51 < $l- de Alco/ol En el t&bo N @1 < $l- de cloro,or$o En el t&bo N :1 < $l- de %ter et(lico @- A*itar con la $is$a intensidad a c& los t&bos--
:- Obser!arlos # deter$inar el *rado de sol&bilidad de $a#or a $enor-
B. So!&'"!"#a# * T"(") e S&#a+ III El S&da$ III es &n tinte dia"o del tipo lisocro$o alta$ente sol&ble en l(pidos ti3%ndolos en la *a$a del ro0o cere"a al anaran0adoPrepara("): <- Colocar < $l- de aceite co$estible en dos t&bos de <@9<;; $$5- Adicionar < $l- de S&da$ III a &no de ellos # al otro a*re*ar <$l de tinta ro0a' a*itar de0ar reposar @- Obser!ar la coloración prod&cida en en la "ona del aceite en &no de los t&bos-
C. Sapo",(a("). Las *rasas reaccionan en caliente con /idró9ido sódico o potsico desco$poni%ndose en *licerina # cidos *rasos- 7stos se co$binan con iones sodio o potasio del /idró9ido para dar 0abones' +&e son por ende las sales sódicas o potsicas de los cidos *rasos<- Colocar en &n t&bo <>9
-. DETERMINACIÓN DE PROTE%NAS A. REACCIÓN DE BIURET Los co$p&estos +&e contienen dos o $s enlaces pept(dicos ,or$an &n co$ple0o con las sales de cobre en &n $edio ,&erte$ente alcalino' dando &n color p2rp&ra o !ioleta' debido a la ,or$ación de &n co$ple0o de coordinación entre los iones del C&F5 # los pares de electrones no co$partidos del nitró*eno +&e ,or$a parte de los enlaces pept(dicosPreparación1 <- Disponer de dos t&bos <>9 *otas de S&l,ato de cobre al <6:- Inc&bar a @H C por <; $in&tos?- Obser!ar la coloración prod&cida e int%rprete -
B. REACCIÓN ANTOPROTE%CA Se e$plea para deter$inar la presencia de prote(nas sol&bles en &na sol&ción' e$pleando cido n(trico concentrado 8NO@- Las prote(nas +&e presentan a$inocidos con anillos benc%nicos' dan deri!ados nitro*enados +&e se colorean de a$arilloPrepara("): <- Colocar 5 $l- de la sol&ción de Alb2$ina al <6 o Clara de /&e!o al <;6 en &n t&bo de <>9
VI.CONCLUSIONES: La prctica ,&e $&# interesante # entretenida- P&di$os obser!ar co$o las $&estras ca$biaban de color con las sol&ciones # reacti!os- A pesar de +&e el tie$po se nos a*otó' ,&e s&.ciente para reali"ar todos todos los e9peri$entos T&!i$os T&!i$os al*&nas di.c<ades al $oler al*&nas de de las $&estrasA lo lar* lar*o o de a$ a$bo boss prc prcti tica cass p&di p&di$o $oss apre apreci ciar ar la co co$p $pos osic ició ión n de las las distintas $acro$ol%c&las !itales' # co$o %stas reaccionan ante di,erentes tinciones # reacciones- Lo +&e nos a#&dó a co$prender &n poco $s a ,ondo por +&% oc&rren ciertos procesos en n&estro or*anis$o # entorno Todo Todo esto ,&e posible a ca&sa del correcto &so de los $ateriales' co$o ta$bi%n a la .delidad a los procedi$ientos-
E sítes"s/ aprendi$os +&e Los l(pidos son &na e9celente reser!a ener*%tica a ra(" de s& estr&ct&ra # poca sol&bilidad Obser!a$os el co$porta$iento de las prote(nas' c&ando son so$etidas a distintos distintos ,actores ,actores'' lo +&e nos a#&dó a co$prender co$prender co$o $antenerla $antenerlass en n&estro or*anis$o en ópti$o estadoe stado Las prote(nas son n&estra principal ,&ente de soporte' # dan l&*ar a la *ran $a#or(a de los procesos' #a +&e p&eden e9presarse de distintas $aneras' #a se sean an En"i En"i$a $as' s' Prot Prote( e(na nass de Me$br Me$bran ana' a' /e$o* /e$o*lo lobi bina na'' entre entre otra otrass Concl&i$os +&e los reacti!os' no necesaria$ente ocasionan reacciones irre!ersibles' sino +&e $s bien ocasionan interacciones +&e no a,ectarn en la estr&ct&ra de la l a Macro$ol%c&la ob0eti!oEs necesa necesario rio est&dia est&diarr # anali"a anali"arr la estr&c estr&ct&r t&ra a de estas estas $ol%c& $ol%c&las las para para co$prender $e0or s&s propiedades' ade$s de +&e estas $ol%c&las tienen &na presencia i$portante en los seres !i!os # son s&$a$ente i$portantes co$o ,&ente de ener*(aAl est&diarlas nos per$ite darnos c&enta la i$portancia del carbono' as( co$o co$o s& capaci capacidad dad de co$bin co$binaci ación ón para para ,or$ar ,or$ar estr&c estr&ct&r t&ras as co$ple co$ple0as 0as # enla"arse a to$os o *r&pos de to$os +&e le dan a las $ol%c&las res<antes propiedades espec(.cas-
VII. CUESTIONARIO: $. 01&2 so so !os #"so!e #"so!etes tes or45"( or45"(os6 os6 Los disol!e Los disol!ente ntess or*ni or*nicos cos son co$p&e co$p&esto stoss or*nicos !oltiles +&e se &tili"an solos o en co$bin co$binaci ación ón con otros otros a*entes a*entes'' para para disol! disol!er er $ate $a teri ria as pri$ pri$as as'' prod prod&c &cto toss o $a $atteria eriale less res esid id&a &ale less' &til &tili" i"n ndo dosse co co$o $o a*en a*entte de li$p li$pie" ie"a' a' para para $odi $odi.c .car ar la !isc !iscos osid idad ad'' co co$o $o a*ente tenso acti!o' co$o plasti.cante' co$o conser!ante o co$o portador de otras s&stan s&stancia ciass +&e' +&e' &na !e" deposi depositad tadas' as' +&edan +&edan .0adas # el disol!ente se e!apora-
-. 01&2 es es !a o'es"# o'es"#a# a# * !a prote" prote"&r" &r"a a6 La obes obesid idad ad se de.n de.ne e co co$o $o la pres presen enci cia a de &na &na ca cant ntid idad ad e9cesi!a de *rasa corporal' lo +&e si*ni.ca ries*o para la sal&d- Es el prod&cto de &n balance calórico positi!o' #a sea por $edio de &n ele!ado aporte ener*%tico ener*%tico o por &na red&cción red&cción del *asto de ener*(aener*(aJarias l(neas de in!esti*ación /an descartado a la sobreali$entación co$o &n /ec/o constante constante en los obesos' considerando considerando a la obesidad co$o &na entidad /etero*%nea' co$ple0a # $<i,actorialLa protein&ria es la presencia de prote(na en la orina en c&ant(a s&perior a @;; $* en la orina de 5: /ora /o ras' s' es esta ta p& p&ed ede e se serr tr tran ansi sito tori ria' a' pe per$ r$an anen ente te'' ortosttic ica a' $onoc oclo lon nal o de sobrec eca ar*a- La prot pr otein ein&r &ria ia en pe pe+& +&e3a e3ass ca cant ntid idad ades es @ @; ; a @; @;; ; s& s&el ele e es esta tarr ca casi si sie$pre a e9pensas de la alb&$ina deno$inndose $icro $ic roal alb& b&$i $in& n&ria ria'' da dato to +& +&e e ad ad+& +&ier iere e &n es espe peci cial al in inte ter% r%ss en la patolo*(a diab%tica-
3. 01&2 s&poe s&poe !a #esat&ra #esat&ra!"7a !"7a(") (") #e &a proteí proteía6 a6 C&ando la prote(na no /a s&,rido nin*2n ca$bio en s& interacción con el disol!ente' se dice +&e presenta &na estr&ct&ra nati!a Ki*&ra in,erior- Se lla$a desnat&rali"ación de las prote(nas a la p%rdida de las estr&ct&ras de orden Estado nativo Estado desnaturalizado s&perior sec&nd aria' terciaria #
c&aternaria' +&edando la cadena polipept(dica red&cida a &n pol($ero estad(stico sin nin*&na estr&ct&ra tridi$ensional .0a
C&al+&ier ,actor +&e $odi.+&e la interacción de la prote(na con el disol!ente dis$in&ir s& estabilidad en disol&ción # pro!ocar la precipitación- As(' la desaparición total o parcial de la en!olt&ra ac&osa' la ne&trali"ación de las car*as el%ctricas de tipo rep&lsi!o o la r&pt&ra de los p&entes de /idró*eno ,acilitar la a*re*ación a* re*ación inter$olec&lar # pro!ocar la precipitación- La precipitación s&ele ser consec&encia del ,enó$eno lla$ado #esat&ra!"7a(") # se dice entonces +&e la prote(na se enc&entra #esat&ra!"7a#a Ki*&ra Ki*&ra s&perior-
VIII. RE8ERENCIAS BIBLIO9R8ICAS BIBLIO9R8ICAS
Disol!entes or*nicos /ttp1-dap/nia-esre!ista<5artic&lo:5?Disol!entesor*anicos
Carbo/idratos Prote(nas # L(pidos /ttps1es-scribd-co$doc?;;@Carbo/idratosProteinas#Lipidos
Desnat&rali"ación de las prote(nas /ttp1-e/&-e&sbio$olec&lasproteinasdesnat&rali"acion-/t$
M'T' MONTOYA DEL8OYO- Man&al de Laboratorio de Biolo*(a <
