El hemograma de Schilling
Hematología Clínica.
UNIVERSI DAD NACIONALMA MAYOR DESANMA MARCO COS ( Un i v e r s i d add e lPe r ú , De c a nad eAmé r i c a )
F ACUL T AD DE MEDI CI NA
E. A. P.TECNOLO OG GI A MÉDI CA
Hemograma de Schilling
Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
San Fernando 202
El hemograma de Schilling
ASI GNATURA :
DOCENT NTE
ALUMNO
Hematología Clínica.
Hematol ogí aCl í ni ca
:
Li c.EduardoVerasteguiLara
:
OscarRaúlChoqueRamos
COD ODI GO:
San Fernando 2012
Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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HEMOGRAMA DE SHILLING Definición: En medicina el hemograma o CSC !conteo sanguíneo com"leto# o $iometría hem%tica es uno de los elementos diagn&sticos $%sicos. Es un cuadro o '&rmula sanguínea en el que se e("resan el número) "ro"orci&n * +ariaciones de los elementos sanguíneos.
Cl%sicamente se considera que un hemograma de$iera incluir: el recuento de eritrocitos) la hemoglo$ina) el hematocrito) los índices cor"usculares) el estudio de la mor'ología eritrocitaria *) adem%s) el recuento de leucocitos) la '&rmula leucocitaria) el recuento "laquetario) la mor'ología "laquetaria. Otro Otross índi índice cess que "ue "uede denn incl inclui uirse rse son: son: recue recuent ntoo de reti reticul culoci ocito tos) s) el índi índice ce ict, ict,ric ricoo * la +elo +eloci cida dadd de eritrosedimentaci&n.
Sin em$argo) el -hemograma com"leto- di'iere en cuanto a in'orme) en los distintos la$oratorios. A tra+,s del tiem"o) el hemograma ha sido o$eto de múlti"les modi'icaciones en cuanto a los "ar%metros que lo com"onen) la 'orma de o$tenerlos) los grados de "recisi&n * de e(actitud * la manera de inter"retarlo. /ara una meor utiliaci&n de los "ar%metros que el hemograma a"orta es de +ital im"ortancia conocer el desarrollo que ha acom"a1ado a la "rue$a * el la$oratorio clínico de$e "ermanecer atento al desarrollo tecnol&gico "ara incor"orar los as"ectos de ma*or rele+ancia desde el "unto de +ista clínico) como una herramienta de rutina que le "ermita tener "rue$as cada +e m%s e(actas) m%s "recisas) a un costo raona$le *) so$retodo) de ma*or utilidad clínica.
El hemograma como "rue$a de la$oratorio "ermite tener una +isi&n glo$al de la homeostasis del sistema hemato"o*,tico) de ahí la im"ortancia de que se e+alúen el ma*or número de "ar%metros *) so$retodo) de que ,stos tengan la ma*or "recisi&n * e(actitud "osi$les) características que '%cilmente se "ueden lograr gracias a los
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grandes a+ances en el la$oratorio de hematología mediante la incor"oraci&n de autoanaliadores de hematología de alta e'iciencia.
A continuaci&n se relacionan los "ar%metros que com"onen los di'erentes ti"os de hemogramas) inclu*endo entre "ar,ntesis los c&digos de la Sociedad Colom$iana de /atología Clínica: Hemograma ti"o 3 : hemoglo$ina) hematocrito) recuento de eritrocitos) índices eritrocitarios !+olumen cor"uscular medio) hemoglo$ina cor"uscular media) concentraci&n de la hemoglo$ina cor"uscular media#) recuento total de leucocitos) * recuento di'erencial de leucocitos * mor'ología "or m,todos manuales. 4o inclu*e sedimentaci&n. Hemograma ti"o 33: hemoglo$ina) hematocrito) recuento de eritrocitos) índices eritrocitarios !+olumen cor"uscular medio) hemoglo$ina cor"uscular media) concentraci&n de la hemoglo$ina cor"uscular media#) recuento total de leucocitos) recuento di'erencialsedimentaci&n. Hemograma ti"o 333 : hemoglo$ina) hematocrito) recuento de eritrocitos) índices eritrocitarios !+olumen cor"uscular medio) hemoglo$ina cor"uscular media) concentraci&n de la hemoglo$ina cor"uscular media#) recuento total de leucocitos) * recuento di'erencial de leucocitos) recuento de "laquetas "or m,todos semiautom%ticos * mor'ología "or m,todos manuales. 4o inclu*e sedimentaci&n. Hemograma ti"o 35: hemoglo$ina) hematocrito) recuento de eritrocitos) índices eritrocitarios !+olumen cor"uscular medio) hemoglo$ina cor"uscular media) concentraci&n de la hemoglo$ina cor"uscular media#) ancho de distri$uci&n de los eritrocitos) recuento total de leucocitos) recuento di'erencial de leucocitos) recuento de "laquetas * mor'ología de sangre "eri',rica "or m,todos electr&nicos * manuales. 4o inclu*e sedimentaci&n.
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Hemograma ti"o 5 : hemoglo$ina) hematocrito) recuento de eritrocitos) índices eritrocitarios !+olumen cor"uscular medio) hemoglo$ina cor"uscular media) concentraci&n de la hemoglo$ina cor"uscular media#) ancho de distri$uci&n de los eritrocitos) recuento total de leucocitos) recuento di'erencial de leucocitos) recuento de "laquetas) índices "laquetarios !+olumen medio "laquetario) ancho de distri$uci&n de las "laquetas) "laquetocrito# * mor'ología de sangre "eri',rica "or m,todos electr&nicos * manuales. 4o inclu*e sedimentaci&n. Hemograma ti"o 53: hemoglo$ina) hematocrito) recuento de eritrocitos) índices eritrocitarios !+olumen cor"uscular medio) hemoglo$ina cor"uscular media) concentraci&n de la hemoglo$ina cor"uscular media#) ancho de distri$uci&n de los eritrocitos) recuento de reticulocitos) índices reticulocitarios) hemoglo$ina reticulocitaria) recuento total de leucocitos) recuento di'erencial de leucocitos) recuento de "laquetas) índices "laquetarios !+olumen medio "laquetario) ancho de distri$uci&n de las "laquetas) "laquetocrito#) "laquetas reticuladas * mor'ología de sangre "eri',rica "or m,todos electr&nicos * manuales. 4o inclu*e sedimentaci&n 6a "resente monogra'ía se en'ocara a el estudio de las t,cnicas del hemograma de Schilling) como t,cnica de uso actual) con ella se cali$rolos "rimeros equi"os automatiados * en la actualidad es "arte del "roceso de control de calidad de los equi"os autoamtiados) de$ido a que ningún equi"o "ude reem"laar las hai$ilidades * conocimientos del tecn&logo medico en la +eri'icaci&n de la lamina en $usca de alteraciones que los equi"os automatiados no "ueden hallar.
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6a "resente monogra'ía di+idir% su contenido de la siguiente 'orma
Fase pre analítica del Hemorama de Sc!illin
• •
7oma de muestra del "aciente /rinci"ales anticoagulantes usados en Hematología.
Fase analítica del Hemorama de Sc!illin" •
•
/rue$as Cuantitati+as. Hematocrito. o Hemoglo$ina. o Recuento de 8l&$ulos Roos. o Recuento de 8l&$ulos 9lanco. o Recuentos de /laquetas. o /rue$as Cualitati+as Realiaci&n del Frotis Hematol&gico. o Coloraci&n del Frotis Hematol&gico. o 6ectura de l%mina "eri',rica. o Alteraciones de la eritrocitos Alteraciones del los leucocito Alteraciones de las "laquetas.
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FASE #RE ANAL$%I&A DEL HEMOGRAMA DE S&HILLING %OMA DE M'ES%RA DEL #A&IEN%E 6a toma de muestra es 'undamental *a que de ello de"ende que el resultado del an%lisis de la muestra sea el correcto. Se e'ectuar% en a*unas o no) de"endiendo de la "rue$a a usar. ateriales Algod&n. Alcohol al ;0<. 6igadura o torniquete de 2= a >0 cm de largo. ?eringas de = m6 5iales con anticoagulante E@7A. A# E4 A@67OS .
@urante la toma de muestra
de$en
guardarse las m%s estrictas normas
de
higiene. 2.
El material descarta$le a
usar se
a$rir% s&lo al momento de su utiliaci&n *) una +e mani"ulado)
no
"odr% guardarse nue+amente aún
cuando
se lo considere nue+o. >.
na +e realiada la toma
de
muestra) descartar inmediatamente
los
materiales usados en reci"ientes
"ara ese
'in.
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B.
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6os reci"ientes que contienen algod&n * los de desecho de$en estar "er'ectamente cerrados todo el tiem"o
* se a$rir%n solamente al momento de usar. =.
Al momento de hacer la e(tracci&n colocarse los guantes desecha$les) los cuales se mantendr%n "uestos
durante todo el "rocedimiento. .
Antes de iniciar la toma de
muestra)
tener
todo
el
material
"re"arado "ero sin a$rir. ;.
Elegir una +ena $ien +isi$le en
el
ante$rao) locali%ndola +isualmente *
"or
"al"aci&n. Colocar el lao * +ol+er a "al"ar la +ena) indicarle al "aciente
que
a$ra * cierre el "u1o "ara 'acilitar la e(tracci&n. El lao de$e ser colocado
de
modo de "roducir una com"resi&n del músculo no ma*or a mm. D.
na +e identi'icada la +ena)
lim"iar el %rea circundante con algod&n em"a"ado en alcohol. @ear secar "er'ectamente. .
En este momento se rom"er% el sello de garantía de la agua) se la colocar% en la eringa sin tocar con los
dedos) controlando el correcto 'uncionamiento del ,m$olo. 0.
6a agua se insertar% en la +ena elegida con el $isel hacia arri$a) deando que la sangre 'lu*a en la eringa
as"irando sua+emente con el ,m$olo. 6a escala de la eringa de$e estar +isi$le !hacia arri$a#. .
@es"u,s de la toma) se le indica al "aciente que a$ra la mano) se retira el torniquete * luego la agua)
"resionando el lugar de la "unci&n con un troo de algod&n seco. 2.
6A A8?A SE @ESCAR7AR E4 E6 CO47E4E@OR @ES734A@O /ARA ESE F34.
>.
6a sangre que est% en la eringa se descargar% en los tu$os o 'rascos que contienen los anticoagulantes
corres"ondientes) e+itando hacer es"uma. B.
Rotular los tu$os o 'rascos con los datos del "aciente.
=.
En el sitio de la "unci&n se "ondr% un a"&sito des"u,s de controlar que no ha*a m%s sangrado.
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.
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6a "ersona que hace la e(tracci&n de$er% quitarse los guantes al 'inaliar la toma de muestra * desecharlos
inmediatamente. 4O RE7363GAR6OS 4E5AE47E. ;.
Si ha* algún dato que ha*a inter'erido con el "rocedimiento) aclararlo en el registro de muestras.
9# E4 43OS .
En ni1os ma*ores de meses) se recomienda hacer la e(tracci&n del $rao como en adultos) "idi,ndole a
un adulto que cola$ore en mantener inm&+il al ni1o) en "articular el $rao. 2.
En el caso de ni1os menores de meses) se "roceder% a e(traer la muestra del tal&n con una lanceta
descarta$le. Antes de la e(tracci&n con+iene calentar el tal&n 'rot%ndolo entre las manos "ara 'a+orecer la irrigaci&n de la ona. >.
@esin'ectar con un troo de algod&n em$e$ido
en
dear e+a"orar * "unar con la lanceta) en la ona del
alcohol)
tal&n indicada
en el di$uo adunto. B.
6im"iar la "rimera gota * dear gotear la sangre
en el tu$o con
anticoagulante. Secar la ona con un troo de algod&n seco * una +e
que no ha*a sangrado)
colocar una curita o a"&sito.
O(%EN&I)N DE SANGRE *ENOSA EN %'(OS AL *A&$O ateriales requeridos Algod&n. Alcohol al ;0<. 6igadura o torniquete de 2= a >0 cm de largo. 7u$os al +acío con anticoagulante E@7A !I>#) E@7A !4a2# u otro anticoagulante.
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>.>..= Aguas con dis"ositi+o "ara e(tracci&n de sangre al +acío: J 4K 2 "ara adultos. J 4K 22 "ara ni1os * neonatos. @e "re'erencia) am$as de $isel corto "ara e+itar la coagulaci&n.
#RO&EDIMIEN%O . Se retira el estuche "rotector de la agua * ,ste se enrosca al dis"ositi+o "ara e(tracci&n de sangre al +acío. 2. Colocar la ligadura cuatro dedos "or encima de la 'le(i&n del codo o 0 cm "or encima de ,ste * "edir al "aciente que a$ra * cierre la mano +arias +eces) "ara 'a+orecer la dilataci&n de las +enas. >. na +e escogida la +ena) desin'ectarla con una "iea de algod&n em$e$ido en etanol al ;0<. B. Se coloca la agua en direcci&n "aralela a la +ena) se "er'ora la "iel haciendo a+anar la agua entre 0)= cm * cm en el teido su$cut%neo) se inserta el tu$o al +acío "or la "arte "osterior * no "reocu"arse "or la cantidad de sangre e(traída *a
que el
mismo sonido del +acío a+isar%
que la
e(tracci&n termin&. =. Retirar la ligadura tirando del e(tremo do$lado. . Colocar un "edao de algod&n
seco
so$re la "arte donde se encuentra oculta la agua. Sacar la agua con un mo+imiento r%"ido * de"ositarla en el reci"iente de metal con desin'ectante . ;. /edir al "aciente que "resione 'irmemente el algod&n durante > minutos) con el $rao e(tendido. 4o se recomienda que se 'le(ione el $rao a causa del riesgo que se 'orme un hematoma. D. eclar "or inmersi&n sua+e la sangre con el anticoagulante contenido en el tu$o. 4o agitar el contenido.
*enta+as de ,na e-tracción de sanre .enosa /ueden hacerse re"etidos e(%menes con la misma muestra. /arte de la muestra !"lasma o suero# "uede congelarse "ara re'erencia 'utura.
Des.enta+as de ,na e-tracción de sanre .enosa 6a "unci&n +enosa) "or su largo "rocedimiento) requiere ma*or "re"araci&n que el m,todo ca"ilar. El m,todo es t,cnicamente di'ícil en ni1os) indi+iduos o$esos * "acientes en shocL.
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6a hem&lisis de$e ser e+itada) "ues se "uede o$tener una disminuci&n en el recuento de eritrocitos. @e$e e+itarse "rolongada estasis +enosa "roducida "or el torniquete) "ues "roduce hem&lisis * otros cam$ios que "onen la sangre en un estado inadecuado "ara el an%lisis de gases) recuentos celulares) determinaci&n de "H sanguíneo * algunas "rue$as de coagulaci&n. 6a sangre anticoagulada si no es de o$tenci&n reciente no de$e ser utiliada en e(tensiones de sangre) "ues algunos anticoagulantes "roducen cam$ios en las "laquetas que "ueden causar aglutinaciones) agregaci&n "laquetaria * di'icultan la identi'icaci&n de leucocitos. /uesto que algunos de los com"onentes de la sangre no son esta$les) los recuentos de leucocitos * "laquetas e índice de sedimentaci&n de$en realiarse antes de que "asen dos horas desde que se o$tu+o la muestra.
#RIN&I#ALES AN%I&OAG'LAN%ES 'SADOS EN HEMA%OLOG$A" na +e e(traída la sangre) ,sta "uede conser+arse coagulada o mantenida incoagula$le mediante la adici&n de un anticoagulante. &ARA&%ER$S%I&AS (/SI&AS DE LOS AN%I&OAG'LAN%ES M/S 'SADOS EN HEMA%OLOG$A • • • •
4o alterar el tama1o de los hematíes. 4o "roducir hem&lisis. E+itar al m%(imo la agregaci&n "laquetaria. 4o alterar la mor'ología de los leucocitos.
6a sangre tratada con anticoagulante de$e "rocesarse lo antes "osi$le) incluso mantenida $ao re'rigeraci&n !B KC# si no "asan de las 2 horas. El tiem"o m%(imo entre la e(tracci&n de la sangre * su "rocesamiento de"ende del coagulante de elecci&n * no de$e ser m%s de B horas) a e(ce"ci&n del anticoagulante E@7A !etilendiaminotetrac,tico# que "uede ser hasta 2B horas !en re'rigeraci&n a B KC#. 6os anticoagulantes "ueden em"learse en 'orma s&lida o líquida. 6os "rimeros est%n indicados "ara la determinaci&n de los "ar%metros hematol&gicos) *a que no "roducen) como los anticoagulantes líquidos) diluci&n de la sangre.
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AN%I&OAG'LAN%ES S)LIDOS ED%A Es la sal dis&dica o tri"ot%sica del %cido etilendiaminotetrac,tico. 6a sal dis&dica !4a2E@7A# es menos solu$le que la sal tri"ot%sica !I>E@7A#. Estos com"uestos realian su acci&n a tra+,s de un e'ecto quelante so$re el calcio) al 'iarlo im"iden su acti+aci&n *) "or ende) la coagulaci&n sanguínea.
*enta+as M Res"eta la mor'ología eritrocitaria !es"ecialmente la sal tri"ot%sica# * leucocitaria) de manera que "ermite una demora de dos horas en la realiaci&n del 'rotis sanguíneo des"u,s de la e(tracci&n sanguínea. M Asegura la conser+aci&n de los elementos 'ormes sanguíneos durante 2B horas si la sangre se mantiene a B KC. M Al inhi$ir la aglutinaci&n de las "laquetas) 'acilita su recuento o su e("resi&n semicuantitati+a a "artir del 'rotis. M 6a concentraci&n recomendada de E@7A es de )= mgNm6. de sangre. na ma*or cantidad de anticoagulante "uede "roducir retracci&n celular) con disminuci&n del hematocrito) * un aumento de la concentraci&n media de la hemoglo$ina. n e(ceso de sangre con relaci&n al anticoagulante "roduce 'ormaci&n de microagregados que "ueden alterar los resultados. El em"leo de tu$os al +acío con una gota !=0m6# de E@7A tri"ot%sica comercial "ara = m6 de sangre es de inter,s "r%ctico dado que es cien +eces m%s solu$le 'acilitando la mecla de sangre con anticoagulante.
Des.enta+as sado en e(ceso a'ecta a los eritrocitos * a los leucocitos) a los cuales les "roduce encogimiento * cam$ios en su 'orma) "or ello de$e cuidarse de agregar la cantidad correcta de sangre al anticoagulante.
Anticoa,lante de 0intro1e Es una mecla de o(alato de amonio * "otasio. Actúa "or "reci"itaci&n del calcio) es '%cil de "re"arar. Se em"lea en 'orma de "ol+o en "ro"orci&n de 2 de o(alato de amonio "or de o(alato de "otasio. 6a cantidad recomendada es de 2 mg ( m6 de sangre. Este anticoagulante no a'ecta el +olumen glo$ular medio * "uede usarse "ara determinaciones de hemoglo$ina) hematocrito * recuento glo$ular) "ero "ara los e(tendidos queda limitada a los "rimeros minutos) tam"oco es útil "ara el recuento "laquetario "orque "roduce 'ormaci&n de agregados "laquetarios.
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Heparina El nom$re de he"arina "ro+iene del griego he"ar) que signi'ica hígado) *a que 'ue aislado "or "rimera +e de las c,lulas de este teido. Es un muco"olisac%rido %cido. /resenta el incon+eniente de que si no se agita r%"idamente con la sangre des"u,s de e(traída "ueden 'ormarse microco%gulos) aunque no altera el +olumen eritrocitario ni la mor'ología de los leucocitos. 4o es recomenda$le "ara el 'rotis sanguíneo "orque "roduce un 'ondo aul en la l%mina. 6a he"arina de sodio o litio "uede usarse en 'orma s&lida o líquida) en "ro"orci&n de 0) J 0)2 mg de he"arina "or m6 de sangre.
AN%I&OAG'LAN%ES L$2'IDOS &itrato trisódico Es de elecci&n "ara las "rue$as de hemostasia * la +elocidad de sedimentaci&n. Actúa a tra+,s de la "reci"itaci&n del calcio. 6a concentraci&n de"ende de la "rue$a "or realiar. M /ara "rue$as de hemostasia se em"lea en "ro"orci&n de : !0)= m6 de anticoagulante "ara B)= m6 de sangre total#. M /ara la determinaci&n de la 5S8 !5elocidad de Sedimentaci&n 8lo$ular# es :B !0)= m6 de anticoagulante "ara 2 m6 de sangre#.
O-alato sódico Recomendado tam$i,n "ara las "rue$as de hemostasia. Se em"lea en "ro"orci&n de un +olumen de anticoagulante "ara B +ol. de sangre.
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FASE ANAL$%I&A DEL HEMOGRAMA DE S&HILLING" #R'E(AS &'AN%I%A%I*AS" HEMA%O&RI%O" ide la concentraci&n de gl&$ulos roos en sangre anticoagulada !,l < del +olumen total de sangre ocu"ado "or gl&$ulos roos#. A*uda al diagnostico de anemia * "olicitemía * es necesario "ara calcular índices sanguíneos. Adem%s la columna de c,lulas $lancas resultante) "ro"orciona una idea a"ro(imada del recuento de leucocitos) es decir una columna de c,lulas $lancas de mm de altura) corres"onde a"ro(imadamente a 0)000 leucocitos ( mm>.
#RO&EDIMIEN%O : •
Se as"ira sangre ca"ilar & +enosa) en ca"ilares he"ariniados & sin he"ariniar "ar sangre con anticoagulantes !E@7A & intro$e#) de$e llenarse a"ro(imadamente un ;0< del ca"ilar.
•
Ocluir un e(tremo del ca"ilar en "lastilina.
•
Colocar el ca"ilar so$re la "lata'orma del ca$eal de una centri'uga de microhematocrito) con el e(tremo de ocluido hacia el centro del a"arato * el ocluido adherido al re$orde e(terno de la "lata'orma.
•
Centri'ugar "or = minutos entre 0)000 a 2)000 re+.(.
•
6eer :
HEMA%O&RI%O 3 Alt,ra de la col,mna de ló1" Ro+os Alt,ra de la col,mna de sanre total" *ALORES NORMALES: Hom1res :
45 6 74 8
R" Nac"
446 <4 8
:
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M,+eres
:
9; 6 4; 8
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6as concentraciones de hemoglo$ina * de gl&$ulos roos "ueden estimarse "or el ni+el del hematocrito según las siguientes '&rmulas siem"re que la sangre sea normal: A. /unto de hematocrito P 0.>B gr. de H$. 9. /unto de hematocrito P 0;)000 de gl&$ulos roos N mm>
IN%ER#RE%A&ION : A,mento
: est% incrementado en hemoconcentraci&n como en shocL asociados a quemaduras) en "olicitemia de cualquier causa * en
cirugía) trauma *
eritrocitosis de deshidrataci&n.
Dismin,=e: en anemia de cualquier causaQ en 'ase de recu"eraci&n des"u,s de ",rdidas sanguíneas.
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FASE ANAL$%I&A DEL HEMOGRAMA DE S&HILLING" #R'E(AS &'AN%I%A%I*AS" HEMOGLO(INA" ME%ODO :
&OLOR
FO%OELE&%RI&O
>ME%ODO
DEL
&IAN'RO
DE
HEMOGLO(INA? AN%ES: &ianmeta!emolo1ina"
El 'erricianuro trans'orma el hierro de la hemoglo$ina del estado 'erroso al ',rrico "ara 'ormar hemoglo$ina) que se com$ina con el cianuro de "otasio "roduciendo el cianuro de hemoglo$ina!C4H2# de color roio de intensidad "ro"orcional a la concentraci&n de hemoglo$ina.
#RO&EDIMIEN%O :
•
En un tu$o colocar = ml de soluci&n @ra$Lin.
•
Homogeneiar $ien la muestra) tomar 20 ul de sangre) * de"ositarlo en el tu$o con @ra$Lin) meclar.
•
@ear en re"oso "or0 minutos.
•
6eer en a$sor$ancia con 'iltro +erde & a =B0 mm. 6le+ando a 0 el 'ot&metro con agua destilada !& $lanco de reacti+o#.
RES'L%ADOS : 6a lectura en a$sor$ancia del "ro$lema de$e ser com"arada en la cur+a "atr&n "ara encontrar a que concentraci&n de hemoglo$ina corres"onde e("res%ndose en grN00 ml
*ALORES NORMALES: Hom1res
: @"7 6 @ r B @55 ml
M,+eres
: @@"7 6 @<"4 r B @55 ml
%I#OS :
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H$ A
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: de del adulto.
H$ A2 : +ariante +ariante del adulto. adulto. H$ F
: 'etal.
H$ A2 * 'etal 'etal se "uede hallar hallar menos de B< en sangre sangre "eri',ric "eri',rica. a. H$ F
B<: B<: hemat hematíes íes en en diana diana !tar !target get cells# cells#)) talas talasemí emíaa ma*or ma*or & anemi anemiaa de Cool Coole* e*..
H$ A2 B< : 7alasemía minor. H$ S
: sicLl sicLlee cell cells: s: anem anemia ia dre"ano dre"anocit citica ica & de c,lula c,lulass 'alci 'alci'orm 'ormes. es.
SIGNIFI&A&ION &LINI&A: El cuadro m%s comúnmente relacionado con la disminuci&n de hemoglo$ina s,rica es la anemia. Esta "atología) "or de'inici&n) im"lica una reducci&n "or de$ao de lo normal no rmal en el número n úmero de gl&$ulos roos) en la cantidad ca ntidad de hemoglo$ina * en el +olumen glo$ular. 6a ",rdida de hemoglo$ina * consecuente disminuci&n de la ca"acidad de trans"orte de o(ígeno en la sangre) son los rasgos características del cuadro clínico * constitu*en las $ases "atol&gicas "ara la ma*oría de los síntomas * signos que se "resentan !tales como disnea) taquicardia) de$ilidad#. de$ ilidad#. En la ma*oría de los casos la anemia ocurre como signo o com"licaci&n de otra en'ermedad) a +eces no relacionada con trastornos en el sistema sanguíneo) como alteraciones he"%ticas o renales) in'ecciones) etc. /or lo tanto) el hallago de ni+eles disminuidos de hemoglo$ina s,rica de$e conducir a una cuidadosa $úsqueda de la "atología causal. E(isten situaciones en las que) "or el contrario) la concentraci&n de hemoglo$ina se encuentra anormalmente ele+ada de$ido a una su"er"roducci&n de gl&$ulos roos. Este trastorno "uede ser "rimario) como en el caso de la "olicitemia +era) o secundario a ciertos tumores renales u o+%ricos) he"atomas) hidrone'rosis. 6a única condici&n natural * 'isiol&gica que a'ecta a los ni+eles de hemoglo$ina es la altitud) altitud) "uesto que 'rente a $aas "resiones de o(ígeno atmos',rico se "roduce una com"ensaci&n mediante el incremento en el número de gl&$ulos roos *) "or ende) en la concentraci&n de hemoglo$ina circulante. En general) de$e tenerse en cuenta que un aumento e(cesi+o de la concentraci&n li$re en la sangre) "roduce e'ectos t&(icos so$re los tú$ulos renales que "uede conducir da1o renal se+ero.
Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
San Fernando 202
El hemograma de Schilling
Hematología Clínica.
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Hematología Clínica.
FASE ANAL$%I&A DEL HEMOGRAMA DE S&HILLING" S&HILLI NG" #R'E(AS &'AN%I%A &'AN%I %A%I* %I*AS" AS" RE&'EN%O DE GLO('LOS ROCOS" 6a sangre se dilu*e en un líquido que nos "ermite o$ser+ar claramente los hematíes) luego esta diluci&n se coloca en una c%mara de 4eu$auer con la a*uda de una "i"eta autom%tica o "i"eta /asteur * se cuentan en el microsco"io a un o$eti+o de B0( "ara calcular el número de gl&$ulos roos "or mm>.
E,ipos J icrosco"io.
J Hemocit&metro !c%mara de 4eu$auer#.
MA%ERIALES REA&%I*OS RE2'ERIDOS • •
/i"eta de gl&$ulos roos !@e 7homa# o "i"eta autom%tica !de 0J00 m6#. /resenta cerca del e(tremo su"erior una marca de 0) inmediatamente continúa una dilataci&n !$ul$o# que contiene una "erla roa mecladora) luego sigue el tallo !e(tremo m%s largo#) el cual est% di+idido en 0 "artes con 2 marcas: aca$ando el $ul$o * 0)= a la mitad del tallo. Se requiere igual que el recuento
• • •
de leucocitos una $oquilla "ara as"irar. @ilu*ente de gl&$ulos roos: Cloruro de Sodio al 0)< &. @ilu*ente de Ha*em. Ha*em. Contador manual !s&lo si 'uera necesario#. /a"el 'iltro.
#RO&EDIMIEN%O •
eclar la sangre o$tenida con el anticoagulante o tomar sangre ca"ilar. 6lenar la "i"eta de gl&$ulos roos con sangre hasta la marca de 0)= "ara realiar una diluci&n de N200) *
•
si se carga hasta ) la diluci&n ser% N00. 6im"iar la "unta con gasa o "a"el a$sor$ente. 3ntroducir la "i"eta en el tu$o o 'rasquito conteniendo dilu*ente !Ha*em# * llenar de líquido de diluci&n
•
hasta la marca de 0. Se coloca en un rotador autom%tico o se hace rotar manualmente de 2 a > minutos.
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•
•
Agitar $ien la "i"eta * descartar > a B
gotas
tallo) luego colocar una gota "eque1a
cerca de un
e(tremo de la c%mara "ara que "or
ca"ilaridad
se llene e(actamente. Hacer el recuento con o$eti+o de B0(.
Se
"uede
realiar con la "i"eta autom%tica) se toma
20
m6
!0)02m6#
• •
•
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de
sangre
total
del
con
anticoagulante) o sangre ca"ilar * se
de"osita en
un tu$o de 2 ( ;= que contenga B m6 de
soluci&n de
Ha*em !aquí se tiene una diluci&n de
:200#.
dea re"osar a"ro(imadamente = minutos
* se "rocede
a cargar la c%mara con la misma "i"eta
usando
un
nue+o ti". El incon+eniente aquí es el
gasto
de
reacti+o !B m6# "ero las medidas son @ear en re"oso "or > minutos. En'ocar la cuadrícula a 0() luego con el
mas e(actas.
B0( contar so$re el cuadrado grande
central de la
c%mara
"eque1os:
s&lo
en
=
Se
o$eti+o de
cuadrados
uno central * cuatro angulares !D0
cuadraditos
en total#. En el recuento se inclu*en las c,lulas
que cu$ren
o tocan "or dentro o "or 'uera las
líneas
limitantes su"erior e iquierda en el
cuadrado
"eque1o de recuento * no se
consideran
los corres"ondientes a los límites in'erior * derecho. Se hace el recuento en los "untos A9C@ * E * se sigue los mismos "ar%metros del recuento de leucocitos.
RES'L%ADOS 4K de hematíes ( mm> P
hematíes contados en = cuadrados "eque1os Altura ( diluci&n %rea
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Reem"laando P hematíes contados en = cuadrados "eque1os N0 ( N200 ( N= P hematíes contados en = cuadrados "eque1os N0 000 P hematíes contados ( 0 000
*ALORES DE REFEREN&IA !nidades tradicionales millones de c,lulasNmm>#. Hom$res
B =00 000 J = =00 000
ueres
B 000 000 J = 000 000
4i1os !B a1os#
B 200 000 J = 200 000
6actantes ! J meses#
> D00 000 J = 200 000
Reci,n nacidos
= 000 000 J 000 000
Fuente: anual de t,cnicas $%sicas "ara un la$oratorio de salud. O/S) 4K 2.
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FASE ANAL$%I&A DEL HEMOGRAMA DE S&HILLING" #R'E(AS &'AN%I%A%I*AS" RE&'EN%O DE GLO('LOS (LAN&OS6 LE'&O&I%OS: 6a sangre anticoagulada se de"osita en un líquido !7RI# que "ermite e+idenciar los leucocitos !los núcleos son coloreados "or el aul de metileno "resente en el reacti+o#) manteni,ndolos +isi$les) mientras que los eritrocitos son hemoliados "or el acido ac,tico. El recuento del número de leucocitos o gl&$ulos $lancos se e("resa "or mm> !milímetro cú$ico#. uestra
:
Materiales
:
Sangre +enosa anticoagulada con E@7A al 0 <
/i"eta de 8l&$ulos 9lancos
/i"eta Autom%tica de 20 ul.
C%mara de 4eT$auer
Cont&metro
7u$o de 6ate( !/i"eteador#
E,ipos
:
icrosco"io O"tico
Reacti.os
Agitar de /i"etas de 8l&$ulo 9lancos.
:
Anticoagulante E@7A !0<# "ara la sangre +enosa Soluci&n dilu*ente de 8l&$ulos 9lancos !Reacti+o de 7urL#.
#RO&EDIMIEN%O I: !/i"eta de 8l&$ulos 9lancos J c%mara 4eT$auer# . As"irar sangre +enosa anticoagulada hasta la marca 0.= !/i"eta de 8l&$ulo 9lancos#) luego com"letas el llenado de la "i"eta hasta la marca con el dilu*ente de 8l&$ulos 9lancos !7urL#. Se o$tiene @iluci&n N20. 2. Colocarlo en el agitador de "i"etas "or U a >U !tam$i,n se "uede agitar con la mano durante V#. >. /re"arar la c%mara de 4eT$auer con su l%minilla. B. @escartar > a B gotas) "ara luego colocar una gota al lado de la c%mara entre esta * la l%minilla * dear en re"oso "or >V.
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=. En'ocar la cuadricula en el microsco"io * con el o$eto de 0( & 20( contar los cuatro cuadrados grandes angulares. El recuento inclu*e las c,lulas que cu$ren o tocan "or dentro o "or 'uera de las líneas limitantes su"erior e iquierda en el cuadrado grande de recuento * no se considera las corres"ondientes a los límites in'erior * derecho.
#RO&EDIMIEN%O II 7u$o de "rue$a 2 ( ;= J C%mara 4eT$auer# . 2. >. 4"
Colocar 0.B ml de @ilu*ente de 8l&$ulo 9lancos en un tu$o 2 ( ;=. Con la "i"eta autom%tica) tomar 20 ul de sangre +enosa * meclarlo con la Sol de 8l&$ulo 9lancos. Hemogeniar * dear en re"oso "or unos minutos. @es"u,s del re"oso hemogeniar nue+amente el tu$o * con la "i"eta de 20 ul cargar la c%mara de
Ne1a,er * realiar el conteo res"ecti+o descrito en el /rocedimiento 3" LE&%'RA 6a lectura se realia en los cam"os ) >) ; * como est% indicado en la 'igura. Adem%s de los leucocitos contados dentro
de cada
uno de los cuadrantes) se de$en contar todos los leucocitos que
se
encuentren adheridos en la línea horiontal su"erior * +ertical e(terior) o de lo contrario) todos los leucocitos) adheridos a la
línea
horiontal in'erior * +ertical interior.
Res,ltados: N de Le,cocitos - mm P
8.9 Contados en B cuadrantes Area contada ( Altura de c%mara ( @iluci&n de uestra
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P 8. 9 Contados B ( N0 W N20 P
8. 9 Contados BN200
*alores Normales: De 7555 J @5555 B mm &orrección de Le,cocitos Hematíes N,cleados 6 Le,cocitosK Si ha* 8l&$ulos Roos nucleados) el recuento de 8l&$ulo 9lancos de$e de corregirse. @e$ido a que el @ilu*ente de 8l&$ulo 9lancos !7urcL# no lisa los Hematíes 4ucleados. Se de$e usar la siguiente '&rmula:
E+emplo:
Gló1,los (lancos O1ser."
3
5555
H"N" B @55 G" ("
3
58
R"G"("&
3
5555 - @55B@5
R"G"("&
3
5;5
Le,cocitos B mm
Interpretación &línica: aK
Le,cocitos Fisiolóico :
Suele ser de grado discreto) s, característica "or "ersistencia de Eosin&'ilos) ausente des+iaci&n iquierda *
'alta de alteraciones t&(icas en los neutr&'ilos. M
Se "uede o$ser+ar en los reci,n nacidos !2=)000 o m%s#.
M
En los ni1os !2)000 a B)000#
M
Al 'inal del em$arao * "eriodo /ostJ"arto) que se normalia en la 2da * >era semana.
M
6eucocitosis en es'uero "rolongada o +iolento.
M
Color e(tremo * altura) etc.
1K
Le,cocitos Infecciosa:
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Es la m%s 'recuente * se caracteria "or una disminuci&n de Eosino'ilos) "resencia de des+iaci&n iquierda
en 4eutr&'ilos) "or eem"lo en in'ecciones /i&genas) 5íricas) "or RicLetsias en com"licaciones s,"ticas) etc.
cK
Le,cocitosis no Infecciosas:
Se o$ser+a en el dolor intenso !"or irritaci&n sim"%tica#.
M
/ost Hemorr%gica transitoria) "or síntomas motores !con+ulsiones) Eclam"sia#.
M
Xuemaduras e(tensas) en síndromes "osto"eratorios.
M
4ecrosis tisulares as,"ticas !3n'arto) 3leo) 4eo"lasias#.
M
En'ermedades del meta$olismo ! 8ota) Acidosis) dia$,tica) como ur,mico * dia$,tico#.
M
Endocrino"atías !7etania#
7&(icas !@rogas como Fenilhidrainas) clorato) /otasio) etc.#.
M
Sales de "lomo) ercurio * Ars,nico.
M
3nto(icaciones "or O(ido de Car$ono.
M
Hemo"atías !Anemia /erniciosa) Hemolítica) /olicitemia) etc.#.
M
Reacciones 6eucemoides !m%s de >0)000#.
M
ononucleosis 3n'ecciosa.
M
6in'ocitosis Aguda 9enigna.
M
Agranulositosis.
M
3n'ecciones) etc.
dK
Le,copenias :
M
6euco"enia constitucional que es mu* rara) digesti+a: /ost Y /randial en.
/acientes +egetales l%$iles. M
6euco"enia in'ecciosa "or +irus) /rotooos) Fie$re 7i'oidea) 9rucella) Saram"i&n) 5aricela) etc.
M
6euco"enias t&(icas !9enol) etales "esados) sul'as) ostaas 4itrogenadas#.
M
@eterminadas Hemotatías: Anemia A"l%sica) /ernniciosa) ieloma) etc.
M
A'ecciones Es"lenohe"%ticas de la m,dula &sea.
M
6euco"enia "os SchocL Ana'il%ctico) "or radiaciones.
M
En'ermedades endocrinol&gicas !i(edema) $aseJdoT#.
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M
Hematología Clínica.
En 6u"us E.S.) 4eo"lasias) E"ile"sia antes * durante las crisis"
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#LA2'E%AS Son "eque1os cuer"os incoloros de re'ringencia moderada) * de 'orma "or lo general es',rica) o+al o $acili'orme.
%AMAO : El di%metro de las "laquetas suele estar com"rendido entre 2 a B u. Su +olumen medio es de ; a D u>. A +eces suele +erse "laquetas grandes !"laquetas de 'orma 9iarra#. Estas se de$en "articularmente cuando e(iste una Acti+a Regeneraci&n Sanguínea) llegando en algunos casos a tener 2= a >0 u de longitud.
ORIGEN F'N&ION ES%R'&%'RA:
Su origen +iene a "artir de la m,dula &sea) "or intermedio de una c,lula "rogenitora común con el resto de las c,lulas mieloides. El /roJ megacario$lasto es la c,lula "recursora del egacario$lasto) quien no tiene identi'icaci&n mor'ol&gica "recisa) "ero se sa$e que es el único estadio e+oluti+o del egacariocito. Esta c,lula "uede "resentar una mitosis com"leta * otra incom"leta. Em"eando en ,sta c,lula la 'ormaci&n de las "laquetas. 6as "laquetas se des"renden del cito"lasma de los megacariociotos adultos "asando así a la sangre "eri',rica. Eerciendo una im"ortante 'unci&n en los di'erentes mecanismo de coagulaci&n * hemostasia. En las "laquetas se delimitan claramente 2 onas: na Central) donde se dis"onen las granulaciones aur&'ilas denominada Cron&mero) * otra ona /eri',rica) hialina e incolora que se conoce como Hial&mero.
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6os gr%nulos es"ecí'icos de las "laquetas son los gr%nulos en Oo de 9ue*) de identi'icaci&n e(clusi+amente ultraestructural) tam$i,n denominados 8r%nulos Al'a) conteniendo > ti"os de "roteínas: A# Factor #la,etario 4: Factor /laquetario de crecimiento de 'i$ro$lastos !/@8F#. 9# Fi1rinóeno : Factor 5 * 'actor 5333 N 5on ille$rand. C# #roteínas como la 7rom$os"ondina) Fi$ronectina) Al$úmina) Al'aJJAntitri"sina * Al'aJ2Jacroglo$ulina. n segundo ti"o de gr%nulos de identi'icaci&n tam$i,n su$microsc&"ica) son los cuer"os densos que contienen Calcio) Serotonina) A@/ * A7/. Así mismo contiene tam$i,n gran cantidad de enimas de localiaci&n lisos&mica !Fos'atasa Acida) 9etaglucuronidasa) Arilsul'atasa) 4JacetilJ$etaglucosaminidasa.
73E/O @E SO9RE53@A: 6as "laquetas "ermanecen en la sangre "eri'erica D a 2 días) des"u,s de los cuales se destru*en en el 9ao "or las c,lulas del sistema mononuclear 'agocítico.
AS/EC7OS ORFO6O833COS E4 SA48RE /ER3FER3CA: En el 'rotis de sangre "eri',rica se o$ser+an con 'recuencia en aglomerados) de$ido a su gran ca"acidad de agregaci&n. Al ser o$ser+ados en el microsco"io) se les +e como "eque1os cuer"os incoloros de re'ringencia moderada * de 'orma "or lo general es',rica) o+al o $acili'orme. 7ienen un contorno "eri',rico neto. A"arentan "oseer algunos gr%nulos inm&+iles en el centro celular. Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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Otros "resentan +acuolas contr%ctiles) com tam$i,n microgr%nulos aur&'ilos en su cito"lasma. Estos gr%nulos en algunas "laquetas "ueden estar aglomerados en su "arte central de la c,lula "laquetaria adquiriendo un as"ecto de núcleo. Ra&n "or lo cual al ser o$ser+adas microsc&"icamente "ueden "resentar una +ariada mor'ología: 'orma de cam"ana) maa india. En 'orma de coma) cigarro * en otras +ariantes no comunes.
RECE47O @E /6AXE7AS: Se conocen > m,todos comunes de realiar un recuento de "laquetas) am$as requieren en sí mucho cuidado en el "rocedimiento del conteo total. n adecuado criterio * conocimiento t,cnico de tra$ao nos "ermitir% o$tener un resultado casi e(acto * +erdadero.
. ME%ODO DIRE&%O EN &AMARAK
(RE&HER &RONI%E M'ES%RA
:
Sangre +enenosa o$tenida con anticoagulante
ED%A 7ri"ot%sico. REA&%I*OS
:
MA%ERIALES
: −
OPALA%O DE AMONIO AL @ 8"
MICROPIPETAS DE 20 ul y 400 ul.
−
T!OS DE P"ASTICO.
−
CAMARA HMEDA.
−
P#TAS DE MICROPIPETAS.
−
CO#TOMETRO.
−
$RADI""A.
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Hematología Clínica. CAMARA DE #E%!AER.
E2'I#OS
: MICROSCOPIO OPTICO .
/ROCE@33E47O : # Homogeniar $ien la sangre de sangre anticoagulada !la que se usa "ara hemograma# 2# En un tu$o de "l%stico hacer una diluci&n N20 de sangre con dilu*ente. ># Homogeniar la mecla * dear re"osar "or es"acio de 0 minutos !"ara "ermitir la lisis de los gl&$ulos roos# B# Cargar en am$os lados de la c%mara de 4eT$auer la muestra diluida * dearla re"osar en la cama húmeda "or es"acio de 0 minutos. =# E'ectuar el conteo de las "laquetas en un aumento de B0 ( 0 !las "laquetas se o$ser+an como estructura discoides) re'ringentes#) de$e de contarse en = cuadrantes del retículo de 7HOA !ona del recuento de los hemati,s#. # /romediar el recuento de las "laquetas en am$os lados de la c%mara. ;# ulti"licar "or 000 "ar o$tener el número de "laquetas "or mm>.
*ALORES NORMALES : @75"555
6
475"55Bmm
2. ME%ODO DIRE&%O EN &AMARAK Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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M'ES%RA
:
Hematología Clínica.
Sangre +enenosa o$tenida con Citrato de sodio al >.D <
como anticoagulante.
REA&%I*O
:
Soluci&n dilu*ente "ara recuento de "laquetas. Citrato de sodio al >.D <.
MA%ERIALES
: −
E2'I#OS
Pi&e'a( de $l)*ulo( !lanco(.
−
C+mara de #e,*auer.
−
$radilla &ara Tu*o(.
−
Tu*o( de Pl+('ico.
: −
Micro(co&io O&'ico.
/ROCE@33E47O : # E(traer B.= cc de sangre en un tu$o que contenga 0.= cc de Citrato de Sodio al >.D <. 2# @ear re"osar "or >0 minutos. ># @el "lasma so$renadante tomar 0.= ml con la "i"eta de gl&$ulos $lancos. B# Com"letar la "i"eta con la soluci&n dilu*ente. =# Agitar * cargar la c%mara 4eT$auer. # @ear re"osar unos minutos. ;# 6eer los = cuadros centrales de la c%mara "ara gl&$ulos roos.
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RES'L%ADOS : Rcto" #la,etas B mm 3 N - 777 - Hto"B@55 N P #-mero de Plaue'a( con'ada( en lo( / cuadro(.
*ALORES NORMALES : @75"55 6 75"555B mm
>. ME%ODO DIRE&%O EN LAMINA #OR%AO(CE%OK
DAME&HE& M'ES%RA
:
na gota de sangre +enenosa o arterial !anticoagulada con E@7A al 0 <#.
REA&%I*O
:
Colorante right J 8iensa.
MA%ERIALES:
E2'I#OS
:
−
"+mina Por'a o*e'o.
−
"+mina E1'en(ora Por'a o*e'o3.
icrosco"io O"tico.
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#RO&EDIMIEN%O : #
Realiar un adecuado e(tendido de l%mina * colorearlo con right J 8iensa * "roceder a la lectura.
2#
Se lee el número total de "laquetas en cam"os de 00 hematíes con un total de 0 cam"os.
RES'L%ADOS :
N de #la,etas - Hto" Q Factor & - @5
N3
4úmero de /laquetas contadas en 0 cam"os.
&3
@e"endiendo del +alor del Hematocrito: −
enor a >= < agregar al Hto.
=.
−
@e > < a > < agregar al Hto. >.
−
@e B0 < a B2 < agregar al Hto. .
−
a*or de B2 < no se agrega nada.
O(SER*A&IONES : @e$emos tener en cuenta que al mantener a las "laquetas "or un tiem"o "rolongado * "re"arados húmedos o en com"onentes sanguíneos con E@7A * O(alatosQ las "laquetas se modi'icar%n mor'ol&gicamente 'ormando entre sí "rolongaciones es"inosas * 'ilamentosasQ en 'orma 'lagelada * en 'orma de 7ri"anosomas) mu* aenas a su as"ecto mor'ol&gico normal. E(isten a +eces) una Zseudotrom$o"enia[ en las ci'ras registradas con los modernos a"aratos automatiados. Esto se de$e a una aglutinaci&n arti'icial en grumos de las
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"laquetas) o su adherencia en rosetas a los neutr&'ilos) "or sangre recogida con E@7AQ en la duda con+iene "roceder a un recuento 'inal utiliando las t,cnicas de sangre ca"ilar.
347ER/RE7AC3O4 C6343CA
•
%ROM(O&I%OSIS : Se o$ser+a en anemia "os. Hemorr%gica) algunas in'ecciones agudas !Escarlata) ononucleosis 3n'eccciosa)
4eumonía) Se"ticemia) C&lera) etc.#
En 6eucemia ieloide Cr&nica) /olicitemia 5era) En'ermedad de HodgLing. @es"u,s de la Es"lenoctomía
!"asaera#) "or Adrenalina) en la Agonía) Cardio"atías
5al+ulares con gran disnea) etc.
•
%ROM(O&I%O#ENIA : Se o$ser+a 7rom$ocito"enia "rimaria en la en'ermedad de erlo' !/73#. En la 7rom$ocito"enia secundaria se o$ser+a en una serie de en'ermedades como: 3n'ecciosas en casos
gra+es) Se"sis) Fie$re 7i'oidea) 5iruela) Saram"i&n.
En com"licaciones t&(icas con 9enol) Al,rgicas en casos
de
Hi"ersensi$ilidad
Cong,nita o adquirida !9elladona) Acido Salicilico) /icadura de 3nsectos) etc. En mielo"atías !com"licaciones medulares) 6eucemias) Carcinomatosis) @i'usa en .O.) ieloma últi"le * otras 4eo"lasías con des"laamiento de ,dula Osea. Se o$ser+a tam$i,n trom$ocito"enia en radiaciones) etc. Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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Hematología Clínica.
IN%ROD'&&ION
El estudio citol&gico de los elementos celulares de la sangre "eri',rica: seria roa * serie roa * serie $lanca) serie "laquetaria. Constitu*e una gran im"ortancia en el diagn&stico "atol&gico que "ueda tener un "aciente al mani'estar su malestar o dolencia org%nica. /or tanto) el tra$ao que realiamos en el la$oratorio Stat) nos com"rende en contri$uir al ,(ito satis'actorio de un $uen tratamiento que se "ueda lograr a 'a+or del "aciente. 4uestra res"onsa$ilidad es mu* grande * delicada) de$ido al ti"o de "acientes que concurren al 3nstituto de En'ermedades 4eo"l%sticas con la es"erana de encontrar una soluci&n a su com"rometida salud) ante el mal neo"l%stico que "uedan tener cada uno de ellos. Siendo el la$oratorio Stat) un ser+icio estrat,gico) donde los e(%menes Hematol&gico) nos e(igen a cada uno de nosotros: Conocimiento) cuidado) criterio) res"onsa$ilidad) etc. Es im"ortante considerar que nuestra línea de tra$ao diario de$e de coincidir $%sicamente: ZEN 'N MISMO &RI%ERIO DE %RA(ACO?) en lo acad,mico * en el "rocedimiento t,cnico diario de tra$ao) que de lograrlo) ha$remos alcanado algo nue+o * $ueno) "ara nuestra "ro"ia satis'acci&n "ro'esional. /or ultimo) "rocuremos hacer un ,n'asis en lo que no se de$e hacer * lo que de$e recordarse de modo es"ecial desde el "unto de +ista "r%ctico) en nuestra *a dilatada e("erienciaQ de$emos de a"render mucho de nuestros errores "ro"ios) así como de las equi+ocaciones m%s 'recuentes que tengamos.
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Recordemos "or tanto lo $ueno que "odamos hacer en la "r%ctica diaria) de nuestro tra$ao) "ara $ien) de nuestro "r&imo.
I" FORM'LA LE'&O&I%ARIA" E-amen de la Sanre #erifricasK El e(amen mor'ol&gico de la sangre "eri',rica com"rende un estudio com"leto de la sangre "eri',rica que com"rende a la serie 9lanca) Roa * /laquetaria. \ todo esto en su conunto) es la "rue$a de la$oratorio m%s útil en el diagn&stico hemetol&gico. En manos e("ertas) esta e("loraci&n "ro"orciona in'ormaci&n +aliosísima so$re 1a dolencia que se in+estiga) * a menudo es diagn&stico "or sí misma. Aquí se consideran a la serie Roa) 9lanca * /laquetaria.
. Serie (lanca: Se denomina tam$i,n 8l&$ulos 9lancos) o 6eucocitos. Se encuentra normalmente en sangre "eri',rica * 'orman > ti"os de gru"o: !4eutr&'ilos) 9as&'ilos * Eosin&'ilos#) 6in'ocitos * onocitos. El recuento "orcentual de los distintos ti"os de 6eucocitos constitu*e la denominada ZForma 6eucocitaria[. En la '&rmula leucocitaria los 8l&$ulos 9lancos "resentan sus "ro"ias características de acuerdo a su línea de maduraci&n * a su res"ecti+a 'unci&n de de'ensa en nuestro organismo. 6a serie 9lanca com"rende B líneas de maduraci&n "eri',rica standar. 6os cuales son: # #olimorfon,cleares : 7ienen de 0 a 2 mm. @e di%metro. Su núcleo es /olilo$ulado * est% 'ormado "or una cromatina densa. El cito"lasma es ligeramente acid&'ilo * contiene granulaci&n neutro'ila : !4eutr&'ilos#) $aso'ilia !9as&'ilos# Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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eosin&'ilia !Eosin&'ilos#. 6os "recursores de los "olimor'onucleares son los siguientes : ielo$lastos) /romielocitos) ielocitos * etamielocitos. Estos se hallan normalmente tan s&lo en la m,dula Osea. Se llaman ca*ados $andas o neutr&'ilos) no segmentados a las c,lulas que "roceden a los /olimor'onucleares en este desarrollo madurati+o. En los granulocitos) en casos "atol&gicos) es mu* notorio * 'undamental conocer las 2 únicas alteraciones de estas c,lulas en dos grandes gru"os:
Alteraciones n,cleares = Alteraciones del citoplasma"
Anomalía
Descripción
Morfoloía
I" Alteraciones n,cleares: Anomalía &onstit,cional
6eucocitos
del #eler H,ert
ausencia
con de
relati+a
segmentaci&n.
Xueda con'igurado en 'orma de $anda o en 2 segmentos. #-cleo( en anillado
Hi"osegmentaci&n nuclear con un gran aguero central !'orma de donut#
Hi&r(egmen'aci)n nuclear
/olinucleares con B o m%s segmentos
Peocanoci'o
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Hi"ersegmentaci&n
nuclear San Fernando 202
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Hematología Clínica. m%s gigantismo celular
II" Alteraciones del citoplasma: Gran,lación to-ica
8ranulaci&n "rimaria que se ti1e de 'orma "ronunciada 4eutr&'ilo
De(granulaci)n
sin
granulaci&n
a"arece aulado * agranular Anomal5a de
8ranulaciones groseras color
Alder 6 Reilly
+ioleta
Anomal5a de
8r%nulos
S'ein*rinc7
inclusiones aules oscuras de
Chedia7 6 Higa(hi
a > um.
Cuer&o( de Dohle
3nclusiones
en
'orma
$as&'ilas
de
*
o+aladas o rectangulares !a('one( de Auer
Estructuras auro'ilas en 'orma de
$astoncillo)
de
"untas
a'iladas !en neutro'ilos * en $lastos#
2# Linfocitos : Son c,lulas mononucleadas) de tama1o com"rendido entre los ; * D um. El cito"lasma suele ser escaso en algunos) $as&'ilos de color aul claro * 'orma una 'ina $anda "erinuclear. /ueden tener granulaciones aur&'ilas en su cito"lasma. Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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Estas c,lulas en muchas "atologías hem%ticas tienden a +ariar su mor'ología * as"ecto celular: o$ser+ando muchas +ariantes como: •
6in'ocitos de 4úcleo hendido
•
6in'ocitos de 4úcleo cere$roide
•
6in'ocitos de As"ecto 7re+olado
•
6in'ocitos de As"ecto Com+ulotado
•
6in'ocitos de As"ecto indentado) etc. En la ma*oría de los "rocesos +írales agudos * cr&nicos) los lin'ocitos mantendr%n una característica celular "ro"iaQ que inclusos "ueden ser de as"ectos atí"icos) !en donde se "ueden o$ser+ar 6in'ocitos grandes de as"ecto monocitoide) de tama1o grande) hi"er$as&'ilosQ otros de cito"lasma e(tendido. !ononucleosis# $ien atí"icos. >. Monocitos : 7ienen de BB a 20 um. @e di%metro) su núcleo "uede ado"tar di+ersas 'ormas: Reni'orme) O+al) 6o$ulado) etc.# su cromatina es la(a e irregular. El cito"lasma es a$undante) de color gris "%lido) * contienen granulaciones aur&'ilas mu* 'inas) etc.
B. #la,etas !+er ca"ítulo 35#.
2. Serie Ro+a:
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Se denomina tam$i,n 8l&$ulos Roos) Eritrocitos o Hematíes. Son los elementos m%s maduros de la Hemato"o*esis. Su "rinci"al 'unci&n es la ca"taci&n de o(ígeno * su trans"orte a los teidos. 6a característica de estos elementos es que son anucleados !sin núcleo#) de color rosado * de 'orma redondeada u o+al) con una de"resi&n o ona m%s clara en el centro. Su tama1o normal es de ; um. @e di%metro * 2 um. @e es"esor. 6as características de su coloraci&n son de$idas a la riquea * distri$uci&n hemoglo$ínica de su interior) tam$i,n su tama1o * 'orma. 6as alteraciones de su 'orma * su contenido hemoglo$ínico de los elementos eritrocíticos de la sangre "eri',rica) tras su tinci&n "an&"tica !coloraci&n rirght J 8iensa# en onas correctamente e(tendidas en una l%mina "ortao$eto * si "osterior o$ser+aci&n en el microsco"io) es de gran utilidad en el diagn&stico de di+ersas hemo"atías. Actualmente se conocen cuatro gru"os de alteraciones de la serie Roa $ien de'inidas) * estos gru"os 'orman "arte de una s&lida $ase de 'undamentos * criterios standares en un $uen diagn&stico hematol&gico "eri',rico. Estos gru"os son los siguientes:
Anomalía
Descripción
Morfoloía
I" Alteraciones de tamao Anisocitosis
@esigualdad en el tama1o de los hematíes
Microci'o(i(
/redominio
de
hematíes
de
di%metro ] um * +olumen ]D0 Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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Hematología Clínica. 'l
Megaloci'o(i(
/redominio
de
hematíes
de
di%metro ^2 m * +olumen ^ 00 'l
II" Alteraciones de la forma poi,ilocitosisK : E(ui('oci'o(
Hematíes 'ragmentados de 2J> um
Dacrioci'o(
Hematíes con una "ro*ecci&n elongada en un "olo !'orma de "era) l%grima#
E(8eroci'o(
Hematíes de 'orma es',rica sin aclaramiento central
O9aloci'o(
Hematíes en 'orma de &+alo
Eli&'oci'o(
Hematíes en 'orma elí"tica
Dre&anoci'o(
Hematíes 'alci'ormes
Codoci'o( o
Hematíes con un %rea con ma*or
herma'5e( en diana
contenido de hemoglo$ina que se sitúa en la ona central clara
E('oma'oci'o(
Hematíes que en su regi&n central clara "oseen una hendidura en 'orma de $oca
Hematíes espic,lados:
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El hemograma de Schilling a) Equinocitos o hematíes crenados
Hematología Clínica. Hematíes con es"ículas cortas distri$uidas
regularmente
"or
toda la su"er'icie b) Keratocitos o hematíes en
/resentan dos "ro*ecciones en 'orma de es"ículas con 'orma de
casco
casco
o
de
som$rero
de
"olichinela c) Acantocitos o spur cells
Hematíes con "er'il dentellado * es"innoso con es"ículas !>J2 * de distinta longitud#
d) Excentrocitos
Hematíes
con
distri$uci&n
anormal de la hemoglo$ina. Se dis"one como des"egada de la "arte interna de la mem$rana * concentrada en uno de sus e(tremos
III"
Alteraciones de la
cola1oración de la !emolo1ina #olicromasia
Hematíes &+enes que conser+an "arte de material $as&'ilo del eritro$lasto * se ti1en de color gris
I*"
Incl,siones
eritrocitarias Cor&-(culo de
Cor"úsculos redondos únicos o
Ho,ell6:olly
múlti"les de um de di%metro de
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Hematología Clínica. color roo +iol%ceo 6ínea mu* 'ina en 'orma de
Anillo( de Ca*o'
anillo de color rosado Pun'eado *a()8ilo
Agru"ados de color aul gris%ceo
Cuer&o( de
8r%nulos aul negruco
Pa&&enheimer •
Re'iculoci'o(
•
Cuer&o( de hein;
Es',rulas aules !tinci&n +ital#
•
Sideroci'o(
8r%nulos +erdes !tinci&n /erts#
Par+(i'o(
3. Reacti.os
Anticoa,lante ED%A @5 8 : E( la (al Di&o'a(ica o Di(odica del Acido E'ilendiamino Tre'rac'ico.
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Mecanismo de acción : /or Xuelaci&n im"ide que se ionice el calcio eerciendo acci&n anticoagulante mu* intensa. O'rece $uen índice de conser+aci&n de los elementos de la sangre) en es"ecial de las "laquetas. Se una 0. ml de soluci&n al 0 < "ara = ml de sangre.
&olorante 0ri!t 6 GiensaK
•
2 grs. de colorante de right.
•
2 grs. de colorante de 8iensa.
•
Alcohol etanol 2 6trs.
•
>0.0 ml de 8licerina.
Sol,ciones : Sol,ción Dil,=ente de Gló1,los (lancos"
•
Acido Ac,tico J J J J J J J J J J J J
2ml.
•
Agua @estilada J J J J J J J J J J
00 cc.
•
Aul de etileno o J J J J J J J J J
J 0 gotas.
•
5ioleta de 8enciana.
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Solución de Hayens para Glóbulos Roos
•
Sul'ato de sodio J J J J J J J J J J J>> gr
•
Cloruro de sodio J J J J J J J J J J
0 grs.
•
enthiolate J J J J J J J J J J J J J
2= grs.
•
Agua @estilada J J J J J J J J J J J
)000 cc.
•
Austar a "H ;.0 con 4a OH 0. 4.
Sol,ción para Rec,ento de #la,etas" •
Citrato de sodio J J J J J J J J J J
>.0 gr.
•
Formol B0 < J J J J J J J J J J J J
.0 ml.
•
Agua @estilada J J J J J J J J J J J
00 cc.
∗
Di(ol9er< 8il'rar y re8rigerar< ha('a &or do( (emana(.
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FI(RINOGENO DEFINI&I)N:
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El 'i$rin&geno es una de las "roteínas m%s im"ortantes * constitu*e cerca del =< de dichas "roteínas. 6a "rue$a de 'i$rin&geno es de utilidad en la di'erenciaci&n de hemorragias "or "atología he"%tica * la causada "or el C3@.
F'NDAMEN%O: El 'i$rin&geno es una "roteína solu$le que se con+ierte "or acci&n de la trom$ina en un "olímero insolu$le resultando en la 'ormaci&n de un coagulo de 'i$rina. El tiem"o de coagulaci&n de trom$ina del "lasma diluido es in+ersamente "ro"orcional a la concentraci&n de 'i$rin&geno en el "lasma. sando este "rinci"io) Clauss desarroll& una "rue$a sim"le * cuantitati+a "ara terminar el 'i$rin&geno a tra+,s del tiem"o de coagulaci&n o$tenido con un "lasma diluido des"u,s de a1adir trom$ina en e(ceso. El tiem"o de coagulaci&n o$tenido se com"ara des"u,s de una cur+a de cali$raci&n de 'e$rin&geno.
ME%ODO: En la actualidad usamos !A!E "EHR#$G.
REA%I*OS:
Reacti+o de trom$ina @ade: na "ro"orci&n de trom$ina $o+ina lio'iliada * tam"onada.
Re'erencia "ara cali$raci&n de 'i$rin&geno @ade: "lasma humana citratada con al$úmina s,rica
7am"&n +eronal de OTren) @ade
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O(%EN&ION DE M'ES%RA
eclar "artes de sangre reci,n e(traída con una "arte de citrato s&dico al >.D<.
Centri'ugar la muestra durante un mínimo de 0 minutos a 000 r.".m. tan "ronto como sea "osi$le des"u,s de la e(tracci&n. Se recomienda realiar la "rue$a inmediatamente) o sino se"arar el "lasma del sedimento de hematíes * mantenerlo re'rigerado hasta el momento de su uso. /re"arar la cur+a de re'erencia "ara la cali$raci&n de 'i$rin&geno realiando las
@iluciones de := a :B0 con la re'erencia "ara cali$raci&n de 'i$rin&geno en tam"&n +eronal OTren de @ade. El ni+el equi+alente de 'i$rin&geno de cada diluci&n est%ndar de determina multi"licando el +alor de la re'erencia "ara cali$raci&n de 'i$rin&geno "or el 'actor de correcci&n. Re"resentar gr%'icamente los resultados de 'i$rin&geno de re'erencia en "a"el de logJlog con la concentraci&n de 'i$rin&geno en la a$scisa * el tiem"o en segundo en al ordenada. 6a uni&n de los "untos de$e "roducir una cur+a. @eterminar las concentraciones de 'i$rin&geno en mgNdl de la cur+a de cali$raci&n inter"olando el tiem"o de coagulaci&n o$tenido de las diluciones :0 del "lasma. /ara +alores de 'i$rin&geno su"eriores a D00 mgNdl: Si el tiem"o de coagulaci&n "ara algún "aciente es e(tremadamente corto) diluir el "lasma :20 en lugar de la diluci&n de :0. 6eer el nue+o +alor en la gr%'ica * multi"licar "or 2.
M'ES%RA DE #A&IEN%E
REA63GAC3O4 @E 6A /RE9A
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@iluir la muestra del "aciente :0 con tam"&n +eronal
#I#E%EAR EN 'N %'(O DE ENSAO IN&'(ADO A ;T& M,estra dil,ida @:@5
55 ,l
Incu*ar a =>?C. En *a@o Mar5a
R.o" De %rom1ina Dade
@55 ,l
Cronome'rar el 'iem&o de coagulaci)n
El c%lculo de los resultados de los an%lisis se "uede e'ectuar) so$re la cur+a de re'erencia "ro"ia. 4ota: 6a cur+a de cali$raci&n sola es +%lida mientras se utilice el mismo lote de reacti+o que se usa "ara realiar la cur+a. 4ue+as cur+as de$en realiarse con cada cam$io de lote de reacti+o o cualquier cam$io de instrumento.
&ON%ROL DE &ALIDAD: En cada serie de "rue$as se de$er% realiar un control normal como CiJ7rol) control de coagulaci&n) @ade) ni+el * un control anormal como el control anormal "ara 'i$rin&geno) @ade.
LIMI%A&IONES DEL ME%ODO:
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6os resultados contenidos "ueden ser a'ectados "or la "resencia de he"arina o de "roductos de 'i$rin&geno en el "lasma del "aciente. 4i+eles signi'icati+os de una de estas sustancias "ueden causar que la "rue$a indique +alores $aos 'alsos.
*ALORES NORMALES: Adultos
%&' a ('' m*dl
Ancianos
+,' a +- m*dl
$i/os0 Reci1n nacido %' a ('' m*dl 2ayor
3'' a +'' m*dl
El inter+alo normal "ara adulto a"arentemente ser% esta$lecido "or Dade !ehring usando el m,todo descrito es de 200 Y B00 mgNdl. Cada la$oratorio de$er% determinar su inter+alo normal tomando una muestra re"resentati+a de la "o$laci&n) *a que los +alores normales "ueden +ariar de un la$oratorio a otro.
FISIOLOGIA El 'i$rin&geno es una de las "roteínas "lasm%ticas m%s im"ortantes * constitu*e cerca del =< de dichas "roteínas. na +e que ha ocurrido la coagulaci&n) +irtualmente todo el 'i$rin&geno se ha retirado del "lasma. El 'i$rin&geno se "roduce en el hígado mediante lo que de$e ser un "roceso e(tremadamente e'iciente de$ido a que es "oco común o$ser+a disminuciones que se "resentan rara +e son in'eriores a 00 mgNdl. Estas "roteínas "lasm%ticas solu$les se con+ierten "or la acci&n de la trom$ina) en la "resencia de calcio * del 'actor 533 !'actor esta$iliador de la 'i$rina#) a la 'i$rina que es una mol,cula "roteica insolu$le. 6os ","tidos !A \ 9# que se se"aran de la mol,cula de 'i$rin&geno en este "roceso son reacti+os de 'ase aguda que res"onde a la in'lamaci&n) lo cual esta$lece una 'unci&n Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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do$le del 'i$rin&geno en el cuer"o) es decir en la coagulaci&n * en la se"araci&n in'lamatoria. @es"u,s) la mol,cula de 'i$rina 'orma largos 'ilamentos que se entreteen * dan lugar al coagulo) el cal atra"a a las c,lulas sanguíneas.
F3S3O/A7O6O83A 6as de'iciencias de 'i$rin&geno "ueden ser cong,nitas o adquiridasQ su resultado "uede ser: . A'i$rinogenemia) 'i$rin&geno no mensura$le 2. Hi"o'i$rinogenemia) 'i$rin&geno "resente) "ero en cantidades menores de 00 mgNdl. >. @is'i$rinogenemia) disminuci&n de la 'unci&n del 'i$rin&geno !que se mide en su reacci&n a la trom$ina) aunque est, "resente en cantidades normales medici&n inmunol&gica#. 6as de'iciencias adquiridas son resultados de trastornos de'icientes s&lo en 'i$rin&geno "ero) "or otro lado) con "rocoagulantes normales) son menos gra+es que los síntomas de "acientes con de'iciencias de uno de los dem%s "rocoagulantes. En consecuencia) la hemorragia que tiene lugar con muchas de'iciencias cong,nitas de 'i$rin&geno no suele "oner en "eligro la +ida) de$ido a que ,stas suelen ser unas de'iciencias aisladas de 'i$rin&geno) los cuales sin em$argo) son "oco 'recuentes en los trastornos hemorr%gicos adquiridos !Henr*) #.
LAS &ON&EN%RA&IONES DE FI(RINOGENO A'MEN%AN EN: . El anciano: Es una res"uesta 'isiol&gica) cu*o "ro"&sito es incierto. 2. Res"uesta a estímulos ines"ecí'icos !"or eem"lo) traumatismo) neo"lasias) hemorragia# Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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LAS &ON&EN%RA&IONES DE FI(RINOGENO DISNIN'EN EN: . 7rastornos de coagulaci&n intra+ascular son consumo e(cesi+o de la "roducci&n) la m%s común es la coagulaci&n intra+ascular diseminada !C3@#) que se "roduce secundariamente a las com"licaciones del em$arao como: a. A$orto di'erido !muerte 'etal intrauterina tiem"o atr%s#. $. Se"araci&n "rematura de la "lacenta. c. Em$olia del líquido amni&tico des"u,s de la administraci&n de o(itocina !se cree que todas las anteriores se de$en a la li$eraci&n de sustancias "arecidas a la trom$o"lastina) "ro+eniente de la "lacenta * del liquido amni&tico hacia la circulaci&n#. 2. C3@ secundario a otros trastornos !,stos se "resentan con ma*or 'recuencia "ara el C3@ relacionado con el em$arao# como en: a. C%ncer "rost%tico con met%stasis) de la cual se cree que "roduce un acti+ador de 'i$rolisina !"lasmin&geno#. $. Se"ticemia. c. Choque quirúrgico * "osto"eratorio. d. Cirugía de deri+aci&n "ostcardiaca. e. 7rom$osis masi+a >. En'ermedad he"%tica !cirrosis) he"atitis#) de$ido a una menor "roducci&n la cual "or lo general no es e+idente en clínica) a menos que se acom"a1e de de'iciencias de otros 'actores que "ueden causar signos * síntomas clínicos. B. 7rastornos que "ro+ocan ma*ores concentraciones de 'i$rinolisinas !enima que destru*en 'i$rin&genos# * 'i$rin&lisis acti+a como:
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a. C%ncer a la "r&stata con met%stasis $. @es"u,s de cirugía tor%cica =. @e'iciencias cong,nitas) en tanto que los otros 'actores de coagulaci&n son normales.
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DIMERO D #$4R5!677#5$
6a 'ormaci&n del coagulo sir+e "ara interrum"ir la ",rdida de sangre "or un +aso lesionado) "ero en de'initi+a) dicho coagulo de$e ser eliminado "ara que se resta$leca el 'luo sanguíneo. Su disoluci&n se "roduce merced a la acci&n del sistema 'i$rinolítico. 6a enima "lasmina +a rom"iendo secuencialmente una serie de "uentes en las mol,culas de 'i$rina. 6i$erando "roductos de degradaci&n de la 'i$rina ! /@F# de naturalea "e"tídica * "roduciendo la lisis del coagulo. Estos 'ragmentos terminales característicos
es el
com"uesto de dos 'racciones @ * una 'racci&n E !'ragmento Z @2E[#) que se denomina @3ERO @. 6os /@F "roducidos en la 'i$rinolisis "oseen "or si mismo e'ectos anticoagulantes) inhi$iendo la "olimeriaci&n de la 'i$rina * la acti+idad enim%tica de algunas enimas Anticoagulantes so$re todo la trom$ina. 6a mol,cula de 'i$rin&geno est% com"uesta originalmente "or dos onas en los e(tremos de la misma conocidas como @Jdominio) una central llamada EJdominio) * dos "ares de 'i$rino"e"tidos A * 9) tam$i,n de u$icaci&n central) la trom$ina cli+a los 'i$rino"e"tidos) "roduciendo la "olimeriaci&n) el 'actor 333a actúa a continuaci&n realiando enlaces cruados entre dos dominios "r&(imos "ara así tener una malla de 'i$rina esta$le. /osteriormente la "lasmina cli+a la 'i$rina) "ero no "uede cortar la uni&n cruada entre los Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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@ dominios) "or lo que el @ímero @ es la m%s "eque1a unidad molecular resistente a la "lasmina que contiene un enlace cruado /@F !6J/@F#.
8R6E"AS !E9 9A"5RA45R#5
6os /@F "roducidos durante la 'i$rinolisis in +i+o "ueden unirse al 'i$rin&geno o "ermanecer li$res en la circulaci&n. Cuando se analian los /@F en los sueros del "aciente) solo de cuanti'ica esta última 'racci&n) "or lo que este ti"o de "rue$as "resenta el "ro$lema "otencial de la o$tenci&n de los resultados negati+os. En el inmunoanalisis de inhi$ici&n de la de la hemaglutinaci&n de hematíes te1idos) los /@F "resentes en el suero del "aciente neutralian el antisuero anti'i$rin&geno) im"idiendo así que aglutine los eritrocitos cu$iertos "or 'i$rin&geno. E(iste otro m,todo m%s r%"ido que consiste en que los /@F "resentes en el "lasma del "aciente aglutinen directamente $olitas de l%te( cu$iertos con anticuer"os monoclonales !A#se meor& enormemente la es"eci'icidad * sensi$ilidad de las "rue$as) que inclu*en E63SA) aglutinaci&n de l%te( !manual * automatiada# * hasta la determinaci&n de @imero @ en sangre total !sim"liRE@ @J@imer#. EnD> A8E4 9iomedical ltd. !Australia# in+ent& * "atent& internacionalmente el "rimer "lasma @J@imer 7est "ara medir 6J/@F) el anticuer"o que 'ue usado es ,l A. onoclonal @@J>9N22) de gran es"eci'icidad!"or lo misma ,"oca tam$i,n surgi& ,l @3ER7ES7 E3A) !A8E4# Lit de Elisa en $ase al mismo A.#. El @imer 7est 6%te( tiene una sensi$ilidad de 200ngNml. /asan los a1os * en 0 es lanado internacionalmente el S3/63RE@J@J@3ER) ensa*o de ultima generaci&n que utilia un anticuer"o $ioes"ecí'ico) el @@J>9N22JRA7JC>ND) de a'inidad tanto al @ímero @ Como a los gl&$ulos roos humanos) el anticuer"o se une a los gl&$ulos roos humanos sin "roducir aglutinaci&n) siendo necesaria la "resencia de concentraciones ele+adas !ma*ores de 20 ngNml# de dímero @ "ara que esta ocurra. Al igual que el ensa*o en l%te( tiene un gran +alor "redicti+o negati+o) * se usa mas en casos de e(clusi&n de trom$osis +enosa "ro'unda * su ma*or com"licaci&n) el em$olismo "ulmonar. Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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Hematología Clínica.
4E7$#7A : 8R57E!#2#E$45 !E9 4ES4
Colecci&n de la muestra Se recomienda que el "lasma anticoagulado sea con citrato. E(traer la sangre +enosa en "l%stico o eringa siliconiada. Realiar una $uena +eno"unci&n) e+itar la contaminaci&n con 'luido tisular. A raUón de V partes sanre con ,na parte de citrato de sodio es
critico" 6a soluci&n de citrato tris&dico de$e ser al 0.0 & Citrato de sodio al >.D<. eclar "or in+ersi&n * centri'ugar a >)000 r"m "or minutos. Si no se tra$aa de inmediato "asar el "lasma a un tu$o de "l%stico) este es esta$le "or B horas a tem"eratura de D a 2= _C) D horas de 2 a D _C * mes a Y20_C.
#RO&EDIMIEN%O %est sima J dianostic ME%ODO &'ALI%A%I*O
Sacar los reacti+os del Lit * atem"erarlos "or un mínimo de 0 minutos. Agitar el reacti+o de 6%te( "or in+ersi&n de = segundos antes de usar. Colocar 20 ul de muestra) control "ositi+o * control negati+o dentro del circulo de la tareta test. Agregar 20 ul de 6%te( dentro del circulo. eclar r%"idamente las muestras * 6%te( con un "alito que llega en el Lit * encender el cron&metro. Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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Rotar la tareta "or es"acio de D0 a 200 segundos.
Res,ltado: 85S#4#;5 es
aglutinaci&n) de$e com"ararse el resultado o$tenido con los controles.
,todo semicuantitati+o Solo para m,estras ,e salieron positi.os en el test .
@" 6 Seriadamente diluir =0 ul :2) : B) :D) con =0 ul de soluci&n 9u''er.
DIL'&I)N %'(O N DEL @
#LASMA @: @:4 @:
#LASMA
('FFER
75 ,l 75 ,l 75 ,l de dil"al @: 75 ,l 75 ,l de dil" al @:4 75 ,l
" 6 Colocar las diluciones * marcar la "osici&n en la tareta test agregar el l%te( * meclar según lo descrito anteriormente.
RES67A@OS
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Cuando la aglutinaci&n ocurre a los 200 segundos entonces la muestra contiene m%s de 2=0 ngNml de @J@ímero. E(aminando las diluciones de la muestra seriadas los resultados "ueden ser o$tenido. 5ea cuadro adunto
D6Dímero
Sin
Dil,ciónes
nBmlK 75 75 J 755 755 J @555 @555 J 555 555
Dil,ción @: @:4 6 6 6 Q 6 6 Q Q 6 Q Q Q Q Q Q
@: 6 6 6 6 Q
Los factores ,e afectan los ni.eles de D6Dimero son:
El tama1o inicial del coagulo.
El tiem"o transcurrido desde el inicio del e"isodio trom$&tico.
/otencial 'i$rinolíti+o.
@e"&sitos de 'i$rina alternati+os.
3n'luencia de la tera"ia anticoagulante.
6imitaciones del ensa*o.
A#LI&A&I)N &LINI&A El incremento del ni.el de dimero D se reporta en los casos de:
Coagulaci&n intra+ascular diseminada.
7rom$osis +enosa "ro'unda !75/#.
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Em$olia "ulmonar !E/#.
onitoreo de disoluciones del coagulo en al tera"ia trom$olítica
Com"licaciones en em$arao
3n'arto agudo del miocardio
SicLle cell crisis.
/ron&sticos * res"uestas a la tera"ia del c%ncer
Cirrosis
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%IEM#O DE #RO%ROM(INA 347RO@CC3O4
Hemostasia es el cese de sangrado que sigue a la interru"ci&n traum%tica de la integridad +ascular. /ara la hemostasia e(isten cuatro 'ases. 6a "rimera 'ase es la contracci&n del +aso da1ado con el o$eto de disminuir el 'luo distal de la sangre a ni+el de la herida. 6a segunda 'ase) consiste en la 'ormaci&n de un ta"&n la+o de "laquetas) o trom$o $lanco) en el lugar del da1o. El col%geno e("uesta en este sitio actúa como $ase "ara la 'iaci&n de las "laquetas) las cuales en res"uesta e la uni&n con el col%geno e("erimenta una desorganiaci&n de su estructura interna * li$eran tro$o(ano * A@/. Estos com"uestos inducen a otras "laquetas a unirse a las que est%n adheridas al col%geno) 'ormando el ta"&n la(o * tem"oral de "laquetas. 6a tercera 'ase) es la 'ormaci&n del trom$o roo !coagulaci&n sanguínea#. 6a cuarta 'ase es la disoluci&n "arcial o com"leta del co%gulo. Ha* tres ti"os de trom$os o de co%gulos. El rom$o $lanco est% com"uesto de "laquetas * 'i$rina * es relati+amente "o$re en eritrocitos. Se 'orma en el sitio de una herida o de una "ared +ascular anormal) "articularmente en las %reas de circulaci&n sanguínea r%"ida !arterias#. n segundo ti"o de trom$o en un de"&sito diseminado de 'i$rina que se 'orma en los +asos "eque1os !ca"ilares#. El trom$o roo es el tercer ti"o de co%gulo * est% constituido "or erictrocitos * 'i$rina. Se "ueden 'ormar in +i+o en %reas de Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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circulaci&n retardada sin que ha*a anormalidad alguna de la "ared +ascular o se "uede 'ormar en el sitio de un da1o o "ared +ascular de manera concurrente con el tam"&n "laquetario inicial. El comieno de la 'ormaci&n del co%gulo en res"uesta al da1o tisular s realiado "or la +ía e(trincica. 6a iniciaci&n del trom$o roo "uro en un %rea de circulaci&n sanguínea restringida o en res"uesta a una "ared +ascular anormal se realia "or +ía intrínseca. 6as cías intrínsecas * e(trínsecas con+ergen en una ruta 'inal común la acti+aci&n de "rotrom$ina a trom$ina * la 'ormaci&n cataliada "or la trom$ina de 'i$rin&geno a 'i$rina.
SIGNIFI&A&ION &LINI&A: 6a coagulaci&n sanguínea "uede iniciarse "or e("osici&n de la sangre al 'actor tisular !sistema e(trínseco# o "or acti+aci&n de 'actores de contacto del "lasma !sistema intrínseco#. Es útil el conce"to de las dos +ías de inicio "ara com"render dos "rue$as "rinci"ales de la coagulaci&n) el tiem"o "arcial de trom$o"lastina acti+ada !a/77# en la que el "lasma se acti+a "or la +ía intrínseca * el tiem"o de "rotrom$ina !/7#) en la que se a1ade 'actor tisular al "lasma) de manera que la acti+aci&n "rosigue "or la +ía e(trínseca. Es mu* im"ortante la acti+aci&n del 'actor 3) un 'actor intrínseco) "or el 'actor 533) un 'actor e(trínseco) "orque las de'iciencias de estos dos 'actores) * tam$i,n de los 'actores que siguen al 'actor 3 en las +ías intrínsecas * común) es decir) los 'actores 5333) ) 5) 33) * 3) se acom"a1an de tendencias a hemorragias. En contraste) la de'iciencia del 'actor33) "recalicreína o cinin&geno de alto "eso molecular no causa un "ro$lema hemorr%gico * la de'iciencia del 'actor 3 se acom"a1a de una tendencia a hemorragias solas en una minoría de casos. Entre las distintas "rue$as de e("loraci&n de los 'actores que inter+iene en la coagulaci&n) la determinaci&n del tiem"o de "rotrom$ina es considerar% entre las de "rimer orden de utilidad. Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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Originalmente se "ens& que el 7/ medía únicamente la acti+idad "rotrom$ínica !'actor 33# del "lasma) de allí su nom$re. Sin em$argo) el descu$rimiento de nue+os 'actores "ermiti& concluir que dicho m,todo es una "rue$a glo$al "ara e+aluar la coagulaci&n e(trínseca siendo sensi$le a:
Factor 33 o "rotrom$ina.
Factor 5 o "roacelerina
Factor 533 o "rocon+ertina
Factor o Stuart Y /oTer. /or lo tanto la determinaci&n se a"lica a:
Estudios de "ro$lemas hemorr%gicos) como los realiados de rutina en los an%lisis "requirúrgicos.
@etecci&n de alteraciones en los ni+eles de uno o m%s 'actores in+olucrados en la +ía e(trínseca) originadas
"or en'ermedades hereditarias) "atol&gicas he"%ticas)
administraci&n de '%rmacos) en'ermedad hemolítica del reci,n nacido) ictericia o$structi+a.
Control de la tera",utica con anticoagulantes orales.
F'NDAMEN%O DEL ME%ODO 6a "rue$a del /7 se $asa en la medida del tiem"o que tarda en coagular en "lasma descalci'icado a >;K * en "resencia de un e(ceso de trom$o"lastina tisular * calcio !trom$o"lastina de cere$ro#. Este tiem"o de "rotrom$ina es usado "redominantemente como "rue$a "reJ o"eratoria "ara detectar "ro$a$lemente "otenciales de hemorragia. n test de /7 anormal generalmente "rolongado es indicati+o de una concentraci&n reducida de uno o m%s Factores de la +ía e(trínseca de coagulaci&n de la sangre. Esta alteraci&n "uede ser causada Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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"or trastornos hereditarios en la coagulaci&n) de'iciencia de +itamina I) dolencias he"%ticas o administraci&n de drogas. El tiem"o de "rotrom$ina tam$i,n es "ara monitorear tratamiento con anticoagulantes orales. El tiem"o de "rotrom$ina no es sensi$le a de'iciencias del sistema intrínseco de coagulaci&n) o de'iciencias "laquetarias) ni "uede ser usado "ara monitorear un tratamiento con he"arina.
REA&%I*O #%: 6a "rotrom$ina de cere$ro) es un e(tracto de cere$ro de coneo "uro al cual se le ha a1adido calcio. S, suminitra en 'orma lio'iliada * de$e reconstituirse con agua destilada. na +e reconstituido) est% listo "ara em"learse en el test de tiem"o de "rotrom$ina.
#RE#ARA&ION DEL REA&%I*O: . Se dea que los +iales de trom$o"lastina de cere$ro se equili$ren a tem"eratura am$iente !20 Y 2=KC# antes de "roceder a la reconstituci&n con agua destilada. 2. Se "i"etea e(actamente = ml de agua destilada en el +ial de = ml de trom$o"lastina de cere$ro. Algunas +eces +ienen +iales de ma*or cantidad) "or lo que se recomienda +eri'icar * agregar la cantidad necesaria de agua destilada. >. @es"u,s de la adici&n de agua) se es"era m%s o menos entre = * 20 minutos "ara que se lle+e a ca$o la reconstituci&n com"leta. Se de$e agitar el +ial antes de utiliarlo) de$ido a que el reacti+o se "resente en 'orma de sus"enci&n * no una soluci&n homog,nea
INS%R'&&IONES DE ALMA&ENAMIEN%O: Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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Si se almacena entre 2K * DKC) los +iales "recintados de trom$o"lastina de cere$ro son esta$le hasta la 'echa de caducidad im"resa en la caa * en las etiquetas. na +e reconstituido) el reacti+o de trom"lastina de cere$ro es esta$le durante cinco días a tem"eratura de re'rigerador !2K * DKC#) durante un día com"leto a tem"eratura am$iente !20K J 2=KC# o durante un día de tra$ao a la tem"eratura e incu$aci&n !>;KC#.
EP%RA&&ION #RE#ARA&ION DE LA M'ES%RA 4o se requiere ningún ti"o de "re"araci&n es"ecial del "aciente antes de la e(tracci&n de la muestra. ediante una agua est,ril con eringa o con tu$o la +acío se e(trae la muestra) e+itando la estasis * la contaminaci&n con 'luido tisular. 6a sangre em"leada "ara los estudios de coagulaci&n de$e tratarse con citrato de sodio al >.2 & >.D< a una "ro"orci&n de N de sangre entera a anticoagulante. 6a "ro"orci&n de sangre a anticoagulante es critica *a que "odrían o$tenerse tiem"os de coagulaci&n err&neos si se usa "ro"orci&n di'erente. El test de coagulaci&n de$e eecutarse dentro de las dos horas siguientes a la e(tracci&n si la muestra ha sido almacenada entre 2 * DKC. En caso de no "rocesarse dentro de las B horas contadas desde la o$tenci&n) la muestra de$e congelarse r%"idamente !a Y 20KC#) de tal 'orma) "uede conser+arse durante un mes. Al momento de usarlo se de$e descongelar tam$i,n r%"idamente.
#RO&EDIMIEN%O DEL %ES%:
. Colocar el "lasma !desconocido o control# en $a1o aría a >;KC durante 2 Y > minutos !no m%s de 0 minutos#. Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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2. En un tu$o colocar 0.2 ml de reacti+o de 7/ reconstituido) "reJincu$ar a >;KC durante 2 Y > minutos !no m%s de 0 minutos#. >. /i"etar 00 ul de "lasma "reincu$ado agregar r%"idamente al tu$o conteniendo 0.2 ml de reacti+o 7/) dis"arando simult%neamente el cron&metro. B. antener el tu$o dentro del $a1o aría * cerca de una 'uente de lu. /re+io el tiem"o estimado de coagulaci&n sacar el tu$o del $a1o) inclinar sua+emente una o dos +eces "or segundo * detener el cron&metro en el momento de a"arici&n del co%gulo. =. 4ormalmente se calcula el tiem"o "romedio de coagulaci&n "or du"licado !"ara cada "lasma o control#. Si la di'erencia entre los re"licados de una misma muestra es ma*or del =< se aconsea re"etir el "rocedimiento desechando los +alores anteriores. En casos de em"lear un instrumento de medici&n de$en seguirse las instrucciones del 'a$ricante del mismo.
RES'L%ADO 6os resultados "ueden e("resarse de distintas 'ormas: . 7iem"o de "rotrom$ina en segundos. 2. /orcentae de acti+idad "rotrom$ínica) res"ecto de un "lasma normal !00< de acti+idad#Q "ara ello se de$e traar una cur+a de acti+idad "rotro$inica de un "ool de "lasma 'rescos normales o com"arar con una ta$la que +iene con el Lit. >. Ra&n 3nternacional 4ormaliado !34R#: Recientemente la OS ha recomendado el uso del 34R) "ara el monitoreo de la tera"ia con medicamentos anticoagulantes a $ase de cumarina) a 'in de que resulten com"ara$les los datos o$tenidos en distintos la$oratorios * con trom$o"lastina de distinto origen. 6a con+ersi&n de tiem"o de "rotrom$ina !7/# a 34R se e'ectúa '%cilmente de la siguiente manera:
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ISIK %# del paciente INR 3 %# plasma normal
7/ del "aciente * 7/ del "lasma normal de$e ser determinados con la misma trom"lastina. 3S3. : 3ndice de Sensi$ilidad 3nternacional) es la constante que "ermite determinar la sensi$ilidad de cada lote de trom$o"lastina con relaci&n a la "rimera "re"araci&n internacional de re'erencia "rimaria. 6os 3S3 se calcula "ara cada lote.
*ALORES NORMALES:
El inter+alo de +alores o$ser+ados en "acientes normales oscila entre:
%iempo de protrom1ina en se,ndos: @ Q ó J #orcenta+e de acti.idad protrom1ínica: ;5 J @558
Se recomienda que cada la$oratorio esta$leca sus "ro"ios inter+alos a +alores de re'erencia. /ara "acientes $ao tratamiento con anti+itaminas I se ha esta$lecido un rango tera",utico que se "uede e("resar como:
/orcentae de acti+idad "rotrom$ínica:
2= Y >= <
EL %# SE #ROLONGA EN: Alumno: Oscar Raúl Choque Ramos
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. 3ngesti&n inadecuada de +itamina I como en: a. En'ermedad hemorr%gica del reci,n nacido) de$ido al suministro inadecuado de leche. 6a leche es la única 'uente de +itamina I "ara el reci,n nacido *a que ,ste carece de $acterias intestinales necesarias "ara su síntesis. $. El estado de a*una total antes de la cirugía en "ersonas que tu+ieran esteriliaci&n intestinal mediante anti$i&tico. 2. Alteraci&n de la a$sorci&n intestinal de la +itamina I como en: a. Es"rue. $. Colitis ulcerati+a o en'ermedad de Crohn. c. 3ctericia o$structi+a. >. En'ermedad he"%tica "arenquimatosa como en: a. Cirrosis. $. He"atitis B. /ersonas que est%n utiliando ciertos medicamentos como: a. Colestiramina !Xuestran# de$ido a que se une a sales $iliares. $. As"irina en grandes dosis. c. 7ratamiento con anti$i&ticos a largo "lao) de$ido a que disminu*a la síntesis de +itamina I. d. 8randes cantidades de la(antes) de$ido a que disminu*e la a$sorci&n de +itamina I. e. 6a Tar'arina o el dicumarol) de$ido a la disminuci&n de la síntesis de +itamina I. El +alor tera",utico de "rotrom$ina con estos '%rmacos suele ser de a 2 +eces el límite normal.
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