Analisis Biokimia Urin
1
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa karena berkat limpahan rahmat dan karuniaNya sehingga kami dapat menyelesaikan laporan praktikum yang berjudul Analisis Biokimia Urin ini tepat pada waktunya. Tim Tim penulis mengucapkan terima kasih kepada dosen pembimbing, pustakawan, laboran, serta semua pihak yang telah mendukung tim penulis selama proses penyusunan laporan praktikum ini. Tim Tim penuli penuliss sudah sudah berus berusah ahaa meny menyele elesai saikan kan lapora laporann prakti praktikum kum ini semaks semaksima imall mungkin, namun jika terdapat kesalahan dari hasil dan pengamatan dalam laporan praktikum ini, tim penulis bersedia menerima kritik dan saran dari pembaca.
Surabaya, Mei !"#
Tim Penulis
Analisis Biokimia Urin
2
DAFTAR ISI
$%T% $%T% PEN&%NT%'...... PEN&%NT%'............................. .............................................. .............................................. ..................................... .............................. ................." ." (%)T%' (%)T%' *S*........................................... *S*.................................................................. .............................................. ...................................................... ............................... +%+ * T-%N PE'/+%%N.......... PE'/+%%N................................. .............................................. ....................................................... ................................00 +%+ ** P'/SE(' $E'-%.......................................... $E'-%................................................................. .............................................. .............................1 ......1 +%+ *** 2%S*3 P'%$T*$M............... P'%$T*$M...................................... .............................................. ....................................................4 .............................4 +%+ *5 PEM+%2%S%N 1." Pemeriksaan )isik rin........................................... rin.................................................................. ....................................................."! .............................."! 1. Pemeriksaan $imiawi rin............................................ rin................................................................... .............................................."" ......................."" 1.." (erajat keasaman p2................................................ p2....................................................................... ........................................ ........................."" ........"" 1.. ji +enedict semikuantitati6........................................ semikuantitati6............................................................... ..................................... ......................"0 ........"0 1..0 ji 2eller........................................ 2eller............................................................... .............................................. ..................................... ............................ .............."1 "1 1..1 ji $oagulasi panas.............................................. panas..................................................................... .................................................... ............................."1 "1 1..# ji &erhardt.................................. &erhardt......................................................... .............................................. .................................................... .............................."4 ."4 1..4 ji 'othera................................... 'othera.......................................................... .............................................. .............................................. ..............................."4 ........"4 1..7 Percobaan kreatinin urin.......................................... urin................................................................. ............................................ .........................."7 ....."7 1..8 Pemeriksaan urobilinogen................................ urobilinogen....................................................... .............................................. .................................."9 ..........."9 1..9 ji )ehling................................ )ehling....................................................... .............................................. ......................................................... ..................................! ! 1.."! ji &melin........................................ &melin............................................................... ..................................................................... ............................................... . +%+ 5 $ES*MP3%N............................... $ES*MP3%N...................................................... .............................................. ..............................................0 .......................0 3%MP*'%N................................... 3%MP*'%N.......................................................... .............................................. .............................................. ......................................1 ...............1 (%)T%' (%)T%' PST%$%................ PST%$%....................................... .............................................. .............................................. ...........................................4 ....................4
Analisis Biokimia Urin
3
BAB I TUJUAN PERCOBAAN
Tujuan Percobaan
Tiap percobaan dan praktikum ini dilakukan dengan tujuan khusus sesuai dengan uji yang dilakukan, antara lain : Pemeriksaan )isik Tujuan : ntuk mengamati si6at 6isik urin (erajat $easaman ;p2< Tujuan : ntuk menentukan p2 urin ji +enedict semikuantitati6 Tujuan : ntuk menentukan kadar glukosa urin secara semikuantitati6 ji 2eller Tujuan : ntuk menentukan adanya protein secara kualitati6 di dalam urin ji $oagulasi Panas Tujuan : ntuk menentukan adanya protein secar kualitati6 di dalam urin ji &erhardt Tujuan : ntuk mengetahui adanya asam asetoasetat dalam urin ji 'othera Tujuan : ntuk membuktikan adanya badan keton di dalam urin Percobaan $reatinin rin Tujuan : ntuk menentukan kreatinin urin sebatas kualitati6 Pemeriksaan robilinogen Tujuan : ntuk menentukan urobilinogen dalam urin ji )ehling Tujuan : ntuk menentukan karbohidrat dalam urin. ji &melin Tujuan : ntuk menentukan adanya pigmen empedu
BAB II PROSEDUR KERJA
(erajat $easaman ;p2<
Tentukan p2 urin menggunakan kertas lakmus atu indikator un=ersal
Analisis Biokimia Urin
4
ji +enedict semikuantitati6 0 m3 larutan +enedict dimasukkan dalam # tabung reaksi, tambahkan ke dalam masing> masing tabung secara berurut,urin praktikan,larutan glukosa !,0?,larutan glukosa "?, larutan glukosa #?. $ocok perlahan, panaskan dalam penangas air selama # menit atau didihkan selama menit. (inginkan dan amati warna dan endapan yang terbentuk. 2asil positi6 bila terdapat endapan berwarna hijau, kuning atau merah bata.
ji 2eller
$e dalam tabung reaksi, masukkan 0 m3 asam nitrat pekat, ditambahkan melalui dinding tabung secara berlahan sampel yang akan diuji ;urin praktikan,sampel yang disediakan< sebanyak m3. %mati terjadinya presipitasi pada pertemuan kedua cairan. 2asil positi6 ditandai dengan presipitasi putih.
ji $oagulasi Panas
Sampel yang akan diuji ;urin praktikan,sampel yang disediakan< sebanyak m3 dimasukkan ke dalam tabung reaksi, didihkan dalam penangas. %mati terjadinya endapan. +agi tabung yang terbentuk endapan, tambahkan # tetes asam asetat. %mati perubahan yang terjadi.
ji &erhardt
Sampel yang akan diuji ;urin praktikan,sampel yang disediakan< sebanyak 0 m3, dimasukkan ke tabung reaksi,tambahkan )el 0 "!? disaring. Tambahkan beberapa tetes )el0 pada 6iltrat. 'eaksi positi6 bila timbul warna merah.
ji 'othera
Sampel yang akan diuji ;urin praktikan,sampel yang disediakan< sebanyak 0 m3, dimasukkan ke tabung reaksi, tambahkan kristal amonium sul6at sampai jenuh. Tambahkan Na nitroprusida #? >0 tetes, kemudian tambahkan amonium hidroksida pekat "> tetes,campur,diamkan 0! menit. 2asil positi6 ditandai oleh warna ungu.
Percobaan $reatinin rin
Analisis Biokimia Urin
5
Sampel yang akan diuji ;urin praktikan, sampel yang disediakan< sebanyak 0 m3, dimasukkan ke tabung reaksi, tambahkan " m3 asam pikrat dan " m3 Na/2 "!?. %mati warna yang timbul
Pemeriksaan robilinogen
Sampel yang akan diuji ;urin praktikan,sampel yang disediakan< sebanyak 0 m3,dimasukkan ke tabung reaksi, tambahkan "!>" tetes larutan para dimetil aminoben@aldehid. ampur dan tunggu selama # menit.%mati perubahan warna A 2asil positi6 ditandai warana merah ceri. Barna merah muda sampai sedikit merah menunjukan kadar normal urobilinogen dalam urin.
ji )ehling
Sampel yang akan diuji ;urin praktikan, sampel yang disediakan< sebanyak 0 m3,dimasukkan ke tabung reaksi, ditambahkan m3 6ehling % dan ml 6ehling +, dipanaskan dalam penangas air selama # menit. %mati perubahan yang terjadi. 2asil positi6 ditandai dengan terbentuknya endapan merah bata.
ji &melin
Sampel yang akan diuji ;urin praktikan, sampel yang disediakan< sebanyak m3,dimasukkan ke tabung reaksi, tambahkan m3 asam nitrat pekat melalui dinding tabung,sehingga terbentuk dua lapisan cairan terpisah dengan jelas. Perubahan warna mulai dari hijau menjadi biru,ungu,merah,dan jingga menunjukan hasil positi6
BAB III HASIL PRAKTIKUM
rin yang digunakan dalam praktikum ini adalah urin Nur )adhila sebagai praktikan. +erikut hasil dari uji yang dilakukan pada urin praktikan:
Analisis Biokimia Urin
6
Tabel I Ha!"l Pe#er"$!aan F"!"$ Ur"n Jen"! Pe#er"$!aan
Ha!"l
5olume
Ke%eran&an
"C : !! m3 1 jam : 4 C !! m3 D ", 3 $uning jernih Tidak ada buih +ening +au;tidak terlalu menyengat<
Barna +uih $ekeruhan +au
Normal Normal Normal Normal Normal
Tabel II Ha!"l Pen&a#a%an Anal"!"! Ur"n Deraja% Kea!a#an 'an Uj" Bene'"c% Se#"$uan%"%a%"( Rea$!" Uj"
(erajat keasaman ;p2<
ji +enedict semikuantitati6 > rin praktikan
> &lukosa !,0?
> &lukosa "?
Ha!"l Pen&a#a%an
Ke!"#)ulan
*ndicator uni=ersal : $uning kehijauan 3akmus merah : Merah 3akmus biru : +iru
p2 D 7 Normal
+iru jernih, tidak ada endapan ;><
Tidak terdapat glukosa
Merah kebiruan, ada endapan ;<
Terdapat glukosa
Merah terang, ada endapan ;<
Terdapat glukosa
Merah gelap, ada endapan ;<
Terdapat glukosa
> &lukosa #?
$eterangan : ;>< kadar glukosa !? ;< kadar glukosa F!,#? ;< kadar glukosa ",!>,!? ;< kadar glukosa G,!?
Analisis Biokimia Urin
7
Tabel III Ha!"l Pen&a#a%an Anal"!"! Ur"n *Uj" Heller+ Koa&ula!" Pana!+ Ger,ar%+ Ro%,era+ Krea%"n"n+ Urob"l"no&enRea$!" Uj"
Ha!"l Pen&a#a%an
Ke!"#)ulan
ji 2eller > rin praktikan
Tidak terbentuk presipitasi putih
;>< tidak mengandung protein
Terbentuk presipitasi putih Tidak terbentuk presipitasi putih
;< mengandung protein ;>
Barna jernih, tidak ada endapan
;>< tidak mengandung protein
Terbentuk endapan putih Barna jernih, tidak ada endapan
;< mengandung protein ;>< tidak mengandung protein
)iltrate )el₃ : kuning
;>< tidak mengandung asam asetoasetat ;>< tidak mengandung asam asetoasetat ;>< tidak mengandung asam asetoasetat
> Sampel : % + • •
ji koagulasi panas > rin praktikan > Sampel : % + • •
ji &erhardt > rin praktikan > Sampel % •
•
)iltrate )el₃ : kuning keruh
+ )iltrate )el₃ : kuning
ji rothera > rin praktikan > Sampel : % + • •
ji kreatinin > rin praktikan > Sampel : %
/range kemerahan
;>< tidak mengandung keton
$uning kecoklatan $uning kecoklatan
;>< tidak mengandung keton ;>< tidak mengandung keton
%s.pikrat : tidak terbentuk endapan ;< mengandung kreatinin Na/2 : warna merah
•
%s.pikrat : terbentuk endapan
;< mengandung kreatinin
Analisis Biokimia Urin
8
•
+
ji urobilinogen > rin praktikan > Sampel % •
•
Na/2 : warna orange endapan hilang %s.pikrat : tidak terbentuk endapan ;< mengandung kreatinin Na/2 : warna orange Barna orange kemerahan
;< mengandung urobilinogen
Barna kuning jernih
;>< tidak mengandung urobilinogen ;>< tidak mengandung urobilinogen
+ Barna kuning pekat
Tabel III Ha!"l Pen&a#a%an Anal"!"! Ur"n *Uj" Fe,l"n&+ Uj" G#el"n-
'eaksi ji ji )ehling > rin praktikan > > Sampel : %
2asil Pengamatan
$esimpulan
Barna biru tua, tidak ada endapan
;>< tidak mengandung karbohidrat
•
Barna ungu tua, ada endapan ;< mengandung karbohidrat
Analisis Biokimia Urin
9
•
+
ji &melin > rin praktikan > Sampel : % •
•
+
merah bata Barna biru keunguan, ada endapan merah bata
;< mengandung karbohidrat
$uning jernih
;>< tidak mengandung pigmen empedu ;>< tidak mengandung pigmen empedu ;>< tidak mengandung pigmen empedu
Barna keruh, ada endapan kuning Barna bening
BAB I. PEMBAHASAN
/0 Kara$%er"!%"$ Ur"n a
Pe#er"$!aan ."!ual 'an F"!"$ 1 .olu#e
*n6ormasi mengenai banyaknya air kemih yang diproduksi sehari>hari dapat menjadi petunjuk ada tidaknya gangguan 6ungsiHpenyakit ginjal, akan tetapi penentuan =olumenya memerlukan pengumpulan contoh dalam jangka waktu tertentu dan dalam jumlah yang cukup
Analisis Biokimia Urin
10
banyak. 3uaran air kemih harian bergantung pada banyaknya asupan cairan dan juga kontrol oleh hormon. 5olume urin normal per hari adalah "! !> "#! !m l, =o lu me ter se but dip engar uhi banyak 6aktor diantaranya suhu, @at>@atdiuretika ;teh, alkohol, dan kopi<, jumlah air minum, hormon %(2, dan emosi. *nterpretasi warna urin dapat menggambarkan kondisi kesehatan organ dalam seseorang ;&ir indra,!"!< (ari pemeriksaan 6isik urin pada praktikan, =olume urin yang dihasilkan berkisar "!!mlHhari sehingga dapat disimpulkan bahwa =olume urinnya masih dalam keadaan normal. b
2arna
Memastikan adanya kelainan pada urin perlu diperhatikan beberapa hal seperti warna, bau, kejernihan, dan kekentalan.Barna yang memerah menandakan adanya darah yang bercampur dalam urin. 2al ini terjadi pada keadaan in6eksi, luka, batus aluran kemih, tumor ,atau meminum obat tertentu. -ika warna sangat merah menandakan adanya perdarahan yang hebat disalur an kemih ;/ph art !!0< Barna urine normal ber=ariasi dari warna pucat, agak kekuningan sampai kuning> coklat ;seperti warna madu<, tergantung pada kepekatan urine. rine biasanya lebih pekat pada pagi hari atau pada klien yang menderita kekurangan =olume cairan. %pabila seseorang minum cairan lebih banyak, urine menjadi lebih encer. (ilihat dari hasil urin praktikan, warna urin yang dihasilkan berwarna kuning jernih sehingga dapat disimpulkan bahwa warna urinnya normal.
c
Bu",
+uih pada urine normal berwarna putih. -ika urine mudah berbuih, menunjukkan bahwa urine tersebut mengandung protein. Sedangkan jika urine memiliki buih yang berwarna kuning, hal tersebut disebabkan oleh adanya pigmen empedu;bilirubin< dalam urine. %palagi bila urin dicurahkan ke dalam tempat berwadah dari posisi tinggi, akan terjadi reaksi yang menyebabkan urin tampak berbusa. '
Ke$eru,an
rin yang kita keluarkan terdiri dari berbagai unsur seperti air, protein, amonia, glukosa, sedimen, bakteri, dan epitel. nsur>unsur tersebut sangat ber=ariasi
Analisis Biokimia Urin
11
perbandingannya pada orang yang berbeda dan juga pada waktu yang berbeda dan dipengaruhi oleh makanan yang kita konsumsi dan konsumsi air yang kurang.rine yang normal tampak transparan saat dikeluarkan. Barna urine yang ditampung dalam suatu wadah selama beberapa menit akan menjadi keruh. rine yang baru dikeluaran oleh klien yang menderita penyakit ginjal dapat tampak keruh atau berbusa akibat tingginya konsentrasi protein. rne juga akan tampak pekat dan keruh akibat adanya bakteri.(ilihat dari hasil urin praktikan,urin yang dihasilkan jernih sehingga dapat disimpulkan bahwa urinnya normal. e
Bau
%ir kemih segar memiliki bau yang khas yang dapat dipengaruhi oleh makanan tertentu, seperti asparagus. +au urin dapat ber=ariasi karena kandungan asam organik yang mudah me n gu ap . (i an ta r an ya ba u ya ng be rl ai na n dari normal seperti bau oleh makanan yang mengandung @at>@at atsiri seperti jengkol, petai, durian, dan asperse. +au obat>obatan seperti terpentin, menthol. +au amonia biasanya terjadi kalau urin dibiarkan tanpa pengawet atau karena reaksi oleh bakteri yang mengubah ureum di dalam kantong kemih. +au keton sering terjadi pada penderita kencing manis dan bau busuk sering terjadi pada penderita tumor di saluran kemih ; / p h a r t ! ! 0 < /3 Pe#er"$!aan K"#"a4" Ur"n /30 Deraja% Kea!a#an *)H <
rin adalah cairan sisa yang diekskresikan oleh ginjal yang kemudian akan dikeluarkan dari dalam tubuh melalui proses urinasi. rin disaring di dalam ginjal, dibawa melalui ureter menuju kandung kemih,akhirnya dibuang keluar tubuh melalui uretra. p2 urin berkisar antara 1,8>7,# urin akan menjadi lebih asam jika mengkonsumsi banyak protein, sedangkan urin akan menjadi lebih basa jika mengkonsumsi banyak sayuran. +erat jenis urin ",!!>",!0#. Secara kimiawi kandungan @at dalan urin diantaranya adalah nitrogen ;ureum, kreatinin dan asamurat<, asam hipurat @at sisa pencernaan sayuran dan buah, badan keton @at sisametabolisme lemak, ion>ion elektrolit ;Na, l, $, amonium, sul6at, a, dan Mg<, hormon, @attoksin ;obat, =itamin, dan @at kimia asing<,dan @at abnormal ;protein, glukosa, sel darah$ristal kapur<. Pembacaan p2 hendaknya segera dilakukan ;urine dalam kondisi segar<, karena urine yang lama cenderung menjadi alkalis ;karena perubahan ureum menjadi amonia<.Pemeriksaan p2 urine segar dapat memberi petunjuk kearah in6eksi saluran kemih. *n6eksi oleh E. coli biasanya menghasilkan urine asam, sedangkan in6eksi oleh Proteus yang merombak ureum
Analisis Biokimia Urin
12
menjadi amoniak menyebabkan urine menjadi basa. )iltrat glomerular plasma darah biasanya diasamkan oleh tubulus ginjal dan saluran pengumpul dari p2 7,1 menjadi sekitar 4 di 6inal urin. Namun, tergantung pada status asam>basa, p2 kemih dapat berkisar dari 1,# I 8,!. p2 ber=ariasi sepanjang hari, dipengaruhi oleh konsumsi makananJ bersi6at basa setelah makan, lalu menurun dan menjadi kurang basa menjelang makan berikutnya. rin pagi hari ;bangun tidur< adalah yang lebih asam. /bat>obatan tertentu dan penyakit gangguan keseimbangan asam>basa juga dapat mempengaruhi p2 urin. +erikut ini adalah keadaan>keadaan yang dapat mempengaruhi p2 urin : a. p2 basa : setelah makan, =egetarian, alkalosis sistemik, in6eksi saluran kemih ;Proteus atau Pseudomonas menguraikan urea menjadi / dan ammonia<, terapi alkalinisasi, asidosis tubulus ginjal, spesimen basi. b. p2 asam : ketosis ;diabetes, kelaparan, penyakit demam pada anak<, asidosis sistemik ;kecuali pada gangguan 6ungsi tubulus, asidosis respiratorik atau metabolik memicu pengasaman urine dan meningkatkan ekskresi N21<, terapi pengasaman. Pengamatan ini digunakan kertas lakmus biru dan merah yang dicelupkan pada bahan. (imana kertas lakmus merupakan indikator penentuan asam dan basa pada suatu bahan. 3akmus yang berubah warna menjadi merah, menunjukkan bahan tersebut bersi6at asam, sedangkan yang berubah menjadi warna biru, bersi6at basa. (erajat keasaman bahan dapat diamati dengan kertas uni=ersal yang dicelupkan pada bahan. 2asil pengamatan menggunakan kertas indikator pada urin praktikan berada p2 7,pada kertas lakmus merah tetap berwana merah dan lakmus biru tetap berarna biru menunjukan bahwa p2 urin netral;normal<.
/33 Uj" Bene'"c% Se#"$uan%"%a%"(
%danya glukosa dalam urin dapat dinyatakan berdasarkan si6at glukosa yang dapat mereduksi ion>ion logam tertentu dalam larutan alkalis. ji ini tidak hanya spesi6ik terhadap glukosa, gula lain yang mempunyai si6at mereduksi dapat juga memberikan hasil yang positi6. &ugus aldehid atau keton bebas gula akan mereduksi kuproksida dalam pereaksi benedict menjadi kuprooksida yang berwarna. (engan ini dapat diperkirakan secara kasar ;semi kuantitati6< kadar gula dalam urin. Percobaan ini dilakukan dengan tujuan untuk menentukan kadar glukosa dalam urin dengan pereaksi +ennedict secara semi ku an ti t at i 6 . P er t am a> t am a 1 bu ah t ab un g reaksi ;", , 0 dan 1< diisi dengan pereaksi benedict sebanyak 0 m3. kemudian pada tabung " ditambahkan urin praktikan,
Analisis Biokimia Urin
13
padatabung ditambahkan larutan glukosa !,0?, pada tabung 0 ditambahkan laru t an glu kos a "? dan p ad a tabun g 1ditambahkan larutan glukosa #?. Barna keempat tabung reaksi tersebut adalah berwarna biru yang merupakan warna khas u yang terdapat dalam pereaksi benedict. Selanjutnya keempat tabung reaksi tersebut dipanaskan dalam penangas air selama # menit, pemanasan bertujuan untuk mempercepat jalannya reaksi antara logam u dalam pereaksi benedict dengan glukosa dalam urin, kemudian didinginkan dengan perlahan. (ari hasil pengamatan seharusnya menunjukan bahwa pada tabung terbentuk endapan berwarna hijau yang artinya kadar glukosa F!,#?, tabung 0 terbentuk endapan jingga yangberarti kadar glukosanya ">? dan 1terbentuk endapan berwarna merah dengan intensitas warna yang semakin meningkat, yang artinya kadar glukosa G ,!?.Terbentuknya endapan merah ini diakibatkan karena pereaksi +enedict yang mengandung kuprisul6at dalam suasana basa akan tereduksi oleh gula yang menpunyai gugus aldehid atau keton bebas ;misal oleh glukosa<, yang dibuktikan dengan terbentuknya kuprooksida berwarna merah. Sedangkan pada tabung " larutan tetap berwarna biru dan tidak terbentuk endapan. 2al ini menandakan bahwa pada sampel urin tidak mengandung glukosa. Sa#)el Uj"
Ha!"l Pen&a#a%an
Ke!"#)ulan
rin praktikan &lukosa !,0? &lukosa "? &lukosa #?
tidak ada endapan,berwarna biru jernih endapan merah bata,berwarna merah kebiruan endapan merah bata,berwarna merah terang endapan merah bata,berwarna merah gelap
;>
Normalnya glukosa tidak ada atau ada tapi dalam jumlah yang sangat kecil di dalam urin. $etika tingkat glukosa dalam darah in melebihi batasan gula ginjal ;"4!>"8! mgHdl< maka glukosa mulai nampak dalam urin. $ehadiran glukosa dalam urin ;glucosuria< merupakan indikasi adanya penyakit diabetes mellitus ;%nonim, !"< 'eaksi : /
/
K
K
'LL2 u /2 I 'LL/2 u/ &ula Pereduksi
Endapan Merah +ata
Analisis Biokimia Urin
14
/35 Uj" Heller
ji ini dilakukan dengan mencampurkan bahan dengan 2N/ 0 pekat sehingga hasilnya akan terbentuk cincin yang berwarna putih pada permukaan larutan. Protein jika terkena asam pekat ;2N/0< akan terjadi denaturasi protein di permukaan, tetapi jika berlangsung lama, denaturasi akan berlangsung terus>menerus sampai cincin putih menghilang. +erdasarkan hasil pengamatan, tabung berisi urin praktikan tidak terbentuk cincin putih dipersimpangan urin dengan asam nitrat. 2al ini menandakan bahwa sampel urin tidak mengandung protein, begitu juga tabung yang berisi sampel +. Namun hasil positi6 pada tabung dengan sampel % yang menunjukkan terbentuknya cincin berwarna putih di permukaan larutan, hal itu menunjukkan sampel % mengandung protein . Pada Percobaan diperoleh hasil sebagai berikut : No
Sa#)el Uj"
". . 0.
rin praktikan Sampel % Sampel +
Ha!"l Pen&a#a%an
Ke!"#)ulan
Tidak terbentuk presipitasi putih Terbentuk presipitasi putih Tidak terbentuk presipitasi putih
;>
/3/ Uj" Koa&ula!" )ana!
(alam urin normal biasanya tidak terdapat kandungan protein di dalamnya atau masih diperbolehkan jika tidak melebihi "#!mgH1 jam atau "!mgHdl urin. Pada urin yang memiliki lebih dari "!mgHdl dapat dikatakan sebagai proteinuria ;albuminuria< yaitu kondisi dimana terlalu banyak kandungan protein dalam urin yang dihasilkan dari adanya kerusakan pada glomerulus ginjal. $arena dalam keadaan normal, protein yang ada di dalam darah akan disaring oleh glomerulus ginjal sehingga tidak akan didapatkan protein pada urin. (engan rusaknya saringan di glomerulus maka dapat menyebabkan @at>@at lain ikut masuk ke dalam urin. ji ini dapat digunakan untuk menentukan adanya protein secara kualitati6 dan cepat. Protein akan terkoagulasi akibat panas. rin praktikan dan sampel yang disediakan dididihkan dalam penangas, setelah dididihkan terbentuk endapan putih. Endapan putih yang terbentuk adalah endapan 6os6at atau protein. Tetapi setelah ditambahkan asam asetat endapan tersebut menghilang. 2al ini menandakan bahwa di dalam sampel urin tidak terkandung protein. Pada Percobaan diperoleh hasil sebagai berikut : No
". . 0.
Sa#)el Uj"
rin praktikan Sampel % Sampel +
Ha!"l Pen&a#a%an
Tidak ada endapan %da endapan Tidak ada endapan
Ke!"#)ulan
;>
Analisis Biokimia Urin
15
Pada urin praktikan, setelah pemanasan tidak terbentuk endapan, hasil uji sesuai dengan teori dan praktikan dapat dikatakan normal karena pada sampel urin tidak mengandung protein. Pada sampel %, memberikan hasil yang positi6 setelah pemanasan maupun ditambahkan asam asetat. (alam pemanasan pada temperature yang tinggi energi kinetic molekul protein meningkat sehingga terjadi gangguan dan terjadi rusaknya struktur alami protein ;sekunder, tersier, kuartener< dalam urin sehingga menyebabkan koagulasi. Penggunaan asam asetat pada urin yang mengandung protein, ion 2 ⁺ dari asam asetat akan terikat pada gugus negati=e protein dan menyebabkan terjadinya kerusakan kon6ormasi alamiah protein dalam urin sehingga terjadi koagulasi pada urin yang mengandung protein. (apat disimpulkan sampel % merupakan sampel berprotein yang kemungkinan adalah putih telur. Pada sampel + memberikan hasil yang negati=e setelah pemanasan maupun ditambahkan asam asetat. 2al ini dikarenakan pada sampel tersebut tidak mengandung protein.
/36 Uj" Ger,ar'%
ji ini didasarkan pada reaksi antara asam aseto asetate dan 6erri klorida yang menyusun @at berwarna seperti anggur ;warna merah coklat<. %sam aseto asetat sampai pengenceran ":"!!! dapat dinyatakan oleh reaksi ini ;jauh kurang peka dari reaksi rothera<, sedangkan acetone dan asam beta hidroksibutirat tidak bereaksi. +adan keton terdiri dari 0 senyawa yaitu aseton, asam asetoasetat dan asam > hidroksibutirat yang merupakan produk metabolisme lemak dan asam lemak yang berlebihan. +adan keton diproduksi ketika karbohidrat tidak dapat digunakan untuk menghasilkan energi yang disebabkan oleh gangguan metabolism karbohidrat ;misalnya diabetes mellitus<, kurangnya asupan karbohidrat ;kelaparan, diet tidak seimbang : tinggi lemak rendah karbohidrat<, gangguan arbsorbsi karbohidrat, gangguan mobilitas glukoma, sehingga tubuh mengambil simpanan asam lemak untuk dibakar. +adan keton yang dijumpai di urin terutama adalah aseton dan asam asetoasetat. %pabila metabolisme karbohidrat terganggu, maka terjadi pembakaran protein dan lemak sebagai penggantinya. %tom karbon dari protein dan lemak inilah yang akan berubah menjadi badan keton dan dikeluarkan melalui urin.
Analisis Biokimia Urin
16
'eaksi ji &erhardt Pada urin normal seharusnya tidak terkandung badan keton karena hal tersebut menunjukkan metabolisme yang normal. Pada urin praktikan, sampel %, dan sampel + muncul hasil negati=e atau dapat dikatakan tidak mengandung asam asetoasetat. 2al tersebut sesuai dengan teori dimana urin yang normal tidak mengandung badan keton, yang salah satunya adalah asam asetoasetat. /37 Uj" Ro%,era
Na>nitropusspid ; Na>nitro6erisianida< dalam suasana asam akan pecah menjadi Na1)e;N<4>NaN/ dan )e;/2<0 yang merupakan oksidator kuat. %seto asetat dan aseton akan dioksidasi dan membentuk kompleks berwarna merah jingga sampai ungu. %gar kompleks ini stabil , diperlukan larutan penyangga, yaitu : ;N21<S/1 +adan keton terdiri dari 0 senyawa, yaitu aseton, asam aseotasetat, dan asam > hidroksibutirat, yang merupakan produk metabolisme lemak dan asam lemak yang berlebihan. +adan keton diproduksi ketika karbohidrat tidak dapat digunakan untuk menghasilkan energi yang disebabkan oleh : gangguan metabolisme karbohidrat ;misalnya diabetes mellitus yang tidak terkontrol<, kurangnya asupan karbohidrat ;kelaparan, diet tidak seimbang : tinggi lemak I rendah karbohidrat<, gangguan absorbsi karbohidrat ;kelainan gastrointestinal<, atau gangguan mobilisasi glukosa, sehingga tubuh mengambil simpanan asam lemak untuk dibakar. $eton memiliki struktur kecil dan dapat diekskresikan ke dalam urin. Peningkatan kadar keton dalam darah akan menimbulkan ketosis sehingga dapat menghabiskan cadangan basa ;misal bikarbonat, 2/ 0< dalam tubuh dan menyebabkan asidosis. Pada ketoasidosis diabetik keton serum meningkat hingga mencapai lebih dari #! mgHd3. Pada Percobaan diperoleh hasil sebagai berikut : No
". . 0.
Sa#)el Uj"
rin praktikan Sampel % Sampel +
Ha!"l Pen&a#a%an
/range kemerahan $uning kecoklatan $uning kecoklatan
Ke!"#)ulan
;>
Analisis Biokimia Urin
17
Sama seperti pada uji gerhardt yaitu urin praktikan, sampel %, dan sampel + tidak berubah menjadi warna ungu melainkan warna orange kemerahan dan kuning kecoklatan yang menunjukan hasil negati=e sehingga dapat disimpulkan bahwa dari ketiga sampel uji tersebut tidak mengandung badan keton. 2al tersebut sesuai dengan teori dimana urin yang normal tidak mengandung badan keton. /38 Percobaan Krea%"n"n Ur"n
'eaksi antara kreatinin dengan pikrat dalam suasana basa, membentuk kompleks kreatinin pikrat berwarna jingga. Metode ini didasarkan pada pembentukan senyawa berwarna merahI oranye yang terjadi antara asam pikrat dengan kreatinin dalam suasana basa ;Siangproh et al .,!!9<.Pemeriksaan ini bertujuan untuk mengetahui kandungan kreatinin dengan mereaksikan dengan nitropusid. $reatinin merupakan hasil dari pemecahan kreatin. $reatin banyak pada anak>anak, kehamilan. Sedangkan kreatinin banyak dijumpai pada kelaparan, kegagalan metabolisme $2, hipertiroidisme, kelainan otot dan in6eksi. Pada penambahan nitropusid membentuk warna kuning, dalam larutan alkalis membentuk warna merah. Sedangkan penambahan asam asetat glasial membentuk warna hijau kebiruan. (asar metode ini adalah kreatinin dalam suasana alkalis dengan asam pikrat membentuk senyawa kuning jingga dan menggunakan alat 6otometer. Penentuan secara 6iCed time kinetic dapat meminimalisir pengaruh billirubin dalam sampel urin. 'eaksi yang terjadi pada uji kreatinin: Na/2$reatinin pikrat
kromo6or merah ;absorbasi pada #"! nm<
(alam penambahan asam pikrat, bertujuan untuk mereaksikan kreatinin agar terbentuk kompleks berwarna kuning. 2al ini sesuai dengan prinsip dari test kreatinin, yaitu berdasarkan reaksi antara kreatinin dengan asam pikrat yang membentuk larutan kuning. Selain dengan penambahan asam pikrat ;reagen kreatinin **<, urin ditambahkan dengan Na/2"? ;reagen kreatinin *< yang bertujuan untuk membuat suasana basa pada larutan. %gar reaksi antara asam pikrat dan kreatinin dapat menghasilkan larutan kompleks berwarna kuning, suasana larutan harus dalam keadaan basa. -ika tidak terbentuk larutan kompleks berwarna kuning, maka kreatinin tidak dapat diuji dengan metode spektro6otometer. -adi suasana larutan dibuat basa dengan penambahan Na/2. Pada Percobaan diperoleh hasil sebagai berikut : No
Sa#)el Uj"
Ha!"l Pen&a#a%an
Ke!"#)ulan
Analisis Biokimia Urin
18
". . 0.
rin praktikan Sampel % Sampel +
+erwarna merah +erwarna /range +erwarna /range
;< mengandung kreatin ;< mengandung kreatin ;< mengandung kreatin
)aktor yang dapat mempengaruhi hasil laboraturium adalah obat tertentu yang dapat meningkatkan kadar kreatinin urinJ kehamilanJ akti=itas 6isik yang berlebihanJ konsumsi daging merah dalam jumlah besar dapat mempengaruhi temuan laboraturium. ;'iswanto,!"!< $adar normal kreatinin pada orang dewasa adalah : 3aki>laki : !,4>",0 mgHdl. Perempuan : !,#>",! mgHdl $adar normal kreatinin pada anak adalah : +ayi baru lahir : !,8>",1 mgHdl. %nak yang lebih tua: !,1>", mgHdl. +ayi : !,7>",1 mgHdl. %nak ;>4 tahun<: !,0>!,4 mgHdl. $adar agak meningkat seiring dengan bertambahnya usia, akibat pertambahan massa otot ;'iswanto, !"!< /39 Pe#er"$!aan Urob"l"no&en
robilin adalah pigmen alami dalam urine yang menghasilkan warna kuning. $etika urine kental, urobilin dapat membenuk warna orange kemerahan yang intensitasnya ber=ariasi dengan derajat oksidasi ;kamus kesehatan<.+ilirubin adalah produk perombakan hemoglobin oleh sel>sel retikuloendotel yang tersebar diseluruh tubuh. +ilirubin adalah senyawa pigmen berwarna kuning yang merupakan produk katabolisme en@imatik bili=erdin reduktase.+ilirubin bersi6at tidak larut air, kemudian dikonjugasi oleh hati sehingga dapat larut air. +ilirubin akan dirubah oleh bakteri dalam usus halus menjadi urobilinogen. $arena proses oksidasi urobilinogen akan berubah menjadi urobilin, yaitu @at yang memberi warna khas pada urine ;$iana, !"0<. Pada kondisi normal, urine tidak mengandung bilirubin. %danya bilirubin dalam urine dalam urine mengidenti6ikasikan adanya kerusakan sel hati atau adanya sumbatan pada saluran empedu peningkatan urobilin dalam urine menggambarkan adanya kerusakan sel hati atau perombakan hemoglobin yang meningkat. Sedangkan ketika terjadi endapan pada saluran empedu, urobilin tidak dijumpai dalam urine ;$iana, !"0< Pada Percobaan diperoleh hasil sebagai berikut : No
Sa#)el Uj"
Ha!"l Pen&a#a%an
".
rin praktikan
+erwarna /range kemerahan
Ke!"#)ulan
;< mengandung urobilinogen
Analisis Biokimia Urin
19
. 0.
Sampel % +erwarna kuning jernih ;>< tidak mengandung urobilinogen Sampel + +erwarna kuning pekat ;>< tidak mengandung urobilinogen (ari hasil pemeriksaan urin menunjukan bahwa pada sampel urin praktikan mengandung urobilinogen dibuktikan dari larutan yang berubah menjadi orange kemerahan yakni kadar normal urobilinogen dalam urin dan pada sampel % dan + tidak mengandung urobilinogen dibuktikan dari hasil larutan yang berwarna kuning. robilinogen dengan para>aminoben@aldehide dalam suasana asam akan terbentuk senyawa a@o yang berwarna merah. (alam keadaan normal kadar urobilinogen berkisar antara !," > ",! Ehrlich unit per dl urin. Peningkatan ekskresi urobilinogen urin mungkin disebabkan oleh kelainan hati, saluran empedu atau proses hemolisa yang berlebihan di dalam tubuh. Pembentukan urobilin : +ilirubin terkonjugasi yang mencapai ileum terminal dan kolon dihidrolisa oleh en@ym bakteri glukoronidase dan pigmen yang bebas dari glukoronida direduksi oleh bakteri usus menjadi urobilinogen, suatu senyawa tetrapirol tak berwarna.Sejumlah urobilinogen diabsorbsi kembali dari usus ke perdarahan portal dan dibawa ke ginjal kemudian dioksidasi menjadi urobilin yang memberi warna kuning pada urine. Sebagian besar urobilinogen berada pada 6eces akan dioksidasi oleh bakteri usus membentuk sterkobilin yang berwarna kuning kecoklatan. /3: Uj" Fe,l"n&
ji )ehling dilakukan untuk menentukan keberadaan karbohidrat dalam urin. Prinsip uji 6ehling yaitu menggunakan gugus aldehid pada gula untuk mereduksi senyawa ;kupro sul6at< uS/1 menjadi u/ ;endapan merah bata< setelah dipanaskan dalam suasana basa. *ntensitas warna merah dari ini secara kasar menunjukkan kadar glukosa dalam urin yang diperiksa. Tes glukosa urin dapat dilakukan dengan menggunakan reaksi reduksi, dikerjakan dengan menggunakan 6ehling, benedict, dan clinitest. $etiga jenis tes ini dapat digolongkan dalam jenis pemeriksaan semi>kuantitati6. Sedangkan tes glukosa dengan reaksi en@imatik dilakukan dengan metode carik celup yang tergolong dalam pemeriksaan semi>kuantitati6 dan kuantitati6 ;Subawa.!"!<. Pereaksi 6ehling terdiri dari dua bagian, yaitu 6ehling % dan 6ehling +. )ehling % adalah larutan uS/1, sedangkan 6ehling + merupakan campuran larutan Na/2 dan kalium natrium tartrat. Pereaksi 6ehling dibuat dengan mencampurkan kedua larutan tersebut, sehingga diperoleh suatu larutan yang berwarna biru tua. (alam pereaksi 6ehling, ion u terdapat sebagai ion kompleks. Pereaksi 6ehling dapat dianggap sebagai larutan u/ ;%nonim, !"!<.
Analisis Biokimia Urin
20
Pada Percobaan diperoleh hasil sebagai berikut : No
".
Sa#)el Uj"
Ha!"l Pen&a#a%an
Ke!"#)ulan
rin praktikan Sampel %
+erwarna biru tua,tidak ada ;>< tidak mengandung endapan merah bata karbohidrat . +erwarna ungu tua,endapan ;< mengandung karbohidrat merah bata 0. Sampel + +erwarna biru keunguan, ;< mengandung karbohidrat endapan merah bata Pada praktikum ini diketahui bahwa tabung % dan + menunjukkan hasil positi6 terkandungnya glukosa dalam sampel urine. (alam suasana alkali, glukosa mereduksi kupri menjadi kupro kemudian membentuk u / yang mengendap dan berwarna merah. Perbedaan intensitas warna merah dari tiap tabung tersebut secara kasar menunjukkan kadar glukosa dalam urine yang diperiksa. +erdasarkan hasil pengamatan diketahui bahwa tabung + mengandung glukosa dengan kadar tertinggi yang ditunjukkan dengan terjadinya perubahan warna dari biru tua ;warna 6ehling % dan +< menjadi kuning kemerahan dean terdapat endapan kuning merah. (ilanjutkan dengan tabung % dengan warna kuning kehijauan dengan endapan kuning. Sedangkan tabung tidak menunjukkan terjadinya perubahan warna, yakni tetap berwarna biru tua seperti warna larutan 6ehling % dan + sebelum dipanaskan. 2al ini telah sesuai secara teoritis, dimana sampel yang digunakan pada tabung ketiga merupakan sampel urine normal, sehingga tidak terjadi perubahan warna pada uji 6ehling yang menunjukkan tidak adanya glukosa dalam sampel tersebut. +erikut ini adalah reaksi antara aldehid dengan 6ehling yang menghasilkan endapan merah bata :
Pada orang normal tidak ditemukan adanya glukosa dalam urin. &lukosuria dapat terjadi karena peningkatan kadar glukosa dalam darah yang melebihi kapasitas maksimum tubulus untuk mereabsorpsi glukosa. 2al ini dapat ditemukan pada kondisi diabetes mellitus, tirotoksikosis, sindroma ushing, phaeochromocytoma, peningkatan tekanan intrakranial atau karena ambang rangsang ginjal yang menurun seperti pada renal glukosuria, kehamilan dan sindroma )anconi ;Birawan dkk, tt<
Analisis Biokimia Urin
21
Pada percobaan yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa urin praktikan tidak mengandung karbohidrat ;glukosa< dan termasuk dalam kondisi normal.
/30; Uj" G#el"n
Oat warna empedu berasal dari pemecahan hemoglobin pada butir sel darah merah. +eberapa @at warna itu adalah bilirubin ;orange,kuning,coklat< dan bili=erdin ;hijau<. Pada percobaan ini larutan N2 0 pekat ditambahkan kedalam tabung yang berisi cairan empedu. Tujuan dari penambahan 2N/ 0 agar terjadi oksidasi @at warna empedu. +anyaknya 2N/ 0 pekat yang dimasukkan kedalam tabung reaksi diusahakan sama banyak dengan jumlah empedu sehingga cairan empedu berada pada bagian atas ;hijau< dan bagian bawah larutan 2N/0;p<, setelah digoyangkan menghasilkan larutan yang berwarna orange. Test gmelin empedu berdasarkan atas reaksi asam nitrat dengan @at warna menghasilkan serangkaian hasil oksida. Pada Percobaan diperoleh hasil sebagai berikut : No
Sa#)el Uj"
". . 0.
rin praktikan Sampel % Sampel +
Ha!"l Pen&a#a%an
+erwarna kuning jernih +erwarna kuning keruh +erwarna bening
Ke!"#)ulan
;>< tidak mengandung pigmen empedu ;>< tidak mengandung pigmen empedu ;>< tidak mengandung pigmen empedu
BAB . KESIMPULAN
Analisis Biokimia Urin
22
".
.
0. 1.
(ari percobaan yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa : rin praktikan secara 6isik keseluruhan normal : a. 5olume urin praktikan tergolong normal berkisar "!! m3 dalam satu hari b. Barna urin kuning jernih c. +uih urin stabil atau wajar d. $ekeruhan urin tergolong normal e. +au urin wajar atau tidak menyengat tergolong normal rin praktikan secara kimiawi normal, karena : a. Tidak mengandung glukosa b. Tidak mengandung protein c. Tidak mengandung asam asetoasetat dan badan keton d. Mengandung kreatinin dan urobilinogen dalam kadar normal e. Tidak mengandung pigmen empedu Sampel % merupakan sampel berprotein,berkarbohidrat Sampel + merupakan sampel berkarbohidrat Saran
Mengkonsumsi cairan sesuai kebutuhanH,# 3 per hari akan sangat berman6aat bagi kesehatan, karena selain memperlancar sistem ekskresi untuk pembuangan @at>@at sisa, juga berperan dalam keseimbangan dalam tubuh
LAMPIRAN
23
Analisis Biokimia Urin
24
Analisis Biokimia Urin
Analisis Biokimia Urin
25
DAFTAR PUSTAKA
". . 0. 1.
Ethel, S.!!0. Anatomi Dan Fisiologi Untuk Pemula .-akarta:E& Penerbit +uku $edokteran. &anong.!!0. Fisiologi Kedokteran.Yogyakarta: &adjah Mada ni=ersity Press. Setiadi, ;!!7<. Anatomi & Fisiologi Manusia .Yogjakarta: &raha *lmu. 2ardjasasmita, Pantjita. !!4 . “Ikhtisar Biokimia Dasar”. )akultas $edokteran ni=ersitas *ndonesia : -akarta #. 'obert $. Murray,(aryl $. &ranner, 5ictor B. 'odwell.!!4. Biokimia ar!er . -akarta :Penerbit E&. 4. Poedjiadi, %nna dan ). M. Titin Supryanti. !!7. Dasar"Dasar Biokimia. -akarta: * Press