Analisis Mikrobiologi Sampel Urin

ANALISIS MIKROBIOLOGI SAMPEL URIN

Disusun oleh: Nama

: Afra Nabila

NIM

: B1A015087

Kelompok

:3

Rombongan : II Asisten

: Dwi Rizki Nurjanah

LAPORAN PRAKTIKUM BAKTERIOLOGI

KEMENTERIAN RISET, TEKNOLOGI, DAN PENDIDIKAN TINGGI UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN FAKULTAS BIOLOGI PURWOKERTO

2017 I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang

Sistem perkemihan merupakan suatu sistem dimana terjadinya proses  penyaringan darah sehingga darah bebas dari zat -zat yang yang tidak dipergunakan oleh tubuh dan menyerap zat-zat yang masih dipergunakan oleh tubuh. Zat-zat yang tidak dipergunakan lagi oleh tubuh larut dalam air dan dikeluarkan berupa urin (air kemih). Sistem perkemihan atau biasa juga disebut Urinary System  adalah suatu sistem

kerjasama

tubuh

yang

memiliki

tujuan

utama

mempertahankan

keseimbangan internal atau Homeostatis. Fungsi lainnya adalah untuk membuang  produk-produk yang tidak dibutuhkan oleh tubuh dan banyak fungsi lainnya yang akan dijelaskan kemudian (Wibowo, 2005). Urin atau air seni atau air kencing adalah cairan sisa yang diekskresikan oleh ginjal yang kemudian akan dikeluarkan dari dalam tubuh melalui proses urinasi. Urin disaring di dalam ginjal, dibawa melalui ureter menuju kandung kemih, akhirnya

dibuang keluar tubuh melalui uretra. Cairan yang tersisa mengandung urea dalam kadar yang tinggi dan berbagai senyawa yang berlebih atau berpotensi racun yang akan dibuang keluar tubuh (Ganong, 2003). Urin yang dikeluarkan oleh tubuh terdiri dari berbagai unsur seperti air, protein, amoniak, glukosa, sedimen, bakteri, epitel, dan sebagainya. Unsur-unsur tersebut sangat bervariasi perbandingannya pada orang yang berbeda dan juga pada waktu yang berbeda dan dipengaruhi oleh makanan yang kita konsumsi. Kandungan urin inilah yang menentukan tampilan fisik air urin seperti kekentalannya, warna, kejernihan, bau, busa, dan sebagainya (Evelyn, 1993). Infeksi Saluran Kemih (ISK) adalah keadaan ditemukannya mikrorganisme di dalam urin dalam jumlah tertentu. Dalam keadaan normal, urin mengandung mikroorganisme, umumnya sekitar 100 bakteri/mL urin. Pasien didiagnosis infeksi saluran kemih bila urinnya mengandung lebih dari 100.000 bakteri/mL (Sondakh et al., 2015). Hasil penelitian Rachman et al., (2016), melaporkan bahwa bakteri  Escherichia coli sebagai salah satu jenis bakteri penyebab ISK yang sebagian besar sudah multiresisten terhadap berbagai antibiotika. Menurut Manning (2010) galur E. coli yang termasuk golongan patogen dan berdasarkan sifat virulensi dan mekanisme kerjanya yaitu  Enteropathogenic E. coli  (EPEC),  Enterotoxigenic E. coli  (ETEC),  Enterohemorrhagic E.

coli  (EHEC),  Enteroinvasive

E.

coli  (EIEC),

dan

 Enteroadherent E. coli  (EAEC). Bakteri penyebab ISK lain yang paling sering seperti  Enterococcus spp, Klebsiella, Enterobacter spp, Proteus spp, dan  Pseudomonas sp, selain

itu ditemukan Streptococcus

group B, Neisseria

 gonorrhoeae dan Chlamydia sp  yang ditularkan melalui kontak seksual (Carreno, 2002). Bacteriuria adalah adanya bakteri di dalam urin yang kepadatannya dinyatakan sebagai unit pembentuk koloni (cfu) organisme per mililiter (ml ),  Asymptomatic  Bacteriuria  merupakan isolasi jumlah kuantitatif tertentu dari bakteri yang berasal dari sampel urin yang diperoleh dari seseorang yang tidak menunjukkan gejala terkena infeksi saluran kencing (ISK), Pyuria adalah peningkatan jumlah leukosit di dalam urin, Leukocyturia adalah keadaan dimana terdapat leukosit yang tidak terdiferensiasi di dalam urin, Infeksi Saluran Kemih Akut pada perempuan adalah infeksi pada kandung kemih dengan gejala ( symptomatic) yang ditandai dengan

frekuensi, urgensi, disuria, atau nyeri suprapubik pada perempuan dengan saluran kemih yang normal (Sendi et al., 2017).

B. Tujuan

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui metode deteksi bacteriuria dan identifikasi mikroorganisme yang berasosiasi dengan saluran urin.

II. MATERI DAN CARA KERJA A. Materi

Alat yang digunakan yaitu tabung reaksi, cawan petri, pembakar spiritus, jarum ose, pipet steril 1 ml, dan inkubator. Bahan yang digunakan yaitu sampel urin, medium Blood Agar, dan akuades.

B. Cara Kerja Isolasi

1.

Tiga tabung pengenceran dan tiga cawan petri berisi medium Blood Agar disiapkan

2.

Sampel urin sebanyak 1 ml diambil sebanyak 1 ml menggunakan pipet steril kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 9 ml akuades sebagai  pengenceran pertama

3.

Pengenceran dilakukan hingga 10 -3

4.  Plating dilakukan pada tiap pengenceran secara  spread plate  pada medium Blood Agar 5.

Biakkan diinkubasi 2x24 jam pada suhu 37ºC

6.

Koloni bakteri dihitung secara TPC kemudian dicocokkan dengan tabel berikut:

Rata-rata

Perkiraan jumlah bakteri  per ml

Diagnosis

<25

<25000

Negatif bacteriuria

25-50

25000-100000

Suspicious

>50

>100000

Positif bacteriuria

Jumlah koloni

Uji Duga

1)

Sampel urin sebanyak 0,1 ml dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi  phenol red lactose broth

2)

Sampel urin yang telah dimasukkan ke dalam tabung reaksi diinkubasi selama 2x24 jam pada suhu 37ºC

3)

Hasil inkubasi diamati dengan interpretasi sebagai berikut:

Kuning : E. coli dan Enterococcus Orange : Klebsiella, Staphylococcus, dan Streptococcus Merah-keunguan : Proteus dan Pseudomonas

III. HASIL DAN PEMBAHASAN

Gambar 3.1 Hasil Isolasi Sampel Urin Pengenceran 10 -1

Hasil perhitungan koloni bakteri dari isolasi sampel urin pada pengenceran 10 -1 yang dapat terhitung pada medium blood agar yang pertama adalah sebanyak 480 koloni sedangkan pada medium blood agar yang kedua terhitung sebanyak 536

koloni. Jumlah rata-rata koloni bakteri dari kedua medium blood agar adalah sebanyak 508 koloni. Setelah dilakukan perhitungan koloni secara TPC, didapatkan hasil jumlah bakteri sebanyak 508 x 10 2 yang menunjukkan bahwa sampel urin didiagnosis  suspicious bacteriuria. Menurut Lumbanbatu et al., (2001), bakteriuria  pada saluran kemih umumnya berasal dari perineum dan orifisium uretra yang menjalar secara asenden, dan paling banyak disebabkan oleh kuman E.coli yang  berasal dari flora kolon.

Gambar 3.2 Hasil Isolasi Sampel Urin Pengenceran 10 -2

Hasil perhitungan koloni bakteri dari isolasi sampel urin pengenceran 10 -2 didapatkan sebanyak 560 pada medium blood agar pertama dan sebanyak 352 pada medium blood agar kedua dengan rata-rata jumlah koloni bakteri sebanyak 456. hasil  perhitungan koloni bakteri secara TPC pada pengenceran 10-2 didapatkan jumlah  bakteri sebanyak 456 x 10 3 dengan diagnosis positif bacteriuria. Menurut Miesien et al., (2006), diagnosis ISK ditegakkan berdasarkan anamnesis, pemeriksaan fisis, dan  pemeriksaan penunjang, serta dipastikan dengan biakan urin kuantitatif.

Gambar 3.3 Hasil Isolasi Sampel Urin Pengenceran 10 -3

Hasil perhitungan koloni bakteri dari isolasi sampel urin pengenceran 10 -3 didapatkan sebanyak 280 pada medium blood agar pertama dan sebanyak 320 pada medium blood agar kedua dengan rata-rata jumlah koloni bakteri sebanyak 300. hasil  perhitungan koloni bakteri secara TPC pada pengenceran 10-2 didapatkan jumlah  bakteri sebanyak 300 x 104 dengan diagnosis positif bacteriuria. Menurut Trinadi et al., (2016), Infeksi saluran kemih ditegakkan berdasarkan hasil kultur urin positif dengan bakteriuria signifikan, jumlah kuman >50.000/colony forming unit. Bakteri  patogen Gram negatif yang sering menyebabkan ISK adalah  E. coli, Klebsiella, dan  Proteus. Sebaliknya, pada kelompok Gram positif, bakteri pathogen penyebab ISK adalah Streptococcus beta hemolitikusgrup B, Enterococcus sp, dan Staphylococcus aureus.

Gambar 3.4 Hasil Uji Duga

Interpretasi hasil dari uji duga adalah warna kuning menunjukkan sampel terinfeksi bakteri  E. coli dan  Enterococcus, warna orange menunjukkan sampel terinfeksi bakteri  Klebsiella, Staphylococcus, dan Streptococcus, sementara warna merah keungunan menunjukkan sampel terinfeksi bakteri  Proteus dan Pseudomonas. Hasil yang diperoleh dari kelompok 3 rombongan II menunjukkan hasil yang negatif karena tidak ada perubahan warna pada sampel, berarti sampel tidak terkontaminasi oleh bakteri. Menurut Kepel et al., (2016), Staphylococcus sp. merupakan sel sferis coccus Gram positif yang bergerombol seperti anggur. Organisme ini dapat tumbuh dalam banyak jenis medium dan aktif secara metabolis. Beberapa bakteri memproduksi pigmen berwarna orange atau kuning, biasanya pada media yang mengandung banyak NaCl.  Klebsiella sp.  merupakan bakteri gram negatif dengan  bentuk basil pendek, cenderung lebih bulat dengan ujung yang membulat dan kebanyakan ditemukan terpisah pisah. Streptococcus sp.  adalah bakteri sferis  berbentuk kokus gram positif yang biasanya berbentuk rantai atau berpasangan ketika tumbuh pada media larutan. Pada uji fisiologi, bakteri ini nonmotil. Sedangkan menurut Goretti & Mangihot (2013),  Pseudomonas aeruginosa mempunyai flagella polar sehingga bakteri ini bersifat motil, berukuran sekitar 0,5-1,0 µm. Bakteri aerob ini mensekresikan beberapa jenis pigmen, di antaranya  pyocyanin (hijaubiru), fluorescein (kuning-hijau) dan pyorubin (merah-cokelat).

IV. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan praktikum dan hasil pengamatan acara analisis mikrobiologi sampel urin, dapat disimpulkan bahwa dalam mendeteksi keberadaan bacteriuria di dalam

sampel urin secara mikrobiologi dapat dilakukan melalui 2 uji yaitu isolasi dan uji duga. Hasil isolasi sampel urin yang didapatkan dari ketiga pengenceran (10 -1, 10 -2, 10 -3) menunjukkan hasil yang  suspicious (mencurigakan terinfeksi bacteriuria) dan  positif terinfeksi bacteriuria. Sementara hasil yang didapatkan dari uji duga menunjukkan hasil yang negatif yang berarti sampel urin tidak terinfeksi oleh bakteri seperti  E. coli,  Enterococcus, Staphylococcus, Streptococcus, Klebsiella, Proteus, ataupun Pseudomonas. B. Saran

Saran untuk praktikum acara analisis mikrobiologi sampel urin adalah diharapkan praktikan dapat bekerja secara lebih aseptis agar hasil yang didapatkan sesuai dengan yang diinginkan dan tidak terjadi kontaminasi oleh bakteri lainnya.

DAFTAR REFERENSI

Kepel, R. E. M., Fatimawali, & Budiarso, F. 2016. Isolasi Bakteri Resisten Merkuri Pada Urin Pasien Dengan Tumpatan Amalgam di Puskesmas Tikala Baru. J urnal e-Biomedik, 4(2), pp. 1-7. Goretti, M., dan Mangihot, T. G. 2013. Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Dekolorisasi Senyawa Pewarna Strawberry Red dan Orange Yellow dalam Kondisi Curah.  Jurnal I lmiah Mahasiswa Uni versitas Surabaya 2(1): 1-15. Trinadi, I., Arguni, E., & Hermawan, K. 2016. Validasi Kriteria Diagnosis Saluran Kemig Berdasarkan  Ameri can Academy of Pediatri cs 2011 pada Anak Usia 2-24 Bulan. Sari Pediatri . 18(1), pp. 17-19. Lumbanbatu, S. M., Rusdidjas, Ramayati, R., & Tobing, R. 2001. Bakteriuria Asimtomatik pada Anak Sekolah Dasar Laki-laki dan Perempuan Usia 9-12 Tahun. Sari Pediatri . 3(2), pp. 67-71. Sendi, P., Borens, O., Wahl, P., Clauss, M., & Uckay, I. 2017. Management of Asymptomatic Bacteriuria, Urinary Catheters and Symptomatic Urinary Tract Infections in Patients Undergoing Surgery for Joint Replacement.  Journal of Bone and Joint I nfections. 2(3), pp.154-159.

Rachman, N. O., Prenggono, M. D., & Budiarti, L. Y. 2016. Uji Sensitivitas Bakteri Penyebab Infeksi Saluran Kemih Pada Pasien Diabetes Melitus Terhadap Seftriakson, Levofloksasin, dan Gentamisin. Berkala K edokteran. 12(2), pp. 205-213. Evelyn, C. P. 1993.  Anatomi dan F isiologi untuk Para Medis. Jakarta: PT Gramedia. Sondakh, F. A., Fatimawali, & Wewengkang, D. S. 2016. Uji Kepekaan Bakteri Yang Diisolasi dan Diidentifikasi dari Urin Penderita Infeksi Saluran Kemih di

RSUP Prof. dr. R. D. Kandou Manado Terhadap Antibiotik Amoksisilin, Gentamisin, dan Seftriakson. J urnal I lmiah F armasi . 5(4), pp. 123-129. Ganong. 2003. F isiologi K edokteran. Yogyakarta: UGM Press. Wibowo , Daniel S . 2005 . Anatomi Tubuh Manusia . Jakarta : Gramedia Widiasarana Indonesia. Miesien, Tambunan, T., & Munasir, Z. 2006. Profil Klinis Infeksi Salurah Kemih pada Anak di RS. dr. Cipto Mangunkusumo.  Sari Pediatri , 7(4), pp. 200-206.