ÍNDICE I.
................................................................................................................ ........................................................ 2 INTRODUCCIÓN ........................................................
II. MATERIALES E INSTRUMENTOS .................................................................................. 3 III.
MÉTODO EXPERIMENTAL .......................................................................................... 3
IV.
................................................................................................................ 4 RESULTADOS .................................................................................................................
......................................................................................................................... ....................................................... 4 V. DISCUSIÓN ..................................................................
VI.
................................................................................................................ ........ 5 CONCLUSIÓN .........................................................................................................
VII.
.............................................................................................................. 5 BIBLIOGRAFÍA ...............................................................................................................
.......................................................................................................................... 6 VIII. ANEXOS ...........................................................................................................................
1
DIGESTIÓN DE LAS GRASAS: EMULSIFICACIÓN DE LAS GRASAS Y ACTIVIDAD DE LA LIPASA PANCREÁTICA
I. INTRODUCCIÓN La mayor parte de las grasas alimentarias se suministran en forma de triacilglicéridos, que se deben hidrolizar para dar ácidos grasos y monoglicéridos antes de ser absorbidos. En niños y en adultos, la digestión de las grasas se produce de forma eficaz y casi completa en el intestino delgado, para poder absorber las grasas se necesita pasar por procesos de emulsificación, hidrolización y solubilización. Las grasas que entran en el intestino se mezclan con la bilis y posteriormente se emulsionan. (Borgstrom, 1974) La lipasa es una enzima liberada por el páncreas dentro del intestino delgado y que se desencadena la descomposición de las grasas en ácidos grasos, en gran variedad de seres vivo su función principal es catalizar la hidrolisis de triacilglicerol a glicerol. Esta enzima hidroliza substratos emulsificados, y no ataca a substratos en verdadera solución. Se cree que esto se debe a que la enzima se absorbe a su substrato emulsificados. (Garcilazo, 1983) La emulsión es entonces tratada por las lipasas segregadas por el páncreas. La lipasa pancreática cataliza la hidrólisis de los ácidos grasos de las posiciones 1 y 3, generando 2-monoacilglicéridos (Tso, 1985). La emulsificación comienza en el antro gástrico gracias a las fuertes contracciones de mezcla ayudadas luego por las sales biliares en el intestino que actúan como detergentes bajando la tensión superficial. Esto disminuye el tamaño de las gotas de grasa, aumenta su número y da mayor superficie para que actúe la lipasa en la interfase grasa-agua en la luz intestinal. De esta manera usando la acción combinada de la lipasa pancreática y la emulsificación se darán productos posibles de absorber como los monoacilgliceroles, ácidos grasos y glicerol los cuales serán utilizados por el organismo. (Aulton, 2004) Esta práctica tendrá como finalidad los siguientes puntos: -
Demostrar el efecto que tienen las sales biliares sobre las grasas.
-
Demostrar el efecto que tienen las sales biliares sobre la lipasa pancreática.
-
Demostrar la acción que tiene la lipasa pancreática sobre los triacilglicéridos contenidos en la leche de vaca.
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II.
MATERIALES E INSTRUMENTOS 1. Material biológico: -
Leche fresca de vaca diluida al 1⁄2 Solución de extracto pancreático al 1%
-
Solución de bilis al 1%
-
2. Reactivos y soluciones: -
Bicarbonato de sodio al 0.4%
-
NaOH 0.01 N
-
Fenolftaleína al 1%
3. Material y equipo de laboratorio:
III.
-
Gradilla y tubos de 16x125 mm y de 20x150 mm
-
Baño María a 37 °C
-
Pipetas de 1.5 y 10 mL
MÉTODO EXPERIMENTAL 1. Sistema de incubación Tabla 1 Sistemas de incubación.
Componentes y proceso (mL) I
Tubos II
III
Solución de leche al 1⁄2
10
10
10
Solución de extracto pancreático al 1%
1
1
Solución de bicarbonato 0.4%
1
Solución de extracto pancreático al 1%
1
1 1
Mezclar e incubar a 37°C durante 0, 15, 30 y 45 minutos 2. Sistema de evaluación de la actividad de lipasa Tabla 2 Sistema de evaluación de la actividad de lipasa.
Componentes (mL) y Tubos proceso I II III Alícuota a los 0 minutos 2 2 2 Fenolftaleína 1% 2 gotas 2 gotas 2 gotas Alícuota a los 15 minutos 2 2 2 Fenolftaleína 1% 2 gotas 2 gotas 2 gotas Alícuota a los 30 minutos 2 2 2 Fenolftaleína 1% 2 gotas 2 gotas 2 gotas Alícuota a los 45 minutos 2 2 2 Fenolftaleína 1% 2 gotas 2 gotas 2 gotas Mezclar y titular con NaOH 0.01 N. Anotar el volumen gastado.
3
IV.
RESULTADOS Tabla 3 Resultados a todos los tiempos de inc ubación.
Tiempo de incubación (minutos) 0 15 30 45
I
Tubos (gasto de NaOH 0.01 N) II
III
1.75 2.66 2.83 3.17
1.21 1.16 1.13 1.09
1.64 1.88 2.00 3.00
TIEMPO VS. GASTO DE NaOH Tubo I
Tubo II
Tubo III
3.5 3 N2.5 1 0 . 0 2 H O a N 1.5 E D L m 1
0.5 0 0
15
30
45
TIEMPO (MIN.)
Figura 1 Gasto de NaOH a diferentes tiempos en todos los sistemas.
V.
DISCUSIÓN -
La solución de leche la cual es constante en todos los tubos contendrá lípidos en los cuales se encontraran los triacilglicéridos que serán la base en la que se enfoca la práctica. La diferencia de los resultados entre un tubo y otro va a depender esencialmente de tres factores: la bilis, el bicarbonato y el extracto pancreático. (Mejia, 2017)
-
En el tubo N° II la respuesta a la interrogante del porque los valores obtenidos han sido casi constantes y bajos es debido a que no se le incluyo el extracto pancreático y por ende no había la presencia de la lipasa que es la encargada de
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romper los enlaces éster de los triacilglicéridos para convertirlos en glicéridos y ácidos grasos. (Mejia, 2017) -
Con respecto N° III al no haber presencia de bilis los valores obtenidos han sido moderadamente más bajos en consecuencia de la falta de este proceso de emulsificación. La bilis permite la emulsificación de las grandes partículas de grasas debido a que contiene grandes cantidades de sales biliares así como un fosfolípido conocido como lecitina las cuales son muy importantes en este proceso debido a que
hace que las gotas de grasa reduzcan su tensión
superficial y tamaño. (Cuesta, 2008) -
Finalmente en el N° I los valores obtenidos fueron los más altos esto debido a que actuaron en conjunto la bilis y la enzima lipasa. Si bien es cierto no se añadió bicarbonato este solo tenía la función de dar alcalinidad al sistema en otras palabras de dar las condiciones normales. (Plasencia, 2017)
VI.
CONCLUSIÓN -
Se demostró experimentalmente que el efecto de las sales biliares sobre las grasa es la de emulsificación y esto se concluyó al déficit de absorción que genera la falta de este elemento.
-
Las sales biliares tienen el efecto acelerar la reacción de las lipasas pancreáticas mediante la micela.
-
La lipasa pancreática hidroliza los triacilgliceroles contenidos en la leche de vaca y se demuestra rompiendo los enlaces éster de los triacilgliceroles logrando reducir los triacilgliceroles hasta gliceroles y este cambio será reflejado en un cambio de pH el cual será importante para determinar el gasto de NaOH.
VII.
BIBLIOGRAFÍA
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Aulton, M. (2004). Pharmaceutics: The Science of Dosage Forms Design.
-
Borgstrom, B. (1974). Digestión de grasa y absorción en Biomembranas. Nueva York: Plenum Press.
-
Cuesta, M. (2008). Macromoléculas. Guadalajara.
-
Garcilazo, P. (1983). Bioquímica metabólica. Unison.
-
Mejia, A. (2017). Digestión de las grasas. Trujillo.
-
Plasencia, O. (2017). Explicación del proceso de digestión de grasas. Trujillo.
-
Tso, P. (1985). Digestión gastrointestinal y absorción de lípidos. Avances en la investigación de lípidos.
5
VIII.
ANEXOS
Figura 2 Resultados de la práctica digestión de las grasas.
6
