Biología en Acuicultura
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS I.
Introducción Los carbohidratos son compuestos orgánicos, formados primordialmente por carbono, hidrógeno y oxígeno. Se encuentran en muchos productos naturales y son una de las fuentes principales de energía para los organismos quimiotróficos. La unidad fundamental de los carbohidratos son los monosacáridos, estos son polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas. Los monosacáridos se combinan, con la pérdida de moléculas de agua uniéndose mediante enlaces glicosídicos, formándose oligosacáridos y polisacáridos. En presencia de ácidos no oxidantes, los carbohidratos se deshidratan y forman furfural si el monosacárido es una pentosa o hidróximetilfurfural, si el monosacárido es una hexosa. El almidón, o fécula, es una macromolécula compuesta de dos polisacáridos, la amilosa en proporción del !"#$ y la amilopectina %" #$.! Es el gl&cido de reser'a de la mayoría de los 'egetales, y la fuente de calorías más importante consumida por el ser humano. La digestión in'olucra una serie de mecanismos de reacción, entre los que encontramos la adición de agua, conocida como hidrólisis. (ara el caso del almidón, las amilasas secretadas por el páncreas y las glándulas sali'ales, son las encargadas de degradar los carbohidratos. )e esta forma, los polisacáridos que se encuentran en el alimento, son degradados a gl&cidos más simples con capacidad para atra'esar la pared digesti'a o ser absorbidos en el intestino.
II.
Objetio! **.+. **.!. **.. **.0.
**.6.
Bioquímica
econocer los diferentes tipos de carbohidratos en una muestra problema. *dentificar la presencia de a-ucares redu ctores pro' enientes de la hidrolisis acida de muestras de carbohidratos. /uantificar productos reacciónquen-imática. econocer los y anali-ar lasde re la acciones e se lle'an en cada una de las pruebas de 1olish2 3-&cares reductores, Seli4anoff2 grupo funcional cetonico, 5arfoed2 diferenciar monosacáridos de disacáridos. eali-ar pruebas cualitati'as para detectar carbohidratos con base en la formación furfural.
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III.
IV.
MATERIALES 7na papa Solución de glucosa +#, solución sacarosa +# Solución de maltosa +#, solución de almidón +# Solución de fructuosa +# Solución alcohólica de 3lfa naftol 6# 8cido sulf&rico eacti'o se Seli'anoff eacti'o de 5arfoed 8cido clorihidrico +.6# Solución de 9ehling :3; y :5;
"rocedi#iento e$%eri#ent&' IV.(. Acción de 'o! )cido! o$id&nte! IV.(.(. Re&cción de Mo'i!*+ Es una reacción general de los carbohidratos que sir'e para detectar su presencia en una sustancia problema. 7na reacción negati'a es una buena e'idencia de la ausencia de a-ucares, mientras que una prueba positi'a es simplemente indicadora de la posibilidad de su existencia y requiere una mayor in'estigación.
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(rimero seleccionamos 0 tubos de ensayos, los cuales lo en numeramos del * al *=. Luego en el tubo * agregamos !." ml solución de glucosa +#. En el tubo ** agregamos !." ml de solución de sacarosa +#.agregamos !." ml de solución de 3l tubo *** maltosa +#. 3l tubo *= agregamos !." ml de solución de almidón +#. Luego a los *= tubos agregamos "! gotas de solución de 3lfa >aftol 6#.
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9inalmente agitamos los tubos con cuidado y se agregó ácido sulf&rico !." ml en el tubo *, **, ***, *=.
<75?Sml$ * ** *** *= Sol.@lucosa+# !." AAAA AAAA AAAA Sol.Sacarosa+# AAAA !." AAAA AAAA Sol.1altosa+# AAAAA AAAAA !." AAAAA Sol.3lmidón+# AAAAA AAAAA AAAA !." Sol.3lfanaftol6#gotas$ "! "! "! "! 1e-clar bien agitando el tubo, agregar lentamente por las paredes. 8cido sulf&rico !." !." !." !." Se pudo obser'ar en la interface la aparición de un anillo roBo 'ioleta oscuro, lo cual indica una reacción positi'a. Esta reacción es debida a la condensación de los furfurales formados por la acción del ácido con el alfa naftol. IV.(.,. Re&cción de Se'i&no--+ Esta es una reacción
específica para a-ucares con grupo funcional cetonico.
Seleccionamos trestubo tubos ensayo. /olocamos a cada unde n&mero *, **, ***$. En el tubo * agregamos +." ml de solución de fructuosa +#. En el tubo ** se agregó +." ml de solución de @lucosa +#. 3l tubo *** se agregó +." ml de solución de sacarosa +#. 9inalmente en el tubo *, **, *** se agregó 6." ml de solución de Selinanoff.
<75?Sml$ Sol.9ructuosa+#
* +."
** AAAA
*** AAAAA
Sol. +# Sol.@lucosa Sacarosa +# x.Selinanoff
AAAA +." AAAA AAAAA 6." 6."
AAAA +." 6."
Se me-cló bien y se sometió a baCo maría hir'iendo. 3l inter'alo de minutos se obser'ó y como a&n faltaba la reacción, se sometió a +6 minutos más. La reacción es positi'a cuando se obser'a una coloración roBo D cere-a. Bioquímica
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IV.(.. Re&cción de B&r-oed+ Esta prueba se utili-a para diferenciar monosacáridos de disacáridos.
Seleccionamos cuatro tubos de ensayos. En el tubo * agregamos +." ml de solución de glucosa +#. En el tubo ** se agregó +." ml de solución de fructuosa +#.agregó +." ml se solución de 3l tubo ** se sacarosa +#. 3l tubo *= se agregó +." ml d solución de matosa +#. 9inalmente se agregó a los cuatro tubos 6." de solución de 5arfoed.
<75?Sml$ Sol.@lucosa+# Sol.9ructuosa+# Sol.Sacarosa+# Sol.1altosa+# x.5arfoed
* +." AAAA AAAAA AAAAA 6."
** AAAA +." AAAAA AAAAA 6."
*** AAAA AAAA +." AAAA 6."
*= AAAA AAAA AAAA +." 6."
1e-clar bien y someter a baCo maría hir'iendo por espacio de 6 minutos, controlar el tiempo en que aparecen las reacciones positi'as precipitado roBo naranBa$ en los diferentes tubos.
IV.(./. Acción de 'o! )'c&'i! !obre 'o! c&rbo*idr&to!+ Se procederá a identificar el a-&car reductor correspondiente. "rocedi#iento+ • •
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•
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VI.
VII.
3Cadir a los tubos anteriores +ml de las soluciones de 9ehling :3; y :5;, luego someterlos a ebullición entre y 6 minutos.
Conc'u!ione!
En la reacción de 1olish en los cuatro tubos se obtu'o el color adecuado ya que la reacción fue positi'aF en los tubos se formó un anillo color roBo 'ioleta oscuro por la acción del ácido con el alfanaftol.
En la reacción de Seli'anoff en los tres tubos se obtu'o color roBoAcere-a como resultado aunque en diferentes tonos.
eacción de 5arfoedF solo hubo reacción en el primer tubo en el cual se obtu'o color roBo naranBa y los tres demás no hubo ninguna reacción porque algo fallo.
En la <ima reacción en los dos tubos se obtu'o la misma reacción un color 'erdu-co oscuro.
Di!cu!ione! Se'ero ?choa2 nos dice que las pruebas colorimétricas para la determinación de a-&cares se basan en la reacción específica de estos compuestos determinados reacti'os para dar deri'ados coloreados. La formacióncon de color se toma como resultado positi'o e indica la presencia del compuesto en cuestión, mientras que la no formación de color es indicati'o de su ausencia. (ara cada prueba se utili-ará un control negati'o, también denominado blanco de la reacción, en el que el reacti'o se aCadirá a agua destilada o sol'ente adecuado$. 3unque en la presente práctica se lle'ará a cabo sólo la determinación cualitati'a de a-&cares, las técnicas que se describen pueden, también, ser utili-adas para la determinación cuantitati'a de dichas biomoléculas. Es importante que el alumno cono-ca la estructura y propiedades químicas de los compuestos que se 'an a utili-ar, por lo que se le recomienda que acuda a sus notas de clase o a un libro de texto de bioquímica general para un meBor entendimiento y apro'echamiento de la práctica y para presentar y discutir los resultados obtenidos en el cuaderno de prácticas.
♣
Himéne- 1. !"++$ nos dice que Los carbohidratos son compuestos orgánicos, formados primordialmente por carbono, hidrógeno y oxígeno. Se encuentran en muchos productos naturales y son una de las fuentes principales de energía para los organismos quimio tróficos. La unidad fundamental de los carbohidratos son los monosacáridos, estos son polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas. Los monosacáridos se combinan, con la pérdida de moléculas de agua uniéndose mediante
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enlaces glucos&ricos, formándose oligosacáridos y polisacáridos. En presencia de ácidos no oxidantes, los carbohidratos se deshidratan y forman furfural si el monosacárido es una pentosa o hidróximetilfurfural, si el monosacárido es una hexosa. /uando la reacción de deshidratación se efect&a con la ayuda del ácido sulf&rico concentrado y el color se desarrolla con alfa naftol, la prueba se denomina reacción de 1olisch.
VIII.
Cue!tion&rio
0Cu)' de '&! %rueb&! %er#ite di-erenci&r &'do!&! de ceto!&!1 2.R La prueba de Seli4anoff es una prueba química que se usa para distinguir aldosas y cetosas. Los a-&cares son distinguidos a tra'és de su función como cetona o aldehído. Si el a-&car contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehído, es una aldosa. Esta prueba está basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido que las aldosas. Seli4anof A +%%I$
0e' &'#idón in3erido %or e' !er *u#&no !u-re e' #i!#o ti%o de *idro'i!i! &cid& re&'i4&d& en '& %r)ctic&1 0Có#o !e *idro'i4&1 En el ser humano le ha posibilitado sobre'i'ir ante carestías de carnes o frutas merced a dietas ricas en almidón como el que se encuentra en cereales, tubérculos y bulbos. Se considera que la capacidad de asimilar eldealmidón por parte de los ancestros del humano ocurrió unos ! millones aCos antes del presente y está asociado al rápido desarrollo del cerebro debido al rápido aporte de carbohidratos, los cuales son un excelente combustible para la acti'idad cerebral. Seli4anof D +%%I$
Re%re!ent& '& unión de #o'5cu'&! de' &'#idon6 3'ucó3eno6 7 ce'u'o!& El almidón es un polímero formad o por la unión de molécula s de J A ) A glucosa, unidas mediante enlaces glucosídicos a A + K 0.
El glucógeno es otro polímero de la glucosa, su estructura es idéntica a la de la amilo pectina, es decir, está constituido por la unión de moléculas de J A ) glucosa, mediante enlaces glucos&ricos J A + K 0 y Bioquímica
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con ramificaciones J A + K M pero, el glucógeno tiene un mayor n&mero de ellas. 3demás, el glucógeno es producido por las células animales y no por las 'egetales. En los 'egetales se encuentra otro polímero de la glucosa que se conoce con el nombre de celulosa, y que está constituida por la unión de moléculas de N A ) A glucosa, unidas mediante enlaces glucos&ricos N A + K 0. La celulosa es un polímero no ramificado.
0De 'o! !i3uiente! &4uc&re! cu&' no e! reductor1 0"or 8u51 9'uco!& : '&cto!&: !&c&ro!& : -ructuo!& 3lgunos disacáridos, como la sacarosa, son a-&cares no reductores, lo que significa que no pueden donar electrones a otras moléculas. La sacarosa se compone de dos a-&cares reductores, glucosa y fructosa, y no contiene grupos carbonilo libres. La sacarosa se encuentra naturalmente en muchos alimentos y, a menudo se aCade a muchos alimentos procesados contribuir dul-ura.
Re-erenci&! bib'io3r)-ic&! )ep. de 5ioquímica y 5iología 1olecular, Edificio /AM Se'ero ?choa$, /ampus de abanales, 7ni'ersidad de /órdoba,+0"I+ /órdoba, EspaCa •
massiel Himéne- +I de no'iembre de !"++ 9acultad de /iencias 5iológicas, 7ni'ersidad >acional de
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der deutschen chemischen Gesellschaft ,
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http2OO444.ciens.uc'.'e2%"%"OgeneradorOsitesOmmedinaOarchi'osO(ractica +0.pdf http2OOquimicaorganica+6lab.blogspot.peO!"++O++OdeterminacionAdeA carbohidratosP"6.html http2OOtrabaBosuni'ersitarios"+.blogspot.peO!"++O++OdeterminacionAdeA carbohidratos.html
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