Ejemplo sobre el cálculo del parámetro hidrológico de Curva Hipsométrica
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Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Zaragoza Por mi mi raza raza hablara hablara el es es íri íritu tu
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1
OBJETIVOS Analizar el diseño de una curva estándar. Desarrollar una curva estándar. Determinar la concentración de albúmina en la clara de huevo. RESULTADOS Tubo Solución problema de proteínas (mL) Solución patrón de proteínas (mL) H2O destilada (mL) Reactivo 3 (mL) Reactivo 4 (mL)
Absorbancias
Blanco -
1 0.3
2 0.6
3 1.2
4 -
5 -
6 -
7 -
-
-
-
-
0.2
0.4
0.8
1.6
3.6 2.0
3.2 2.0
2.4 2.0
0.2
0.2
0.2
0.095
0.177
0.205
4.0 3.7 3.4 2.8 3.8 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 Agitar y dejar reposar 10 minutos 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 Agitar inmediatamente y dejar reposar 20 minutos Medir la absorbancia a 640 nm 0.141 0.197 0.200 0.081
Grafica
Gráfica sin corregir 0.25 0.2 a i c n a b r o s b a
0.15 0.1 0.05 0 0
0.02
0.04
0.08
0.16
mg de albumina
2
CALCULOS absorbancia
concentracion
x
y
x2
yx
0
0
0
0
0.02
0.081
0.0004
0.00162
0.04
0.095
0.0016
0.0038
0.08
0.177
0.0064
0.01416
0.16
0.205
0.0256
0.0328
∑x=0.3
∑y=0.558
2
∑x
=0.034
∑xy=0.05238
Linealización por mínimos cuadrados: ∑y= na + ∑x ∑xy= a∑x + ∑x
2
Sustituyendo en las ecuaciones los resultados obtenidos tenemos: Multiplicar por (-0.3) Multiplicar por (5)
Reemplazando b= 1.18125 en la primera ecuación normal
Tenemos que los coeficientes de regresión son: a=0.04073 y b=1.18125. Por tanto la ecuación de regresión queda:
Como tenemos las absorbancias de la muestra de albúmina (Y); podemos despejar a x para conocer los miligramos de albúmina que hay a dicha absorbancia. 3
Tubo 1 2 3
Absorbancia 0.141 0.197 0.200
mg de albúmina 0.0848 0.1322 0.1348
g
0.25 0.2 a i c n a b r o s b A
0.15
Absorbancia tubo1
0.1
tubo2
0.05
tubo3
0 0
0.02
0.04
0.08
0.16
mg de albumina
Calculo de la concentración original de albúmina de la muestra problema: ̅
Dato obtenido
Dato teórico 4
DISCUSIÓN: La cantidad de gramos de albúmina obtenida, fue muy pequeña comparándola con la teórica, esto se puede deber a varios factores que influyeron en la concentración de la muestra problema entre ellos tenemos:
La absorbancia se midió a 642 nm esto se debió a que el espectrofotómetro no se estabilizaba y la mayoría de las lecturas se hicieron entre 640 nm y 642 nm. La cantidad de reactivos que se le iba agregando a cada tubo, pues fue entre varios integrantes los que intervinieron en la medición de estos mismo. El último paso no se realizó correctamente, que era cuando se agregaba el reactivo 4, no se realizó la agitación inmediatamente, se observó que en el fondo de algunos tubos aparecía una coloración amarilla, la cual ya no se pudo mezclar bien con la demás solución que contenía el tubo.
BIBLIOGRAFÍA AlemanyLamana M. y S. Font Sebarroja(1983). Prácticas de Bioquímica. Editorial Alhambra. Rendina G. Técnicas de Bioquímica Aplicada. Editorial Interamericana.
