´a Pruebas F´sicas ´ı sicas / h621i Cromatografı´a
USP 30
R
resolucio resoluc io´n entre ent re dos do s picos pico s cromatogra cro matogra´fic ´ficos, os,
t t M W W h/2 h/2 W 0,05 0,05
R F
factor de retardo cromatogra´fico igual al cociente entre la distancia desde el origen hasta el centro de una zona dividido por la distancia desde el origen hasta el frente de la fase mo´ vil.
Rr
tiempo de retencio´ n relativo
Rrel
retardo relativo
RS
cociente entre las respuestas de los picos de una Preparac Preparacio io´n esta est a´ndar ´nd ar que q ue contien c ontienee el Esta´ndar ´ndar de Referencia y el esta´ndar ´ndar interno,
RU
cociente entre las respuestas de los picos de la Preparacio Prepara cio´n ´n de valoracio ´n que contie ´n contiene ne el analito y el esta´ndar interno,
S R (% (%))
desv de svia iaci cio o´n ´ n es esta ta´ndar ´ ndar re rela lati tiva va por porce cent ntua ual, l,
T
en donde X i es una medida individual en un conjunto de N mediciones y X es la media aritme´tica ´tica del conjunto. factor de asimetrı´a, ´a,
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tiempo de retencio´ n medido desde el tiempo de inyeccio´ n hasta el tiempo de elucio´ n del ma´ximo ´x imo del pico. tiempo de retencio´ n del componente no retardado, aire con deteccio´ n por conductivid condu ctividad ad te´rmic ´rmica. a. ancho del pico medido por extrapolacio´ n de los lados relativamente relativamente recto rectoss en la lı´nea ´nea base. ancho del pico a la mitad de la altura. ancho del pico al 5% de altura.
Cambio en la redaccio ´ n:
´ FICOS REACTIVOS CROMATOGRA La siguiente lista de rellenos (L), fases (G) y soportes (S) pretende ser una referencia u´ til para el te´cnico ´cnico en cromatografı´a. [ NOTA— Los Los taman˜ os de partı´cula ´cula que se proporcionan en esta lista son los que se pueden obtener generalmente. Cuando se requiera otro taman˜ o, generalment genera lmentee ma´s ´s fino, la monogr monografı afı´a ind indivi ividual dual esp especi ecifica fica el taman˜ o de partı´cula ´ cula des desead eado. o. Den Dentro tro de cua cualqu lquier ier cat categor egorı´ıa de materiales mater iales de relle relleno no o de fases que se enume enumeran ran a continu continuacio acio ´n, ´n, existe exi ste una amp amplia lia var varied iedad ad de col column umnas as dis disponi ponible bles. s. Cua Cuando ndo es necesario necesa rio definir ma´s ´s especı´fica ´ficamente mente las condici condiciones ones croma cromatotogra´ficas, ´fic as, la l a monografı mo nografı´a ´a individual ası´ lo indica.]
Rellenos L1—Octade L1—O ctadecils cilsilano ilano unid unido o quı´m ´mica icamen mente te a sı´lice ´ lice por porosa osa o micropartı´culas ´culas cera´micas, ´micas, de 3 mm a 1 0 mm de dia´metro, ´metro, o una varilla silı´cea ´cea monolı´tica. ´tica. L2—Octadecilsilano unido quı´micamente a gel de sı´lice ´lice de una porosidad de superficie controlada, que se ha unido a un nu´ cleo esfe´r ´rico ico so´ lid lido, o, de 30 mm a 50 mm de dia´me ´metro. tro. L3—Partı´culas ´culas de sı´lice ´lice porosas de 5 mm a 10 mm de dia´metro. ´me tro. L4—Gel de sı´lice ´lice de una porosidad de superficie controlada que se ha unido a un nu´cleo ´cleo esfe´rico ´rico so´ lido, de 30 30m mm a 5 0 mm de diaa´met di metro ro.. L5—Alu´ mina de una porosidad de superficie con trolada que se ha mm a 50 mm de dia´metro. unido a un u n nu´ cleo esfe´ric ´rico o so´ lido, de 30 30m ´me tro. L6—Relleno de intercambio catio´ nico fuerte–polı´mero de fluorocarbono sulfonado recubierto sobre un nu´ cleo esfe´rico ´rico so´ lido, de 30 mm a 50 mm de dia´metro. ´me tro. L7—Octilsi L7—Oc tilsilano lano unido quı´m ´mica icamen mente te a par partı tı´cul ´ culas as de sı´lice ~ totalmente porosas, de 1,7~USP30 mm a 10 mm de dia´met ´metro. ro. L8—Capa L8—Ca pa esenci esencialmen almente te monom monomolecul olecular ar de amino aminopropil propilsilan silano o unida quı´micamente ´micamente a un soporte de gel de sı´lice ´lice totalmente poroso, de 3 mm a 10 mm de dia´metro. ´me tro. L9—Gel de sı´lice ´lice totalmente poroso, irregular o esfe´rico, unido quı´micamente ´micamente a un recubrimiento de intercambio catio´ nico fuertemente a´cido, ´ci do, de 3 mm a 10 mm de dia´met ´metro. ro. L10—Grupos nitrilo unidos quı´micamente a partı´culas ´culas de sı´lice ´lice porosas, de 3 mm a 10 mm de dia´metro. ´me tro. L11—Grupos fenilo unidos quı´micamente a partı´culas ´culas de sı´lice ´lice ~ porosas, de 1,7~USP30 mm a 10 mm de dia´met ´metro. ro. L12—Relleno de intercambio anio´ nico fuerte obtenido uniendo quı´micamente ´micamente un grupo amino cu aternario a un nu´ cleo esfe´rico de sı´lice ´lice so´ lido, de 30 3 0 mm a 50 mm de dia´met ´metro. ro. L13—Trime L13—T rimetilsi tilsilano lano unido quı´mi ´micamen camente te a partı´cu ´culas las de sı´lice ´lice porosas, de 3 mm a 10 mm de dia´metro. ´me tro. L14—Gel de sı´lice ´lice unido quı´micamente ´micamente a un recubrimiento de intercambio anio´ nico, de amonio cuaternario fuertemente ba´sico, ´sico, de 5 mm a 10 mm de dia´metro. ´me tro. L15—Hexilsi L15—He xilsilano lano unido quı´m ´mica icamen mente te a par partı tı´cul ´ culas as de sı´lice totalmente porosas, de 3 mm a 10 mm de dia´met ´metro. ro. L16—Dimetil L16—Di metilsilano silano unido quı´mi ´micamen camente te a partı´c ´cula ulass de sı´lice ´lice porosas, de 5 mm a 10 mm de dia´metro. ´me tro.
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h621i Cromatografı´a / Pruebas Fı´sicas
L17—Resina de intercambio catio ´ nico fuerte que consta de un copolı´mero sulfonado entrecruzado de estireno-divinilbenceno, en forma de hidro´geno, de 7 mm a 11 mm de dia´metro. L18—Grupos amino y ciano unidos quı´micamente a partı´culas de sı´lice porosas, de 3 mm a 10 mm de dia´metro. L19—Resina de intercambio catio ´ nico fuerte que consta de un copolı´mero sulfonado entrecruzado de estireno-divinilbenceno, en la forma ca´lcica, de aproximadamente 9 mm de dia´metro. L20—Grupos dihidroxipropano quı´micamente unidos a partı´culas de sı´lice porosas, de 5 mm a 10 mm de dia´metro. L21—Un copolı´mero rı´gido, esfe´rico de estireno-divinilbenceno, de 5 mm a 10 mm de dia´metro. L22—Resina de intercambio catio ´ nico constituida por gel de poliestireno poroso con grupos a´cidos sulfo´nicos, de un taman˜o aproximado de 10 mm. L23—Resina de intercambio anio ´ nico constituida por gel de polia crilat o o polimet acrila to poroso con grupos de amonio cuaternario, de un taman˜o aproximado de 10 mm. L24—Gel hid ro´filo semirrı´gido que consta de polı´meros de vinilo con numerosos grupos hidroxilo sobre la superficie de la matriz, de 32 mm a 63 mm de dia´metro. [ NOTA— Esta´ disponible como YMCPack PVA-SIL, fabricado por YMC Co., Ltd. y distribuido por Waters Corp. (www.waters.com).] L25—Relleno con capacidad para separar compuestos en un intervalo de p eso molecular de 100 a 5000 (determinado con o´xido de polietileno), aplicable a polı´meros hidrosolubles neutros, anio ´nicos y catio ´ nicos. Se determino ´ que una base de resina de polimetacrilato, entrecruzada con e´ter polihidroxilado (la superficie contiene algunos grupos funcionales carboxilo residuales) es adecuada. L26—Butilsilano unido quı´micamente a partı´culas de sı´lice totalmente porosas, de 3 mm a 10 mm de dia´metro. L27—Partı´culas de sı´lice porosas, de 30 mm a 50 mm de dia´metro. L28—Un soporte multifuncional, que consiste en un sustrato de ˚ , unido a un intercambiador sı´lice esfe´rico de alta pureza, de 100 A anio´nico, con funcionalidad amina, adema´s de u na funcionalidad en fase reversa convencional de C8. L29—Gamma alu´ mina de fase reversa con bajo porcentaje, en peso, de carbono y partı´culas esfe´ricas de polibutadieno con b ase de ˚. alu´mina, de 5 mm de dia´metro con un volumen de poro de 80 A L30—Etilsilano unido quı´micamente a partı´ culas de sı´lice totalmente porosas, de 3 mm a 10 mm de dia´metro. L31—Resina de intercambio anio´nico fuerte, hidro´xido-selectivo, unida por amina cuaternaria a partı´culas de la´tex ligadas a un nu´cleo de partı´culas macroporosas de 8,5 mm con un taman ˜o de poro de ˚ y constituidas de etilvinilbenceno entrecruzado con 55% de 2000 A divinilbenceno. L32—Relleno de intercambio con ligando quiral–complejo de L prolina y cobre unido covale ntemente a partı´culas de sı´lice irregulares de 5 mm a 10 mm de dia´metro. L33—Relleno con capacidad para separar dextranos de un taman˜o molecular en un intervalo de entre 4000 y 500 000 Da. Es esfe´rico con base de sı´lice y tiene un procesamiento que le proporciona estabilidad frente al pH. [ NOTA— Esta´ disponible como TSKgel G4000 SWXL que se puede obtener de Tosoh Biosep (www. tosohbiosep.com).] L34—Resina de intercambio catio´nico fuerte que consiste de un copolı´mero sulfonado entrecruzado de estireno-divinilbenceno en la forma de plomo, de aproximadamente 9 mm de dia´metro. L35—Relleno de sı´lice esfe´rica estabilizada con zirconio con una fase unida que consta de una monocapa molecular hidro´fila (tipo ˚. diol), con un taman ˜o de poro de 150 A L36—Derivado 3,5-dinitrobenzoilo de L-fenilglicina unido covalentemente a sı´lice aminopropı´lica de 5 mm. L37—Relleno con capacidad para separar proteı´nas por taman˜o molecular en un intervalo de entre 2000 y 40 000 Da. Es un gel de polimetacrilato. L38—Relleno basado en metacrilato para cromatografı´a de exclusio´n por taman˜o de muestras hidrosolubles. L39—Gel de polihidroximetacrilato hidro´filo de resina esfe´rica totalmente porosa. L40—Partı´culas de sı´lice porosas cubiertas con tris-3,5-dimetilfenilcarbamato de celulosa, de 5 mm a 20 mm de dia´metro. L41—Glicoproteı´na a1-a´cida inmovilizada sobre partı´culas esfe´ricas de sı´lice, de 5 mm de dia´metro.
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L42—Grupos octilsilano y octadecilsilano unidos quı´micamente a partı´culas de sı´lice porosas, de 5 mm de dia´metro. L43—Grupos pentafluorofenilo unidos quı´micamente a partı´culas de sı´ lice mediante un espaciador propilo, de 5mm a 1 0 mm de dia´metro. L44—Un soporte multifuncional, que consiste en un sustrato de ˚ , unido a un intercambiador sı´lice esfe´rico de alta pureza, 60 A catio´nico, con funcionalidad sulfo´nica a´cida, adema´s de una funcionalidad en fase reversa convencional de C8. L45—Beta ciclodextrina unida a partı´culas de sı´lice porosas, de 5 mm a 10 mm de dia´metro. L46—Sustrato de poliestireno y divinilbenceno aglomerado con perlas de la´tex con funcionalidad de aminas cuaternarias, de aproximadamente 10 mm de dia´metro. L47—Sustrato microporoso de intercambio anio ´ nico de alta capacidad, totalmente funcionalizado con grupos trimetilamino, de 8 mm de dia´metro. [ NOTA— Esta´ disponible como CarboPac MA1 y lo distribuye Dionex Corp. (www.dionex.com).] L48—Poliestireno entrecruzado sulfonado, con una capa exterior de microperlas de intercambio anio´nico porosas submicrome´tricas, de 15 mm de dia´metro. L49—Un relleno en fase reversa obtenido por recubrimiento con una capa fina de polibutadieno sobre partı´culas porosas esfe´ricas de zirconio, de 3 mm a 10 mm de dia´metro. [ NOTA— Esta´ disponible como Zirchrom PBD, fabricado por ZirChrom Separations, Inc. y distribuido por Alltech, www.Alltechweb.com.] L50—Resina multifuncional, con retencio´n en fase reversa y funcionalidades de intercambio de aniones fuerte. La resina consta de etilvinilbenceno, entrecruzado al 55% con copolı ´mero de divinilbenceno, de 3 mm a 15 mm de dia´metro, y una superficie de no menos de 350 m2 por g. El sustrato esta´ recubierto de partı´culas de la´tex con funcionalidad de amonio cuaternario que constan de estireno entrecruzado con divinilbenceno. [ NOTA— Esta´ disponible como OmniPac PAX-500 y lo distribuye Dionex Corp. (www. dionex.com).] L51—Partı´ culas de sı´lice esfe´ricas, porosas, recubiertas con amilosa tris-3,5-dimetilfenilcarbamato, de 5 mm a 1 0 mm de dia´metro. [ NOTA— E sta´ disponible como Chiralpak AD que se puede obtener de Chiral Technologies, Inc., (www.chiraltech.com).] L52—Resina de intercambio catio´ nico fuerte de sı´lice porosa con grupos sulfopropilo, de 5 mm a 1 0 mm de dia´metro. [ NOTA— Esta´ disponible como TSK IC SW Cation que se puede obtener de Tosoh Biosep (www.tosohbiosep.com).] L53—Resina de intercambio catio´nico de´bil que consta de etilvinilbenceno, entrecruzado al 55% con copolı ´mero de divinil benceno, de 3 mm a 15 mm de dia´metro. El sustrato esta´ injertado en la superficie con a´cido carboxı´lico y/o mono´meros funcionalizados de a´cido fosfo´rico. La capacidad es de no menos de 500 mEq/ columna. [ NOTA— Esta´ disponible como IonPac CS14 distribuido por Dionex Corp. (www.dionex.com).] L54—Medio de exclusio´n por taman˜o constituido por dextrano unido covalentemente a perlas de agarosa porosa altamente entrecruzada, de aproximadamente 13 mm de dia´metro. [ NOTA— Esta´ disponible como Superdex Peptide HR 10/30 que se puede obtener de Amersham Pharmacia Biotech (www.amershambio sciences.com).] L55—Resina de intercambio catio ´nico fuerte hecha de sı´lice porosa recubierta con copolı´mero d e polibutadieno–a´cido maleico, de aproximadamente 5 mm de dia´metro. [ NOTA— Esta´ disponible como IC-Pak C M/D que se puede obtener de Waters Corp. (www.waters.com).] L56—Propilsilano unido quı´micamente a partı´culas de sı´lice totalmente porosas, de 3 mm a 1 0 mm de dia´metro. [ NOTA— Esta´ disponible como Zorbax SB-C3 que se puede obtener de Agilent Technologies. (www.agilent.com/chem).] L57—Proteı´ na de reconocimiento quiral, ovomucoide, unida quı´micamente a partı´culas de sı´lice, de aproximadamente 5 mm de ˚ . [ NOTA— Esta´ disponible dia´metro, con un taman˜o de poro d e 120 A como Ultron ES-OVM que se puede obtener de Agilent Technologies (www.agilent.com/chem).] L58—Resina de intercambio catio ´ nico fuerte, que consiste de copolı´mero sulfonado entrecruzado de estireno-divinilbenceno en la forma so´dica, de aproximadamente 7 mm a 11 mm de dia´metro. [ NOTA— E sta´ disponible como Aminex HPX-87N que se puede obtener de Bio-Rad Laboratories, (N8 de cata´logo 2000/01, 1250143) www.bio-rad.com.]
Pruebas Fı´sicas / h621i Cromatografı´a
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L59—Relleno con capacidad para separar proteı ´nas por peso molecular en un intervalo de entre 10 y 500 kDa. Es esfe´rico (10 mm), con base de sı´lice y tiene un procesamiento que le proporciona caracterı´sticas hidro´filas y estabilidad de pH. [ NOTA— Esta´ disponible como TSKgel G3000SW Column (columna analı´tica) y como TSKgel Guard (guarda columna) que se pueden obtener de Tosoh Biosep (nu ´ mero de pieza 05789 y 05371, respectivamente) (www.tosohbiosep.com).] L60—Gel de sı´lice poroso, esfe´rico, de 3 mm o 5 mm de dia´metro, cuya superficie se ha modificado covalentemente con grupos palmitamidopropilo y se ha recubierto exhaustivamente. [ NOTA— Esta´ disponible como Supelcosil ABZ que se puede obtener de Supelco (www.sigmaaldrich.com/supelco).] L61—Resina de intercambio anio´nico fuerte hidro´xido-selectiva compuesta de un nu´cleo altamente entrecruzado de partı ´culas microporosas de 13 mm con un taman˜o de poro de menos de ˚ y que consiste en etilvinilbenceno entrecruzado con 10 A divinilbenceno al 55%, con un recubrimiento de la´tex compuesto de microperlas de 85 nm de dia´metro unidas con iones alcanol amonio cuaternario (6%). [ NOTA— Esta´ disponible como Ion Pac AS 11 y como AG 11 que se pueden obtener de Dionex (www.dionex.com).] L62—Fase de silano C30 unida a sı´lice esfe´rica, totalmente porosa, de 3 mm a 15 mm de dia´metro.
Fases G1—Aceite de dimetilpolisiloxano. G2—Goma de dimetilpolisiloxano. G3—50% de fenilpolisiloxano y 50% de metilpolisiloxano. G4—Polie´ster de succinato de dietilenglicol. G5—3-Cianopropilpolisiloxano. G6—Trifluoropropilmetilpolisiloxano. G7—50% de 3-cianopropilsilicona y 50% de fenilmetilsilicona. G8—80% de bis (3-cianopropil)polisiloxano y 20% de 3cianopropilfenilpolisiloxano (los porcentajes hacen referencia a la sustitu cio´n molar). G9—Metilvinilpolisiloxano. G10—Poliamida formada por reaccio´n de un a´cido dicarboxı´lico de C36 con 1,3-di-4-piperidilpropano y piperidina en una relacio´n molar de 1,00: 0,90 : 0,20. G11—Polie´ster de sebacato de bis(2-etilhexilo). G12—Polie´ster de succinato de fenildietanolamina. G13—Sorbitol. G14—Polietilenglicol (peso molecular promedio de 950 a 1050). G15—Polietilenglicol (peso molecular promedio de 3000 a 3700). G16—Compuesto de polietilenglicol (peso molecular promedio de aproximadamente 15 000). Un compuesto de polietilenglicol de alto peso molecular con un enlazador diepo´xido. [ NOTA— Esta´ disponible comercialmente como Polyethylene Glycol Compound 20M o como Carbowax 20M, que se pueden obtener de proveedores de reactivos para cromatografı´a.] G17—75% de fenilpolisiloxano y 25% de metilpolisiloxano. G18—Polialquilenglicol. G19—25% de fenilsilicona, 25% de cianopropilsilicona y 50% de metilsilicona. G20—Polietilenglicol (peso molecular promedio de 380 a 420). G21—Succinato de neopentilglicol. G22—Ftalato de bis(2-etilhexilo) G23—Adipato de polietilenglicol. G24—Ftalato de diisodecilo. G25—Compuesto de polietilenglicol y a´cido terefta´lico (TPA, por sus siglas en ingle´s). Un compuesto de alto peso molecular de un polietilenglicol y un diepo´xido que se esterifica con a´cido terefta´lico. [ NOTA— Esta´ disponible comercialmente como Carbowax 20M-TPA que se puede obtener de proveedores de reactivos para cromatografı´a.] G26—25% de 2-cianoetilpolisiloxano y 75% de metilpolisiloxano. G27—5% de fenilpolisiloxano y 95% de metilpolisiloxano. G28—25% de fenilpolisiloxano y 75% de metilpolisiloxano. G29—3,3’-Tiodipropionitrilo. G30—Tetraetilenglicol dimetil e´ter. G31—Nonilfenoxipoli(etilenoxi)etanol (la longitud promedio de la cadena etilenoxi es 30); Nonoxinol 30.
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G32—20% de fenilmetilpolisiloxano y 80% de dimetilpolisiloxano. G33—20% de carboranosilicona y 80% de metilsilicona. G34—Polie´ster de succinato de dietilenglicol estabilizado con a´cido fosfo´rico. G35—Un compuesto de alto peso molecular de polietilenglicol y un d iepo´ xido que se esterifica con a´cido nitroterefta´lico. G36—1% de vinilpolisiloxano y 5% de fenilmetilpolisiloxano. G37—Poliimida. G38—Fase G1 que contiene un pequen˜o porcentaje de inhibidor de asimetrı´a. [ NOTA— Un grado adecuado esta´ disponible comercialmente como ‘‘SP2100/0,1% Carbowax 1500’’ que se puede obtener de Supelco, Inc., (www.sigmaaldrich.com/supelco).] G39—Polietilenglicol (peso molecular promedio aproximadamente 1500). G40—Adipato de etilenglicol. G41—Fenilmetildimetilsilicona (sustituida al 10% por fenilo). G42—35% de fenilpolisiloxano y 65% de dimetilpolisiloxano (los porcentajes hacen referencia a la sustitucio´n molar). G43—6% de cianopropilfenilpolisiloxano y 94% de dimetilpolisiloxano (los porcentajes hacen referencia a la sustitucio´ n molar). G44—2% de grasa de hidrocarburos de vaselina de bajo peso molecular y 1% de solucio´n de hidro´xido de potasio. G45—Divinilbenceno-etilenglicol-dimetilacrilato. G46—14% de cianopropilfenilpolisiloxano y 86% de metilpolisiloxano. G47—Polietilenglicol (peso molecular promedio aproximadamente 8000). G48—Cianopolisiloxano altamente polar y parcialmente entrecruzado.
Soportes NOTA— A menos que se especifique algo diferente, se indican taman ˜os de malla de 80 a 100 o alternativamente de 100 a 120. S1A—Tierra silı´cea para cromatografı´a de gases que ha sido fundida-calcinada mezclando diatomita con flujo de Na2CO3 y calcinada a una temperatura superior a 9008. La tierra silı´cea se lava con a´cido, luego se lava con agua hasta lograr la neu tralidad, pero no se lava con bases. La tierra silı´cea puede ser silanizada al tratarla con un agente como dimetildiclorosilano [ NOTA— A menos que se especifique algo diferente en la monografı ´a individual, se indica un soporte silanizado.] para enmascarar los grupos silanoles superficiales. S1AB—Tierra silı´cea conforme a la descripcio ´ n anterior pero lavada con a´cido y base. [ NOTA— A menos que se especifique algo diferente en la monografı´a individual, se indica un soporte silanizado.] S1C—Un soporte preparado con ladrillo refractario molido y calcinado o quemado con arcilla como aglutinante, a una temperatura por encima de los 9008 y lavado posteriormente con a´cido. Puede estar silanizado. S1NS—Tierra silı´cea no tratada. S2—Copolı´mero de estireno-divinilbenceno con un a´rea nominal de menos de 50 m2 por g y un dia´metro de poro promedio de 0,3mm a 0,4 mm. S3—Copolı´mero de etilvinilbenceno y divinilbenceno con un a´rea nominal de 500 m2 a 600 m2 por g y un dia´metro de poro promedio de 0,0075 mm. S4—Copolı´mero de estireno-divinilbenceno con grupos aroma´ticos –O y –N con un a´rea nominal de 400 m2 a 600 m2 por g y un dia´metro de po ro promedio de 0,007 6mm. S5—Polı´mero de tetrafluoroetileno de alto peso molecular de malla 40 a 60. S6—Copolı´mero de estireno-divinilbenceno con un a´rea nominal de 250 m2 a 350 m2 por g y un dia´metro de poro promedio de 0,0091 mm. S7—Carbono grafitizado que tiene un a´rea nominal de 12 m2 por g. S8—Copolı´mero de 4-vinil-piridina y estireno-divinilbenceno. S9—Polı´mero poroso a base de o´xido de 2,6-difenil- p-fenileno. S10—Copolı´mero altamente polar entrecruzado con acrilonitrito y divinilbenceno.
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h631i Color y Acromatismo / Pruebas Fı´sicas
S11—Carbono grafitizado que tiene un a´rea nominal de 100 m2 por g modificado con cantidades p equen˜as de vaselina y compuestos de polietilenglicol. [ NOTA— Esta´ disponible comercialmente como SP1500 en Carbopack B que se puede obtener de Supelco (www.sigmaaldrich.com/supelco).] S12—Carbono grafitizado que tiene un a´rea nominal de 100 m2 por g.
h631i COLOR Y ACROMATISMO Definicio´n— A los fines de este capı´tulo, el color se puede definir como la percepcio´n o la respuesta subjetiva de un observador al estı´mulo objetivo de energı´a radiante en el espectro visible que se extiende en el intervalo de longitudes de onda de 400 nm a 700 nm. El color percibido es una funcio´ n de tres variables: las propiedades espectrales del objeto, tanto absorbentes como reflectantes; las prop iedad es espe ctral es de la fuent e de ilumi naci o´n; y las caracterı´sticas visuales del observador. Se dice que dos objetos poseen colores iguales para una fuente especı´fica de iluminacio ´ n cuando un observador no puede detectar una diferencia de color. Cuando un par de objetos presenta colores iguales, con una fuente de iluminacio´n y no con otra, constituyen un par metame´rico. El color de dos objetos es igual para todas las fuentes de iluminacio´n si los espectros de absorcio´n y de reflectancia de los dos objetos son ide´nticos. El acromatismo o falta de color es un extremo de cualquier escala de color para la transmisio´n de luz. Esto implica la ausencia completa de color y, en consecuencia, el espectro visible del objeto carece de absorbancias. A efectos pra´cticos, el observador en este caso percibe poca o ninguna absorcio´ n en el espectro visible. Atributos del Color— Como la sensacio´n de color tiene un componente subjetivo y otro objetivo, el color no puede describirse exclusivamente en te´rminos espectrofotome´tricos. Por lo tanto, los atributos comunes del color no pueden corresponder uno a uno con la terminologı´a espectral. Por lo general se utilizan tres atributos para identificar un color. (1) el matiz, o la cualidad segu´n la cual una familia de colores se distingue de otra, como por ejemplo rojo, amarillo, azul, verde y te´rminos intermedios; (2) el valor, o la cualidad que distingue un color claro de uno oscuro; y (3) la cromaticidad, o la cualidad que distingue un color fuerte d e uno de´bil, o el grado en el cual un color difiere de un gris del mismo valor. Los tres atributos del color se pueden utilizar para definir un espacio de color tridimensional, en el cual se ubica cualquier color por sus coordenadas. El espacio de color elegido es visualmente uniforme si la distancia geome´trica entre dos colores en el espacio de color es directamente una medida de la distancia del color entre ellos. A menudo se eligen coordenadas cilı´ndricas por conveniencia: Los puntos a lo largo del eje longitudinal representan valores del oscuro al claro o del negro al blanco y poseen un matiz indeterminado y ninguna cromaticidad. Centra´ndose en una seccio´n transversal perpendicular al eje del valor, el matiz se determina por el a´ngulo con respecto al eje longitudinal y la cromaticidad se determina por la distancia desde el eje longitudinal. Los matices rojos, amarillos, verdes, azules, morados e intermedios esta´n dados por diferentes a´ngulos. Los colores a lo largo de un radio de una seccio´n transversal tienen el mismo matiz, que se convierte en un matiz ma´s intenso a medida que se aleja. Por ejemplo, el agua incolora o acroma´tica tiene un matiz intermedio, valor alto y ninguna cromaticidad. Si se agrega un soluto de color, el agua adopta un matiz especı´fico. A medida que se agrega ma´s soluto, el color se torna ma´s oscuro, ma´s intenso, o ma´s profundo; es decir, generalmente la cromaticidad aumenta y el valor disminuye. Sin embargo si el soluto es de color neutro, es decir, gris, el valor disminuye, no se observa un aumento en la cromaticidad y el matiz permanece indeterminado. Las mediciones espectrosco´picas de laboratorio pueden convertirse en mediciones de los tres atributos de color. Los resultados espectrosco´picos para tres luces o estı´mulos elegidos se ponderan mediante tres funciones de distribucio ´ n para producir los valores
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tricroma´ticos, X , Y , Z (ver Color—Medicio´n Instrumental h1061i). Las funciones de distribucio ´n se determinaron en experimentos de comparacio´n de color con sujetos humanos. Los valores tricroma´ticos no son coordenadas en un espacio de color visualmente uniforme; sin embargo, se han propuesto varias transformaciones que son cercanas a la uniformidad, una de las cuales se describe en el capı´tulo citado h1061i Color—Medicio´n Instrumental . El valor es a menudo una funcio´n solamente del valor de Y . La obtencio´n de uniformidad en el subespacio de matiz y cromatismo ha sido menos satisfactoria. En un sentido pra´ctico, esto significa que en una comparacio ´n visual de colores, cuando dos objetos difieren significativamente en matiz, resulta difı ´cil decidir cua´l tiene mayor cromaticidad. Esto sen˜ala la importancia de elegir un esta´ndar de comparacio´n lo ma´s parecido posible al color de la muestra, especialmente para los atributos de matiz y cromaticidad. Determinacio´ n de Color y Esta´ndares— La percepcio´n del color y de la igualdad de colores depende de las condiciones de observacio ´n e iluminacio ´n. Las determinaciones deben hacerse usando iluminacio´n difusa y uniforme bajo condiciones que reduzcan al mı´nimo las sombras y la reflectancia no espectral. La superficie de los polvos debe alisarse con presio´n suave para que puedan presentar una superficie plana sin irregularidades. Los lı´quidos deben compararse en tubos para comparacio ´ n de color iguales, contra un fondo blanco. Si se descubre que los resultados varı´an con la iluminacio ´n, se considerara´n correctos los valores obtenidos con luz de dı´a natural o artificial. En lugar de la determinacio ´ n visual debe emplearse un me´todo instrumental apropiado. Los colores de los esta´ndares deben ser lo ma´s parecidos posibles a los de las muestras de prueba para cuantificar las diferencias de color. Los esta´ndares para materiales opacos esta´n disponibles como conjuntos de muestras indicadoras de color que se disponen en un espacio visualmente uniforme.* Esta´ndares para comparaciones de color de lı´quidos, identificados mediante una letra, se pueden preparar segu´n la tabla adjunta. Para preparar el lı´quido de comparacio´n requerido, pipetear y transferir los volu ´ menes prescritos de las soluciones de prueba colorime´tricas [ver en Soluciones Color ime´tricas (SC) en la seccio´n Reactivos, Indicadores, y Soluciones] y agua en uno de los recipientes para comparacio ´n y mezclar la solucio´n en el recipiente. Hacer la comparacio´n segu´n se indica en la monografı´a individual, bajo las condiciones de observacio´n previamente descritas. Los lı´quidos de comparacio´n u otras combinaciones de las soluciones colorime´tricas pueden emplearse en concentraciones muy bajas para medir desviaciones del acromatismo. Lı´quidos de Comparacio´n
Lı´quido de Comparacio´n A B C D E F G H I J K L M N O P Q R *
Partes de Cloruro Cobaltoso SC 0,1 0,3 0,1 0,3 0,4 0,3 0,5 0,2 0,4 0,4 0,5 0,8 0,1 0,0 0,1 0,2 0,2 0,3
Partes de Cloruro Fe´rrico SC 0,4 0,9 0,6 0,6 1,2 1,2 1,2 1,5 2,2 3,5 4,5 3,8 2,0 4,9 4,8 0,4 0,3 0,4
Partes de Sulfato Cu´prico SC 0,1 0,3 0,1 0,4 0,3 0,0 0,2 0,0 0,1 0,1 0,0 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,2
Partes de Agua 4,4 3,5 4,2 3,7 3,1 3,5 3,1 3,3 2,3 1,0 0,0 0,3 2,8 0,0 0,0 4,3 4,4 4,1
Las colecciones de muestras de color, ordenadas segu´n matiz, valor y cromatismo en un espacio visualmente uniforme y apropiado para su uso en la designacio ´n de colores de muestras por comparacio ´ n visual esta´n disponibles en GretagMacbeth LLC, 617 Little Britain Road, New Windsor, NY 12553-6148.
