Practica 2 "Acción de la amilasa sobre el almidón"
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES PLANTEL SUR PRACTICA 2 “ACCIÓN DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDÓN” EQUIPO 3: SERRATO MAGAÑA KARLA DENNISE RUIZ TEMPLOS MARIANA TERÁN HERNÁNDEZ PABLO ENRIQUE PROFESORA: MARIA EUGENIA TOVAR GRUPO: 528
Hipótesis: El almidón es un polímero,formado por enlaces de amilasa y amilopectina. En la practica se podrá identificar la presencia del almidón con ayuda del reactivo lugol que nos dará una solución en color morado. La enzima de la amilasa va a hidrolizar al almidón rompiendo sus enlaces. Obteniendo glucosa. Para poder identificar y comprobar que en verdad se rompieron tos enlaces usaremos el reactivo de benedict, el cual formara un precipitado color rojo ladrillo que permitirá identificar los azucares simples como la glucosa.
Preguntas generadoras : ¿Cómo actúa la amilasa sobre el almidón? La amilasa en una ezima que va a actuar sobre el polisacarido almidón hidrolizando sus enlaces, hasta degradarlo degradarloss en glucosa. ¿Como está formado el almidón químicamente?
esta formado por moleculas de amilasa y amilopectina unidos mediante enlaces Oglucosidicos ¿Que es la amilasa desde el punto de vista químico? es la encargada de degradar y comenzar la digestión química de los alimentos. ¿Cuál es el papel que desempeña el almidón en los animales? tiene una gran importancia en los animales ya que actúa como sustancia de reserva energética. ¿Por que es necesario para los animales que la amilasa actúe sobre el almidón? por que al igual que en los seres humanos, actúa como lubricante y facilita la degradación del alimento.
Introducción:
Las enzimas son catalizadores proteicos que aceleran la velocidad de las reacciones metabólicas que ocurren tanto a nivel celular como fuera de ellas, sin sufrir ellas cambios en su estructura. Para el proceso de digestión , las biomoléculas ingeridas en la dieta deben ser degradadas a sus componentes más sencillos para ser absorbidas a nivel del tubo digestivo y así llegar al lugar correspondiente a nivel celular donde participarán en diversos procesos metabólicos indispensables para el mantenimiento de una adecuada homeostasis.La digestión de los carbohidratos comienza en la boca, donde los alimentos se mezclan con la Amilasa salival que degrada los enlaces del almidón liberándose Maltosa, Glucosa y dextrinas de almidón que poseen todos los enlaces.La acción de las enzimas, por sus características físico-químicas, pueden afectarse por la condiciones presentes en el lugar de acción de éstas. Entre los principales factores que pueden modificar la acción enzimática tenemos: a. La temperatura: Todas las enzimas muestran cierta termolabilidad, aunque para muchas de ellas el aumento de la temperatura, hasta cierto límite, acelera la velocidad de la reacción. Sin embargo, por que la mayoría de éstas son estructuras proteicas , pueden ser desnaturalizadas a medida que se aumenta la temperatura y así perder su actividad biológica. La temperatura a la cual se observa la máxima actividad enzimática se denomina Temperatura Óptima. b. El pH: Por su característica proteica, muchas enzimas por el pH de donde se encuentran pueden cambiar desde un estado ionizado ( Con carga ) a uno no ionizado ( sin carga), afectando así la actividad biológica de las mismas. Cada enzima posee un pH característico donde puede realizar su función ( pH óptimo), cualquier variación del mismo puede afectar la acción enzimática y así afectar la velocidad de las reacciones químicas. c. Inductores e inhibidores:
Existen sustancias químicas que pueden afectar la interacción del sustrato y la enzima, ya sea aumentando la actividad enzimática ( Inductores ) o disminuyéndola ( Inhibidores). Los inhibidores tienen gran utilidad en bioquímica, ya que ayudan a determinar la especificidad de la enzima por el sustrato, la naturaleza de los grupos funcionales en el mantenimiento de la estructura activa de la enzima. Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima. De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, se han clasificado en : • Inhibidores Reversibles. • Inhibidores Irreversibles
Objetivos: Identificar la acción de la amilasa de la saliva sobre el almidón identificar los productos de la acción de la amilasa sobre el almidón Caracterizar la digestión enzimática realizada por la secreción de las glándulas salivales
Material: Papel filtro Embudo 5 tubos de ensayo 2 goteros 2 cápsulas de porcelana
Material biológico: Muestra de saliva
Sustancias: Agua destilada Almidón Reactivo de Benedict Reactivo de lugol para almidón
Equipo: Balanza granataria electrónica Parrilla con agitador magnético
Procedimiento: A. Obtención de la enzima amilasa Despues de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro para estimular la salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1 ml. La saliva así obtenida se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua destilada,
así se obtiene la preparación de enzima base. Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g de almidón y se disuelven en 100 ml de agua destilada. Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la enzima. En otro tubo se colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución del almidón al 2%. Los tubos se colocan en baño maria a 37° C, durante 15 minutos dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón. Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño maria y se harán las pruebas del lugol y el benedict. B. Reacciones del lugol para almidón y benedict La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta caracteristico. Toma 1 ml de la disolución de cada uno de los tubos y añade unas gotas de lugol a cada una de ellas. Si no existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva. La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Toma 1 ml de cada una de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño Maria, si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azucares como la glucosa y la maltosa.
Resultados: Contenido del tubo
Reacción del lugol
Reacción del Benedict
Amilasa+almidón+agua
negativa
positiva
Almidón+agua
positiva
negativa
Solo en el tubo que contiene la enzima base (amilasa), agua destilada y solución del almidón, y con la acción de la sustancia de Benedict, ocurrirá una reacción que nos indica que en esta hay presencia de azucares. En cambio en el tubo que contiene solo agua destilada y solucion del almidón, y con ayuda del lugol.. todo la mezcla tomo un color azul, que nos indica que en esta hay presencia de almidón
Análisis de resultados: enzima
es una proteína que permiten que se lleven a cabo todas las reacciones químicas acelerando dichas reacciones.
digestión química
Se lleva a cabo por las enzimas y estas hacen que las moléculas se transformen de complejas a simples.
digestión mecánica
Es la trituración del alimento por medio de la masticación con ayuda de los dientes.
degradación
Es la transformación de moléculas complejas a simples, con ayuda de enzimas que romperán los enlaces.
saliva
Es una sustancia liquida que humedece los alimentos para así facilitar la masticación
azúcares simples
están formados por un monosacarido, son de rápida absorción y digestión.
azúcares complejos
están compuestos por muchas moléculas de glucosa y tienen una digestión más lenta
polímeros
son moléculas complejas o macro moléculas como las grasas, proteínas, ácidos nucleicos entre otros.
monómeros
son moléculas sencillas como el glicerol y ácidos grasos, aminoácidos, bases nitogenadas entre otros.
Replanteamiento de la hipótesis: La amilasa es una enzima (producida por las glándulas salivales) que rompe los enlaces entre los azúcares que constituyen al almidón y finalmente después de su acción deja glucosa. El almidón se hidroliza por medio de la amilasa que se encuentra formando parte de la saliva y el jugo pancreático. Para poder identificar la presencia de almidón, la disolución tendrá que tornarse azúl intenso.
Conceptos clave: Enzima, digestión, digestión química, digestión mecánica, degradación, secreciones de glándulas del aparato digestivo, reacciones químicas en el interior del cuerpo, azucares simples, azucares complejos, polímeros y monómeros.
Relaciones: Este tema es importante porque permite observar en el laboratorio la acción de las secreciones de las glándulas salivales, las que llevan a cabo una digestión química de los polisacaridos, apoya a los estudiantes en la construcción del concepto de digestión química y permite comprender la función de algunas glándulas asociadas al aparato digestivo.
Discusión: En esta practica logramos identificar como una enzima actúa sobre el almidón, y nos ayuda a entender mejor como es que otras enzimas actuan en todo el aparato digestivo. La enzima de la amilasa va a hidrolizar al almidón rompiendo sus enlaces y en esta practica comprobamos que estos enlaces se rompieron y formaron glucosa. Pudimos identificar cómo es que la amilasa actuó sobre el almidón, también la presencia de éste y la de sus productos: la glucosa y maltosa.
Conclusión: La amilasa es la enzima secretada por las glándulas salivales y la amilasa pancreática (parótidas, submaxilares y sublinguales) encargada de romper los enlaces del almidón, formando glucosa y maltosa. La ð-amilasa hidroliza al almidón en ð-maltosa; la enzima actúa primero solo sobre los extremos no reductores La función de la amilasa consiste en degradar el almidón para formar azúcares simples. las enzimas catalizadoras en ese caso la amilasa actúa sobre el polisacárido el almidón, hidrolizando el enlace O-glicosídico, por lo que el almidón se termina por transformar en unidades de glucosa.
Referencias:
http://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=2581978 http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas/schmid th02/parte07/01.html
PRÁCTICA #2 “Acción de la amilasa sobre el almidón”
Autores: Domínguez Martínez Griselda Maya Cárdenas Brenda Morales Aguirre Gabriela G. Viadero Cumplido Javier
Grupo: 528 Objetivos: Identificar la acción de la amilasa de la saliva sobre el almidón Identificar los productos de la acción de la amilasa sobre el almidón Caracterizar la digestión enzimática realizada por la secreción de las glándulas salivales.
Hipótesis: El almidón es un polisacárido, las azúcares que lo constituyen son moléculas de glucosa, de carbono, hidrógeno y oxígeno. La amilasa hidroliza el 2-cloro-4-nitrofenil –a- D-maltotriósido (CNPG3) a 2-cloro-4-nitrofenol (CNP)y forma 2-cloro-4-nitrofenil-aD-maltoside (CNPG2), maltotriosa (G3) y glucosa (G). Es necesario que la amilasa actúe sobre el almidón Porque los animales tienen lo equivalente al almidón que es una sustancia de reserva energética que recibe el nombre de glucógeno, la cual es digerida por la amilasa con el objetivo de formar azucares simples.
Introducción: La amilasa, denominada también sacarasa o ptialina, es un enzima hidrolasaque tiene la función de catalizar la reacción de hidrólisis de los enlaces 1- 4 del componente α -Amilasa al digerir el glucógeno y el almidón para formarazúcares simples, se produce principalmente en las glándulas salivales(sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene actividad enzimática a un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como en la pancreatitis, aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre (amilasemia). Fue la primera enzima en ser identificada y aislada por Anselme Payen en 1833, quien la bautizó en un principio con el nombre de "diastasa". La amilasa, denominada también sacarasa o ptialina, es un enzima hidrolasaque tiene la función de catalizar la reacción de hidrólisis de los enlaces 1- 4 del componente α -Amilasa al digerir el glucógeno y el almidón para formarazúcares simples, se produce principalmente en las glándulas salivales(sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene actividad enzimática a un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como en la pancreatitis, aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre (amilasemia). Fue la primera enzima en ser identificada y aislada por Anselme Payen en 1833, quien la bautizó en un principio con el nombre de "diastasa". Las reacciones de hidrólisis se producen cuando los compuestos orgánicos reaccionan con el agua. Se caracterizan por la división de una molécula de agua en un grupo de hidrógeno e hidróxido con uno o ambos de estos apegándose a un producto orgánico de partida. La hidrólisis, por lo general, requiere el uso de un catalizador ácido o base y se utiliza en la síntesis de muchos compuestos útiles. El término "hidrólisis" significaliteralmente dividir con agua; el proceso inverso, cuando el agua se forma en una reacción, se llama condensación.
Material:
Papel filtro Embudo 5 tubos de ensayo 2 goteros 2 cápsulas de porcelana
Material biológico:
Muestra de saliva
Sustancias:
Agua destilada Almidón Reactivo de Benedict Reactivo de Lugol para almidón
Equipo:
Balanza granataria electrónica Parrilla con agitador magnético
Método: A. Obtención de la enzima amilasa Después de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro para estimular la salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1 ml. La saliva así obtenida se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua destilada, así se obtiene la preparación de enzima base. Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g de almidón y se disuelven en 100 ml de agua destilada Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la enzima. En otro tubo se colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2%. Los tubos se colocan en baño maría a 37° C, durante 15 minutos dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño maría y se harán las pruebas del lugol y Benedict.
B. Reacciones de lugol para almidón y Benedict La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta característico. Toma 1 ml de la disolución de cada uno de los tubos y añade unas gotas de lugol a cada una de ellas. Si no existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva. La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Toma 1 ml de cada uno de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño María, si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares como la glucosa y la maltosa.
Resultados: Contenido del Tubo Reacción de Lugol Amilasa+ almidón +agua Almidón+agua
negativa
Reacción de Benedict Positiva
positiva
negativa
Interpretación de resultados: Con base a nuestros resultados podemos observar que cuando existe la presencia de amilasa, almidón y agua no existe la hidrólisis , en cambio cuando existe la presencia de almidón y agua si existe la hidrólisis del almidón. Cuando observamos los resultados con Benedict podemos observar que en la presencia de la enzima amilasa si existe presencia de azúcares ya que esta enzima compleja convierte al almidón en una molécula simple en donde se presentan los azúcares , en cambio donde solo se encuentra agua y almidón no presenciamos las azúcares.
Discusión:
Como equipo podemos decir que en cuanto a la forma de trabajo y realización de prácticas todos colaboramos, lo cual permite que se cree un ambiente de trabajo en donde todos los miembros del equipo aporten ideas de manera equitativa para lograr un buen aprendizaje.
Conclusiones: Podemos concluir que la función de la amilasa consiste en degradar el almidón para formar azúcares simples, la amilasa salival o ptialina se encuentra en las saliva, cuando entra en contacto con el almidón que es un polisacárido lo desdobla en unidades de monosacáridos llamados glucosa ;en ese caso la amilasa actúa sobre el polisacárido que es el almidón hidrolizando el enlace Oglicosídico, por lo que el almidón se termina por transformarse en unidades de glucosa. Sin la amilasa las largas cadenas de azucares que conforman los almidones no serian absorbidas por los animales y se desecharían del cuerpo de estos sin brindar la energía que la glucosa del almidón proporcionan; así que por lo consiguiente nuestra hipótesis se acaepta.
Bibliografía:
Tovar María Eugenia, Programa de Biología III, 2013
Cyberografía: http://es.wikipedia.org/wiki/Amilasa http://www.monografias.com/trabajospdf900/actividad-enzimaticaamilasa/actividad-enzimatica-amilasa.pdf http://www.ehowenespanol.com/producereaccion-hidrolisis-info_254177/ http://es.wikipedia.org/wiki/Almid%C3%B3n
