Biologia Practica 2

Experimento N°2: Difusión a través de una membrana selectivamente permeable (Diálisis):

Materiales:          

Un vaso de precipitado de 500 ml. Una bolsa de diálisis (reemplazada por una bolsa de celofán) Rejilla y tubos de ensayo pequeños Baño de maría y matraz pequeño con agua Agarradera de tubo de ensayo Reactivo de Benedict Solución de yodo ( Lugol) Cilindro graduado Solución de glucosa 30 % Solución de almidón 1 %

Método: Este experimento se realizara con una bolsa de celofán debido a que presenta características similares a una bolsa de diálisis peritoneal      

Primero se debe agregar a la bolsa de celofán aprox. 25 ml de Solución de glucosa y de almidón. Después se mezcla ambas soluciones dentro de la bolsa. Se añade varias gotas de Solución de yodo (Lugol) a un vaso de precipitado con 300 ml de agua hasta obtener un color dorado. Colocar la bolsa de celofán dentro del agua por 30 minutos. Pasado el tiempo, sacar la bolsa y colocar su contenido dentro de otro vaso de precipitado Realizar la prueba de Benedict a ambas soluciones

Resultados y gráficas: 1. El color inicial de la solución (almidón + glucosa) era de un color que iba de blanco a transparente. 2. Al momento de sacar la bolsa de celofán del agua no se observó cambio alguno en la coloración de alguna de las sustancias. 3. Los resultados obtenidos están en base a la utilización del Reactivo de Benedict en las soluciones pasado el tiempo de 30 minutos: a. La solución que contenida en la bolsa de celofán resulto positivo a la prueba. b. La solución contenida dentro del vaso resulto positiva a la prueba.

Bolsa de celofán conteniendo la solución de glucosa + almidón

Solución de Lugol

Reactivo de Benedict

Bolsa de celofán a punto de sumergirse en la solución de agua + Lugol

Bolsa sumergida en la solución durante 30 minutos

Resultados de la prueba

Discusión:  (1) “La difusión de un soluto (una sustancia disuelta) a través de una membrana diferencialmente permeable se llama diálisis”.  Este concepto es aplicado de manera específica en este experimento dado que se busca comprender la manera en la que actúa la membrana plasmática al permitir el paso de diferentes solutos a través de ella; el celofán es utilizado frecuentemente como "membrana artificial" debido a que está compuesto por moléculas de polisacáridos y puede formar una lámina delgada que permite el paso de moléculas de agua. Estas membranas se fabrican con permeabilidad variable para diferentes solutos.  En el experimento lo que se busco demostrar es como actúa una membrana plasmática a través del proceso de diálisis. Gracias a que la membrana de celofán es permeable al azúcar (sacarosa = glucosa + fructuosa) y al agua resulto perfecta para el experimento.  Cuando se coloca la bolsa de celofán conteniendo glucosa + almidón en un ambiente que contenía agua mezclada con Lugol se dio el proceso de diálisis debido a que la concentración de glucosa es menor fuera de la bolsa y mayor adentro, cuando se igualan las concentraciones de glucosa se seguirá dando intercambio pero sin cambio en las concentraciones.  (2) “La membrana es una estructura funcional activa. La membrana es una estructura funcional activa, con mecanismos enzimáticos que desplazan moléculas específicas penetrando o saliendo de la célula con un gradiente de concentración”  La diálisis es un proceso que no utiliza energía y que las moléculas deben cumplir determinadas características para poder pasar a través de la membrana, es por ello que no cambia la coloración de la solución dentro de la bolsa no cambia de coloración. Esto fue de suma importancia también debido a que no se dio el cambio de coloración en la solución de almidón + glucosa.  (3) “La reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del C anomérico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja”.  Dado a que ambas soluciones dieron positivo a la reacción se puede corroborar que se dio diálisis permitiendo el paso de la

glucosa hacia la solución de agua + Lugol igualando la concentración de glucosa en ambas soluciones. La coloración de la reacción fue la un color marrón rojizo que es indicativo también de la cantidad de cobre reducido. Conclusiones: 1. Difusión es el intercambio de sustancias de un sitio de mayor concentración a otro de menor concentración. Mediante el cual la célula mantiene su integridad estructural y funcional. 2. Gracias a este proceso se puede mantener una determinada concentración de solutos dentro y fuera de las células. 3. Se pudo corroborar que para que se lleve a cabo este proceso se necesitan de diversos factores y que la membrana plasmática es discriminadora dado de que no permite el paso de cualquier soluto; estos solutos que no pueden ingresar a la célula necesitan otros mecanismos para poder entrar y que requiere gasto de energía. 4. Que moléculas como la glucosa pueden atravesar la membrana artificial de celofán, pero cuando se habla de células la glucosa necesita de transportadores (proteínas) o de mecanismos de simporte- antimporte. 5. La Prueba de Benedict ayuda a corroborar la función de la bolsa de diálisis, el de permitir el paso de sustancias, quien en este caso fue hecha de celofán y que permitió el paso de la glucosa, dando positivo ambas sustancias a la reacción de Benedict.

Cuestionario: 1. ¿Cuáles son los resultados de este experimento para las pruebas de yodo y de Benedict? Explique. En el Tubo 1 de ensayo se tomó parte del Lugol que se encontraba en el vaso precipitado y dio como resultado un color rojizo. En el Tubo 2 de ensayo se tomó parte de la solución de la bolsa de Celofán (diálisis) siendo este de color rojizo. Los resultados se dieron de esa manera debido de la bolsa de celofán permitió y actuó como una membrana semipermeable permitiendo el paso de glucosa de una zona de mayor a menor concentración a una de mayor concentración y fue comprobado totalmente con la reacción. 2. ¿Qué indican estos resultados? Estos resultados indican que la bolsa de celofán actuó como una membrana semipermeable permitiendo el paso de glucosa que es un azúcar reductor pero impidiendo el paso de los iones cuprosos hacia dentro de ella; esto fue

comprobado con la reacción de Benedict porque ambas sustancias dieron positivas. 3. ¿Qué característica tiene la membrana de diálisis que afecta los resultados? Si se ponen dos líquidos separados por una membrana semipermeable con diferentes concentraciones de solutos, habrá un paso de solutos desde el compartimento donde la concentración es alta hacia el que es más baja, la bolsa de celofán que usamos actuó como una membrana semipermeable por lo que hubo el paso de la glucosa hacia el medio exterior donde se encontraba el Lugol y por consiguiente dio positivo a la Prueba de Benedict donde se identificó la existencia de azúcares reductores en ambas soluciones.

Bibliografía: (1) F. Goyanes, Marcelo, MEMBRANA CELULAR, España, 2009, página 4 (2) http://ciam.ucol.mx/colima/Electivas/Morfologicas/biologia%20celular/dialisis.ph

(3) Quesada

Mora,

LABORATORIO

Silvia,

MANUAL

DE

EXPERIMENTOS

PARA BIOQUÍMICA;2007; pág. 31

DE