“Año del Diálogo y la Reconciliación Nacional”
FACULTAD: FARMACIA FACULTAD: FARMACIA Y BIOQUIMICA DOCENTE: Mg. JOSÉ ANTONIO LLAHUILLA QUEA V Práctica: 11y 12
DETERMINACION DETERMINACION DE INSECTICIDAS INSECTICIDAS ORGANO FOSFORADOS, CARBAMICOS Y CLORADOS
INTEGRANTES:
Garay Fuertes María María Isabel
Mera Santa Santa Cruz Ermitanio
Obregón Obregón Miriam
Papuico Sánchez Liliana
Tirado Enríquez Fiorella
CICLO: IX SECION: FB9N2
LIMA – LIMA – PERU PERU 2018
INTRODUCCION. Según la OMS, un pesticida o plaguicida es cualquier sustancia o mezclas de sustancias, de carácter orgánico o inorgánico, que está destinada a combatir insectos, ácaros, roedores y otras especies indeseables de plantas y animales que son perjudiciales para el hombre o que interfieren de cualquier otra forma en la producción, elaboración, almacenamiento, transporte o comercialización de alimentos, producción de alimentos, productos agrícolas, madera y productos de madera o alimentos para animales, también aquellos que pueden administrarse a los animales para combatir insectos arácnidos u otras plagas en o sobre sus cuerpos.
MARCO TEORICO PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS Estas propiedades son las determinantes de su cinética ambiental. El aire, el agua, el suelo y los alimentos retienen gran parte de los pesticidas y éstos llegarán a los seres vivos. Constituye un problema actual su persistencia en el medio ambiente, su concentración y transformación en organismos vivos.
1. PLAGUICIDAS ORGA NOCLORADOS Desde el punto de vista estructural, constituyen un grupo de sustancias, muy heterogéneo, teniendo en común la presencia de estructuras monocíclicas o policíclicas con distinto número de sustituyentes cloro.
2. PLA G UICID AS OR G ANOFOS FOR ADOS Son sustancias biodegradables en la naturaleza, sin tendencia a acumularse en las grasas del organismo, pero con gran actividad neurotóxica que va a producir intoxicaciones agudas de gravedad. Son los insecticidas, junto con los carbamatos y piretroides, más ampliamente utilizados en la actualidad.
3.-C A R B A MA TOS Forman parte de una gran familia de plaguicidas entre los que se hallan herbicidas, fungicidas e insecticidas. Todos ellos derivan del ácido Carbámico.
PROCEDIMIENTOS: Se trabajará con el residuo neutro de la práctica de aislamiento de los Tóxicos orgánicos fijos (manzana). La determinación de los Insecticidas se realiza por cromatografía capa fina y revelado diferencial con diferentes reveladores. En una cromatoplaca de 20 x 20 cm estriada sembrar las muestras a una distancia superior a la del nivel del sistema de solventes.
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Silicagel+H2Odestilada
Se realiza el sembrado en cada lado de la placa
Colocar la placa en la cámara de revelado y dejar correr aproximadamente el 70%.
S is tema de solventes B enceno: acetona 5:1
Comparar los colores contra standares.
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Revelado: Azul de Bromofenol
MARON
Revelado: cloruro de paladio
TOXICOS ORGANICOS FURADAN (CARBAMICO) FIJOS (MANZANA)
OFOSFORADO)
RESULTADOS: Muestra
Resultado
Tamaron (organofosforado)
Positivo (Rf=0.92)
Furadan (carbamico)
Negativo
organofosforado
Negativo
Tamaron (org anofosforado)
R f=. R f= 0.92
REACCIONES QUIMICAS.
CROMATOGR AFÍA Y RE LEVADO DE LOS ORG ANOFOSFORADOS R evelado con verde brillante 0.5% Método de detección específico para ácidos carboxílicos.
Cloruro de paladio 1% en HC l 5% La principal aplicación del paladio es su uso como catalizador el cual actúa permitiendo una reacción de acoplamiento C-C. El primer paso consiste en la activación del enlace C-X por la inserción de paladio, seguido de la coordinación al doble enlace (al anillo en caso de arilos metálicos) y la formación del enlace C(sp2)-C(sp2) con la consiguiente salida del átomo de paladio.
DISCUSIONES
Según Sánchez, Victoria Guadalupe; Gutiérrez, César Argentino; Gómez, Diego Sebastian; Loewy, Miriam; Guiñazú, Natalia. En un estudio realizado sobre Residuos de plaguicidas organofosforados y carbamatos en aguas subterráneas de bebida en las zonas rurales de Plottier y Senillosa, Patagonia Norte, Argentina, refieren: La mayor producción de frutas de pepita (manzanas y peras) se ubica en Patagonia Norte con el 78 % de la producción total, registrándose la mayor concentración de frutales en el Alto Valle de Río Negro y Neuquén, lo cual tiene un peso gravitante en las economías de estas provincias y en las exportaciones del sector agrícola argentino. La plaga principal de los frutales de manzana y pera es el lepidóptero Cydia pomonella (carpocapsa). El insecticida más empleado en las actividades agrícolas de la República Argentina es el principio activo clorpirifos que pertenece a la familia de los organofosforados). El blanco de acción primario de clorpirifos es l a enzima acetilcolinesterasa (AChE). Esta enzima es inactivada por plaguicidas organofosforados y carbamatos, dando como resultado la acumulación del neurotransmisor acetilcolina en las sinapsis y uniones neuromusculares. Como consecuencia se producen contracciones rápidas de los músculos voluntarios e involuntarios, conduciendo a parálisis y hasta la muerte, en el caso de exposición a elevados niveles de estas sustancias, dentro del grupo de los carbamatos, sólo propoxur posee un elevado índice de lixiviación, manteniéndose tanto el carbofurano, el pirimicarb y el carbaril en valores intermedios. Por otra parte, todos los OFs estudiados poseen índices de lixiviación bajos a excepción de triazofos que posee un valor intermedio. En este sentido, Loewy y col. (1999) también determinaron en otra zona rural de Neuquén, que metil azinfos era el plaguicida más detectado en muestras de agua subterránea con un 63,7 %, seguido por dimetoato y metidatión 17,08 y 17,79 %, respectivamente. Sumado a esto, un estudio realizado durante el periodo 2003-2004 en la zona rural de Campo Grande y Cinco Saltos, Alto Valle, Provincia de Río Negro, demostró que en la mayoría de los sitios muestreados había presencia de insecticidas organofosforados en agua de consumo provenientes de perforaciones tales como metil azinfos en un rango de detecciones que van de concentraciones trazas hasta 0,99 µg/L. Finalmente, Martínez Vidal y col. (2004) en la región de Almeria, España, determinaron la presencia de endosulfan α (0,25 µg/L), endosulfan sulfato (0,04 µg/L) y clorpirifos (0,08 µg/L) en muestras procedentes
de aguas subterráneas de entre 8 y 12 metros de profundidad. Mientras que
Chau y col. 2015, en un estudio realizado en el Delta del Río Mekong en Vietnam demostraron que todas las fuentes de agua que investigaron: agua de lluvia, pozos de agua subterránea y agua embotellada, estaban contaminadas con plaguicidas. Estos resultados reafirman la importancia de los factores del entorno, las prácticas agrícolas, y la composición del suelo en la dinámica de los plaguicidas y su determinación en diferentes matrices ambientales. CONCLUSIONES. En la práctica realizada mediante cromatografía en capa fina se logró evidenciar presencia de organofosforados en la muestra de manzana, utilizando como muestra estándar el organofosforado (tamaron) que se usó como revelador el cloruro de paladio al 1%. En la muestra de manzana nos dio un resultado negativo para presencia de insecticidas órganocarbamicos y órganoclorados. La determinación de insecticidas organofosforados, organocarbamicos resulta importante determinarlos en las frutas y hortalizas, así como en distintos tubérculos que el hombre los consume, ya que la presencia de estos puede ocasionar efectos perjudiciales para la salud.
CUESTIONARIO. Valores tóxicos de los insecticidas estudiados. Insecticidas organoclorados. Se ha estimado la dosis letal en humanos para algunos insecticidas; es de 2 a 7 g. para el toxafén, de 6 a 60 g. para el clordano, de 8 g. Para el lindano, de 20 a 30 g para el hexaclorociclohexano, 450 g para el metoxiclor. Para el lindano se calcula que la dosis tóxica es de 10 mg/kg y letal de 20 a 70 mg/kg en animales
Insecticidas organofosforados y carbamatos. La dosis tóxica depende de la potencia del organofosforado o carbamato y de muchos otros factores como la vía y el tiempo de exposición. Es importante
conocer la categoría toxicológica del compuesto involucrado para determinar junto con la cantidad ingerida o absorbida por las diferentes vías, la severidad del cuadro clínico y por lo tanto tomar las medidas terapéuticas adecuadas. En el caso del paratión, la absorción dérmica en distintas zonas del cuerpo humano varía desde el 0 %, en el arco plantar, hasta el 100 %, en el escroto . .
Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas.
Determinación
La determinación de POF se realiza mediante técnicas de separación eficaces y rápidas, como la CG, CL y EC.
Determinación por cromatografía de gases (CG). La CG es una técnica basada en la separación de compuestos en función de su volatilidad, por lo que es de primera elección para la determinación de POF ya que mayoritariamente son muy volátiles y termoestables. Es una técnica que tiene un elevado poder de resolución para separar un gran número de compuestos (como se ilustra en la figura 1) y una sensibilidad adecuada para cuantificar niveles de mg/kg ya que se combina con detectores específicos para los POF como son: el detector de captura de electrones (DCE), fotometría de llama (DFLL), nitrógeno fósforo (DNF) y espectrometría de masas (EM) que han permitido desarrollar métodos de análisis de trazas y ul tratrazas.
Determinación por cromatografía líquida (CL). La CL separa los analitos en función de su polaridad y permite determinar cualquier POF independientemente de su volatilidad o termoestabilidad. Esta técnica presenta un poder de resolución inferior al de la CG pero seleccionando
una fase móvil y estacionaria adecuada se obtienen separaciones aceptables, como se muestra en la (figura 2). Los detectores utilizados son: UV-visible que es universal pero poco selectivo ya que muchas moléculas absorben a la misma longitud de onda que los POF; fluorescencia que por el contrario es muy selectivo, pero los POF no son fluorescentes y se precisa de reacciones de derivatización, y espectrometría de masas (EM) que es un detector muy sensible, pero todavía reciente y por ello no se ha generalizado la técnica para el análisis de POF.
Determinación por electroforesis capilar (EC). Esta técnica se basa en la distinta movilidad de las sustancias bajo la acción de un campo eléctrico, en el interior de un capilar de sílice. La separación se produce como consecuencia de la acción combinada de la migración electroforética o moléculas cargadas de la solución que van en dirección a un electrodo de carga opuesta, y del flujo electroosmótico o flujo de electrolito en bloque ocasionado por la pared interna cargada del capilar y el potencial aplicado de forma que todas las moléculas se ven arrastradas al cátodo donde se realiza la detección (Figura 3). Se utilizan dos variantes de la EC, la electroforesis capilar
de zona (ECZ) donde las moléculas neutras se desplazan banda única y la electroforesis capilar electrocinética micelar (ECEM), en la que las moléculas se separan por la adición a la solución de electrolito de aditivos micelares como dodecil sulfato de sódico, así las moléculas neutras con distintas afinidades por las micelas cargadas se separan. La aplicación de esta técnica al analisis de POF es mucho más reciente que el de la CG.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 1. MILLA, Manuel; PALOMINO, Rodolfo. Niveles de colinesterasa serica en agricultura de la localidad de Coropongo (Peru) y determinacion de residuo de plaguicidas inhibidores de la acetilcolinesterasa en frutas y hortalizas cultivadas. Tesis para optar el titulo. Lima. UNMSM.2002. Disponible en: http://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtualdata/tesis/salud/Milla_C_O/t_compl eto.pdf
2. Reactivos de visualización en cromatografía de capa fina. Disponible en:
http://lcso.epfl.ch/files/content/sites/lcso/files/load/TLC_Stains.pdf
3. HERNANDEZ, F. Y BELTRAN,J. Analisis de residuos plaguicidas en aguas. Disponible en; http://abe.ufl.edu/carpena/files/pdf/zona_no_saturada/avances_en_la_in v estigacion_v2/c23_p321_356.pdf 4. Loomis, T; “Fundamentos de Toxicología”. Acribia, Zaragoza. España. 1982. 5. Pineda, E; “Toxicología Alimentaria, Plaguicidas”. Iram, Buenos Aires, Argentina. 1980.
