Praktikum
: Ke IX
Judul
: Pemeriksaan Kadar HDL dan LDL darah
Hari, Tanggal Tanggal : Kamis, 3 Desember 201 Tem!at
: Lab"rat"rium #i"kimia Jurusan $i%i
#&# I P'(D&H)L)&( &* Lata Latarr #ela #elaka kang ng
Lipid adalah senyawa yang mengandung karbon dan hidrogen yang umumnya umumnya hidrofobik: hidrofobik: tidak larut dalam air, tetapi larut dalam pelarut pelarut organik. organik. Pengukuran lipid serum yang paling relevan adalah kolesterol total, trigliserida, dan fraksional kolesterol menjadi fraksi HDL dengan kalkulasi fraksi LDL kolesterol. Koles Koleste tero roll adala adalah h suat suatu u at lema lemak k yang yang bered beredar ar di dala dalam m darah darah,, diproduksi oleh hati dan sangat diperlukan oleh tubuh, tetapi kolesterol berlebih akan menimbulkan masalah terutama pada pembuluh darah jantung dan otak. Darah mengandung !" # kolesterol yang di produksi oleh tubuh sendiri dan $"# berasal dari makanan. Kolesterol yang diproduksi terdiri atas $ jenis yaitu kolesterol HDL dan kolesterol LDL (Low Density Lipoprotein). %ila kolesterol LDL (High Density Density Lipoprotein) jumlahnya berlebih,di dalam darah akan diendapkan pada dinding pembuluh darah dan membentuk bekuan yang dapat menyumbat pembulun darah, sedangkan kolesterol HDL, mempunyai fungsi
membersihkan pembuluh darah dari kolesterol LDL yang berlebihan. &elain itu ada 'rigliserida yang terbentuk sebagai hasil dari metabolisme makanan yang berbentuk lemak dan juga berbentuk karbohidrat dan protein yang berlebihan, yang tidak seluruhnya dibutuhkan sebagai sumber energi.(&iswono, $"")*
Tu+uan Praktikum
+ahasiswa dapat mengetahui ara pemeriksaan HDL dan LDL darah.
#&# II TI(J&)&( P)T&K&
#* Dasar Te"ri Kolesterol merupakan steroid hewani yang terdapat paling meluas dan
dijumpai dalam hampir semua jaringan hewan. Kolesterol merupakan at antara yang diperlukan dalam biosintesis hormon storoid namun tak merpakan keharusan dalam makanan (-essenden ,/!)*. Kolesterol di dalam tubuh di produksi oleh hepar, ia diangkut di dalam plasma terutama sebagai LDL. Kolesterol dieksresikan ke dalam empedu sebagai kolesterol yang tidak berubah atau sebagai asam kolat atau kenodeoksikolat (asam empedu* (%aron, //*. Kolestrol merupakan satu0 satunya steroid yang ada dalam konsentrasi yang bisa dinilai diseluruh tubuh. Kolestrol diet yang berasal dari hewan diabsorbsi dalam jumlah terbatas kedalam sistem limfatik bila ada garam0garam empedu dan setelah esterifikasi parsial dengan asaam0asam lemak. Keuali ergosterol (pro0 vitamin D*, steroid tumbuh0tumbuhan diabsorbsi buruk oleh manusia. &ebagian besar kolesterol yang dibutuhkan tubuh disintesa seara endogen dari asetil Ko01 melalui 20 hidroksi020metil glutamine Ko1. +ungkin semua sel sanggup mensintesa kolesterol, tetapi sebagian terbesar kolesterol di dalam tubuh di produksi oleh hepar. 3a diangkut di dalam plasma terutama sebagai LDL (%aron,//4*. Kolesterol adalah komponen dari membran sel dan merupakan prekusor untuk hormon steroid dan asam empedu yang disintesis oleh sel0sel tubuh dan
diserap
dengan makanan. Kolesterol diangkut dalam
plasma melalui
lipoprotein, yaitu kompleks antara lipid dan apolipoproteins (&wastini dan 1stuti, $""5*. Kolesterol merupakan jenis steroid yang paling dikenal. Dengan $5 karbon, kolesterol dibiosintesis dari lanosterol. Kolesterol terdapat dalam semua sel hewan terutama terkonsentrasi dalam otak dan sumsum tulang belakang. Kolesterol diperoleh dari hasil sintesis didalam hati. %ahan bakunya diperoleh dari karbohidrat, protein dan lemak (%aron, //4*. 6umlah yang disintesis bergantung pada kebutuhan tubuh dan jumlah yang diperoleh dari makanan. +enurut 1lmatsir ($""*, batas anjuran konsumsi kolesterol dalam makanan adalah 7 8"" mg9hari. Kolesterol merupakan penyusun utama batu empedu. Kolesterol berfungsi membantu absorbsi asam lemak dari usus keil, juga merupakan praat (prekursor* bagi pembentukan asam empedu, hormon steroid, dan vitamin D (Harper, /!"*. Kadar kolesterol dalam darah berhubungan dengan penyakit jantung koroner dan pengerasan pembuluh darah (atherosclerosis*. Kolesterol di dalam darah beredar tidak dalam keadaan bebas, akan tetapi berada dalam partikel0partikel lipoprotein. -ungsi kolesterol adalah untuk mensintesis (membuat* membran sel, mengubah fluiditas sel dan mensintesis hormon steroid dan asam empedu ('apan, $""4 *. ilai kolesterol dalam darah yang dianjurkan adalah ; $"" mg9dL, untuk resiko sedang sebesar $""0$8/ mg9dL, dan untuk resiko tinggi < $=" mg9dL.
Table 1* (ilai ru+ukan untuk k"lester"l )I& -Tahun.
(IL&I /)J)K&( -mgdL.
; $/
; $""
8" > 8/
; $$4
=" > =/
; $=4
? 4"
; $)4
(&uryaatmaja,+ ,$""=*. Kemampuan sel untuk menyerap kolesterol ada batasnya. Kolesterol yang tidak bisa terserap dalam jaringan akan tetap tinggal di pembuluh darah dan membentuk plak. 6ika hal ini terjadi terus0menerus dan bertahun0tahun pembuluh darah tersebut akan tersumbat. &umbatan bisa fatal jika terjadi pada pembuluh0pembuluh darah yang penting misalnya otak (menyebabkan stroke* ataupun pembuluh darah koroner (serangan jantung* ('apan, $""4 *. Lipoprotein merupakan senyawa kompleks antara lemak dan protein yang disintesis didalam hati. Dalam serum darah lipoprotein terdiri atas = jenis, yaitu kilomikron, very low density lypoprotein (@LDL*, low density lypoprotein (LDL*, dan high density lypoprotein (HDL* (Devlin, //$*. Ampat kelas lipoprotein yang berbeda menunjukkan hubungan yang berbeda untuk anterosklerosis koroner. Kolesterol LDL memberikan kontribusi untuk pembentukan plak aterosklerotik dalam arteri intima dan sangat terkait dengan penyakit jantung kokoroner (P6K* dan mortalitas (Devlin, //$*. . LDL (low density lypoproteins* LDL merupakan lipoprotein pengangkut terbesar pada manusia (sekitar 5"#*. LDL berperan mengangkut kolesterol dari hati ke jaringan perifer. LDL berasal dari kolesterol dalam makanan. Peningkatan LDL akan menyebabkan kolesterol menumpuk dalam jaringan (sel0sel dan organ tubuh*. Kolesterol >
LDL dianggap sebagai kolesterol jahat dan kolesterol0HDL dianggap sebagai kolesterol baik9 pelindung ('apan, $""4 *. B. Table 2* (ilai ru+ukan untuk k"lester"l LDL P&/&'T'/
(IL&I /)J)K&( -mgdL.
ilai yang dianjurkan
; 8"
Cesiko sedang
8" > 4/
Cesiko tinggi
< )"
(&uryaatmaja,+. $""=*. LDL mengandung kolesterol yang ukup tinggi, hal ini berarti bahwa dengan peningkatan kadar LDL di dalam darah selalu disertai hiperkolesterolemia. 1pabila kadar HDL di dalam serum darah rendah maka kolesterol yang dimetabolisme relatif sedikit, sehingga banyak kolesterol yang tertimbun. 1kibat penimbunan ini terjadi hiperkolesterolemia, dan lebih lanjut akan menjadi atherosclerosis, yaitu terjadi pengendapan kolesterol dan lipida lainnya pada dinding arteri, dan lebih lanjut akan terjadi pengerasan dinding arteri tersebut (+athews dan van Holde, //*. $. HDL (high density lypoproteins) Karena lipoprotein mengandung enersi, bahan pembuat membran dan homon steroid maka at tersebut perlu disampaikan ke jaringan yang membutuhkannya. Lipoprotein selain bertugas menyalurkan bahan0bahan tersebut di atas, pekerjaan yang lain mengambil bahan yang berlebihan dari jaringan porifer sehingga menegah penimbunan lemak dan ateroskeloris ('apan, $""4 *. &ebagian kolesterol yang sudah terangkut tersebut masuk ke hati dan diubah menjadi asam empedu, yang kemudian dikeluarkan ke usus
untuk mengaktifkan absorbsi lemak. HDL bertanggung jawab atas penyerapan kolesterol dari sel ('apan, $""4 *. HDL mengandung 8# trigliserida !# kolesterol 4"# protein, dan 8"# fosfolipida. HDL berfungsi mengangkut kolesterol ke hati untuk didegradasi menjadi asam empedu dan dibuang dalam kantong empedu. &eperempat sampai sepertiga bagian dari lipoprotein adalah protein dan selebihnya adalah lipida. Lipoprotein mempunyai fungsi mengangkut lipida didalam plasma ke jaring0 jaring yang membutuhkannya sebagai sumber energi. &ebagai komponen membrane sel atau sebagai prekursor metabolit aktif (Devlin, //$*. HDL dianggap mempunyai daya pelindung, anti aterogenik. +ekanisme yang diajukan adalah bahwa HDL mengangkut kolesterol dari sel kembali ke hati, menegah pembentukan
sel
busa,
menghambat molekul
adhesi yang
memungkinkan monosit masuk ke bawah sel endotel dinding arteri, menghambat perubahan oksidatif oleh LDL . Kadar kolesterol HDL yang rendah dianggap kurang baik9 resiko tinggi (%oehringer +, //)*. Dari hasil penelitian diperoleh suatu kenyataan bahwa HDL mempunyai sifat
spesifik,
karena
hubungannya
yang
bersifat
negatif
terhadap
atherosclerosis dan hiperkolesterolemia. &emakin tinggi kadar kolesterol0HDL dalam serum darah maka akan semakin keil kemungkinan individu tersebut mengalami penyakit atherosclerosis (&unaryo, dkk, /!4*. Lebih lanjut Linder (/!4* mengatakan bahwa orang yang mempunyai kadar kolesterol sekitar $)" mg9"" ml darah mempunyai kemungkinan dua kali lebih besar untuk terkena penyakit jantung koroner dari pada orang yang kadar kolesterolnya di bawah $$" mg9""ml.
&ejalan dengan kemajuan pengetahuan dan teknologi pemeriksaan maka dikenalnya lipoprotein. &ejak tahun /5"0an, telah diperiksa beta0lipoprotein yang kemudian pada akhir /5"0an diikuti dengan low density lypoproteins (LDL* dan high density lypoproteins (HDL*, dalam hal ini yang diperiksa adalah kandungan kolesterolnya yaitu kolesterol0LDL dan kolesterol0HDL (%oehringer +, //)*. LDL dapat masuk menembus endotel pembuluh darah nadi dan kemudian mengalami perubahan dan akhirnya menunjukkan ditangkap oleh makrofag dan membentuk sel busa. &udah banyak studi epidemologis yang menunjukkan bahwa LDL merupakan faktor utama aterogenik, dimana peningkatan kadar kolesterol0LDL memberikan angka kejadian PK6 (&unaryo, dkk, /!4*.
Tabel 3* (ilai ru+ukan untuk k"lester"l HDL
Esia
ilai Cujukan laki0laki (mg9dL*
ilai Cujukan Perempuan (mg9dL*
$" > $=
8" > )8
88 > 5/
$4 > $/
8 > )8
85 > !8
8" > 8=
$! > )8
8) > 55
84 > 8/
$/ > )$
8= > !$
=" > ==
$5 > )5
8= > !!
=4 > =/
8" > )=
8= > !5
4" > 4=
$! > )8
85 > /$
(&uryaatmaja,+. $""=*. Kolesterol HDL sering disebut dengan kolesterol baik karena kolesterol HDL menegah terjadinya atherosklerosis dengan ara mengeluarkan kolesterol jahat dan dinding arteri dan mengirimkannya ke hati. 6adi, bila kadar kolesterol LDL tinggi sedangkan kadar kolesterol HDL rendah maka merupakan faktor resiko terjadinya atherosklerosis. &ebaliknya yang diharapkan adalah kadar kolesterol LDL rendah dan kadar kolesterol HDL yang tinggi.HDL ( High Density Lipoprotein * adalah kompleks lipid dan protein yang didominasi protein dan berfungsi mengikat kolesterol dan trigliserida dalam sistem sirkulasi darah. Kolesterol yang berikatan dengan HDL sebagai pembawa memiliki efek positif bagi tubuh, sehingga disebut kolesterol baik. Kolesterol HDL dapat membersihkan plak yang berada di arteri dan membawanya ke hati untuk dikeluarkan dan digunakan kembali oleh tubuh. Kadar HF$0B yang tinggi memberikan
efek
perlindungan
terhadap
penyakit
kardiovaskuler
dari
rendahnya HDL > B ( kurang dari =" mg9dl * meningkatkan resiko penyakit jantung. ( sudirman, $"$ * 6ika kadar kolesterol HDL0nya rendah maka makin tinggi resiko untuk menderita atheroskierosis dan serangan jantung. Gang diharapkan adalah kadar kolesterol LDL yang rendah dengan kadar HDL kolesterol yang tinggi sehingga resiko terjadinya kedua penyakit tersebut juga akan menurun. Entuk
menormalkan kadar kolesterol HDL adalah dengan melakukan aktifitas fisik dan menghindari stres. &elalu mengontrol kadar kolesterol dan berat badan, membatasi konsumsi makanan yang mengandung lemak tinggi, seperti jeroan, daging dan mengkonsumsi sayuran dan buah. %eberapa langkah juga dapat dilakukan seperti mengubah pola hidup yang tidak sehat. 6ika dengan perubahan perilaku ini peningkatkan kadar kolesterol HDL tidak menapai apa yang diharapkan, maka baru dipertimbangkan untuk melakukan pengobatan dengan
obat
obatan.
Dalam
memberikan
obat,
dokter
akan
selalu
mempertimbangkan segala hal tentang keadaan atau kondisi pasien termasuk ketidak normalan kadar kolesterolnya. Flah raga seara teratur, penurunan berat badan, menghentikan kebiasaan merokok, akan meningkatkan kadar kolesterol HDL.
#&# III 'TD' P/&KTIK)
+etode Prinsip
: BHFD >P1P presipitat : kilomikron, @LDL, penambahan
Ceaksi
asam
dan
fosfat
LDL tungsten
diendapkan dan
dengan
+gBl$.setelah
disentrifuge, HDL ada pada airan supernatant. : BHA Aster Kolesterol kolesterol asam lemak BHF Kolesterol F$ kolestene > 8 > one H$F$ PFD $H$F$ =0-enaon fenol Iuinoneimine =H$F
1lat 0 0 0 0 0 0
'abung sentrifuge Kuvet Kalibrator ( kolesterol HDL * +ikropipet &pektrofotometer Cak tabung
%ahan 0 0 0 0 0
&el darah (&.K Khairiva Cahman* Ceagen Pengendap HDL 1Iuadest Ceagen kolesterol &tandar
Bara Kerja HDL PAJADD1P1 &A+3 +1KCF &el $"" l Ceagen pengendap HDL 4"" l &entrifuge dengan 8""" rpm selama 40$" menit didapat HDL •
•
supernatant Kemudian lakukan uji pemeriksaannya
1Iuadest HDL supernatant Ceagen kolesterol &tandar • •
&tandar 0 0 """ l "" l
%lanko "" l 0 """ l 0
&el 0 "" l """ l 0
Bampur (kook*, inkubasi selama 4 menit pada suhu 85oB. Ekur absorbansi standar dan sampel masing0masing terhadap blanko reagen dalam )" menit (1*
Perhitungan : Konsentrasistandar x
∆ A sampel ∆ AStandar
#&# I H&IL D&( P'#&H&&(
Hasil Pengamatan
Diketahui : 0 1bsorbansi sampel 0 1bsorbansi standar 0 1bsorbansi blanko 0 Konsentrasi standar 0 Kolesterol total 0 'rigliserida
: ",$8 : ",$)4 :" : 4" : =),$4 : )",44"=
Perhitungan kadar HDL : dl mg / ¿ Konsentrasi standar x
∆ Asampel ¿ ∆ A standar
dl mg / ¿ M
M
50 ×
0,123 0,265
$8,$"
¿
mg / dl
Perhitungan LDL : dl LDL ( mg / ¿ ¿ M kolesterol total > (trigliserida(mg9dl* : 4* > HDL
M =),$4 > ()",44"= : 4* 0$8,$" M =),$4 > $, 0$8,$" M ",/=
mg / dl
o .
Jambar hasil pengamatan
Keterangan
HDL supernatan. Hasil yang didapat setelah sampel
Ceagen pengendap HDL disentrifuge dengan 8""" rpm selama 40$" menit
Kadar HDL pada sampel darah &.K $
Khairiva Cahman 9perempuan 9usia tahun adalah $8,$" mg9dl. Narna : +erah
Pembahasan HDL adalah lipoprotein yang mempunyai diameter paling keil yaitu 40
$ nm, mempunyai ddensitas ,")8 > ,$ g9ml. HDL mengandung $408"# phospholipid,40$"# kolesterol, 8#trigliserida dan =404/# protein.(1disty, $"$*. LDL adalah lipoprotein dengan diameter !08" nm, mempunyai densitas $,"$/0$,") g9ml. bersikulasi dalam tubuh dibawa ke sel otot, lemak dan sel0sel lainnya. Pengatur utama kadar kolesterol darah adalah hati, karena sebagian reseptor LDL terdapat didalam hati. LDL mengangkut paling banyak kolesterol
dalam darah. LDL disebut juga kolesterol jahat, karena kadar LDL yang tinggi menyebabkan kolesterol di dalam arteri. ( 1disty, $"$*. Pada kegiatan praktikum kali ini telah dilakukan uji sampel dengan data sebagai berikut : ama
: &.K Khairiva Cahman
6enis kelamin
: perempuan
Esia
:
Dari kegiatan praktikum yang telah dilakukan diperoleh hasil kadar HDL pada sampel adalah $8,$" mg9dl, hasil tersebut berada di bawah nilai rujukan untuk perempuan dengan usia $"0$=. ilai rujukan untuk perempuan dengan usia $"0$= berada dalam kisaran 88 > 5/ mg9dl. &elain kadar HDL kami juga menghitung kadar
LDL dalam darah, rumus yang
digunakan
untuk
mendapatkan kadar LDL yaitu kolesterol total > (trigliserida : 4* > HDL. Dari hasil perhitungan ini, didapat kadar LDL pada sampel adalah ",/= mg9dl. hasil tersebut berada pada nilai yang dianjurkan. ilai rujukan yang dianjurkan berada dalam kisaran ; 8" mg9dl. %erdasarkan teori yang ada, dapt dikatakan bahwa sampel memiliki kadar HDL yang rendah atau buruk dan pada kadar LDL sampel dapat dikatakan optimal atau sesuai dengan nilai yang dianjurkan.
Narna yang dihasilkan ada lah merah. Narna merah yang terbentuk adalah hasil reaksi dari H$F$ dan fenol ditambah =0fenaon dengan bantuan dengan bantuan enim peroksidase (PFD*. Kadar kolesterol HDL akan semakin menurun dengan meningkatnya 3+'. 3+' yang semakin meningkat berhubungan dengan meningkatnya kadar kolesterol
dan
triasilgliserol
('1J*,
menurunnya
kadar
HDL
serta
meningkatnya kadar kolesterol LDL. ( +awi, $""/*. -aktor0faktor yang dapat meningkatkan kadar HDL kolesterol yaitu : . Flahraga $. Hindari merokok,
merokok
dapat
menurunkan
kolesterol
HDL
dan
meningkatkan keenderungan darah menggumpal. 8. +enghindari makanan dengan lemak trans, makanan yang mengandung lemak trans dapat meningkatkan kolesterol LDL dan menurunkan kadar HDL. =. +enjaga berat badan yang sehat, berat badan dapat mempengaruhi kadar kolesterol. Entuk mempertahankan berat badan dalam kisaran sehat perlu memperhatikan pola makan dan olahraga ( -reemah O tunge, $""!*.
#&#
P'()T)P
Kesim!ulan
. LDL (low density lypoproteins* merupakan lipoprotein pengangkut terbesar pada manusia (sekitar 5"#*. LDL berperan mengangkut kolesterol dari hati ke jaringan perifer. LDL berasal dari kolesterol dalam makanan $. High0density lipoprotein (HDL* adalah kolesterol baik yang membantu menjaga Low0density lipoprotein (LDL* menyumbat dinding arteri. 8. Dari kegiatan praktikum yang telah dilakukan diperoleh hasil kadar HDL pada sampel adalah $8,$" mg9dl. Didapat kadar LDL pada sampel adalah ",/= mg9dl. %erdasarkan teori yang ada, dapt dikatakan bahwa sampel memiliki kadar HDL yang rendah atau buruk dan pada kadar LDL sampel dapat dikatakan optimal atau sesuai dengan nilai yang dianjurkan. =. Narna yang dihasilkan adalah merah. Narna merah yang terbentuk adalah hasil reaksi dari H$F$ dan fenol ditambah =0fenaon dengan bantuan dengan bantuan enim peroksidase (PFD*.
D&4T&/ P)T&K&
1lmatsier, &. $"". Prinsip Dasar Ilmu Gizi. 6akarta: Jramedia Pustaka Etama
%aron, D. (//4*, Patologi linik , Adisi keempat. 6akarta: Penerbit %uku Kedokteran AJB. %oehringer +annheim. //). Lipoproteins in : Priniples of laboratory +ediine. %oehringer +annheim Laboratory &ystem. Daie,
&.6.@.
dan
Lewis
&.+.,
//, Practical
Hematology,5th
ed.,
Longman&ingapore Publishers Pt. Ltd., &ingapore. Davidson, B. $""8. &eri kesehatan : !im"ingan Dokter Pada penyakit #antung oroner . Dian Cakyat : 6akarta. Delvin, +. 'homas. (//$*.
$e%t"ook o& !iochemistry,
with Blinial
Borrelation. ew Gork:Nilley0Liss -essenden, C.6., and -essenden, 6.&. /!). imia 'rganik jilid $ 6akarta : Arlangga. Harper, H.1. (/!"*. eview o& Physiological hemistry, diterjemahkan oleh *artin+uliawan. 6akarta: Penerbit %uku Kedokteran AJB. +athews,K.B.,K.A.van Holde. (//*. !iochemistry. ew Gork: 'he%enjamin9 Bummings Bompany. &unaryo, H. dkk. (/!4*. Pengaruh Pem"erian urkuminoid urcuma Domestica val terhadap adar olesterol HDL +erum $ikus Putih. &imposium 'emulawak.
&uryaatmaja,+.dkk. $""=. $a"el onversi satuan +I konvensional dan nilai ru,ukan dewasa - anak parameter la"oratorium klinik . Perhimpunan Dokter &pesialis Patologi Klinik 3ndonesia. 6akarta &wastini, D.1 dan 1stuti, K.N. $""5. !uku ,ar *ata uliah /armakognosi.6urusan -armasi -akultas +3P1 Eniversitas Edayana: %ukit 6imbaran 'apan Arik. $""4. Penyakit Degerati& .Ale +edia Komputindo: 6akarta. Nirawan, C. $""$. Pemeriksaan La"oratorium Hematologi +ederhana. %alai Penerbit -akultas Kedokteran Eniversiatas 3ndonesia: 6akarta. &udirman. $"$. Pemeriksaan La"oratorium. +akassar : diakses tanggal $4 1pril $"8
