BAB I PENDAHULUAN A.
Latar Belakang
Sentivitas bakteri merupakan suatu metode untuk menentukan tingkat kerentanan bakteri terhadap zat antibakteri dan untuk mengetahui senyawa murni yang memiliki aktivitas antibakteri. menyatakan bahwa metode difusi agar dari prosedur Kirby-Bauer, sering digunakan untuk mengetahui sensitivitas bakteri. Prinsip dari metode ini adalah penghambatan terhadap pertumbuhan mikroorganisme, yaitu zona hambatan akan terlihat sebagai daerah jernih di sekitar cakram kertas yang mengandung zat antibakteri. Diameter zona hambatan pertumbuhan bakteri menunjukkan sensitivitas bakteri terhadap zat antibakteri. Perhitungan jumlah suatu bakteri dapat melalui berbagai macam uji seperti uji kualitatif koliform yang secara lengkap terdiri dari tiga tahap yaitu uji penduga (uji kuantitatif, bisa dengan metode MPN), uji penguat dan uji pelengkap. Waktu, mutu sampel, biaya, tujuan analisis merupakan beberapa faktor penentu dalam uji kualitatif koliform. Bakteri koliform dapat dihitung dengan menggunakan metode cawan petri (metode perhitungan secara tidak langsung yang didasarkan pada anggapan bahwa setiap sel yang dapat hidup akan berkembang menjadi satu koloni yang merupakan suatu indeks bagi jumlah organisme yang dapat hidup yang terdapat pada sampel) seperti yang dilakukan pada percobaan ini. Antibiotik adalah segolongan senyawa, baik alami maupun sintetik, yang mempunyai efek menekan atau menghentikan suatu proses biokimia di dalam organisme, khususnya dalam proses infeksi oleh bakteri. Berdasarkan sifatnya antibiotik dibagi menjadi dua; antibiotik yang bersifat bakterisidal, yaitu antibiotik yang bersifat destruktif terhadap bakteri dan antibiotik yang bersifat
bakteriostatik,
yaitu
antibiotik
pertumbuhan atau multiplikasi bakteri.
yang
bekerja
menghambat
Berdasarkan mekanisme kerjanya dapat dibagi menjadi 5 kelompok yaitu: pengganggu metabolisme sel mikroba (sulfonamid, trimetoprin, asam p-aminosalisilat (PAS), dan Sulfon.), penghambat sintesis dinding mikroba (penisilin, sefalosporin, basitrasin, vankomisin, dan sikloserin), pengganggu permeabilitas membran sel mikroba (polimiksin, golongan polien serta berbagai antimikroba kemoterapeutik) penghambat sintesis protein sel mikroba (golongan aminoglikosid, makrolid, linkomisin, tetrasiklin, dan kloramfenikol), penghambat sintesis atau merusak asam nukleat sel mikroba (rifampisin, dan golongan kuinolon). Uji potensi antibiotika dilakukan dalam dua metode yaitu metode kertas saring (Kirby and Bauer) dan metode d’Aubert. Metode kertas saring menghambat pertumbuhan mikroorganisme dengan menggunakan zat-zat kimia seperti fungisida, bakterisida, dan insektisida. Dengan perlakuan fisik seperti dengan sinar UV, pemanasan yang tinggi, serta dengan perlakuan biologi seperti menggunakan mikroorganisme lain sebagai antagonis. Metode d’Aubert yaitu metode yang digunakan untuk memeriksa kadar anibiotika dalam bahan makanan sebagai bahan pengawet. Berdasarkan hal di atas maka dapat di ketahui bahwa bakteri dapat ditekan dan dihentikan dengan menggunakan antibiotik. Namun tidak semua antibiotik dapat menekan dan menghentikan bakteri. Hanya beberapa antibiotik yang dapat menekan dan menghentikan bakteri hal ini ditentukan oleh resistant, intermediet, dan sensitif bakteri. B. Tujuan
Adapun tujuan dari praktikum uji sensitivitas adalah : 1. Mengetahui zona hambat dari setiap antibiotik 2. Mengetahui tingkat resitensi bakteri terhadap antibiotik C. Manfaat
Adapun manfaat dari praktikum uji sensitivitas adalah kita mampu mencegah penularan penyakit yang disebabkan oleh Salmonella typhi dengan menggunakan antibiotik.
BAB II TINJAUAN PUSTAKA Sensitifitas menyatakan bahwa uji sentifitas bakteri merupakan suatu metode untuk menentukan tingkat kerentanan bakteri terhadap zat antibakteri dan untuk mengetahui senyawa murni yang memiliki aktivitas antibakteri. Metode Uji sensitivitas bakteri adalah metode cara bagaimana mengetahui dan mendapatkan produk alam yang berpotensi sebagai bahan anti bakteri serta mempunyai kemampuan untuk menghambat pertumbuhan atau mematikan bakteri pada konsentrasi yang rendah. uji sentivitas bakteri merupakan suatu metode untuk menentukan tingkat kerentanan bakteri terhadap zat antibakteri dan untuk mengetahui senyawa murni yang memiliki aktivitas antibakteri. Seorang ilmuan dari perancis menyatakan bahwa metode difusi agar dari prosedur Kirby-Bauer, sering digunakan untuk mengetahui sensitivitas bakteri . Prinsip dari metode ini adalah penghambatan terhadap pertumbuhan mikroorganisme, yaitu zona hambatan akan terlihat sebagai daerah jernih di sekitar cakram kertas yang mengandung zat antibakteri. Diameter zona hambatan pertumbuhan bakteri menunjukkan sensitivitas bakteri terhadap zat antibakteri (Koeswartono, 1982). Pada umumnya metode yang dipergunakan dalam uji sensitivitas bakteri adalah metode Difusi Agar yaitu dengan cara mengamati daya hambat pertumbuhan mikroorganisme oleh ekstrak yang diketahui dari daerah di sekitar kertas cakram (paper disk) yang tidak ditumbuhi oleh mikroorganisme. Zona hambatan pertumbuhan inilah yang menunjukkan sensitivitas bakteri terhadap bahan anti bakteri . (Dwidjoseputro, 1998) pada pengenceran yang berikutnya ada tabung yang negatif. Kombinasi yang diambil terdiri dari tiga pengenceran. Jika pada pengenceran yang keempat atau seterusnya masih diketemukan tabung yang hasilnya positif, maka jumlah tabung yang positif tersebut harus ditambahkan pada angka kombinasi yang ketiga sampai mencapai jumlah maksimum. (Fardiaz, 1989)
sentivitas bakteri merupakan suatu metode untuk menentukan tingkat kerentanan bakteri terhadap zat antibakteri dan untuk mengetahui senyawa murni yang memiliki aktivitas antibakteri. (Lay, 1994) Prinsip dalam metode hitungan cawan adalah jika sel jasad renik yang masih hidup situmbuhkan pada medium agar, maka jasad sel renik tersebut akan berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dan dihitung dengan mata telanjang. Metode hitungan cawan merupakan cara yang paling sensitive untuk menentukan jumlah jasad renik karena beberapa hal: 1. hanya sel yang masih hidup yang dapat dihitung, 2. Beberapa jasad renik dapat dihitung sekaligus 3. Dapat digunakan untuk isolasi dan identifikasi jasad renik karena koloni yang terbentuk mungkin berasal dari suatu jasad renik yang mempunyai penampakan pertumbuhan spesifik. Selain keuntungan-keuntungan tersebut, metode hitungan cawan juga mempunyai kelemahan-kelemahan sebagai berikut : 1.
Hasil perhitungan tidak menunjukkan jumlah sel yang sebenarnya, karena beberapa sel yang berdekatan mungkin membentuk suatu koloni
2.
Medium dan kondisi inkubasi yang berbeda mungkin menghasilkan nilai yang berbeda Jasad renik yang ditumbuhkan harus dapat tumbuh pada medium padat dan membentuk koloni yang kompak dan jelas, tidak menyebar.
3.
Memerlukan persiapan dan waktu inkubasi relatif lama sehingga pertumbuhan koloni dapat dihitung (Fardiaz, 1989).
BAB III METODOLGI A. Waktu dan Tempat
Adapun waktu dan tempat praktikum uji sensitivitas adalah sebagai berikut: 1. Hari/Tanggal :
Rabu, 11 April 2012
2. Jam
:
13.00 WITA - selesai
3. Tempat
:
Laboratorium Biodiversity Jurusan Biologi
FMIPA
UNTAD B. Alat dan Bahan 1. Alat
Adapun alat yang digunakan dalam praktikum uji sensitivitas adalah sebagai berikut : a. Cawan Petri b. Swab c. Inkubator d. Hand spray e. Tabung reaksi f.
Rak tabung reaksi
g. Bunsen 2. Bahan
Adapun alat yang digunakan dalam praktikum uji sensitivitas adalah sebagai berikut : a. Medium MHA (Muller Hilton agar) b. Medium BHIB (Brain hearth infucion broth) c. Alkohol 70 % d. Bakteri Salmonella thyphi e. Antibiotik Cloxacillin (OB) f.
Antibiotik Neomycin (N)
g. Antibiotik Amikacin (AK)
h. Antibiotik Cefoperazone (CFP) i.
Antibiotik Sulphamethoxazole/Trimethoprin (SXT)
j.
Antibiotik Penicilin (P)
k. Antibiotik Cephalexin (CL) l.
Antibiotik Bacitracin (B)
m. Antibiotik Chloromphenicol (C) n. Antibiotik Nalidixie Acid (NA) o. Antibiotik Amoxicilin (AMC) p. Antibiotik Gentamicin (CN) q. Korek api C. Prosedur Kerja
Adapun prosedur kerja dalam praktikum uji sensitivitas adalah sebagai berikut : 1. Pembuatan suspensi bakteri a. Mengfiksasi tabung reaksi yang berisi bakteri Salmonella typhi. b. Mengambil sampel bakteri dengan cara mencelupkan kapas lidi pada medium BHIB. c. Mengfiksasi medium MHA. d. Mengoleskan kapas lidi pada medium MHA secara merata. e. Menempelkan disc obat pada permukaan medium MHA, f.
Menginkubasi medium MHA selama 24 jam
g. Mengukur zona hambat yang pada medium MHA
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil Pengamatan
No
1
2
3
Gambar
Jenis Antibiotik
Diameter
Cloxacillin
0 mm
Neomycin
14 mm
Amikacin
23 mm
Cefoperazone
29 mm
Sulphamethoxazole/Trimethoprin
12 mm
Cephalexin
24 mm
Amoxicilin
23 mm
4
5
Bacitracin
0 mm
Penicilin
6 mm
Gentamicin
19 mm
Nalidixie Acid
0 mm
Chloromphenicol
11 mm
B. Pembahasan
Uji Sentivitas bakteri merupakan suatu metode untuk menentukan tingkat kerentanan bakteri terhadap zat antibakteri dan untuk mengetahui senyawa murni yang memiliki aktivitas antibakteri. Dalam mengetahui apakah bakteri yang diujikan bersifat sensitif, intermediet ataupun resistant terhadap antibiotik yang digunakan dapat menggunakan acuan angka resistant, intermediet dan sensitivitas. Menurut dinas kesehatan yaitu dikatakan resistant apabila zona hambatnya kurang dari 10 mm, dikatakan intermediet apabila zona hambatnya 11-12 mm, dikatakan sensitif apabila zona hambatnya kurang di atas 12 mm. Pada praktikum kali ini, praktikan melakukan praktikan tentang sensitivitas bakteri Salmonella typhi terhadap antibiotik. Digunakannya bakteri Salmonella typhi karena Salmonella typhi merupakan bakteri gram negativ yang cenderung resistant anti biotik karena memiliki susunan membran sel rangkap yang berbeda dengan bakteri gram positif yang hanya memiliki 1 lapisan membran plasma sehingga lebih positif. Praktikum ini bertujuan untuk menentukan zona hambat pada setiap antibiotik. Zona hambat adalah suatu area yang tidak ditumbuhi bakteri. Pada umumnya zona hambat ditandai dengan daerah yang berwarna bening. Berpengaruh atau tidaknya bahan anti bakteri dapat dilihat daerah yang tidak ditumbuhi bakteri. Dalam mengetahui apakah bakteri yang diujikan bersifat sensitif, intermediet ataupun resistant terhadap antibiotik yang digunakan dapat menggunakan acuan angka resistant, intermediet dan sensitivitas. Menurut dinas kesehatan yaitu dikatakan resistant apabila zona hambatnya kurang dari 10 mm, dikatakan intermediet apabila zona hambatnya 11-12 mm, dikatakan sensitif apabila zona hambatnya kurang di atas 12 mm. Dari hasil pengamatan yang dilakukan pada bakteri Salmonella typhi dengan menggunakan beberapa antibiotik diperoleh hasil yaitu pada jenis antibiotik Cloxacillin diperoleh diameter zona hambat adalah 0mm. Hal ini menunjukkan bahwa bakteri resistant terhadap antibiotik jenis Cloxacillin, dan
Cloaxacillin tidak cocok digunakan sebagai antibiotic untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Neomycin diperoleh diameter zona hambat adalah 14mm. Hal ini menunjukkan bahwa bakteri Intermediet terhadap antibiotik jenis Neomycin, dan Neomycin cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Amikacin diperoleh diameter zona hambat adalah 23 mm. Hal ini menunjukkan bahwa bakteri sensitif terhadap antibiotik Amikacin, dan Amikacin cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Cefoperazone diperoleh diameter zona hambat adalah 29mm. Hal ini menujukkan bahwa bakteri sensitif terhadap antibiotik Cefoperazone, dan Cefoperazone cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Sulphamethoxazole/Trimethoprin diperoleh diameter zona hambat adalah 12mm. Hal ini menunjukkan bahwa bakteri Intermediet terhadap antibiotik jenis Sulphamethoxazole/Trimethoprin, dan Sulphamethoxazole/Trimethoprin cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Penicilin diperoleh diameter zona hambat adalah 6mm. Hal ini menujukkan bahwa bakteri resistant terhadap antibiotik Penicilin, dan Penicilin kurang cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Cephalexin diperoleh diameter zona hambat adalah 24mm. Hal ini menujukkan bahwa bakteri sensitif terhadap antibiotik Cephalexin, dan Cephalexin cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Bacitracin diperoleh diameter zona hambat adalah 0mm. Hal ini menujukkan bahwa bakteri resistant terhadap antibiotik Bacitracin, dan Bacitracin tidak cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi.
Pada antibiotik jenis Chloromphenicol diperoleh diameter zona hambat adalah 11mm. Hal ini menujukkan bahwa bakteri intermediet terhadap antibiotik Chloromphenicol dan Cholomphenicol kurang cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Nalidixie Acid diperoleh diameter zona hambat adalah 0mm. Hal ini menujukkan bahwa bakteri resistant terhadap antibiotik Nalidixie Acid, dan Nalidixie Acid tidak cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Amoxicilin diperoleh diameter zona hambat adalah 23mm. Hal ini menujukkan bahwa bakteri sensitif terhadap antibiotik Amoxicilin, dan Amoxicilin cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi. Pada antibiotik jenis Gentamicin diperoleh diameter zona hambat adalah 19mm. Hal ini menujukkan bahwa bakteri intermediet terhadap antibiotik Gentamicin, dan Gentamicin cocok digunakan sebagai antibiotik untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi.
BAB V PENUTUP A. Kesimpulan
1. Zona hambat adalah zona dimana menunjukan aktif dan resisten tidaknya suatu bakteri terhadap suatu senyawa atau zat. Zona hambat ditentukan oleh dinas kesehatan yaitu resistant adalah zona hambatnya kurang dari 10 mm, intermediet adalah zona hambatnya 11-12 mm,sensitif adalah zona hambatnya kurang di atas 12 mm. 2. Resistensi bakteri terhadap antibiotika dapat dilihat melalui zona bening dan tingkat kekeruhan kultur bakteri. Zona bening kecil dan tingkat kekeruhan yang besar menunjukkan bakteri resisten terhadap antibiotika yang diberikan.
DAFTAR PUSTAKA Dwidjoseputro, D., Prof.,Dr. 1987. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta : Djambatan Fardiaz, S. 1989. Mikrobiologi Pangan, Depdikbud Dikti Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi IPB. Bogor : IPB – Press Gaman, P. M., dan Sherrington, K. B. 1992. Ilmu Pangan : Pengantar Ilmu Pangan, Nutrisi, dan Mikrobiologi, Edisi Kedua. Yogyakarta : UGM – Press Jawetz, G., Melnick, J. L., dan Adelberg, E. A. 1991. Mikrobiologi untuk Profesi Kesehatan. Jakarta : EGC Volk, W. A., dan Wheeler, M. F. 1993. Mikrobiologi Dasar Jilid 1, Edisi Kelima. Jakarta : Erlangga
