UJI EFEK HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK BUAH PARE ( Mo M omor di ca cha char anti nti a L.) PADA MENCIT ( Mus M us musc usculus ulus) Karya Tulis Ilmiah Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar A Ahli hli Mad Madyya F arm rma asi (A.Md.Farm)
Diajukan Oleh:
ANDI AHMES LESTARI F.14.007
Kepada PROGRAM STUDI DIPLOMA III FARMASI AKADEMI FARMASI BINA HUSADA KENDARI 2017
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas limpahan rahmat dan karuniah-Nya, sehingga penulis karya tulis ilmiah ini dapat terselesaikan sesuai dengan harapan. Berbagai kesulitan dan hambatan dialami dalam penulisan karya ilmiah ini, namun atas dorongan dan kemauan yang keras terutama adanya bantuan dari berbagai pihak sehingga penulisan karya ilmiah ini dapat diselesaikan pada waktunya. Melalaui kesempatan ini dengan segala kasih sayang penulis sampaikan terimakasih yang tak terhingga kepada kedua orang tua, penulis yakni Ayahanda Latanra S.Pd dan Ibunda Harwati yang telah merawat penulis dari lahir hingga sekarang dan berjuangan membiayai penuis sehingga penulis dapat menyelesaikan studi saat ini. Untuk itu penulis menyampaikan ucapan terimakasih dari lubuk hati yang paling dalam dan penghargaan secara pribadi yang sebesar-besarnya kepada Bapak Parawansah, M.Kes., Apt selaku pembimbing I dan Bapak Muh. Syaiful Saehu, ST., M.Si selaku pembimbng II yang baik hati telah banyak meluangkan waktu
dan
memberikan
petunjuk
serta
menyumbangkan
pikiran
dalam
membimbing penulis mulai saat perencanaan penelitian hingga selesainya Karya Tulis Ilmiah ini. Semoga dengan ini penulis dapat menjadi kebanggaan orang tua dan pembimbing penulis.
Dengan segala kerendahan hati penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya khusus kepada : 1. Bapak Kemal Idris Balaka, SH., MH selaku ketua yayasan Akademi Farmasi Bina Husada Kendari 2. Bapak Muh. Syaiful Saehu, ST., M.Si selaku Direktur Akademi Farmasi Bina Husada Kendari 3. Ibu Nirwati Rusli, S.Si., M.Sc., Apt. selaku Ketua Program Studi Akademi Farmasi Bina Husada Kendari 4. Bapak Muh. Muh. Ilyas Yusuf, S.Farm., S.Farm., M.Imun., M.Imun., Apt selaku Wakil Direktur I Akademi Farmasi Bina Husada Kendari 5. Ibu Hasnawati, S.Si., M.Sc selaku Wakil Direktur II Akademi Farmasi Bina Husada Kendari 6. Kepala Laboratorium, staf tata usaha dan asisten laboratorium Akademi Farmasi
Bina
Farmakologi
Husada
Kendari,
khususnya
Akademi
Farmasi
Bina
asisten
Husada
laboratorium
Kendari
yaitu
Rafiuddin,S.Farm 7. Bapak-Ibu Panitia Pelaksana Karya Tulis Ilmiah Tahun Ajaran 2014 8. Bapak Pimpinan Direktur Rumah Sakit Palang Merah Indonesia Kendari dan Ibu Hanari, Ak., SP.M.Kes selaku Kepala Laboratorium serta Pegawai dan asisten Laboratorium 9. Adik saya tercinta Andi Arsandi, Andi Abrar Hidayat dan Andi Anisa Ramadani yang selalu memberi dukungan dan hiburan.
10. Teman-teman Akademi Farmasi Bina Husada Kendari angkatan 2014 khususnya kelas A serta kepada sahabat seperjuangan dan senasib saya Bangkit Saputra, Fachriawan Syahrir, Andi Septhian Jaya Pribadi, Dede Haryono, Ahlul Fath, Aswan, Ardiansyah, dan Achnis Akbar Jum, dan untuk teman-teman kelas yang tidak bisa saya sebutkan satu persatu khususnya kepada para sahabat perempuan saya ucapkan terima kasih karena kalian selalu menjadi sahabat yang baik buat saya. Penulis sadar bahwa dalam penulisan karya tulis ilmiah ini masih terdapat banyak kekeliruan dan kesalahan yang disebabkan oleh keterbatasan dari segi pengetahuan, tenaga maupun materi. Oleh karena itu, pendapat, saran dan kritik sangat diharapkan dari semua pihak demi kesempurnaan Karya Tulis Ilmiah ini Kendari, 4 Agustus 2017
Penulis
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL.................................................................................
i
HALAMAN SAMPUL .............................................................................
ii
HALAMAN PENGESAHAN...................................................................
iii
HALAMAN PERNYATAAN KEASLIAN............................................
iv
HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI..........................................
v
KATA PENGANTAR .............................................................................. ..............................................................................
vi
DAFTAR ISI..............................................................................................
ix
DAFTAR TABEL......................................................................................
xi
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. .................................................................................
xii
DAFTAR LAMPIRAN.............................................................................. xiii INTISARI..................................................................................................
xiv
ABSTRACT...............................................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN..........................................................................
1
A. Latar Belakang....................................... Belakang............................................................. .................................. ............
1
B. Rumusan masalah............................................ masalah.................................................................. ......................... ...
3
C. Tujuan penelitian....................... penelitian............................................. .................................. ............ ........…. ........….
4
D. Manfaat Penelitian.......................... Penelitian................................................ .......................................... ....................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA...............................................................
5
A. Rujukan Penelitian..................... Penelitian............................................. ............................................. .....................
5
B. Landasan Teori............................................. Teori....................................................................... ..........................
7
1. Pare ( Momordica Momordica charantia L.)................................... L.)....................................... ....
7
2. Ekstraksi.............................. Ekstraksi.....................................................................…. .......................................….
8
3. Etanol................................. Etanol............................................…………………… ...........……………………
10
4. Mencit ( Mus Mus musculus).. musculus).................................………….. ...............................…………..
10
5. Hati............................................ Hati.................................................................... ................................ ........ …..
14
6. Hepatoprotektor dan Hepatotoksin.............................…
15
7. Enzim Aminotransferase (SGOT/SGPT)....................... (SGOT/SGPT).......................
16
8. Penginduksi Hepatoprotektor................. Hepatoprotektor......................................... ........................
17
9. Sediaan Hepatoprotektor.................. Hepatoprotektor........................................ .............................. ........
18
BAB III METODE PENELITIAN......................................................
20
A. Jenis Penelitian......................................... Penelitian.................................................................. ............................ ...
20
B. Desain Penelitian.......................... Penelitian................................................... ........................................ ...............
20
C. Waktu dan Tempat Penelitian......................... Penelitian.............................................. .....................
20
D. Objek penelitian……........................................................... penelitian……...........................................................
20
E. Kerangka Konseptual..................... Konseptual........................................... ...................................... ................
21
F. Definisi Operasional Penelitian...................... Penelitian............................................ ......................
21
G. Hipotesis...............................................................................
21
H. Prosedur Penelitian....................... Penelitian............................................... ........................................ ................
22
BAB IV HASIL PENELITIAN AN PEMBAHASAN........................
30
BAB V PENUTUP.................................................................................
38
DAFTAR PUSTAKA............................................................................
39
DAFTAR TABEL Tabel
Tabel 1. Hasil Pengukuran SGOT-SGPT................................... SGOT-SGPT............................................. ..........
Halaman 30
DAFTAR GAMBAR Gambar
Halaman
Gambar 1. Buah Pare............................................... Pare..................................................................... ........................... .....
7
Gambar 2. Kerangka Konseptual................... Konseptual......................................... ..................................... ...............
21
Gambar 3. Skema Jalannya Penelitian........................ Penelitian.............................................. ........................ ..
29
Gambar 4. Diagram Hasil Pengukuran SGOT-SGPT......................... SGOT-SGPT.........................
31
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran
Halaman
Lampiran 1. Perhitungan Dosis dan Volume Pemberian Sampel............
41
Lampiran 2. Hasil Analisis data.......................................... data............................................................... .....................
46
Lampiran 3. Dokumentasi Penelitian...................... Penelitian............................................ ................................. ...........
53
INTISARI
“UJI EFEK HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK BUAH PARE
( M omor di ca char Mo har anti nti a L.) PADA MENCIT ( Mus M us musc usculus ulus)” Penyakit hati adalah jenis penyakit yang berbahaya dan masih tergolong tinggi di Indonesia. Salah satu cara untuk mengetahui kerusakan hati dengan mengukur aktivitas enzim SGOT dan SGPT. Salah satu bahan alam yang berpotensi memiliki efek hepatoprotektor adalah tumbuhan Pare ( Momordica charantia L.) dan telah dilakukan penelitian bahwa tumbuhan Pare mengandung senyawa flavonoid yang berpotensi sebagai antioksidan. Tujuan penelitian adalah untuk mengetahui efek hepatoprotektor dan dosis yang efektif dari ekstrak etanol buah pare ( Momordica charantia L.) pada mencit yang diinduksi aspirin dosis toksik. Jenis penelitian adalah eksperimental laboratorium, dengan desain Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan menggunakan 25 mencit yang dibagi dalam 5 kelompok perlakuan dengan lima kali pengulangan yang diinduksi dengan aspirin dosis toksik setelah pemberian ekstrak. Berdasarkan data hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian ekstrak buah pare ( Momordica Momordica charantia L.) 500 mg/kg BB memberikan efek hepatoprotektor dan mencegah peningkatan kadar SGOT dan SGPT. Pada taraf nyata 0,05 dengan ( P-value ( P-value)) = 0,000293 dan 6.7E-06 yang menunjukkan pengaruh yang signifikan signifikan dari keduanya. Kata kunci
: Hepatoprotektor, Buah Pare ( Momordica charantia L.), SGOT, SGPT.
ABSTRACT
“THE TEST OF HEPATOPROTEKTOR ETHANOL EXTRACT EFFECT OF PARE FRUIT ( Mo M omor di ca char har anti nti a L.) ON MICE ( M us musc Mus usculus ulus)” The liver disease is a dangerous disease and still relatively high in Indonesia. One way to determine liver damage by measuring the activity of SGOT and SGPT enzyme. One of the natural substances that potentially have hepatoprotective effects is Pare (Momordica charantia L.) and has carried out t he result that Pare is potentially containing flavonoids as antioxidants. The purpose of the study is todetermine the effect of hepatoprotective and the effective dose of ethanol extract of Pare Fruit (Momordica charantia L.) on mice that induced aspirin of toxic dose. This type of research is an experimental laboratory, with the design of Completely Randomized Design (CRD) and using 25 mice were divided into 5 groups with five repetitions induced by aspirin of of toxic dose after extract. Based on data of research result indicate that giving of leaf extract of Pare Fruit (Momordica charantia L.) 500 mg/kg BB giving effect of hepatoprotector and prevent increase of level SGOT and SGPT. At the real level of 0.05 with (P-value) = 0,000293 and 6.7E-06, shows 6.7E-06, shows significant effect Keywords : Hepatoprotective, Pare Fruit (Momordica charantia L.), SGOT, SGPT.
BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang Penelitian
Hati merupakan pusat metabolisme tubuh dengan kapasitas cadangan yang besar, karena itu kerusakan sel hati secara klinis baru dapat diketahui jika sudah lanjut. Kerusakan pada sel hati yang sedang berlangsung dapat diketahui dengan mengukur parameter fungsi berupa zat dalam peredaran darah yang dibentuk oleh sel hati yang rusak atau mengalami nekrosis (Widman, (Wi dman, 1995). Kerusakan hati dapat berupa nekrosis hati. Selain itu kerusakan pada hati juga ditandai dengan peningkatan jaringan peroksidasi lipid dan penurunan dari level glutation hormon (GSH). Serta dapat ditandai dengan meningkatnya beberapa penanda biokimia seperti Asparatade aminotransferase aminotransferase (AST), Alanin amoinotransferase amoinotransferase (ALT), trigliserid, kolesterol, bilirubin dan alkalin fosfatase (Maheswari et al., 2008). Penggunaan obat herbal akhir-akhir ini sangat populer, Salah satu kandungan dalam tanaman yang yang dapat berfungsi berfungsi sebagai hepatoprotektor hepatoprotektor adalah flavonoid. Banyak tanaman yang ada di sekeliling kita yang mengandung flavonoid dan bisa dimanfaatkan sebagai hepatoprotektor (Orbayinah, 2008). Pare dikenal dengan rasa pahitnya. Rasa pahit pare tidak mengurangi khasiat yang dikandungnya sebagai obat berbagai jenis penyakit. Pare ( Momordica Momordica charantia L.) dapat digunakan sebagai obat penurun panas atau antipiretik. Selain itu, pare dapat digunakan untuk menyembuhkan diare pada
bayi, membersihkan darah bagi wanita yang baru melahirkan, mengeluarkan cacing kremi, dan dapat menyembuhkan batuk (Sudarsono, 2002). Di India, tanaman pare digunakan sebagai antidiabetik, obat reumatik, obat penyakit hati dan untuk mengobati gangguan limpa sedangkan di Jepang digunakan sebagai pencahar dan obat cacing. Daging buah pare mengandung momordisin, momordin, momordiasin, asam resinat, dan sterol (stigmasterol dan β-sitosterol). Beberapa penelitian menyimpulkan bahwa ekstrak etanol buah pare yang diberikan per oral dapat menurunkan kadar insulin serum pada kelinci (Winarno, 2011) Pare mengandung vitamin A, vitamin B, vitamin C, saponin, flavonoid, steroid/triterpenoid, asam fenolat, alkaloid, dan karotenoid (Tati, 2004). Flavonoid menunjukkan
lebih
dari
seratus
macam
bioaktivitas.
Bioaktivitas
yang
ditunjukkan antara lain efek antipiretik, analgetik, dan antiinflamasi. Flavonoid dapat menghambat siklooksigenase sehingga kemungkinan besar efek antipiretik disebabkan karena penghambatan siklooksigenase yang merupakan langkah pertama padajalur yang menuju eikosanoid seperti sepe rti prostaglandin dan tromboksan (Robinson, 1991). Flavonoid merupakan senyawa fenolik alam yang potensial sebagai antioksidan dan mempunyai bioaktifitas sebagai obat (Waji & Sugrani, 2009). Flavonoid diduga berpengaruh dalam menghambat kerusakan hepar dengan cara mengikat radikal bebas sebagai antioksidan, sehingga dampaknya pada hati berkurang.
Aspirin merupakan obat yang efektif sebagai anti−inflmasi, meskipun aspirin mungkin lebih efektif sebagai analgesik. Aspiri n diabsorbsi begitu saja dan cepat dihidrolisis menjadi asam asetat dan salisilat oleh esterase dalam jaringan dan darah. Salisilat terikat pada albumin, tetapi ikatan dan metabolisme salisilat dapat menjadi jenuh sehingga fraksi yang tidak terikat meningkat seiring dengan meningkatnya konsentrasi total (Katzung et al., al., 2009). Pengaruh aspirin dalam penghambatan proses fosforilasi oksidatif serupa dengan pengaruh yang ditimbulkan 2,4−dinitrofenol. Pada dosis toksik, aspirin dapat menghambat metabolisme aerob dari beberapa enzim dehidrogenase di hepar dan jaringan lainnya, dengan cara berkompetisi dengan koenzim nukleotida piridin dan penghambatan beberapa enzim oksidase yang membutuhkan nukleotida ebagai koenzim, seperti xanthin oksidase (Irvanda, 2007). Berdasarkan uraian latar belakang diatas, penulis tertarik untuk melakukan penelitian dengan judul “UJI EFEK EFEK HEPATOPROTEKTOR EKSTRAK BUAH PARE ( Momordica ( Momordica charantia L.) PADA MENCIT ( Mus musculus). musculus). B. Rumusan Masalah
1. Apakah ekstrak buah pare ( Momordica charantia L.) dapat memberikan efek hepatoprotektor pada mencit (Mus musculus) ? musculus) ?
2. Pada konsentrasi berapakah ekstrak buah pare ( Momordica ( Momordica charantia L.) dapat memberikan efek hepatoprotektor yang optimal pada mencit (Mus musculus) ?
C. Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui efek hepatoprotektor ekstrak buah pare (( Momordica Momordica charantia L.) pada mencit ( Mus musculus). 2. Untuk
mengetahui
konsentrasi
yang
dapat
memberikan
efek
hepatoprotektor ekstrak buah pare ( Momordica charantia L.) pada mencit. D. Manfaat Penelitian
1. Dapat memberikan informasi ilmiah kepada masyarakat mengenai efek hepatoprotektor dari ekstrak buah pare ( Momordica charantia L.). 2. Sebagai informasi dan bahan referensi bagi peneliti lain mengenai efek hepatoprotektor ekstrak buah pare ( Momordica charantia L.). 3. Menambah ilmu pengetahuan dan pengalaman yang berkaitan dengan penelitian dan penulisan karya kar ya tulis ilmiah mengenai efek hepatoprotektor ekstrak buah pare ( Momordica charantia L.).
BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Rujukan Penelitian
Penelitian yang menjadi rujukan atau referensi dalam penelitian ini antara lain adalah : 1. Desti Nurul, (2015) Pengaruh Ekstrak Kulit Pisang Kepok Terhadap Hepar Tikus yang Diinduksi Aspirin : Penelitian ini adalah pemberian aspirin pada dosis toksik dapat menyebabkan kerusakan hepar dan ekstrak kulit pisang kepok mampu memberikan perbaikan yang optimal pada kerusakan hepar yang diinduksi aspirin. 2.
Elly Fauziah, (2010) Efek Antipiretik Antipiretik Ekstrak Daun Pare pada Tikus Putih Jantan : Simpulan penelitian ini adalah ekstrak daun pare ( Momordica Momordica charantia L.) mempunyai efek antipiretik pada tikus putih jantan,namun efeknya lebih rendah dari parasetamol. Hasil analisis dengan menggunakan uji anova menunjukkan adanya perbedaan secara bermakna pada sumber variasi antar kelompok perlakuan sedangkan pada sumber variasi antar kelompok waktu tidak terdapat perbedaan secara bermakna. Hasil analisis uji post hoc menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok kontrol positif maupun dengan kelompok uji.
3. Arista Novi, (2009) (2009) Pengaruh Ekstrak Pegagan Terhadap Kadar Kadar SGPT Mencit yang Diinduksi Paracetamol : Pemberian ekstrak pegagan dengan dosis terapi sebesar 0.6 mg/kgBB, 0.8 mg/kgBB, dan 1
mg/kgBB terhadap mencit putih yang diinduksi parasetamol dosis toksik selama 6 hari tidak menunjukkan penurunan kadar SGPT pada mencit secara bermakna. 4. Sasminto, (2013) Uji Efek Ekstrak Etanol 70% Daun Binahong Terhadap Kadar ALT Pada Tikus Jantan yang Diinduksi Paracetamol : Pemberian ekstrak etanol 70% daun binahong dosis 25 mg/200g tikus, 50mg/200g tikus dan 100 mg/200g tikus tidak dapat menghambat peningkatan kadar ALT pada tikus jantan galur Wistar yang diinduksi dengan parasetamol. 5. Sri Oktavia, dkk. (2015) Uji Aktifitas Hepatoprotektor Ekstrak Daun Sukun Terhadap Kerusakan Hati yang Diinduksi karbon tertraklorida (CCl4) : Dari penelitian yang telah dilakukan diperoleh kesimpulan bahwa ekstrak daun sukun memiliki aktivitas hepatoprotektor karena dapat menurunkan aktivitas serum glutamic oxaloacetic transaminase (SGOT) dan serum
glutamic pyruvic transaminase (SGPT) pada
mencit putih jantan yang diinduksi karbon tetraklorida (CCl 4) dengan dosis yang efektif adalah dosis 500 mg/kg BB, dengan lama pemberian selama 29 hari. Dari hasil uji statistik analisys of variance (ANOVA) dua arah dimana nilai signifikansi untuk aktivitas SGPT dan SGOT (p< 0,05). Hal ini berarti pemberian ekstrak daun dengan lama waktu pemberian memberikan pengaruh terhadap penurunan aktivitas SGPT dan SGOT pada mencit yang diinduksi CCl 4.
B. Landasan Teori 1. Pare ( Momo Momor di ca charan harantti a L.) a. Klasifikasi
Kingdom
: Plantae : Plantae
Divisi
: Spermatophyta
Subdivisi
: Angiospermae : Angiospermae
Kelas
: Dicotyledonae : Dicotyledonae
Ordo
: Cucurbitales
Famili
: Cucurbitaceae
Genus
: Momordica Momordica
Spesies
: Momordica : Momordica charantia (Tati, 2004)
b. Morfologi
Semak, (menjalar atau memanjat), berbau tidak enak. Daun tunggal, bertangkai, helaian bentuk membulat, berbintik-bintik tembus cahaya. Bunga tunggal, tangkai bunga dekat pangkalnya pangkalnya dengan daun pelindung. Biji berwarna coklat kekuningan pucat memanjang (Sudarsono, 2002).
Sumber : Dokumentasi pribadi (Gambar 1. Buah Pare ( Momordica charantia L.))
c. Khasiat
Buah dimanfaatkan untuk peluruh dahak atau obat batuk, pembersih darah, penambah nafsu makan, penurun panas, penyegar badan, dan mengobati sakit gula. Bunga dapat memacu enzim pencernaan. Daun digunakan sebagai obat cacing, obat luka, peluruh
haid,
pencahar,
dan
penurun
panas.
Serta
akar
menunjukkan sifat antibiotik (Sudarsono, 2002).Pare mengandung flavonoid yang dapat berpengaruh dalam menghambat kerusakan hepar dengan cara mengikat radikal bebas sebagai antioksidan, sehingga dampaknya pada hati berkurang. d. Kandungan
Buah
mengandung
senyawa
kimia
seperti
saponin,
flavonoid, steroid/triterpenoid, karbohidrat, momordisin, alkaloid, vitamin A, vitamin B, vitamin C, dan karantin. Daunnya mengandung vitamin A, vitamin B, vitamin C, saponin, flavonoid, steroid/triterpenoid, asam fenolat, alkaloid, dan karotenoid. Serta bijinya mengandung asam lemak, asam butirat, asam palmitat, asam linoleat, dan asam stearat (Tati, 2004). 2. Ekstraksi
Ekstrak
adalah
sediaan
pekat
yang
diperoleh
dengan
mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa
diperlakukan
sedemikian
hingga
memenuhi
baku
yang
telah
ditetapkan. Ekstraksi adalah penyarian zat-zat aktif atau zat-zat berkhasiat dari bagian tanaman, hewan, dan beberapa jenis ikan termasuk biota laut. Ekstraksi dapat dilakukan dengan beberapa cara (DepkesRI, 2000). 1. Ekstraksi dingin a. Maserasi
Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengadukan pada temperature ruangan (Depkes RI, 2000). b. Perkolasi
Perkolasi
adalah
ekstraksi
dengan
pelarut
sampai
sempurna (exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada
temperatur
ruangan.
Proses
terdiri
dari
tahapan
pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak) (Depkes RI, 2000). 2. Ekstraksi panas a. Refluks
Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut yang ralatif konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes RI, 2000).
b. Soxhlet
Soxhlet adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes RI, 2000). 3. Etanol
Etanol merupakan salah satu sumber energi alternatif yang mempunyai beberapa kelebihan, diantaranya sifat etanol yang dapat diperbarui dan ramah lingkungan karena emisi karbondioksidanya rendah (Jeon, 2007). Pembuatan etanol dapat dilakukan dengan hidrasi etilen dan fermentasi. Proses hidrasi etilen tidak cocok dikembangkan di Indonesia karena cadangan minyak bumi yang semakin sedikit. Sebaliknya, proses fermentasi sangat mungkin untuk dikembangkan di Indonesia. Etanol dapat diproduksi dengan cara fermentasi bahan mentah mono/disakarida (gula tebu, tetes tebu), bahan berpati (jagung, padi, umbi), dan bahan berselulosa (kayu, limbah pertanian) (Bailey, 1986). 4. Mencit ( M us musculus) musculus)
Hewan uji yang sering digunakan sebagai penelitian adalah mencit, karena mencit memiliki struktur tubuh yang mirip manusia sehingga para ahli menggunakan mencit sebagai hewan percobaan.
a. Klasifikasi Mencit ( Mus Mus musc usculus ulus)
Kerajaan
: Animalia
Filum
: Chordata
Kelas
: Mammalia
Ordo
: Rodentia
Famili
: Muridae
Genus
: Mus : Mus
Spesies
: Mus : Mus musculus (Sugiyanto, 1995).
b. Karakteristik Mencit ( Mus Mus musc usculus ulus)
Masa puberitas
: 4 bulan
Masa beranak
: 5 kali setahun
Lama hamil
: 19-20 hari
Jumlah satu kali lahir
: 4-12 ekor
Lama hidup
: 2-3 tahun
Masa tumbuh
: 6 bulan
Volume darah
:7,3 b/b%
Suhu tubuh normal
: 37,5-39,5˚C 37,5- 39,5˚C
Tekanan darah normal
: 147/106 mmHg
Berat badan betina
: 25-45 g
Berat badan jantan
: 20-40 g
Pernapasan
: 94-163 napas/menit
Kadar Normal SGPT
: 2,1-23,8 mikro/L
Kadar Normal SGOT
: 23,2-48,4 mikro/L
c. Anatomi mencit
Mencit (Mus musculus) musculus) merupakan hewan yang termasuk dalam famili Murideae. Mus musculus musculus liar atau Mus musculus rumah
adalah
hewan
satu
spesies
dengan Mus
musculus
laboratorium. Semua galur Mus musculus musculus laboratorium sekarang ini merupakan keturunan dari Mus musculus musculus liar sesudah melalui peternakan selektif (Mangkoewidjojo,1998). Rambut Mus musculus musculus liar berwarna keabu-abuan dan warna perut sedikit lebih pucat. Mata berwarna hitam dan kulit berpigmen. Berat badan bervariasi, tetapi umumnya pada umur empat minggu berat badan mencapai 18-20 gram. Mus musculus liar dewasa dapat mencapai 30-40 gram pada umur enam bulan atau lebih. Mus musculus liar makan segala macam makanan (omnivorus) dan mau mencoba makan apapun makanan yang tersedia bahkan bahan yang tidak bisa dimakan. Makanan yang diberikan untuk Mus musculus biasanya berbentuk pelet secara tanpa batas (ad (ad libitum). libitum). Air minum dapat diberikan dengan botol botol gelas atau plastik dan Mus musculus musculus dapat minum air dari botol tersebut melalui pipa gelas (Mangkoewidjojo,1998). Mus musculus liar lebih suka suhu lingkungan tinggi, namun juga dapat terus hidup dalam suhu rendah. Mus musculus jantan dan betina muda sukar untuk dibedakan. Mus musculus betina dapat dikenali karena jarak yang berdekatan antara lubang
anus dan lubang genitalnya. Testis pada Mus musculus jantan musculus jantan pada saat matang seksual terlihat sangat jelas, berukuran relatif besar dan biasanya tidak tertutup oleh rambut. Testis dapat ditarik masuk ke dalam tubuh. Mus musculus betina memiliki lima pasang kelenjar susu dan puting susu sedang pada Mus musculus jantan tidak dijumpai (Mangkoewidjojo, 1998). d. Penentuan Jumlah dan Pengelompokan Mencit
Hewan uji dibagi menjadi 5 kelompok, pengelompokan hewan uji dilakukan secara acak lengkap dengan jumlah mengikuti rumus federer tahun 1963 (Syam dkk, 2011) yaitu: (n-1) (t-1) (t-1) ≥ 15 Ket: n = banyaknya pengulangan tiap perlakuan/kelompok uji t = banyaknya perlakuan atau kelompok uji (n-1) (5-1) (5-1) ≥ 15 (n-1) (n-1) (4) ≥ 15 4n ≥ 4+15 n=
n = 4,75 = 5 Jadi jumlah minimum hewan uji yang digunakan ialah 5 ekor tiap kelompok.
5. Hati a. Pengertian
Hati merupakan pusat metabolisme tubuh dengan kapasitas cadangan yang besar, karena itu kerusakan sel hati secara klinis baru dapat diketahui jika sudah lanjut. Kerusakan pada sel hati yang sedang berlangsung dapat diketahui dengan mengukur parameter fungsi berupa zat dalam peredaran darah yang dibentuk oleh sel hati yang rusak atau mengalami nekrosis ( Widman, 1995). b. Kerusakan Hati
Kerusakan hati terbesar dapat berupa nekrosis hati. Selain itu kerusakan pada hati juga ditandai dengan peningkatan jaringan peroksidasi lipid dan penurunan dari level glutation (GSH). Serta dapat ditandai dengan meningkatnya beberapa penanda biokimia seperti
Asparatade
aminotransferase aminotransferase
(AST),
( Alanin
amoinotransferase) amoinotransferase) (ALT), trigliserid, kolesterol, bilirubin dan alkalin fosfatase (Maheswari et al., 2008). Gangguan hati ditandai dengan peningkatan aktivitas serum transaminase berup Serum Glutamic Piruvic Transaminase (SGPT) Transaminase (SGPT) dan Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase Transaminase (SGOT), laktat dehidrogenase, serta bilirubin serum. Kadar SGPT dalam serum menjadi petunjuk yang lebih sensitif ke arah kerusakan hati karena sangat sedikit kondisi selain hati yang berpengaruh pada kadar SGPT dalam serum (Widmann, 1995).
6. Hepatoprotektor dan Hepatotoksin a.
Hepatoprotektor
Hepatoprotektor adalah senyawa atau zat yang berkhasiat melindungi sel hati terhadap pengaruh zat toksik yang dapat merusak hati, bahkan dapat memperbaiki jaringan hati yang telah rusak Secara empiris telah banyak tanaman yang tumbuh di Indonesia yang digunakan oleh masyarakat sebagai obat penyakit hati, seperti brotowali, kembang merak, rebung bambu, mengkudu, tomat, jagung, pepaya, wortel, lidah buaya, akar kuning, temulawak dan kunyit. Namun, masih sedikit diantara tumbuhan tersebut yang telah dibuktikan secara ilmiah kebenarannya. Sebagian besar zat hepatoprotektor tersebut adalah senyawa yang tergolong antioksidan. Senyawa ini bekerja dalam menghambat atau memperlambat proses oksidasi radikal bebas (Murray 2009). b. Hepatotoksin
Hepatotoksin adalah senyawa yang dapat menyebabkan gangguan pada jaringan hati. Hepatotoksin juga merupakan zat yang mempunyai efek toksik pada hati dengan dosis berlebihan atau dalam jangka waktu yang lama. Hepatotoksin yang menyebabkan gangguan pada jaringan hati, tergantung pada dosis pemberian,
interval
waktu
pemberian
yang singkat
antara
pencernaan obat dan reaksi melawan, serta kemampuan untuk
menimbulkan perubahan yang sama pada jaringan hati (Dalimartha 2005). 7. Enzim Amino Aminottr ansfe nsferas rase e (SGOT/SGPT)
Enzim Transaminase atau disebut juga enzim aminotransferase adalah enzim yang mengkatalisis reaksi transaminasi. Terdapat dua jenis enzim serum transaminase yaitu serum glutamat oksaloasetat transaminase (SGOT) dan serum glutamat piruvat transaminase (SGPT). Pemeriksaan SGPT adalah indikator yang lebih sensitif terhadap kerusakan hati dibanding SGOT. Hal ini dikarenakan enzim GPT sumber utamanya di hati, sedangkan enzim GOT banyak terdapat pada jaringan terutama jantung, otot rangka, ginjal dan otak (Cahyono, 2009). Enzim aspartat aminotransferase (AST) disebut juga serum glutamat
oksaloasetat
transaminase
(SGOT)
merupakan
enzim
mitokondria yang berfungsi mengkatalisis pemindahan bolak-balik gugus amino dari asam aspartat ke asam α-oksaloasetat α-oksaloasetat membentuk asam glutamat dan oksaloasetat. Dalam kondisi normal enzim yang dihasilkan oleh sel hepar konsentrasinya rendah. Fungsi dari enzim-enzim hepar tersebut hanya sedikit yang diketahui. Nilai normal kadar SGOT < 35 U/L dan SGPT < 41 U/L. Enzim SGOT dan SGPT mencerminkan keutuhan atau intergrasi sel-sel
hati.
Adanya
peningkatan
enzim
hati
tersebut
dapat
mencerminkan
tingkat
kerusakan
sel-sel
hati.
Makin
tinggi
peningkatan kadar enzim SGOT dan SGPT, semakin tinggi tingkat kerusakan sel-sel hati (Cahyono 2009). Kerusakan
membran
sel
menyebabkan
enzim
Glutamat
Oksaloasetat Transaminase (GOT) keluar dari sitoplasma sel yang rusak, dan jumlahnya meningkat di dalam darah. Sehingga dapat dijadikan indikator kerusakan hati. 8. Penginduksi Hepatoprotektor Hepatoprotektor a. Aspirin
Aspirin merupakan obat yang efektif sebagai anti−inflmasi, meskipun aspirin mungkin lebih efektif sebagai analgesik. Aspirin diabsorbsi begitu saja dan cepat dihidrolisis menjadi asam asetat dan salisilat oleh esterase dalam jaringan dan darah. Salisilat terikat pada albumin, tetapi ikatan dan metabolisme salisilat dapat menjadi jenuh sehingga fraksi yang tidak terikat meningkat seiring dengan meningkatnya konsentrasi total. Di luar kandungan dalam tubuh total sebesar 600 mg, peningkatan dosis salisilat tersebut dapat waktu meningkatkan konsentrasi salisilat secara tidak proporsional. Seiring meningkatnya dosis aspirin, waktu paruh eliminasi
salisilat
meningkat
dari
3−5
jam
(untuk
dosis
600mg/hari) menjadi 12−16 jam (dosis >3,6 gr/hari). Alkalinisasi urine meningkatkan laju ekskresi salisilat bebas dan konjugatnya yang larut dalam air (Katzung et al., al., 2009).
Pengaruh aspirin dalam penghambatan proses fosforilasi oksidatif
serupa
dengan
pengaruh
yang
ditimbulkan
2,4−dinitrofenol. Pada dosis toksik, aspirin dapat menghambat metabolisme aerob dari beberapa enzim dehidrogenase di hepar dan jaringan lainnya, dengan cara berkompetisi dengan koenzim nukleotida piridin dan penghambatan beberapa enzim oksidase yang membutuhkan nukleotida ebagai koenzim, seperti xanthin oksidase (Irvanda, 2007). Overdosis aspirin dapat terjadi secara akut maupun kronik. Tingkat kematian pada overdosis akut mencapai 2% dan pada overdosis kronik mencapai 25% , akan lebih berat dampaknya pada anak-anak. Toksisitas sedang terjadi pada dosis >300 mg/kg BB dan toksisitas berat terjadi pada dosis 300 – 500 mg/kg BB. Sedangkan dosis lethal apabila digunakan pada dosis >500 mg/kg BB.
Overdosis
hipokalemi,
aspirin
hipoglikemi,
berefek
tinnitus,
pireksia,
nyeri
hiperventilasi,
abdominal, disritmia,
hipotensi, halusinasi, gagal ginjal, kejang, koma, dan kematian.s 9. Sediaan Hepatoprotektor Hepatoprotektor
Temulawak sejak lama dikenal sebagai tanaman obat, diantaranya memiliki
efek
(hepatoprotektor),
farmakologis
sebagai
meningkatkan
pelindung
nafsu
makan,
terhadap
hati
antiradang,
memperlancar pengeluaran empedu (kolagogum), dan mengatasi gangguan
pencernaan seperti diare, konstipasi, dan disentri.
Komponen
senyawa
yang
bertindak
sebagai
antioksidan
dari
temulawak adalah flavonoid, fenol dan kurkumin (Dwi Ferina, 2014). Penelitian yang telah dilakukan menjelaskan bahwa terdapat pengaruh pemberian temulawak dalam mencegah kerusakan hepar tikus jantan dewasa galur Sprague dawley yang yang diinduksi aspirin.
Pemberian
dekok rimpang temulawak dengan dosis 2,6 g/kgBB dan 5,2 g/kgBB memiliki efek hepatoprotektif terhadap hepar tikus yang diinduksi aspirin dibandingkan dengan kelompok yang hanya diberi dekok rimpang temulawak dosis 1,3 g/kgBB (Sirait 2014).
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian
Jenis
penelitian
yang
telah
digunakan
adalah
penelitian
eksperimental. Penelitian eksperimental laboratorium adalah merupakan penelitian yang dimaksudkan untuk mengetahui ada tidaknya efek dari suatu subjek yang diteliti. B. Desain Penelitian
Desain
penelitian yang digunakan dalam efek hepatoprotektor hepatoprotektor
ekstrak buah pare (Momordica charantia L. ) pada ) pada mencit menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang yang terdiri atas lima perlakuan dan lima pengulangan. C. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian
telah
dilaksanakan
pada
bulan
April-Juni
2017
bertempat di Laboratotium Farmakologi Akademi Farmasi Bina Husada Kendari. D. Objek Penelitian
Objek penelitian dalam penelitian ini adalah ekstrak pare yang diperoleh petani pare di desa Duriaasi, kecamatan Wonggeduku, kabupaten Konawe.
E. Kerangka Konseptual
Konsentrasi Ekstrak Buah Pare
Efek Hepatoprotektor pada hewan uji mencit yang diinduksi aspirin
Gambar 2. Kerangka konseptual Keterangan
:
: Variabel terikat : Variabel bebas
F. Definisi Operasional Penelitian
1.
Pare ( Momordica Momordica charantia L.) adalah tanaman yang digunakan sebagai sampel dalam penelitian yang dapat memberikan efek hepatoprotektor terhadap mencit (Mus musculus) musculus) setelah diinduksi aspirin.
2. Hepatoprotektor adalah suatu zat/senyawa yang dapat memberikan perlindungan pada hati mencit yang telah diinduksi aspirin. 3. Induksi aspirin adalah bahan obat yang digunakan sebagai penginduksi agar dapat memberikan kerusakan hati pada hewan uji mencit . 4. Mencit adalah hewan yang digunakan dalam penelitian uji efek hepatoprotektor karena memiliki struktur tubuh yang mirip manusia. G. Hipotesis
1. H0 : Ekstrak tanaman pare ( Momordica ( Momordica charantia L.) tidak memiliki efek hepatoprotektor yang yang diinduksi aspirin pada mencit.
H1 : Ekstrak tanaman pare ( Momordica Momordica charantia L.) memiliki efek hepatoprotektor yang yang diinduksi aspirin pada mencit. 2. H0 : Ekstrak tanaman pare pada konsentrasi tertentu tidak memiliki efek hepatoprotektor yang yang diinduksi aspirin pada mencit. H1 : Ekstrak Ekstrak tanaman pare pada konsentrasi tertentu memiliki efek hepatoprotektor yang yang diinduksi aspirin pada mencit. H. Prosedur Penelitian 1. Alat, Bahan dan Subjek Penelitian
Alat-alat yang digunakan pada penelitian penelitian ini adalah rotary vacum evaporator (Rotavapor, Buchi ®), batang pengaduk, gelas ukur (pyrex®), gelas kimia, gunting bedah, kanula, hot plate (Stuart®), mortir dan stamper, papan bedah, pisau bedah, spoit, sentrifuge, sendok tanduk, stopwach, timbangan analitik, timbangan digital. Bahan yang digunakan aquadest, aspirin, ekstrak pare, serbuk kurkumin, kain flanel, etanol, mencit, Na CMC. 2. Cara Kerja b. Penyiapan sampel
Sampel yang yang digunakan dalam penelitian ini adalah
buah
tumbuhan pare. Pada tahap awal, sampel buah dibersihkan bersihkan kemudian dipotong hingga berukuran kecil dengan tujuan untuk memudahkan dalam proses pengeringan. Pengeringan sampel dilakukan dengan cara diangin-anginkan arau pada suhu yang tidak terlalu tinggi agar komponen-komponen kimia dalam
sampel tidak mengalami kerusakan karena pada umumnya senyawa bioaktif tidak tahan terhadap suhu tinggi. Pengeringan juga dimaksudkan agar sebagian besar kandungan air dari tumbuhan dapat berkurang. Penghalusan dilakukan untuk mengubah ukuran sampel menjadi lebih kecil dengan luas permukaan yang lebih besar untuk memaksimalkan kerja pelarut pada tahap maserasi c. Prosedur pembuatan ekstrak buah pare dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%
1) Ditimbang simplisia kering 2 kg kemudian dimasukkan kedalam wadah maserasi, lalu direndam dengan pelarut etanol 96% (1:7,5) mL dan dibiarkan selama 5 hari sambil berulang-ulang diaduk 2) Setelah didiamkan kemudian ekstrak etanol buah pare disaring dan diperas dimasukkan kembali kedalam botol kemudian ditutup rapat dan didiamkan lagi selama 3 hari 3) Dipisahkan endapan, lalu diuapkan dengan menggunakan rotavapor, kemudian ekstrak kental dimasukkan kedalam botol dan dibuat ekstrak dengan masing-masing konsentrasi. d. Pembuatan Na CMC 0,5% 100 mL
1. Ditimbang Na CMC sebanyak 0,5 % 100 mL 2. Dilarutkan dengan sedikit air dan diaduk sampai mengental diatas hot plate.
3. Ditambahkan air sampai 100 mL, aduk dan biarkan mendidih sampai larutan menjadi bening dan didinginkan e. Penyiapan Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan adalah mencit dengan bobot badan 20-30 gram yang telah dikarantina untuk menyesuaikan diri dengan lingkungannya selama satu minggu. 25 ekor mencit yang dibagi atas 5 kelompok yang terdiri dari kelompok perlakuan dan kelompok kontrol. Masing-masing kelompok terdiri dari lima ekor mencit. f.
Perlakuan Hewan Uji
a. Kelompok Kontrol Terdiri dari 5 ekor mencit, hewan uji dipuasakan 6-8 jam
sebelum perlakuan, kemudian ditimbang. Diambil
darah mencit melalui intra muscular melalui ekor dengan menggunakan spoit 1cc, disentrifug lalu ukur SGOT dan SGPT awal, kemudian diberi suspensi Na CMC (1 kali sehari) selama 6 hari, lalu darah diambil pada hari ke-7 kemudian diinduksi diinduksi dengan aspirin (1 kali sehari) pada hari ke-8 sampai hari ke-13 dengan takaran 400 mg/kg BB, dan pada hari ke-14 dilakukan pengukuran aktifitas SGOT dan SGPT akhir.
b. Kelompok Perlakuan Hewan uji dipuasakan selama 6-8 jam sebelum perlakuan, kemudian ditimbang. Dilakukan pengukuran SGOT dan SGPT awal. Kemudian hewan uji dibagi dalam 3 kelompok perlakuan yaitu diberi ektrak tanaman pare dengan dosis 125 mg/BB, 250 mg/BB dan 500 mg/BB (1 kali sehari)
selama 6 hari, lalu
dilakukan pengukuran kadar SGOT/SGPT pertama pada hari ke-7, dan diberi perlakuan diinduksi dengan aspirin (1 kali sehari) pada hari ke-8 sampai hari ke-13 dengan takaran 400 mg/kg BB, dan pada hari ke-14 dilakukan pengukuran aktifitas SGOT dan SGPT akhir. c. Kelompok Pembanding Terdiri dari 5 ekor mencit, hewan uji dipuasakan 6-8 jam sebelum perlakuan, kemudian ditimbang. Diambil darah mencit melalui intra muscular melalui ekor dengan menggunakan spoit 1 cc, disentrifug lalu ukur SGOT dan SGPT awal, kemudian diberi suspensi kurkumin (1 kali sehari) selama 6 hari, lalu darah diambil pada hari ke-7 kemudian diinduksi dengan aspirin (1 kali sehari) pada hari ke-8 sampai hari ke-13 dengan takaran 400 mg/kg BB, dan pada hari ke-14 dilakukan pengukuran aktifitas SGOT dan SGPT SGPT akhir.
g. Pengukuran Aktivitas GPT-Plasma Darah Hewan Uji
a. Penyiapan Plasma Darah (sampel) Dipipet 20,0
larutan EDTA 10% kedalam tabung
sentrifuge. Setelah itu diambil darah mencit sebanyak 1 mL lalu dimasukkan kedalam tabung sentrifuge yang berisi 20
larutan EDTA 10% secepatnya kemudian disentrifugasi dengan kecepatan lebih kurang 3000 rpm selama 10-15 menit. Plasma diambil dengan pipet mikro kemudian dimasukkan ke Cup Frischer untuk dianalisis. b. Pengukuran Pada Fotometer Disiapkan working reagent (reagen kerja) yaitu dengan cara melarutkan 1 bagian R 2 (starting reagent ) kedalam 4 bagian R 1 (enzyme reagent ). ). Setelah itu dipipet 100 (sampel) dan 1000
plasma
working reagent sebagai reagen blanko.
Selanjutnya pada fotometer disiapkan aquadest, selanjutnya disiapkan reagen blanko dan terakhir disiapkan sampel. Pada fotometer akan terbaca hasil.
3. Analisis Data a. Data i. Jenis data
yaitu data nominal dengan Sumber data yaitu data primer yaitu data yang diperoleh langsung dari hasil penelitian dan data sekunder yaitu data yang berasal dari literatur yang mendukung penelitian. ii. Sumber Data
1. Data primer yaitu data yang diperoleh dari proses pembuatan ekstrak tanaman pare ( Momordica Momordica charantia L.) dan perlakuan terhadap mencit. 2. Data sekunder yaitu data yang berasal dari buku, literatur yang digunakan
sebagai
landasan
teori
dalam
menunjang
terselesainya karya tulis ini. iii. Sifat Data
Data ini bersifat kuantitatif karena penelitian ini bertujuan untuk
memperoleh
data
berupa
angka/konsentrasi
yang
mempunyai efek Hepatoprotektor pada mencit. b. Pengumpulan Data
Data penelitian ini diperoleh dari hasil efek hepatoproptektor dari ekstrak tanaman pare ( Momordica charantia L.) menggunakan hewan uji mencit.
c. Pengolahan Data
Data dikumpulkan dari hasil pengukuran kadar SGOT dan SGPT plasma awal, kadar SGOT dan SGPT setelah pemberian ekstrak dan kadar SGOT dan SGPT setelah pemeberian aspirin. Data yang diperoleh dianalisis dengan metode SPSS 16 . d. Penyajian Data
Data yang telah dianalisa telah disajikan dalam bentuk tabel kemudian dijabarkan dalam bentuk narasi.
4.Skema Jalannya Penelitian Mencit ( Mus ( Mus Musculus) Musculus) Buah Pare ( Momordica charantia L.) - Disorta - Sortasi basah - Dicuci - Diangin-anginkan - Dirajang - Dikeringkan - Ditimbang sebanyak X g
Dikarantina
Pemeriksaan mencit
Dipuasakan
Maserasi dengan men men unak unakan an etan etanol ol 96 %
Ditimbang -
Disaring Maserat dipekatkan
Ekstrak dikentalkan
Suspensi Na CMC
Pengukuran kadar SGOT dan SGPT awal
Ekstrak Buah 125 mg/BB
Ekstrak Buah 250 mg/BB
Ekstrak Buah 500 mg/BB
Suspensi Kurkumin
Diberikan masing-masing secara per oral 1 kali sehari selama 7 hari
Suspensi Na CMC + aspirin
Ekstrak Buah Pare + aspirin
Diberikan masing secara per oral 1 kali sehari selama 7 hari
Selang 8 hari dihitung kadar SGPT dan SGOT akhir
Pare dapat menurunkan kadar SGOT-SGPT
Gambar 3. Skema Jalanya Penelitian
Suspensi Kurkumin +aspirin
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
Data hasil pengujian SGOT dan SGPT , setelah pemberian ekstrak buah pare ( Momordica Momordica charantia L.), charantia L.), dan setelah diinduksi dengan aspirin ( Acidum ( Acidum acetyl salicylicum) salicylicum) pada mencit. Rata – rata rata hasil pengukuran kadar SGOT dan SGPT darah mencit, Tabel 1. Rata – setelah pemberian ekstrak buah pare dan setelah pemberian Aspirin
Perlakuan
Kadar Setelah Pemberian Ekstrak Buah Pare
Kadar Setelah Pemberian Aspirin
SGOT
SGPT
SGOT
SGPT
Ekstrak Buah Pare 125 mg
27.4
20
42.6
37.6
Ekstrak Buah Pare 250 mg
27.2
19.4
32.8
29.6
Ekstrak Buah Pare 500 mg
27.2
20.2
27.6
26
Kontrol (+)
27
16.6
25.6
23.8
Kontrol (-)
25.4
19.2
130.82
119
Dari Tabel di atas diketahui bahwa hasil rata-rata pengukuran kadar SGOT maupun SGPT pada hewan uji mencit setelah pemberian ekstak memiliki kadar yang normal (SGOT normal pada darah mencit yaitu 23,248,4 µ/l dan kadar SGPT normal yaitu 2,1-23,8 µ/l), dimana rata-rata kadar SGOT pada darah mencit setelah pemberian ekstrak etanol buah pare 125 mg/kg BB, 250 mg/kg BB, 500 mg/kg BB, yaitu secara berturut-turut 27,4 µ/l, 27,2 µ/l, dan 27,2 µ/l. Demikian juga dengan rata – rata rata kadar SGPT pada darah mencit setelah pemberian ekstrak etanol buah pare 125 mg/kg BB, 250 mg/kg BB, 500 mg/kg BB yaitu secara berturut-turut 20 µ/l, 19,4 µ/l, dan
20,2 µ/l. Untuk kelompok kontrol positif kadar SGOT dan SGPT juga dalam keadaan normal bila dibandingkan dengan kontrol negatif yang dimana kadar SGOT dan SGPT mengalami kenaikan. Untuk rata-rata kadar SGOT pada darah mencit setelah pemberian aspirin dosis toksik untuk ekstrak 125 mg/kg BB dan 250 mg/kg BB dan ekstrak 500 mg/kg BB hanya mengalami kenaikan yang sedikit tetapi masih dalam kadar normalnya, sedangkan sedangkan untuk kadar SGPT pada darah mencit setelah pemberian aspirin dosis toksik untuk ekstrak 125 mg/kg BB dan ekstrak 250 mg/kg BB mengalami kenaikan yang yang sedikit dari kadar normal, sedangkan untuk ekstrak 500 mg/kg BB hampir tidak mengalami kenaikan dari keadaan normal. Untuk kelompok kontrol positif terjadi penurunan kadar SGOT maupun SGPT bila dibandingkan dengan kontrol negatif yang kadar SGOT dan SGPT mengalami kenaikan setelah pemberian aspirin dosis toksik.
Grafik SGOT sebelum & sesudah perlakuan 130.8
140 120 T 100 O G 80 S r a 60 d a K 40
sebelum perlakuan 42.6 27.4
27.232.8
27.227.6
27 25.6
25.4
20
setelah perlakuan
0 Buah 125 mg Buah 250 mg Buah 500 mg
Kontrol (+)
Kontrol (-)
Perlakuan
Gambar 1. Diagram Enzim Enzim SGOT (µ/l) mencit setelah pemberian pemberian ekstrak dan setelah pemberian Aspirin Aspirin
Grafik SGPT sebelum & sesudah perlakuan 140
119 120 100
T P G S r a d a K
80
sebelum perlakuan
60
37.6
40
20
29.6 19.4
20.2
26
20
23.8 16.6
19.2
sesudah perlakuan
0 Buah 125 mg Buah 250 mg Buah 500 mg
Kontrol (+)
Kontrol (-)
Perlakuan
Gambar 2. Diagram Enzim SGPT (µ/l) mencit setelah pemberian ekstrak dan setelah pemberian aspirin aspirin
Dari kedua gambar diagram diatas dapat disimpulkan dari ketiga variasi konsentrasi memberikan efek hepatoprotektor terhadap kadar SGOT dan SGPT pada mencit, dan efek tersebut dapat dilihat dengan dengan penurunan kadar kadar pada gambar diagram diatas. Penelitian mengenai Uji Efek Hepatoprotektor Ekstrak etanol buah pare ( Momordica Momordica charantia L.) mencit bertujuan untuk mengetahui sejauh mana ekstrak buah pare dapat melindungi hati dari paparan aspirin. Untuk memperoleh ekstrak buah pare, sampel dicuci dengan air mengalir hingga bersih dengan tujuan untuk menghilangkan atau mengurangi tanah atau debu yang melekat pada daun, selanjutnya disortasi untuk memisahkan bagian daun yang rusak, kemudian simplisia dirajang untuk membantu mempercepat
proses pengeringan. Rajangan dikeringkan dengan cara diangin-anginkan selama kurang lebih 7 hari, simplisia diekstraksi dengan menggunakan metode maserasi. Digunakan metode tersebut karena simplisia yang digunakan berupa buah yang bersifat lunak, selain itu metodenya sederhana, dan juga baik untuk sampel yang tidak tahan terhadap pemanasan. Pelarut yang digunakan adalah etanol 96% karena menurut Grubben Grubben (2014) (2014) etanol 96% sangat baik dalam menarik senyawa flavonoid yang terdapat pada tanaman, selain itu bersifat universal, tidak bersifat toksik, dan tidak mudah mengurai senyawa zat aktif dari tanaman tersebut. Ekstrak cair yang diperoleh kemudian diuapkan pelarutnya menggunakan rotary vacuum evaporator. Dalam penelitian ini menggunakan 25 ekor mencit yang dibagi dalam 5 kelompok perlakuan dengan lima kali pengulangan. Hewan uji sebelumnya dipuasakan selama 6-8 jam, tujuannya agar kondisi hewan uji sama dan mengurangi pengaruh makanan yang dikonsumsi terhadap absorbsi sampel yang diberikan. Setelah itu dilakukan penimbangan berat badan hewan uji untuk menentukan volume pemberian yang akan diberikan terhadap hewan coba. Zat penginduksi hepatotoksik yang digunakan dalam penelitian ini adalah Aspirin, pengaruh aspirin dalam penghambatan proses fosforilasi oksidatif serupa dengan pengaruh yang ditimbulkan. Pada dosis toksik, aspirin dapat menghambat metabolisme aerob dari beberapa enzim dehidrogenase di hepar dan jaringan lainnya, dengan cara berkompetisi
dengan koenzim nukleotida piridin dan penghambatan beberapa enzim oksidase yang membutuhkan nukleotida sebagai koenzim, seperti xanthin oksidase (Irvanda, 2007). Dari data hasil pengamatan terhadap pengukuran kadar enzim SGOT dan SGPT setelah pemberian ekstrak etanol buah pare ( Momordica charantia L.) hanya menunjukkan menunjukkan sedikit kenaikan kadar enzim SGOT dan dan SGPT dari semua konsentrasi yang diberikan dan untuk kontrol negatifnya mengalami kenaikan yang sangat tinggi, kecuali dengan kontrol positif yang tidak mengalami kenaikan kadar enzim SGOT dan SGPT. Hal ini berarti bahwa ekstrak etanol buah pare ( Momordica charantia L.) dapat memperbaiki dan – sel mempercepat sel – sel hati yang rusak. Dari Tabel rata-rata kadar juga dapat dilihat bahwa semakin tinggi dosis praperlakuan ekstrak etanol maka semakin besar daya da ya hambat kerusakan sel hati yang ditandai dengan penurunan kadar SGPT dan SGOT dalam darah mencit seiring dengan peningkatan dosis yang diberikan. Aktivitas hepatoprotektif yang ditunjukkan oleh ekstrak etanol buah pare kemungkinan disebabkan dise babkan oleh adanya aktivitas antioksidan dalam tanaman tersebut. Menurut Mellisa (2011) menemukan bahwa ekstrak buah pare dan buah pare kukus etil asetat dan juga ekstrak etil asetat mempunyai aktivitas antioksidan sebesar 50 µg/mL, 100 µg/mL, 150 µg/mL dan 200 µg/mL . Dalam hal ini, aktivitas antioksidan tersebut terjadi karena adanya senyawa flavanoid dalam tanaman buah pare ( Momordica charantia L.), flavonoid diduga berpengaruh dalam menghambat kerusakan hati dengan cara mengikat radikal bebas sehingga dampaknya terhadap hati berkurang.
Hasil penelitian ini telah menunjukan bahwa kadar SGOT dan SGPT kelompok mencit yang diberi ekstrak buah pare kemudian dipapar aspirin tidak setinggi kelompok mencit yang tidak diberi ekstrak buah pare. Oleh karena itu pemberian ekstrak buah pare terbukti secara signifikan melalui statistik mempunyai mempunyai aktivitas hepatoprotektif hepatoprotektif
terhadap hati mencit yang
dipapar aspirin dosis toksik. Dari hasil analisis statistik yang telah diperoleh untuk uji kadar SGOT menunujukkan efek ekstrak buah pare setelah didinduksi dengan aspirin dosis toksik, sehingga dilakukan test pengujian Anova dengan dengan tingkat kepercayaan 95% (α=0,05) (α=0,05) dengan menggunakan alat bantu komputer dan menunjukkan hasil yang signifikan dimana ekstrak yang diberikan memiliki efek pada hewan uji, dimana hipotesis Fhitung>Ftabel 0.05 adalah 8.77>2.866 yang berarti jika Fhitung lebih besar dari Ftabel0.05 maka perlakuan yang diuji berpengaruh secara signifikan dan juga diperoleh hasil P-value dengan nilai 0,000293 dimana lebih kecil dibandingkan dengan nilai Ftabel 0.05 2.866 maka perlakuan yang diuji menolak H0 atau dengan kata lain perlakuan yang diuji berpengaruh secara signifikan sehingga dilanjutkan dengan pengujian LSD/BNT (Beda Nyata Terkecil) dengan tujuan untuk untuk mengetahui perbedaan perbedaan efek yang signifikan dari kelima perlakuan. Dari hasil uji LSD/BNT (Beda Nyata Terkecil) diperoleh hasil yang tidak berbeda secara signifikan dari ketiga dosis yang diberikan dibandingkan dengan kontrol negatif. Sedangkan untuk kadar SGPT pada pengujian Anova menunjukkan hasil yang signifikan juga dimana ekstrak yang diberikan memiliki efek pada
hewan uji setelah diinduksi dengan aspirin dosis toksik, sehingga dilakukan test pengujian Anova dengan tingkat kepercayaan 95% (α=0,05) atau Ftabel0.05 dengan menggunakan alat bantu komputer dimana menunjukkan hasil yang signifikan dimana ekstrak yang diberikan memiliki efek pada hewan uji, dimana hipotesis Fhitung>Ftabel 0.05 adalah 15.4>2.866 yang berarti perlakuan yang diuji berpengaruh secara signifikan dan juga diperoleh hasil P-value dengan nilai 6.7E-06 yang berarti perlakuan yang diuji menolak H0 atau dengan kata lain perlakuan yang diuji berpengaruh secara signifikan sehingga dilanjutkan dengan pengujian LSD/BNT (Beda Nyata Terkecil) dengan tujuan untuk mengetahui perbedaan efek yang signifikan dari kelima perlakuan. Dari hasil uji LSD/BNT (Beda Nyata Terkecil) diperoleh hasil yang tidak berbeda secara signifikan dari ketiga dosis yang diberikan dibandingkan dengan kontrol negatif. Dari hasil statistik menunjukkan perbedaan hasil yang signifikan dari pengujian kadar SGOT dan SGPT, dimana ekstrak buah pare memiliki efek terhadap kadar SGOT tetapi efeknya tidak sama dengan kontrol positif sedangkan untuk kadar SGPT dosis 500 mg/kg BB dapat memberikan efek yang hampir sama dengan kontrol positif dalam penurunan kadar SGPT. Tetapi kita kembali kepada enzim itu sendiri, dimana enzim GOT tidak spesifik terhadap kerusakan sel hati karena enzim GOT juga terdapat pada otot jantung, otot tubuh, ginjal dan pankreas, sedangkan enzim GPT sangat spesifik terhadap sel-sel hati. Dimana penentuan aktivitas ALT atau SGPT dianggap sebagai tes yang lebih spesifik terhadap adanya kerusakan
hepatoseluler akut, sedangkan aktivitas AST atau SGOT akan menjadi lebih tinggi apabila terdapat nekrosis jaringan yang lebih hebat. Jadi, apabila ekstrak buah pare dapat menurunkan kadar SGPT sudah dikatakan bersifat sebagai hepatoprotektor.
BAB V PENUTUP A. Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan sebagai berikut : 1. Ekstrak buah pare ( Momordica charantia L.) 500 mg/kg BB memberikan efek hepatoprotektor pada mencit yang diinduksi aspirin pada taraf nyata 0,05 dengan ( P-value) P-value) = 0,000293 dan 6.7E-06 yang menunjukkan pengaruh yang signifikan dari keduanya. 2. Kadar SGOT dan SGPT ekstrak buah pare ( Momordica ( Momordica charantia L.) 500 mg/kg BB setelah diinduksi aspirin yaitu 27.6 µ/L dan 26 µ/L. B. Saran
Melihat hasil yang diperoleh dari penelitian ini maka peneliti menyarankan: 1. Perlu adanya penelitian lebih lanjut dengan konsentrasi ekstrak buah pare yang lebih besar untuk penurunan kadar SGPT 2. Perlu adanya penelitian lebih lanjut mengenai efek hepatoprotektor dalam pengujian enzim seperti alkalin fosfatase, ornitin karbamil transferase (OCT), sorbitol dehidrogenase (SDH), malondialdehid (MDA), dan lainlain.
DAFTAR PUSTAKA
Bailey, James E. and David F. Ollis, 1986, Biochemical Engineering Fundamentals, Fundamentals, 2nd edition, McGraw-Hill Book Co., Singapore. Cahyono, JBSB. 2009, Hepatitis 2009, Hepatitis A. A. Yogyakarta : Kanisius Yogyakarta Dalimartha S. 2005, Ramuan Tradisional untuk Pengobatan Hepatitis. Penebar Swadaya. Jakarta. Depkes RI. 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Cetakan Pertama. Jakarta : Depkes RI. Desti, Q. N. 2015, Pengaruh Ekstrak Kulit Pisang Kepok ( Musa ( Musa acuminata) acuminata ) Terhadap Hepar Tikus ( Rattus norvegicus) norvegicus) Yang diinduksi Aspirin, Skripsi, Program Studi Pendidikan dokter, Universitas Lampung. Fauziah Elly. 2010, Efek Antipiretik Ekstrak Daun Pare ( Momordica charantia L.) pada Tikus Putih Jantan. Jantan .USMS, Surakarta. Federer, L. R. 1963, Experimental Design, Theory and application. New York: Mac. Millan. Hal. 544. Goodman & Gilman. 2007, Dasar 2007, Dasar dasar Farmakologi Terapi Terapi . Jakarta: EGC Irvanda R. 2007, Pengaruh pemberian aspirin berbagai dosis per oral terhadap gambaran histopatologi hepar. Artikel Karya Tulis Ilmiah. Semarang: Universitas Diponegoro. Jeon, Bo Young et al, 2007, Development of a Serial Bioreactor System for Direct Ethanol Production from Starch Using Aspergillus niger and Saccharomyces cerevisiae, Biotechnology and Bioprocess Engineering, Vol. 12, pp. 566-573. Katzung BG, Masters SB, Trevor AJ. 2009, Katzung Basic & Clinical Pharmacology, 11th ed. United States of America: Lange. Maheswari C., Maryammal R., Venkatanarayanan R., 2008, Hepatoprotective Activity Of “ Orthosipon Stamineus “ On Liver Damage Caused By Parasetamol In Rats. JJBS. Rats. JJBS. Vol.1. No.3. 105-108 Mangkoewidjojo, S, 1998, Pemeliharaan, pembiakan dan penggunaan hewan percobaan di daerah tropis. tropis. UI press. Jakarta. Hal : 10- 18. Murray RK, Granner DK, Rodwel VW. 2009, Biokimia Harper. Ed ke-27 . penerjemah Wulandari N., Terjemahan dari: Harper’s Illustrated Biochemistry. EGC. Jakarta.
Novi Arista. 2009, Pengaruh Ekstrak Pegagan ( Centella asiatica) asiatica) Terhadap Kadar SGPT Mencit ( Mus musculus) musculus) yang Diinduksi Paracetamol. Paracetamol.USMS, Surakarta. Oktavia Sri Dkk. 2015, Uji Aktifitas Hepatoprotektor Ekstrak Daun Sukun (Artocarpus Altilis (Parkinson) fosberg) Terhadap Kerusakan Hati yang Diinduksi (CCl4). STIFARM, Padang. Orbayinah S., Kartyanto A., 2008, Efikasi Binahong ( Anredera ( Anredera cordifolia cordifolia (ten) steenis) Terhadap Kadar Alkalin Posphatase. Mutiara Medika Medika.. Vol.21 No.3 Robinson T. 1991, Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi . Edisi 6. Bandung Penerbit ITB, pp : 191-193. Sasminto. 2013, Uji Efek Ekstrak Etanol 70% Daun Binahong ( Anredera ( Anredera cordifolia cordifolia (Tenore.) Steen) Terhadap Kadar ALT (Alanin Aminotransferase) Aminotransferase) Pada Tikus Jantan Galur wista ( Rattus Norvegicus) Norvegicus) yang Diinduksi Paracetamol. Paracetamol . UMS, Surakarta.. Surakarta. . Sirait RRU, Windarti I, Fiana DN. Effect of Oral Route Rhizome Temulawak (Curcuma xanthorriza Roxb.) on Liver Damage of White Male Rats (Rattus Norvegicus) Sprague Dawley Strain Induced by Aspirin. Aspirin . Majority. 2014. 3(4): 129-137 Sudarsono D.G., Subagus W. 2002 , 2002 , Tumbuhan Obat Obat II. Hasil Penelitian , Sifat Sifat dan Penggunaan. Yogyakarta Penggunaan. Yogyakarta : Penerbit PSOT UGM, pp : 114-116 Sugiyanto, 1995, Petunjuk Praktikum Farmakologi, Edisi IV. Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi. Toksikologi . Fakultas Farmasi Universitas GadjahMada. Yogyakarta. Tati Subahar. 2004, Khasiat & Manfaat Pare, si Pahit Pembasmi Penyakit . Jakarta: Agromedia Pustaka, pp : 4-16, 45-46. Waji R.A., Sugrani A., 2009, Makalah Kimia Organik Bahan Alam Flavanoid (Quercetyn). (maret 2012) Widman, F. K. 1995, Tinjauan Klinis atas Hasi Pemeriksaan Laboratorium. Laboratorium . (Edisi 9). Penerjemah: Siti Budina Kresno, Ganda Soebrata, J. Latu. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Winarno Wien Dkk. 2011, Pengaruh Ekstrak Etanol Buah Pare ( Momordica ( Momordica charantia) charantia) terhadap Gambaran Sel Epitel Kelenjar Prostat Tikus Putih. Depkes RI, Jakarta.
Lampiran 1. Perhitungan Dosis dan Volume Pemberian Sampel
1. Ekstrak 125 mg (P1) Berat rata-rata mencit
= 20,56 g
- Dosis 125 mg/kg
=
x berat rata-rata mencit x 20,56 g = = 2,57 mg/g BB > konversi ke gram = 0,0025 g x 5 ekor mencit = 0,0125 g/5 ekor mencit
-Volume pemberian
x volume pemberian x 1 mL =
=
= 0,68 mL 2. Ekstrak 250 mg (P2) Berat rata-rata mencit mencit = 20,77 20,77 g - Dosis 125 mg/kg
x berat rata-rata mencit x 20,77 g =
=
= 5,1925 mg/g BB > konversi ke gram = 0,0052 g x 5 ekor mencit = 0,026 g/5 ekor mencit -Volume pemberian
x volume pemberian x 1 mL =
=
= 0,69 mL
3.
Ekstrak 500 mg (P3) Berat rata-rata mencit = 20,11 g - Dosis 500 mg/kg
x berat rata-rata mencit x 20,11 g =
=
= 10,0550 mg/g BB > konversi ke gram = 0,0100 g x 5 ekor mencit = 0,05 g/5 ekor mencit -Volume pemberian =
x volume pemberian x 1 mL = = 0,67 mL
4.
Curcuma FCT 20 mg K (+) Dosis konversi
= Nilai konversi x dosis untuk manusia = 0,0026 x 20 mg/kg BB = 0,052 mg/kg BB = 0,052 mg/kg : berat rata-rata mencit = 0,052 mg/kg : 23,17 g
Ditimbang
= 0,0022 mg/kg > konversi ke gram = 2,2 = 2,2 mg/g BB x berat rata-rata mencit =2,2 mg/g BB x 23,17 g = 50,97 mg/ekor x 5 ekor = 254,85 mg > Konversi ke ke gram = 0,2548 g
Volume pemberian =
x volume pemberian x 1 mL = = 0,77 mL
5. Untuk kontrol negatif (Na CMC) K(-) - Berat rata-rata mencit = 22,93 g Volume pemberian
x volume pemberian x 1 mL = 0,76 mL =
=
Perhitungan Dosis Aspirin 1.
Aspirin 400 mg (P1) Berat rata-rata mencit mencit = 20,56 g
x berat rata-rata mencit x 20,56 g =
- Dosis 400 mg/kg =
= 8,22 mg/g BB > konversi ke gram = 0,0082 g x 5 ekor mencit = 0,041 g/5 ekor mencit 2. Aspirin 400 mg (P2) Berat rata-rata mencit mencit = 20,77 20,77 g - Dosis 400 mg/kg
x berat rata-rata mencit x 20,77 g =
=
= 8,30 mg/g BB > konversi ke gram = 0,0083 g x 5 ekor mencit = 0,041 g/5 ekor mencit 3.
Aspirin 400 mg Berat rata-rata mencit = 20,11 g - Dosis 400 mg/kg
x berat rata-rata mencit x 20,11 g =
=
= 8,04 mg/g BB > konversi ke gram = 0,0080 g x 5 ekor mencit
= 0,040 g/5 ekor mencit 4.
Aspirin 400 mg K (+) Berat rata-rata mencit = 20,11 g - Dosis 400 mg/kg
x berat rata-rata mencit x 23,17 g =
=
= 9,26 mg/g BB > konversi ke gram = 0,0092 g x 5 ekor mencit = 0,0463 g/5 ekor mencit 5. Aspirin 400 mg (Na CMC) K(-) Berat rata-rata mencit = 20,11 g - Dosis 400 mg/kg
x berat rata-rata mencit x 22,93 g =
=
= 9,17 mg/g BB > konversi ke gram = 0,0091 g x 5 ekor mencit = 0,0458 g/5 ekor mencit
Lampiran 2. Analisis data Tabel Rata-Rata SGOT & SGPT Sebelum Dan Sesudah Perlakuan
Perlakuan
Kadar Setelah Pemberian Ekstrak Buah Pare
Kadar Setelah Pemberian Aspirin
SGOT
SGPT
SGOT
SGPT
Buah Pare 125 mg
27.4
20
42.6
37.6
Buah Pare 250 mg
27.2
19.4
32.8
29.6
Buah Pare 500 mg
27.2
20.2
27.6
26
Kontrol (+)
27
16.6
25.6
23.8
Kontrol (-)
25.4
19.2
130.82
119
Tabel Kadar Kadar SGOT Setelah Setelah Perlakuan Perlakuan Perlaku an Buah
I (mm) 48
Replikasi II III IV (mm) (mm) (mm) 40 41 43
V (mm) 41
∑
Mean
Standar Deviasi
213
42.6
3
125 mg Buah
29
35
31
33
36
164
32.8
3
26
26
27
29
30
138
27.6
2
29
28
22
23
26
128
25.6
3
254
105
95
58
142
654
130.8
75
386
234
216
186
275
1297
250 mg Buah 500 mg Kontrol (+) Kontrol (-)
TOTAL
Tabel Analisis Variansi SGOT Sumber
JK
DB
KT
Fhitung
P-value
Ftabel
Perlakuan
39793.44
4
9948.36
8.77
0.000293
2.866
Galat
22675.20
20
1133.76
Total
62468.64
24
Variasi
Perhitungan Faktor Koreksi (FK), t = treatment (perlakuan), r = replikasi FK
= (∑Perlakuan^2 ) / r.t = 1297^2 / 25
= 67288.36
Derajat Bebas (DB) DB Total
=
r.t – r.t – 1 1 = 25 – 25 – 1 1
= 24
DB Perlakuan
= t-1 = 5 – 1 – 1
DB Galat
= DB Total – Total – DB DB Perlakuan = 24 – 24 – 4 4 = 20
=4
Perhitungan Jumlah Kuadrat dan Kuadrat Tengah
JK Total
= ( 48^2 +….+ 142^2) – FK – FK
= 62468.64
JK Perlakuan
= (213^2 +….+654 ^2 ) / 5 – FK – FK
= 39793.44
JK Galat
= JK Total – Total – JK JK Perlakuan
= 22675.2
KT Perlakuan
= JKPerlakuan / DB perlakuan
= 9948.36
KT Galat
= JK Galat / DB Galat
= 1133.76
Fhitung
= KT perlakuan / KT galat
= 8.77
Hipotesis Fhit>Ftabel0.05= 8.77>2.866 yang berarti perlakuan yang diuji berpengaruh secara signifikan. Sehingga bias dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Jujur (BNT)
Uji Beda NyataTerkecil (BNT)
BNT0.05
= (t0.05,DBgalat) *
= 2.086 * 21.296 = 44.42
Tabel BNT Buah 125 mg
Buah 250 mg
Buah 500 mg
Kontrol (+)
Kontrol (-)
42.6
32.8
27.6
25.6
130.8
0
9.8
15 15
17
88.2**
0
5.2
7.2
98**
0
2
103.2**
0
105.2**
Buah 125 mg Buah 250 mg Buah 500 mg Kontrol (+) Kontrol (-)
0
Keterangan :
** = menunjukkan bahwa antara perlakuan yang diuji berbeda secara signifikan, namun apabila tidak terdapat ** berarti antara perlakuan yang diuji tidak berbeda signifikan.
Grafik SGOT sebelum dan sesudah perlakuan 130.8
140 120 100 r a d a K
80 60 40
42.6 27.4
sebelum perlakuan
32.8 27.2
27.227.6
2725.6
25.4
20 0 Buah 125 mg Buah 250 mg Buah 500 mg Kontrol (+) Perlakuan
Kontrol (-)
setelah perlakuan
Tabel Kadar SGPT Setelah Perlakuan
Perlakuan Buah 125
Replikasi II III IV (mm) (mm) (mm) 39 33 40
I (mm) 35
V (mm) 41
∑
Mean
Standar Deviasi
188
37.6
3.44
mg Buah 250
27
30
27
30
34
148
29.6
2.88
25
29
25
24
27
130
26
2.00
27
27
24
20
21
119
23.8
3.27
198
98
81
76
142
595
119
51.24
312
223
190
190
265
1180
mg Buah 500 mg Kontrol (+) Kontrol (-) TOTAL
Tabel Analisis Variansi SGPT Sumber
JK
DB
KT
Fhitung
P-value
Ftabel
Perlakuan
32770.8
4
8192.7
15.40
6.7E-06
2.87
Galat
10643.2
20
532.16
Total
43414
24
Variasi
Perhitungan Faktor Koreksi (FK), t = treatment (perlakuan), r = replikasi FK
= (∑Perlakuan^2 ) / r.t = 1180^2 / 25
= 55696
Derajat Bebas (DB) DB Total
=
r.t – r.t – 1 1 = 25 – 25 – 1 1
= 24
DB Perlakuan
= t-1 = 5 – 1 – 1
DB Galat
= DB Total – Total – DB DB Perlakuan = 24 – 24 – 4 4 = 20
=4
Perhitungan Jumlah Kuadrat dan Kuadrat Tengah JK Total
=( 35^2 +….+ 142^2) – FK – FK
= 43414
JK Perlakuan
= (188^2 +….+595 ^2 ) / 5 – FK – FK
= 32770.88
JK Galat
= JK Total – Total – JK JK Perlakuan
= 1064.32
KT Perlakuan
= JKPerlakuan / DB perlakuan
= 8192.7
KT Galat
= JK Galat / DB Galat
= 532.16
Fhitung
= KT perlakuan / KT galat
= 15.40
Hipotesis Fhit>Ftabel Fhit>Ftabel0.05= 15.4 <2.87 yang berarti perlakuan yang diuji berpengaruh secara signifikan. Sehingga dapat dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil (BNT).
Uji Beda Nyata Terkecil (BNT)
BNT0.05 = (t0.05,DBgalat) * = 2.086 * 14.59 = 30.434
Tabel BNT Buah 125 mg
Buah 250 mg
Buah 500 mg
Kontrol (+)
Kontrol (-)
37.6
29.6
26
23.8
119
0
-8
-11.6
-13.8
81.4**
0
-3.6
-5.8
89.4**
0
-2.2
93**
0
95.2**
Buah 125 mg Buah 250 mg Buah 500 mg Kontrol (+) Kontrol (-)
0
Keterangan :
** = menunjukkan bahwa antara perlakuan yang diuji berbeda secara signifikan, namun apabila tidak terdapat ** berarti antara pe rlakuan yang diuji tidak berbeda signifikan.
Grafik SGPT sebelum & sesudah perlakuan 140
119
120 100 r a d a K
sebelum perlakuan
80 60 40
37.6 20
29.6 19.4
26 20.2
23.8 16.6
Buah 250 mg
Buah 500 mg
Kontrol (+)
20
19.2
0 Buah 125 mg
Perlakuan
Kontrol (-)
sesudah perlakuan
Lampiran 3. Dokumentasi Penelitian
a.
b.
c.
d.
e.
f.
g.
h.
i.
Keterangan: a. Pencucian/pembersihan sampel, b. Perajangan sampel, c. Penimbangan sampel, d. Proses maserasi sampel, e. Penyaringan sampel buah pare setelah dimaserasi selama 5 hari, f. Hasil penyarian ekstrak buah pare, g. Penimbangan mencit , , h. penimbangan Kontrol positif, i. Pengambilan darah mencit.
j.
m.
k.
l.
n.
Keterangan: j. Proses sentrifuge darah mencit, k. hasil sentrifuge darah mencit, l. Reagent GOT, m. Reagent GPT, n. Alat fotometer
