LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBILOGI LINGKUNGAN TEKNIK LABORATORIUM MIKROBIOLOGI TEKNIK LINGKUNGAN DAN PENGENALAN MIKROBA
KELOMPOK VI Luthfiaqmar Rizky Pratiwi 1152005021
ASISTEN: 1. Astari Dwi Jayanti 2. Hariastuti Prameswari
JURUSAN TEKNIK LINGKUNGAN FAKULTAS TEKNIK DAN ILMU KOMUNIKASI UNIVERSITAS BAKRIE 2016
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas rahmat dan karunia Nya penulis dapat menyelesaikan laporan praktikum mikrobiologi yang berjudul ber judul “Teknik Laboratorium Mikrobiologi Lingkungan dan Pengenalan Mikroba” ini. Laporan praktikum mikrobiologi ini disusun sebagai tugas wajib yang harus dikejakan seteah melakukan pratikum. Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari kata sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun agar kedepannya penulis dapat lebih baik dalam menyusun laporan. Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Sandra Madonna, SSi, MT. selaku dosen pembimbing pada mata kuliah praktikum mikrobiologi yang telah memberi materi dan bimbingan dalam melakukan praktikum mikrobiologi ini. 2. Astari Dwi Jayanti selaku kepala asisten laboratorium dan Hariastuti Prameswari selaku asisten laboratorium yang telah membimbing dalam melakukan praktikum mikrobiologi. Hanya Allah SWT yang akan membalas kebaikan kalian. Demikian laporan ini penulis susun, akhir kata penulis mohon maaf atas segala kesalahan. Semoga laporan ini bermanfaat bagi yang membacanya dan penulis penulis selalu mengharapkan kritik dan saran yang membangun membangun demi perbaikan dimasa depan.
Bekasi, 29 September 2016
(Luthfiaqmar Rizky Pratiwi)
ii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas rahmat dan karunia Nya penulis dapat menyelesaikan laporan praktikum mikrobiologi yang berjudul ber judul “Teknik Laboratorium Mikrobiologi Lingkungan dan Pengenalan Mikroba” ini. Laporan praktikum mikrobiologi ini disusun sebagai tugas wajib yang harus dikejakan seteah melakukan pratikum. Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari kata sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun agar kedepannya penulis dapat lebih baik dalam menyusun laporan. Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Sandra Madonna, SSi, MT. selaku dosen pembimbing pada mata kuliah praktikum mikrobiologi yang telah memberi materi dan bimbingan dalam melakukan praktikum mikrobiologi ini. 2. Astari Dwi Jayanti selaku kepala asisten laboratorium dan Hariastuti Prameswari selaku asisten laboratorium yang telah membimbing dalam melakukan praktikum mikrobiologi. Hanya Allah SWT yang akan membalas kebaikan kalian. Demikian laporan ini penulis susun, akhir kata penulis mohon maaf atas segala kesalahan. Semoga laporan ini bermanfaat bagi yang membacanya dan penulis penulis selalu mengharapkan kritik dan saran yang membangun membangun demi perbaikan dimasa depan.
Bekasi, 29 September 2016
(Luthfiaqmar Rizky Pratiwi)
ii
DAFTAR ISI
..………………………………………………………………….. i KATA PENGANTAR ..………………………………………………………………….. DAFTAR ISI …………... …………...…………………………………………………………………ii …………………………………………………………………ii DAFTAR TABEL ……….. ………..……………………………………………………………... ……………………………………………………………... iii iii
.……... ...………………………………………………………….. …………………………………………………………..... ... iv DAFTAR GAMBAR .…… BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang ………………………….......... …………………………..........………………………………. ………………………………. 4 1.2 Tujuan ……………………………………………………………….. ………………………………………………………………..……….. ……….. 7 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Teori Dasar ……………........... ……………...........……………………………………………….. ……………………………………………….. 2.1.1 Mikroorganisme…………………………………… Mikroorganisme ……………………………………... ...………… …………........ ........ 8 2.1.2 Mikroskop………………………………………..………………… Mikroskop………………………………………..………………… 12 12 2.1.3 Sterilisasi Sterilisasi …………..………………………………………………. 20 BAB III PEMBAHASAN DAN HASIL PENGAMATAN ……………………………… 5 3.1 Hasil pengamatan ……………...……………………….. ……………...………………………..…………………… …………………… 21 3.2 Pembahasan ….. …..……………...………………………………………………. ……………...………………………………………………. 24 BAB IV KESIMPULAN KESIMPULAN ………………………………………………………………… 28 ………………………………………………………………… 28 DAFTAR PUSTAKA PUSTA KA …………………...……………………………………………….. 29 29
iii
DAFTAR TABEL
1. Tabel 2.1.1 Pengamatan Mikroba………………………………………………... 10 2. Tabel 2.2.1 Pengenalan Mikroskop …………….………..………………………. 11 3. Tabel 2.2.2 Sterilisasi ……………………………………………………………..12 4. Tabel 3.1.1 Teknik-teknik Laboratorium ………………………………………... 13 5. Tabel 3.1.2 Pengenalan Mikroba………………………………………………… 14
iv
DAFTAR GAMBAR
1. Gambar 2.1 Mikroskop Medan Terang ………………………………………….. 13 2. Gambar 2.2 Mikroskop Binokuler ………………………………………………..14 3. Gambar 2.3 Mikroskop Stereo…………………………………………………… 15 4. Gambar 2.4 Autoklaf ……………………………………………………………. 16
v
BAB I PENDAHULUAN
1.1 LATAR BELAKANG
Mikroorganisme adalah ilmu pengetahuan tentang kehidupan makhluk kecil atau beberapa mikron yang hanya bias dilihat melalui mikroskop. Yang berasal dari Bahasa yunani (mikron= kecil, bios= hidup, logos= kata atau ilmu).mikroorganisme yang termasuk golongan ini adalah bakteri, cendawan atau jamur tingkat rendah, ragi yang menurut sistematik masuk golongan jamur, ganggang, hewan bersel satu atau protozoa,
dan
virus
yang
hanya
Nampak
dengan
mikroskop
electron.
(Dwidjoseputro,1990) Mikroorganisme umumnya terdapat di mana-mana, seperti didalam tanah dilingkungan akuatik, berkisar dari aliran air sampai lautan, dan atmosfer (Pelczar dan Chan, 1986). Mikroorganisme tersebut mempunyai beberapa peranan salah satunya mikroorganisme yang hidup dalam tanah dapat mmebentuk pembentukan struktur tanag yang mantap, karena mikroorganisme tanah dapat mengeluarkan (sekresi) zat perekat yang tidak mudah larut dalam air ( Hardjowigeno,1992) Mikroorganisme atau mikroba adalah organisme yang berukuran sangat kecil. Mikroorganisme disebut juga organisme mikroskopok. Mikrooranisme seringkali bersel tunggal( uniseluler ) maupun bersel banyak ( multiseluler ). Namun, beberapa Protista bersel tunggal masih terlihat oleh mata telanjang dan ada beberapa spesies prostista bersel tungal masih terlihat oleh mata telanjang dan ada beberapa spesies multisel tidak terlihat mata telanjang. Virus juga termasuk kedalam mikroorganisme meskipun tidak bersifat seluler. Saat ini mikroba banyak dimanfaatkan di bidang lingkungan, yang berperan membantu memperbaiki kualitas lingkungan. Terutama untuk mengatasi masalah pencemaran lingkungan, baik di lingkungan tanah maupun perairan. Bahan pencemaran dapat bermacam-macam mulai dari bahan yang berasal dari sumbersumber alam sampai bahan sintetik, dengan sifat yang mudah dirombak (biodegradable) sampai sangat sulit bahkan tidak bias dirombak (non-biodegradable) maupun bersifat meracun bagi jasad hidup dengan bahan aktif tidak rusak dalam waktu lama (persisten)
vi
1.2 TUJUAN
Tujuan dari pratikum teknik laboratorium mikrobiologi dan pengenalan mikroba adalah : 1.2.1
TEKNIK LABORATORIUM
1
Pengenalan mikroskop Pengenalan mikroskop yang dilakukan pada praktikum ini bertujuan untuk mengenal,mengetahui dan mempelajari sterilisasi beserta teknik atau tahap-tahap sterilisasi.
2
Sterilisasi alat dan bahan Sterilisasi alat dan bahan yang dilakukan pada praktikum ini bertujuan untuk mengetahui dan mempelajari sterilisasi beserta teknik atau tahap-tahap sterilisasi.
1.2.2
PENGENALAN MIKROBA
Pengenalan mikroba yang dilakukan pada praktikum ini bertujuan untuk mengetahui beberapa jenis mikroba yang terdapat pada oncom, tempe, ragi, air kotor dan air alga menggunakan mikroskop.
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1
Mikroorganisme
Mikroorganisme atau mikroba adalah organisme yang berukuran sangat kecil. Mikroorganisme disebut juga organisme mikroskopok. Mikrooranisme seringkali bersel tunggal( uniseluler ) maupun bersel banyak ( multiseluler ). Namun, beberapa Protista bersel tunggal masih terlihat oleh mata telanjang dan ada beberapa spesies prostista bersel tungal masih terlihat oleh mata telanjang dan ada beberapa spesies multisel tidak terlihat mata telanjang. Virus juga termasuk kedalam mikroorganisme meskipun tidak bersifat seluler. Saat ini mikroba banyak dimanfaatkan di bidang lingkungan, yang berperan membantu memperbaiki kualitas lingkungan. Terutama untuk mengatasi masalah pencemaran lingkungan, baik di lingkungan tanah maupun perairan. Bahan pencemaran dapat bermacam-macam mulai dari bahan yang berasal dari sumber-sumber alam sampai bahan sintetik, dengan sifat yang mudah dirombak (biodegradable) sampai sangat sulit bahkan tidak bias dirombak (non-biodegradable) maupun bersifat meracun bagi jasad hidup dengan bahan aktif tidak rusak dalam waktu lama (persisten). ( Hardjowigeno, 1992) Mikroorganisme biasanya dianggap mencakup semua prokariotik dan Protista. Fungi terutama yang berukuran kecil dan tidak membentuk hifa, dapat pula dianggap sebagai bagiannya, meskipun banyak yang tidak menyepakatinya. Kebanyakan orang beranggapan bahwa yang dapat dianggap mikroorganisme adalah semua organisme yang sangat kecil dan dapat dibiakkan dalam cawan petri atau incubator didalam laboratorium mampu memperbanyak diri secara mitosis. Mikroorganisme berbeda dengan sel makroorganisme. Sel makroorganisme tidak hidup bebas di alam melainkan menjadi bagian dari struktur multiseluler yang membentuk jaringan, organ ,dan sistem organ. (Dwidjoseputro, 2003).
ii
A. Bakteri
Bakteri berasal dari kata latin bacterium (jamak,bacteria) adalah kelompok besar organisme prokariotik archae yang berukuran sangat kecil serta memiliki peran besar dalam kehidupan dibumi. Struktur sel bakteri relative sederhana. Tanpa nucleus atau inti sel,kerangka sel dan organel-organel lain seperti mitokondria dan kloroplas. Bakteri dapat ditemukan di hampir semua tempat ditanah,air,udara dalam simbosis dengan organisme lain maupun sebagai agen parasite (patogen), bahkan dalam tubuh manusia. Pada umumnya, bakteri berukuran 0,5-5µm. beberapa jenis bakteri bersifat motil ( mampu bergerak ) dan mobilitasnnya ini disebabkan oleh flage. Contoh : Salmonella, E. coli, Staphylococcus dan Diphtheria bacillus.
B. Virus
Organisme yang paing kecil adalah virus. Ada beberapa virus yang tidak bias dilihat, walaupun sudah menggunakan mikroskop. Biasanya virus ini menyebar lewat media air dan makanan, sebagai contoh: Virus hepatitis. Sedangkan virus polio, menyebar lewat makanan atau susu.
C. Fungi
Fungi adaah organisme eukariotik yang bersel tungga atau banyak dengan tidak memiiki klorofil. Sel jamur memiliki dinding yang tersusun atas kitin. Karena sifat-sifatnya tersebut dalam klasifikasi makhluk hidup, jamur dipisahkan dalam kingdomnya tersendiri, ia tidak termasuk dalam kingdom Protista,monera maupun plantae. Karena tidak berklorofil, jamur termasuk kedalam makhluk hidup heterotroph (memperoleh makanan dari organisme lainnya) dalam hal ini jamur hidup dengan jalan menguraikan bahan-bahan organic yang ada dilingkungannya . umumnya jamur hidup secara saprofit ( hidup dengan menguai sampah organic seperti bangkai menjadi bahan anorganik). Ada juga jamur yang hidup secara parasite ( memperoleh bahan organic dari inangnya) adapula yang hidup dengan simbiosis mutualisme ( yaitu hidup dengan organisme lain agar sama-sama mendapatkan untung).
iii
D. Protozoa
Protozoa secara umum dapat dijelaskan bahhwa protozoa berasal dari Bahasa yunani, yaitu protos artinya pertama dan zoon artinya hewan. Jadi, protozoa adalah hewan pertama. Protozoa merupakan kelompok lain Protista eukariotik. Kadangkadang antara algae dan protozoa kurang jelas perbedaannya. Kebanyaan protozoa hanya dapat dilihat dibawah mikroskop. Beberapa organisme mempunyai sifat anara algae dan protozoa. Sebagai contoh algae hijau (Euglenophyta) selnya berflagela dan merupakan sel tunggal yang berklorofil, tetapi dapat mengalami kehilangan klorofil dan kemampuan untuk berfotosintesa. Semua spesies Euglenaphyta yang mampu hidup
pada
nutrisi
kompleks
tanpa
adanya
cahaya,
Beberapa
ilmuwan
memasukannya kedalam filum protozoa. Contohnyastrain mutan algae genus polytoma. Hal ini merupakan contoh bagaimana sulitnya membedakan dengan tegas antara algae dan protozoa. Protozoa dapat dibedakan dari prokarioti karena ukurannya yang lebih bedar, dan selnya eukariotik. Protozoa dibedakkan dari algae karena tidak berklorofil, dibedakkan dari jamur karena dapat be rgerak aktif dan tidak berdinding sel, serta dibedakan dari jamur lender Karena tidak dapat membentuk badan buah.
E. Algae
Secara umum pengertian alga adalah Protista yang bersifat fotoautorof yang dapat membuat makanannya sendiri dengan cara fotosintesis. Ganggang/alga memiliki kloroplas dengan mengandung klorofil atau plastid yang berisi pigmen fotosintetik lainnya. Ganggan (alga) dapat dengan mudah ditemukan diair tawar maupun air laut. Ada yang hidup dengan menempel disuatu tempat atau melayanglayang diair.ganggang (alga) merupakan Protista mirip tumbuhan. Ganggang menimbulkan air sawah,airkolam,air danau,atau akuarium tampak berwarna hijau. Namun masyarakat menyanka bahwa ganggang adalah lumut. Padahal ganggang berbeda dengan lumut. Lumut tidak terendam diair,sedangkan ganggang hidup didalam air. Jika dipegang, lumut akan terasa seperti beludru dan lebih kering,sedangkan ganggang akan teraa basah, licin atau berlendir. Dilaut,ganggang mudah ditemukan, dan biasanya terdampar dipantai, berbentuk meyerupai tumbuhan yang berwarna-warni (hijau, kuning,merah atau coklat). Biasanya orang awam menyebutnya dengan rumput laut. iv
2.1.1 Pengamatan Mikroba
Tabel 2.1.1 Pengamatan Mikroba No
Cara Kerja
1.
Sterilkan alat-alat yang akan digunakan
2.
Ambil sedikti sampel yang akan diamati
Gambar
diatas preparat yang sudah disterilkan menggunakan ose yang telaah diukur sebelumnya. Sampel yang akan diamati pada prcobaan ini adalah tempe,oncom,rai,air alga,dan air kotor.
3.
Basahi samepl dengan sedikit aquades, lalu tutup dengan kaca penutup.
4.
Amati preparat menggunakan mikroskop.
v
2.2
Mikroskop
Tubuh makhluk hidup tersusun mulai dari struktur yang sangat kecil sampai struktur yang sangat besar atau kompleks. Struktur yang lebih besar akan sangat mudah diamati oleh mata secara langsung, bahkan tanpa menggunakan alat bantu. Akan tetapi bagi struktur benda atau objek yang lebih kecil dan tidak dapat dilihat dengan mata telanjang. Seperti sel dan jaringan pada makhluk hidup membutuhkan alat bantu untuk dapat mengamatinya. Karena keterbatasan pengelihatan manusia inilah yang menjadi dorongan para ilmuwan untuk mencari alat yang bias digunakan untuk mempermudahkan mengamati bagian tubuh makhluk hidup yang sangat kecil itu dikenal dengan mikroskop. Mikroskop adalah alat utama yang digunakan untuk mengamati benda-benda kecil. Mikroskop Dapat mengamati berbagai macam ukuran mulai dari ukuran 0,1mm. objek yang dipeaari dalam biologi adalah makhuk hidup, dan sebesar apapun makhluk hidup tersebut pada dasarnya tersusun oleh sel-sel yang sangat kecil, dengan munculnya mikroskop tiga dimensi (mikroskop stereo). Sedangkan berdasarkan sumber cahaya, mikroskop dibedakan menjadi mikroskop cahaya maupun mikroskop electron. Lensa objektif maupun lensa okuler keduanya merupakan lenssa cembung secara sederhana dan garis besar lensa objektif menghasilkan suatu bayangan sementara yang bersifat semu,terbalik dan diperbesar terhadap posisi benda mulamula, baik pada mikroskop cahaya maupun mikroskop elect ron. Perbesaran dalam suatu objek dapat diketahui dengan membandingkan ukuran terhadap bidang pandang, dalam mengamati objek suatu prepat, yang dilihat dibawah mikroskop, terebih dahulu menggunakan perbesaran lemah. Mikroskop terdiri dari beberapa komponen, yaitu kompnen optik dan komponen mekanik dan memiliki fungsi yang berbeda-beda, dalam melakukan pengamatan dengan mikroskop kita harus mengetahui bagian-bagiannya sehingga mempermudah dalam penggunaanya. Dalam menggunakan mikroskop harus juga diperhatikan cara membersihkan dan menyimpan agar tidak terjadi kerusakan pada mikroskop itu sendiri.
vi
Gambar 2.1 Mikroskop Medan Terang
Keterangan: 1. Eyepieceloculars (Lensa okuler) untuk memperbesar bayangan yang dibenetuk lensa objektif. 2. Revolving nosepiece (Pemutar lensa objektif) untuk memutar lensa objektif sehingga mengubah perbesaran. 3. Observation tube (Tabung pengamat atau tabung okuler) 4. Stage (Meja benda) 5. Condenser (conseder) untuk menggumpulkan cahaya supya tertuju ke lensa objektif. 6. Objective lense ( lensa objektif) 7. Brightness adjustment knob ( knop penatur kekuatan lampu) untuk memperbesar dan memperkecil cahaya lampu. 8. Main switch (tombol on-off) 9. Diopter adjustment ring ( cincin pengatur diopter) untuk menyamakan focus antara mata kanan dan kiri. 10. Interpupillar distance adjustment knob ( pengatur jarak interpupillar) vii
11. Specimen holder (penjepit specimen ) 12. Illuminator (sumber cahaya ) 13. Vertical feed knob (knop pengatur vertical ) untuk menaikkan atau menurunkan objek glass 14. Horizontal feed knob ( knop pengatur horizontal) untuk mengatur kekanan/kiri objek glass. 15. Coarse focunob (knob focus kasar ) untuk mengatur naik-turunnya meja benda secara kasar dan cepat. 16. Fine focus knob ( knob focus halus ) untuk mengatur naik-turunnya meja benda secara halus dan lambat. 17. Observation tube securing knob (knop pengencang tabung okuler). 18. Conseder adjustment knob (knop pengatur kondeser ) untuk menaik -turunkan konseder.
Gambar 2.2 Mikroskop Binokuler
viii
Keterangan : 1. Bagian-bagian optik :
Lensa okuler, lensa yang terdapat dibagian ujung atas tabung pada gambar,pengamat melihat objek melalui lensa ini. Lensa okuler berfungsi untuk memperbesar kembali bayangan dari lensa objektif. Lensa okuer biasanya memiliki perbesaran 6,10 atau 12 kali.
Lensa objektif, yaitu ensa yang dekat dengan objek. Biasanya terdapat 4 lensa objektif pada mikroskop, yaitu dengan perbes aran 5,10,40, dan 100 kali. Saat menggunakan lensa objektif pengamat harus mengoeskan minyak emersi kebaian objek, minyak emersi ini berfungsi sebagai pelumas dan untuk memperjelas bayangan benda,Karena saat pebesaran 100 kai, letak lensa dengan objek yang diamati sangat dekat,bahkan kadang bersentuhan.
Condenser, yaitu bagian yang dapat diputar naik t urun yang berfungsi untuk mengumpulkan cahaya yag dipantulkan oleh cermin dan memusatkannya ke objek.
Diafragma, yaitu bagian yang dapat berfungsi untuk mengatur banyak sedikitnya cahaya yang masuk dan mengenai preparat.
Cermin, yaitu bagian yang berfungsi untuk menerima dan mengarahkan cahaya yang diterima. Cermin mengarahkan cahaya dengan cara memantulkan cahaya tersebut.
2. Bagia-bagian mekanik (non-optik) :
Revolver, yaitu bagian yang berfungsi untuk mengatur perbesaran lensa objektif yang diinginkan.
Tabung mikroskop, yaitu bagian yang berfungsi untuk mengubungkan lensa objekif dan lensa okuler mikrosop.
Lensa mikroskop, yaitu bagian yang berfungsi untuk tempat pengamat memegang mikroskop.
Meja benda, yaitu bagian yang berfungsi untuk tempat menempatkan objek yang akan diamati, pada meja benda terdapat penjepit objek, yang menjaga objek tetap ditempat yang diinginkan.
ix
Makrometer ( Pemutar Kasar ) yaitu berfungsi untuk menaikkan atau menurunkan tabung secara cepat untu pengaturan mendapatkan kejelasan dari gambaran objek yang diinginkan.
Micrometer ( pemutar halus ) yaitu bagian yang berfungsi untuk menaikkan atau menurunkan tabung secara lambat untuk pengaturan mendapatkan kejelasan dari gambaran objek yang diinginkan.
Kaki mikroskop, yaitu bagian yang berfungsi sebagai pen yangga yang menjaga mikroskop tetap pada tempat yang diinginkan, dan juga untu tempat memegang mikroskop saat mikroskop hendak dipindahkan.
Gambar 2.3 Mikroskop Stereo
Keterangan: 1. Oculars eyepiece ( lensa okuler ) 2. Diopter adjustment ring ( cincin pengatur diopter ) 3. Zoom contro knob ( sekrup pengatur pembesaran ) 4. Focusing knob ( sekrup pengatur focus ) 5. Stage plate ( plat tempat specimen diletakkan ) 6. Stage clip ( penjepti specimen/preparat )
x
Selain itu, bahan dan peralatan yang digunakan dalam penelitian harus dala m kondisi steril. Oleh karna itu, diperlukan teknik sterilisai. Sterilisasi dalam mikrobiologi adalah suatu proses untuk mematikan semua organisme yang terdapat pada atau didalam suatu benda. Ketika anda untuk pertama kalinnya melakukan pemindahan biakan bateri secara aseptic,sesungguhnya anda telah menggunakan salah satu sterilisasi, yaitu pembakaran. Namun kebanyakan peralatam dan media yang umum dipakai dalam pekerjaan mikrobiologis akan menjadi rusak bila dibakar. Utnungnya tersedia berbagai metode lain yang efektif (Hadioetomo,1993) Ada tiga cara yang umum digunakan dalam sterilisasi yaitu penggunaan panas,penggunaan bahan kimia dan penyaringan ( filtrasi ). Bila panas yang digunakan bersama-sama dengan uap air, maka disebut sterilisasi panas lembut atau sterilisasi basah,bila tanpa kelembapan, maka disebut sterilisasi panas kering atau sterilisasi kering. (Hadioetomo,1993) Berikut ini merupakan bagia-bagian saah satu a;at yang digunakan dalam sterilisasi panas basah, yaitu autoklaf (autocaver) adalah alat untu mensterilkan berbaai macam alat dan bahan menggunakan uap air panasbert ekanan. Tekanan yang digunakan pada umumnya 15 psi atau sekit an 2 atm dan dengan uhu 121°C. Jadi,tekanan yang bekerja keseluruh permukaan benda adalah 15 psi ( 15 pounds per square inch ). Lama sterilisasi yang dilakukan biasanya 15 menit untuk 121°C, tapi jika digunakan suhu 115°C, lama waktu autoclaving disarankan menjadi 20 menit.
xi
Gambar 2.4 Autoklaf
Keterangan: 1. tombol pengatur waktu mundur (timer ) 2. katup pengeluaran uap. 3. Pengukur tekanan. 4. katup pengaman 5. Tombol on-off. 6. Termometer. 7. Lempeng sumber panas. 8. Air 9. Clamp ( plat pengaman ). 10. Angsang ( plat berpori ) yang merupakan masimum air pemanas.
xii
2.2.1 Pengenalan Mikroskop
Tabel 2.2.1 Pengenalan Mikroskop No
Cara Kerja
1.
Pasang lensa okuler mikroskop dan
atur
Gambar
lensa
objektif
mikroskop. 2.
Pasang preparat dibawah lensa objektif.
3.
Atur cahaya dengan mencari cahaya
sampai
mengenai
preparat. 4.
Atur lensa objektif dengan cara memutar
makrometer
untuk
menentukan focus objek. 5.
Atur lensa okuler dengan cara memutar micrometer sehingga didapatkan
bayangan
objek
yang lebih halus
xiii
2.3 Sterilisasi
Tabel 2.2.2 Sterilisasi
No
Cara Kerja
1.
Siapkan alat-aat yang akan disterilisasi,yaitu preparat dan kawat ose. Siapkan juga Bunsen dan gegep (penjepit ) sebagai alat pembantu storalisasi .
2.
Jepit preparat dengan gegep, lalu beri sedikit aquades pada permukannya.
3.
Nyalakan Bunsen, kemudian kibaskan-kibaskan peparat diatas api yang menyala hingga.kering. preparat tidak boleh terkena api langsung.
4.
Untuk mensterilkan kawat ose, bakar ujungnya hingga membara.
xiv
BAB III HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN 3.1 Hasil Pengamatan 3.1.1 Teknik-teknik Laboratorium
Tabel 3.1.1 Teknik-teknik Laboratorium No
Nama Alat
Kegunaan
1.
Kawat ose dan
Kawat ose: Mengambil
pinset
sampel suatu
Gambar
mikroorganisme. Pinset : Mengambil atau membawa obek tertentu.
2.
Bunsen
Untuk memanaskan medium dan mensterilkan alat-alat lab.
3.
Gegep (penjepit)
Untuk membantu menjepit benda yang tidak dapat dipegang menggunakan tangan saja.
xv
4.
Autoklaf
Sterilisasi basah dengan suhu sekitar 120-125 °C
5.
Mikrosop
Melihat pegamatan suatu benda kecil atau objek tak kasat mata dengan perbesaran tertentu.
6.
Oven
Menumbuhkan mikroba pada suhu tertentu. Dapat juga digunakan untuk mensterilkan alat dan bahan.
xvi
3.1.2 Pengenal Mikroba
Tabel 3.1.2 Pengenalan Mikroba No
Hasil Pengamatan
Gambar
Mikroba : Neurospora sithopilia 1.
Bentuk : Spora Bahan : Oncom
Mikroba : Rhizopus oryzae 2.
Bentuk : Rhizoid Bahan : Tempe
Mikroba : Saccharmoyces cereviceae 3.
Bentuk : Elipsodial Bahan : Ragi
xvii
Mikroba : Chlorophyta 4.
Bentuk :Coccus Bahan : Air Alga
Mikroba : Heliozoa 5.
Bentuk :Coccus Bahan :Air kotor
xviii
3.2 Pembahasan
Pada praktikum mikrobiologi ini,dilakukan pengenaan terhadap alat aat yang ada dilaboratorium mikrobiologi meliputi mikroskop, auroklaf,cawan petri, gegep, kawat ose,oven,jarum ose pinset dan alat-alat lainnya. Masing-masing aat mempunyai kegunaan yang berbeda. Alat utama yang dibutuhkan dalam praktikum mikrobiologi ini adalah mikroskop. Karena alat ini digunakan untuk melihat benda-benda yang berukuran renik atau sangat renik. Pada percobaan pertama yang dilakukan pada praktikum kali ini adalah pengenalan bagian-bagian dan fungsi dari mikroskop, serta penggunaan mikroskop yang baik dan benar. Pada praktikum ini, praktikan diperkenalkan dua buah mikroskop yang biasa digunakan dilab mikrobioogi, mikroskop tersebut adalah mikroskop binokuler dan mikroskop medan terang. Pada umumnya, kedua mikroskop tersebut tidak memiliki perbedaan yang sangat signifikan, keduanya memiliki bagian-bagian dan fungsi yang sama, Namun, mikroskop binokuler
merupakan
mikroskop
yang
lebih
sering
digunakan
untuk
meneliti
mikroorganisme pada rai dan juga bakteri. Bagian utama yang ada pada mikroskop adalah lensa objektif, sekrup besar ( makrometer ), sekrup kecil (mikrometer ), lensa okuler, kondensorm dam preparat. Sekrup besar digunakan untuk mengatur jarak lensa ke preparat ntuk mendapatkan bayangan objek yang focus dan sekrup kecil digunakan untuk memperhalus bayangan. Lemsa okuler menciptakan bayangan yang bersifat semu,terbalik dan diperbesar. Bayangan yang terbalik tidak menjadi masalah Karena anatomi benda yang diamati tidak sempurna. Kondesor juga digunakan untuk mengatur cahaya ke preparat. Selain diperkenakan beberapa alat-alat laboratorium, praktikan uga mempelajari sterilisasi alat. Sterilisasi alat adalah ha yang harus dilakukan sebelum pengambilan sampel atau penggunaan alat. Sterilisasi dilakukan untuk menghindari terkontaminasinya sampel yang akan diamati oleh mikroba-mikroba lain diudara. Sterilisasi yang dipelajari pada praktikum ini adalah sterilisasi panas, yaitu hanya dengan menggunakan media api pada Bunsen. Alat-alat yang disterilisasi pada praktikum ini adalah kawat os e, jarum ose dank aca preparat. Selain diperkenalkan beberapa alat-alat laboratorium, praktikan ini juga mempelajari sterilisasi alat. Sterilisasi alat adalah hal yang harus dilakukan sebelum pengambilan sampel xix
atau penggunaan alat. Sterilisasi dilakukan untuk menghindari terkontaminasinya sampel yang akan diamati oleh mikroba-mikroba lain diudara. Sterilisasi yang dipelajari pada praktikum kali ini adalah sterilisasi panas dimana sterilisasi ini adalah sterilisasi sederhana, yaitu hanya dengan menngunakan media api pada bunsen. Alat-alat yang disterilisasi pada praktikum ini adlah kawat ose, jarum ose dan kaca preparat. Percobaan terakhir yang dilakukan pada praktikum ini adalah pengenalan bakteri.. dalam
hal
ini,praktikan
tidak
hanya
meneliti
bakteri
saja,tetapi
juga
meneliti
mikroorganisme lain,yaitu fungi. Selain itu praktikan juga mempelajari mikroorganisme lain,yaitu virus,alga,protozoa dan liken. Masing-masing mikroorganisme tersebut memiliki ciri khas masing-masing. Pengenalan bakteri yang dilakukan pada praktikum ini adalah bakteri yang berasal dari beberapa sampel, yaitu tempe,oncom,ragi, air alga dan air kotor. Pada penelitian sampel oncom,didapatkan bakteri Neurosphora sithopilia. Pertumbuhan jamur sangat pesat dengan warna jingganya yang khas, serta bentuk spora (konidis) yang berbentuk seperti tepung merupaakan ciri-ciri jamur ini. Namun,istilah jamur tidak tepat digunakan sebagai sebutan untuk Neurosphora sithopilia. Neurosphora sithopilia merupakan kapang yang umum digunakan dalam pembuatan oncom merah. Fungsi kapang ini adalah mengeluarkan enxim amilase,lipase dan prooase yang aktif selama proses fermentasi. Enzim-enzim tersebut memegang peranan penting dalam penguraian pati menjadi gula,penguraian bahan-bahan dinding sel kacang,penguraian lemak,serta pembentukan sedikit alcohol dan berbagai ester yang memunculkan aroma sedap dna harum. Pada penelitian sampel tempe,didapatkan mikroba Rhizopus oryzae. Rhizopus oryzae merupakan amur yang sering digunakan dalam pembuatan tempe. Jamur ini aman dikonsumsi karena tidak menghasilkan toksin dan mampu menghasilkan asam laktat. Selain itu, jamur ini mempunyai kemampuan mengurai lemak kompleks menjadi trigliserida dan asam amino dan mampu menghasilkan protease. Pada penelitian sampel ragi menggunaan mikrokop binokuler, didapatan mikroba Saccharmoyces cereviceae. Saccharmoyces cereviceae adalah nama spesies yang termasuk dalam khamir berbentuk oval. Saccharmoyces cereviceae mempunyai mikrostruktur yang terdiri dari kapsul,diding sl,membransitoplasma,nucleus,vakuola,mitokondria,lipid dan
xx
sitoplasma. Saccharmoyces cereviceae bersifat fermentative 9melakukan fermentasi, yaitu memecah glukosa menjadi karbon dioksida dan alcohol ) kuat. Pada penelitian sampel air alga, didapatkan mikroba Chlorophyta. Chlorophyta adalah divisi dari alga hijau. Dalam sstem klasifikasi yang lebih tua,mengacu pada kelompok yang sangat parafiletik dari semua ganging hijau dalam tumbuhan hijau (Viridiplantae) dan dengan demikian mencakup 7000 spesies dari organisme eukariotik fotosintetik yang sbeagian besar hidup diair. Dalam klasifikasi yang lebh baru, mengacu pada salah satu dari dua klad yang membentuk Viridiplantae, yang menciptakan chlorophyte dan streptophyta. Klad streptophyta terdiri dari dua divisi, yaitu Charophyta dan Embryophyta. Dalam hal ini, chlorophyte hanya mencakup sekitar 4300 spesies. Seperti tumbuhan darat ( bryophyte dan tracheophyta), ganggang hijau mengandung klorofil a dan klorofil b, serta menyimpan makanan dalam bentuk pati di plastida. Penelitian terakhir yang dilaukan adalah penelitian sampel air kotor.pada penelitian sampel ini didapatkan mikroba protozoa heliozoa. Heliozoa dari filum actinopoda memiliki pseudopodia ramping dan menyebar yang disebut axopodia. Tubuh dari protozoa ini berbentuk seperti bola dan hidup pada air tawar. Dalam pengamatn ini pratikan mengalami kesulitan untuk menemukan mikroba pada sampel air kotor dikarenakan keberadaan meja praktik yang berhadapan langsung dengan ac sehingga angina menjadi pengaruh. Kemudia mikroba seperti bergerak bebas sehingga sulit ditemukan. Pada percobaan ini didapatkan pengamatan berupa bola kecil yang memiliki ekor runcing seperti kaki semu sebagai alat gerak.
xxi
BAB IV KESIMPULAN
Tujuan dari praktikum ini adalah sebagai berikut : 1. Untuk mengidentifikasi keterkaitan antara mikroorganisme dan berbaai bidangg kajain didalam mikrobiologi lingkungan. 2. Praktikan
mampu
mengatahui
berbagai
klasifikasi
dari
berbagai
jenis
mikroorganisme 3. Praktikan mampu mengetahui dan menjelakan mengenai cara penggunaan mikroskop,bagian-bagian mikroskop dan berbaai jenis serta kegunaan masingmasing mikroskop. 4. Praktikan mampu memahami dan mengerti bagaimana proses sterilisasi pada peralatan laboratorium mikrobiologi yang baik dan benar. 5. Praktikan menambah banyak wawasan seputar mikroorganisme, mikroskop serta proses sterilisasi dibidang mikrobiologi lingkungan.
xxii
DAFTAR PUSTAKA
Dwidjoseputro, 1990. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta : Penerbit Djambatan. Hardjowigeno,S. 1992 Ilmu Tanah. Jakarta :Icraf. Arrazy, Diah. “Bahan Kuliah Biologi”. Diakses pada 2 Oktober 2016 https://diaharrazy.files.wordpress.com/2011/04/bahan-kuliah-biologi-2.pdf Hadi, Abdul. “Pengertian,Fungsi Macam Bagian Mikroskop”. Diakses pada 2 Oktober 2016 http://www.softilmu.com/2015/01/Pengertian-Fungsi-Macam-Bagian-MikroskopAdalah.html Supriyanto, Joko.“Macam Mikroskop Beserta Fungsinya” Diakses pada 2 Oktober 2016 http://mansaba.sch.id/web_saba/science-/527-macam-macam-mikroskop-besertafungsinya.htm
xxiii
