PROTOCOLO DE VALIDACION DE PRUEBA DE DESAFIO DE DESINFECTANTES 1. OBJETIVO 2. ALCANCE 3. RESPONSABILIDADES 4. EQUIPOS Y MATERIALES A UTILIZAR 5. METODOLOGÍA DE VALIDACIÓN 5.1. Caracterización de microbiota endógena 5.2. Evaluación de la eficacia de desinfectantes: Método de dilución en uso 5.3. Prueba de desafío de superficies 5.4. Criterios de aceptación.
1. OBJETIVO: Demostrar mediante evidencia documentada que la metodología para evaluar la eficacia de los desinfectante en un entorno de fabricación de productos farmacéuticos, que complemente un programa eficaz de limpieza y sanitización de ambientes controlados para prevenir la contaminación microbiana de los mismos, está totalmente bajo control y proporciona de forma consistente y reproducible resultados que cumplen las especificaciones establecidas.
2. ALCANCE: Este protocolo se utilizará para la validación de la eficacia de los desinfectantes: Alcohol etílico, Tego, Hipoclorito de sodio
3. RESPONSABILIDAD: 3.1. Analista de Microbiología, es responsable de Diseñar, planificar, desarrollar, registrar datos y de preparar el reporte de validación, adjuntando toda la documentación pertinente. 3.2. Jefe de Control de Calidad, es responsable de vigilar la correcta ejecución de la validación 3.3. Jefe de Validaciones, es el responsable de mantener vigente la calificación de los equipos y calibración de los instrumentos de medición utilizados en la validación. 3.4. Jefe de Aseguramiento de la Calidad es el encargado de la coordinación de las actividades que genere la validación, así como de colaborar en la revisión de la documentación propia del proceso de validación. 3.5. El Director Técnico es responsable de la aprobación del Reporte Final de la Validación y de darlo a conocer a los involucrados.
4. EQUIPOS Y MATERIALES A UTILIZAR 4.1. Equipos NOMBRE
MARCA
CÓDIGO
FECHA CALIBRACIÓN
CÓDIGO/LOTE
FECHA CALIBRACIÓN
Cabina de bioseguridad Balanza Analítica Estufa de Incubación Autoclave Refrigeradora de 2-8°C Espectrofotómetro
4.2. Materiales de vidrio y accesorios NOMBRE
MARCA
Frasco 100mL con tapa Frasco 250mL con tapa Tubo 18x150mm Tubo 25x150mm
Pipeta x 1 mL Pipeta x 5 mL Pipeta x 10 mL Cilindros de acero inoxidable Asa de siembra descartable Placas Petri 20x90mm Placas Rodac 15x65mm Pinza de acero inoxidable Papel whatman N°2 Hisopo Micropipeta 100 uL
4.3. Material de referencia, producto y activos NOMBRE
Escherichia coli, ATCC 11229 Sthaphylococcus aureus, ATCC 6538 Pseudomonas aeruginosa, ATCC 15442 / 9027 Candida albicans, ATCC 10231 A. brasiliensis, ATCC 16404 B. subtilis, ATCC 19659 / 6633
MARCA
LOTE
FECHA VENCIMIENTO
Alcohol etílico Hipoclorito de sodio Tego Fenol
4.4. Medios de Cultivo, reactivos y excipientes NOMBRE Bateria Gram Agar CASO (TSA) Agar Sabouraud Caldo CASO (TSB) Caldo Letheen
MARCA
LOTE
FECHA VENCIMIENTO
5. METODOLOGÍA DE VALIDACIÓN: 5.1. Consideraciones Generales Los ensayos de cada concentración o análisis se harán por triplicado. Dichos análisis se harán sobre soluciones preparadas el mismo día del ensayo. 5.2. Ensayos a realizar: Para demostrar la eficacia de un desinfectante en un entorno de fabricación de productos farmacéuticos puede considerarse necesaria la realización de las siguientes pruebas:
5.2.1. Caracterización de microbiota endógena: se aísla e identifica los microrganismos que históricamente se detectan con mayor frecuencia y aquéllos que por su naturaleza u origen puedan considerarse más críticos y representativos de los ambientes de trabajo. 5.2.2. Evaluación de la eficacia de desinfectantes: 5.2.2.1. Prueba del coeficiente fenólico: Compara la eficacia del desinfectante a evaluar respecto al fenol 5.2.2.2. Pruebas de dilución de uso : analizar la eficacia de los desinfectantes a concentración y tiempos de contacto establecidos contra una amplia variedad de organismos estándares de prueba. 5.2.3. Pruebas de desafío de superficie : Se determinando la reducción del logaritmo de los microorganismos estándares de prueba y microorganismos típicos de aislamientos ambientales, inoculados en superficies representativas de los ambientes de trabajo luego de aplicar desinfectantes a la concentración de uso seleccionada y durante un tiempo de contacto especificado. 5.3. Referencias: Caracterización de microbiota endógena: aislamientos obtenidos de la aplicación de los procedimientos xxxxx “Control de ambientes de áreas estériles y áreas no estériles ”, y xxxxxx “Control microbiológico de superficies críticas” Prueba del coeficiente fenólico: Adaptado de AOAC 2016 Método oficial 955.11. Prueba de dilución de uso: Adaptado de AOAC 2016 Método oficial 955.14, 955.15, 964.02. Prueba de desafío de superficie: Adaptado de USP 39 <1072> Desinfectantes y Antisépticos. Pag. 1215-1216
