TUGAS PENDAHULUAN (TP) 1. Jelaskan mekanisme isolasi pada kromatografi kolom ! 2. Apa keuntungan dan kerugian kromatografi kolom, jelaskan ! 3. Apa yang menjadi dasar pertimbangan untuk menggunakan metode kromatografi kolom dalam isolasi ekstrak! 4. Bilakah isolasi dikatakan sempurna pada kromatografi vakum cair? 5. Gambarkan alat yang digunakan pada kromatografi vakum cair beserta bagian-bagiannya? Jawaban : 1. Sampel yang akan dipisahkan dilarutkan terlebih dahulu dalam pelarut,
kemudian diletakkan di bagian atas kolom yang telah diisi oleh fasa diam. Kemudian fasa gerak yang sudah disiapkan dialirkan pelan-pelan dan dibiarkan mengalir melalui kolom sampai pelarut habis. Fasa gerak akan membawa campuran komponen ke bawah, sehingga di dalam kolom terjadi kesetimbangan dinamis antara komponen teradsorbsi pada fasa diam dengan komponen yang terlarut dalam fasa gerak. Maka fasa gerak akan mengalir ke bawah. Pelarut (fase gerak) dibiarkan mengalir melalui kolom karena aliran yang disebabkan oleh gaya berat ayau gaya gravitasi atau didorong dengan tekanan. Pita, merupakan senyawa yang larut yang bergerak melalui kolom dengan laju yang berbeda,jika telah terpisah terpisah maka dapat dapat dikumpulkan dalam dalam vial atau atau tabung reaksi maupun dalam botol UC yang hasilnya berupa fraksi ketika keluar dari kolom.
Trusted by over 1 million members
Try Scribd FREE for 30 days to access over 125 million titles without ads or interruptions! Start Free Trial Cancel Anytime.
Trusted by over 1 million members
Try Scribd FREE for 30 days to access over 125 million titles without ads or interruptions! Start Free Trial Cancel Anytime.
2. Adapaun keuntungan dan kerugian dari kromatografi kolom adalah
sebagai berikut :
a. Keuntungan
1. Konsumsi fase gerak KCV hanya 80% atau lebih kecil disbanding dengan
kolom
konvensional
karena
pada
kolom
mikrobor
kecepatan alir fase gerak lebih lambat (10- 100μl/menit)
2. Adanya aliran fase gerak lebih lambat membuat kolom mikrobor lebih ideal jika digabung dengan spectrometer massa.
3. Sensitivitas kolom mikrobor ditingkatkan karena solute lebih pekat karenanya jenis kolom ini sangat bermanfaat jika jumlah sampel terbatas missal sampel klinis b. Kerugian KCV (Kromatografi Vakum Cair) : 1. Membutuhkan waktu yang cukup lama 2. Sampel yang dapat digunakan terbatas
3. Dasar pertimbangan pemilihan kromatografi kromatografi kolom yaitu : Pemisahan dengan kromatografi kolom baik untuk memisahkan campuran dalam jumlah besar( lebih dari 1 gram). Untuk komponen yang
jumlahnya sangat kecil dapat dapat digunakan kromotografi kromotografi gas
maupun kromatografi kinerja tinggi, karena dalam kromatografi ini di gunakan: 1. Adsorben yang lebih kecil dan luas 2. Tekanan dari suatu pompa untuk mendorong pelarut 3. Detektor dapat digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif senyawa- senyawa yang ter elusi
Trusted by over 1 million members
Try Scribd FREE for 30 days to access over 125 million titles without ads or interruptions! Start Free Trial Cancel Anytime.
4. Isolasi pada kromatografi vakum belum bisa dikatakan semurna, karena pada proses kromatografi vakum masih memisahkan senyawa-senyawa kimia yang terdapat pada sampel, tapi dalam proses kromatografi ini senyawa yang kita dapatkan bisa lebih sedikit daripada pada proses KLT biasa maka dari itu tahap selanjutnya setelah memperoleh fraksi dari proses kromatografi vakum yaitu dengan melakukan KLT.
5. Gambar alat kromatografi kolom beserta keterangannya :
