PENGGUNAAN CENTRIFUGE
LAPORAN UNTUK MEMENUHI TUGAS MATAKULIAH Teknik Laboratorium yang dibina oleh Bapak I ayan ayan Sumberartha
!" ." (" )" &"
oleh Kelompok ! #ita #ita $erdan $erdanaa %!&'() %!&'()!*' !*'+&' +&',,Lelly Lu/kita0ari %!&'()!*''((,Luth1ianti 2a 2anani %!&'()!*'('!,3idady 3idadyah ah ilu4eng ilu4eng %!&'() %!&'()!*' !*''!. '!.++3ido 3ido Sigit Sigit i/ak0 i/ak0ono ono %!&'( %!&'()!* )!*'(( '(((.(.-
UNIVERSITAS NEGERI MALANG FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM JURUSAN BIOLOGI November 201 PENGGUNAAN CENTRIFUGE 1! T"#"$% Maha0i05a diharapkan dapat 6 !" Men4ela Men4ela0ka 0kan n prin0 prin0ip ip ker4 ker4aa /entri1 /entri1uge uge ." Men4ela Men4ela0ka 0kan n keguna kegunaan an /entri1 /entri1uge uge (" Mengopera0ik Mengopera0ikan an penggunaan penggunaan /entri1uge /entri1uge dengan dengan benar benar 2! D$&$ D$&$rr Te Teor' or'
7entri1uge %0entri1u08 alat pemu0ing- adalah 0uatu alat untuk memi0ahkan /ampuran materi yang berbeda ma00a 4eni0nya berda0arkan gaya 0entri1ugal" Suatu benda yang mengalami gerak putar akan mendapatkan gaya 0entripetal %gaya ke arah pu0at- yang 0ama kuatnya dengan gaya 0entri1ugal %gaya ke arah luar-" $engaruh gaya 0entri1ugal mirip gaya gra9ita0i" #engan adanya gaya gra9ita0i8 0uatu 0u0pen0i akan mengendap bila didiamkan8 tetapi memerlukan 5aktu yang lama" 7ara ker4a dari /entri1uge adalah meman1aatkan gaya /entri1ugal yang ditimbulkan oleh adanya putaran rotor" #engan menggunakan /entri1uge akan diha0ilkan gaya 0entri1ugal yang 0angat be0ar8 0ehingga 1aktor gra9ita0i akan diperbe0ar8 akibatnya pro0e0 pengendapan diper/epat dan partikel : partikel dapat dipi0ah : pi0ahkan" Gaya 0entri1ugal menyebabkan partikel : partikel menu4u dinding tabung dan terakumula0i membentuk endapan" $artikel yang mempunyai ma00a 4eni0 paling be0ar akan menempati bagian tabung paling da0ar" Suatu 0u0pen0i yang diputar dengan /entri1uge dengan ke/epatan tertentu dalam 5aktu tertentu akan memi0ah men4adi dua bagian8 yaitu bagian endapan %bia0a di0ebut pellet -8 dan bagian beningan %bia0a di0ebut supernatant -" $ada da0arnya /entri1uge terdiri dari rotor yang diputarkan oleh 0uatu motor penggerak" Terdapat dua ma/am rotor" Ma/am pertama adalah rotor 0udut %angle rotor -8 yang memegang tabung dengan 0udut tetap8 mi0alnya (&;" Ma/am yang kedua adalah rotor ayun % swing rotor -8 mempunyai tabung logam yang tergantung8 tempat meletakkan tabung 0entri1uge" $ada 5aktu rotor ayun berputar8 tabung akan terayun hingga men/apai po0i0i hori
=
2
2
m 4 π N R
#imana6
m = ma00a ob4ek yang di0entri1uga0i N = ke/epatan putar per detik = re9olution per minute %rpm->*' 3 = radiu0 %4arak ob4ek dari 0umbu rota0iSehubungan dengan /entri1uge8 be0arnya gaya 0entri1ugal relati1 %relati9e /entri1ugal 1or/e- %372- merupakan harga yang lebih berman1aat8
yang penting untuk menentukan ke/epatan pengendapan" 372 bia0anya dinyatakan dalam 0ekian kali gra9ita0i atau 0ekian kali g" 2 2 2 2 Fc m 4 π N R 4 π N R RCF ( Fg ( ( mg g $enggunaan 0entri1uge 0e/ara benar 6 ?umlah tabung yang digunakan haru0 genap dan diletakkan • •
0aling berhadapan" $ada 0aat 0entri1uge berputar8 4angan dihentikan dengan
•
tangan" Untuk /entri1uge dengan ligatan tinggi haru0 di0ertai dengan pendingin yang me4aga agar larutan yang diputar
•
tidak terpengaruh" 3umah tabung haru0 di0ertai dengan beban karet agar
•
tabung tidak mudah pe/ah" 3otor haru0 membuat putaran yang kon0tan"
C$r$ me%))"%$*$% +e%,r'-")e
!" ." (" )"
Sambungakan 0top kontak ke 0ta9olt ber0umber ..' 9olt Buka penutup /entri1uge 7ek keber0ihan bagian dalam alat Ma0ukkan 0ampel kedalam tabung dengan 9olume yang 0ama
antar tiap : tiap tabung &" Ma0ukkan tabung yang telah dii0i dengan 0ampel kedalam *" +" @" ,"
0entri1uge 0ebanyak .>)>*>!. buah Tutup kembali /entri1uge Tekan tombol ke/epatan yang diinginkan %rpmTekan tombol 5aktu yang diinginkan %menitTunggu 0ampai 0entri1uge benar : benar berhenti8 baru /entri1uge dapat dibuka dan 0ampel dapat dikeluarkan Setelah pemakaian pertama8 i0tirahatkan /entri1uge 0elama • !& menit baru kemudian dapat digunakan untuk pemakaian •
kedua" Matikan tombol po5er"
.! A/$, $% B$$% Alat 6 !" 7entri1uge manual ." 7entri1uge elektrik Hetti/h (" Tabung /entri1uge
)" &" *" +" @"
Nera/a digital Beaker gla00 *'' mL Gela0 ukur !'' mL $ipet tete0 Batang pengaduk
Bahan 6 • •
Amilum Air
! Pro&e"r Ker#$ 1! Pe%))"%$$% +e%,r'-")e m$%"$/
#ibuat 0u0pen0i amilum !' 0ebanyak &'' mL
#itimbang tabung /entri1uge ko0ong menggunakan nera/a digital
#ii0i tabung /entri1uge dengan !& ml 0u0pen0i amilum yang 0ebelumnya telah diaduk rata8 ditutup rapat : rapat"
#iputar tabung /entri1uge be0erta i0inya dengan /entri1uge manual 0elama . menit
#iamati dan di/atat keadaan 0upernatannya %4ernih atau keruh-
#ibuang 0upernatannya dengan hati : hati8 4angan 0ampai terikut pelletnya" #itimbang tabung be0erta pelletnya" #ihitung bobot pelletnya"
#iulang per/obaan menggunakan /entri1uge manual untuk 5aktu putar ) menit
C$,$,$% 6 0etiap kali akan mengganti 0u0pen0i amilum8 di/u/i tabung
/entri1uge ber0ih : ber0ih
2! Pe%))"%$$% +e%,r'-")e e/e*,r'* He,,'+
#ibuat 0u0pen0i amilum !' 0ebanyak &'' mL
#itimbang tabung /entri1uge ko0ong menggunakan nera/a digital
#ii0i tabung /entri1uge dengan !& ml 0u0pen0i amilum yang 0ebelumnya telah diaduk rata8 ditutup rapat : rapat"
#ii0i tabung /entri1uge dengan !& ml 0u0pen0i amilum yang 0ebelumnya telah diaduk rata8 ditutup rapat : rapat"
#itekan tombol ke/epatan %rpm- dan 5aktu %menit- yang diinginkan8 mi0alnya dengan ke/epatan .''' rpm dan 5aktu . menit
#iamati dan di/atat keadaan 0upernatannya %4ernih atau keruh-
#ibuang 0upernatannya dengan hati : hati8 4angan 0ampai terikut pelletnya" #itimbang tabung be0erta pelletnya" #ihitung bobot pelletnya"
#iulang per/obaan menggunakan /entri1uge elektrik Hetti/h untuk ke/epatan .''' rpm dan 5aktu putar ) menit8 ke/epatan )''' rpm dan 5aktu putar . menit8 ke/epatan )''' rpm dan 5aktu putar ) menit"
C$,$,$% 6 0etiap kali akan mengganti 0u0pen0i amilum8 di/u/i tabung
/entri1uge ber0ih : ber0ih
! D$,$ Pe%)$m$,
%$ No
?eni0 /entri1uge
rpm
"
aktu
Keadaan
Bobot
Bobot
Bobot
putar
0upernatan
tabung
tabung pelet
%menit-
ko0on
pelet %g-
%g-
.
Sedikit
g %g*8*
@8,
.8(
)
keruh ?ernih
+
@8+
!8+
!"
7entri1uge
."
manual 7entri1uge
("
manual 7entri1uge
.'''
.
?ernih
*8*
@8&
!8,
)"
Hetti/h 7entri1uge
.'''
)
?ernih
+
@8@
!8@
&"
Hetti/h 7entri1uge
(&''
.
?ernih
*8*
@8*
.8'
*"
Hetti/h 7entri1uge
(&''
)
?ernih
+
@8@
!8@
Hetti/h
3! A%$/'&'& D$,$ Berda0arkan data pengamatan di ata08 maka diperoleh ha0il 0ebagai
berikut" $enggunaan /entri1uge manual untuk 5aktu putar . menit diperoleh ha0il keadaan 0upernatannya 0edikit keruh8 bobot tabung ko0ong *8* gram8 0etelah /entri1uge manual diputar8 bobot tabung be0erta pelletnya @8, gram8 0ehingga dapat diketahui bobot pelletnya 0ebe0ar .8( gram" $enggunaan /entri1uge manual untuk 5aktu putar ) menit diperoleh ha0il keadaan 0upernatannya 4ernih8 bobot tabung ko0ong + gram8 0etelah /entri1uge manual diputar8 bobot tabung be0erta pelletnya @8+ gram8 0ehingga dapat diketahui bobot pelletnya 0ebe0ar !8+ gram" $enggunaan /entri1uge elektrik Hetti/h untuk ke/epatan .''' rpm dengan 5aktu putar . menit diperoleh ha0il keadaan 0upernatannya 4ernih8 bobot tabung ko0ong *8* gram8 0etelah /entri1uge elektrik Hetti/h diputar8 bobot tabung be0erta pelletnya @8& gram8 0ehingga dapat diketahui bobot pelletnya 0ebe0ar !8, gram" $enggunaan /entri1uge elektrik Hetti/h untuk ke/epatan .''' rpm dengan 5aktu putar ) menit diperoleh ha0il keadaan 0upernatannya 4ernih8 bobot tabung ko0ong + gram8 0etelah /entri1uge elektrik Hetti/h diputar8 bobot tabung be0erta pelletnya @8@ gram8 0ehingga dapat diketahui bobot pelletnya 0ebe0ar !8@ gram" $enggunaan /entri1uge elektrik Hetti/h untuk ke/epatan (&'' rpm dengan 5aktu putar . menit diperoleh ha0il keadaan 0upernatannya 4ernih8 bobot tabung ko0ong *8* gram8 0etelah /entri1uge elektrik Hetti/h diputar8 bobot tabung be0erta pelletnya @8* gram8 0ehingga dapat diketahui bobot pelletnya 0ebe0ar .8' gram" $enggunaan /entri1uge elektrik Hetti/h untuk ke/epatan (&'' rpm dengan 5aktu putar ) menit diperoleh ha0il keadaan 0upernatannya 4ernih8 bobot tabung ko0ong + gram8 0etelah /entri1uge elektrik Hetti/h diputar8 bobot tabung be0erta pelletnya @8@ gram8 0ehingga dapat diketahui bobot pelletnya 0ebe0ar !8@ gram"
4! Pemb$$&
%$ Berda0arkan per/obaan 0entri1uge yang telah kami lakukan terdapat perbedaan keadaan 0upernatan dan bobot pelet antara 0entri1uge manual dan 0entri1uge hetti/h" #apat didilihat pada tabel !" No
?eni0
rpm
Sentri1uge
aktu
Keadaan
Bobot
Bobot
Bobot
$utar
Supernatan
Tabung
tabungpellet
$elet
%Menit-
ko0ong
%gram-
%gram-
.
Sedikit
%gram*8* gram
@8,
.8(
)
Keruh ?ernih
+8' gram
@8+
!8+
!
Sentri1uge
.
Manual Sentri1uge
(
Manual Sentri1uge
.'''
.
?ernih
*8* gram
@8&
!8,
)
Hetti/h Sentri1uge
.'''
)
?ernih
+8' gram
@8@
!8@
&
Hetti/h Sentri1uge
(&''
.
?ernih
*8* gram
@8*
.8'
*
Hetti/h Sentri1uge
(&''
)
?ernih
+8' gram
@8@
!8@
Hetti/h Tabel !" $ada 0aat per/obaan 0entri1uga0i menggunakan 0entri1ugator terbentuk endapan dan pemi0ahan antara endapan dan 0entrat dikarenakan perbedaan berat 4eni0 %7hari0mata8 .'!.-" $er/obaan pertama menggunakan 0entri1uge manual dengan dura0i 5aktu putar 0elama . menit mengha0ilkan 0upernatan yang 0edikit keruh berbeda dengan per/obaan . 0ampai * yang mengha0ilkan 0upernatan yang 4ernih" $er/obaan keC( 0ampai per/obaan keC* ala t yang digunakan berbeda dengan per/obaan ! dan .8 pada per/obaan ( 0ampai * alat yang digunakan menggunakan tenaga li0trik 0edangkan per/obaan ! 0ampai . menggunakan tenaga manu0ia"3pm yang digunakan 4uga berbeda hal ini 4uga 0ebagai penentu tingkat ke4ernihan dari 0upernatan" 3pm mak0imum yang digunakan dalam perobaan ini yakni (&''" Terdapat kelebihan dan kekurangan dalam per/obaan ini8 kelebihan dari 0entri1uga0i adalah 0udah menggunakan alat yang modern yaitu 0entri1ugator 0udah tidak memerlukan /ara 0ederhana 0eperti menggunakan tangan8 dapat 0e/ara teliti memi0ahkan
Kekurangannya adalah butuh 5aktu yang tidak 0ebentar untuk memi0ahkan endapan dengan /airannya %7hari0mata8 .'!.-" Terdapat 1aktor penyebab 0upernatan tidak 4ernih yakni 0aat pemutaran 0entri1uge ma0ih menggunakan tenaga manu0ia 0ehingga tenaga yang digunakan kadang ma0ih bi0a berubahCubah8 kurang akurat dalam pengambilan 0ampel8 lama 5aktu putaran yang ma0ih menggunakan /ara manual 0eperti 0top5at/h 0ehingga bi0a lebih atau kurang beberapa detik" $ada per/obaan yang kami lakukan terlihat 0emakin lama 5aktu putaran maka 0emakin 0edikit pelet yang diha0ilkan hal ini di0ebabkan per/obaan yang kami lakukan menggunakan . tabung yang memiliki ma00a yang berbeda yakni *8* gram dan +8' gram8 bobot pelet kelihatan 0eperti mengalami penurunan8
padahal 4ika keadaan tabung
homogen atau dalam keadaan yang 0ama per/obaan yang kami lakukan 0emakin lama 5aktu putaran pelet yang diha0ilkan akan 0emakin berat"
5! Ke&'m6"/$% !" $rin0ip ker4a /entri1uge yaitu dimana ob4ek diputar 0e/ara hori
pada 4arak radial dari titik dimana di titik ter0ebut dikenekan gaya" $ada 0aat ob4ek diputar8 partikelCpartikel yang ada akan berpi0ah dan berpen/ar 0e0uai berat 4eni0 ma0ingCma0ing partikel" #engan gaya yang paling berperan adalah gaya 0entri1ugal" #engan adanya teknik ini8 pro0e0 pengendapan 0uatu bahan akan lebih /epat dan optimum dibandingkan dengan teknik bia0a" Hal ter0ebut tergantung pada ukuran dan bobot 4eni0 dari 0u0pen0i" Teknik ini dapat digunakan untuk mengi0ola0i dan mengkarakteri0a0i molekul biologi dan komponen 0elular" Ha0il 0entri1uga0i terbagi men4adi dua8 yaitu 0upernatan dan pelet" Supernatan adalah 0ub0tan0i ha0il 0entri1uga0i yang memiliki bobot 4eni0 yang lebih rendah" $o0i0i dari 0ub0tan0i ini berada pada lapi0an ata0 dan 5arnanya lebih 4ernih" Sementara pelet adalah 0ub0tan0i ha0il 0entri1uga0i yang memiliki bobot 4eni0 yang lebih tinggi" ." Kegunaan /entri1uge yaitu untuk memi0ahkan /ampuran materi yang berbeda ma00a 4eni0nya berda0arkan gaya 0entri1ugal" (" Mengopera0ikan /entri1uge dengan benar8 0ebagai berikut"
%!- #iletakkan tabung yang beri0i /airan yang dengan 9olume 0ama antara tabung 0atu dengan yang lainnya pada tempat yang ber0eberangan %.- #itutup penutup /entri1uge 0ampai terkun/i %(- #ipilih ke/epatan yang diinginkan pada tombol ke/epatan %)- #ipilih 5aktu pemutaran yang diinginkan pada tombol 5aktu %&- #itekan 0tar untuk /entri1uge yang memiliki tombol 0tar8 yang tidak memiliki tombol 0tar begitu tombol 5aktu diputar /entri1uge lang0ung berputar %*- Segera 0etelah berhenti8 penutup dibuka lang0ung atau perlu menekan tombol berhenti %+- #iambil tabung dari /entri1uge Segera pi0ahkan 0e0uai yang dibutuhkan 7! S$r$% !" Lebih memahami prin0ip ker4a /entri1uge ." Bela4ar mengopera0ikan /entri1uge dengan benar (" $ada 0aat memutar /entri1uge8 putarannya haru0 kon0tan )" $ada 0aat mengambil larutan haru0 diaduk terlebih dahulu agar tidak
mengental &" Lebih teliti dalam menimbang /entri1uge *" Lebih teliti dalam memba/a 0kala pada tabung /enti1uge8 mak0udnya 4ika larutan diambil !' mL8 maka haru0 tepat !' mL pada tabung /entri1uge
D$-,$r P"&,$*$
7hari0mata Ke>555"a/ademia"edu>*+'.,.*>LA$D3ANMINGGUAN$EMU3NIAN -8di ak0e0 '@ No9ember .'!& ir4o0oemanto8 Koe0mad4i8 Fu0u1 Hilmi Adi0end4a4a8 Bambang Suprianto8 3iandi" .'!'" Common Textbook (Edisi Revisi) Teknik Laboratorium" ?akarta6 2MI$A U$I
D'&*"&'
!" ?ela0kan prin0ip ker4a /entri1uge dalam per/obaan yang telah Anda lakukan ." ?ela0kan hubungan antara ke/epatan putar /entri1uge8 5aktu putar dan bobot pellet yang terbentuk (" Manakah yang lebih /epat mengha0ilkan pengendapan8 /entri1uge dengan rotor 0udut ataukah dengan rotor ayun ?ela0kan ala0an Anda )" Sebutkan dan 4ela0kan ma/am dan 1ung0i alat /entri1uge yang anda ketahui %minimal (- ?a5aban !" $rin0ip ker4a /entri1uge8 yaitu dimana ob4ek diputar 0e/ara hori
berperan adalah gaya 0entri1ugal" #engan adanya teknik ini8 pro0e0 pengendapan 0uatu bahan akan lebih /epat dan optimum dibandingkan dengan teknik bia0a" Hal ter0ebut tergantung pada ukuran dan bobot 4eni0 dari 0u0pen0i" Teknik ini dapat digunakan untuk mengi0ola0i dan mengkarakteri0a0i
molekul
biologi
dan
komponen
0elular"
Ha0il
0entri1uga0i terbagi men4adi dua8 yaitu 0upernatan dan pelet" Supernatan adalah 0ub0tan0i ha0il 0entri1uga0i yang memiliki bobot 4eni0 yang lebih rendah" $o0i0i dari 0ub0tan0i ini berada pada lapi0an ata0 dan 5arnanya lebih 4ernih" Sementara pelet adalah 0ub0tan0i ha0il 0entri1uga0i yang memiliki bobot 4eni0 yang lebih tinggi" ." Hubungan antara ke/epatan putar /entri1uge8 5aktu putar dan bobot pellet yang terbentuk 0ebagai berikut" Semakin /epat /entri1uge berputar dan 5aktu yang dibutuhkan untuk memutar /entri1uge lama8 maka bobot pellet 0emakin bertambah"
(" Fang lebih /epat mengha0ilkan pengendapan yaitu menggunakan rotor 0udut" Hal ini di0ebabkan karena pada bentuk 2iedCangle 3otor memiliki 0udut kemiringan tetap pada pro0e0 0entri1uga0i" Hal ini berakibat pada terbentuknya endapan %pellet- pada 4arak ter4auh dari 0umbu akibat gaya 0entri1ugal" Umumnya bentuk 2iedCangle ini mampu diopera0ikan pada ke/epatan yang 0angat tinggi" )" Ma/am dan 1ung0i alat /entri1uge yang praktikan ketahui8 0ebagai berikut" %!- General $urpo0e 7entri1uge8 modelnya bia0a8 bi0a diletakkan diata0 me4a dan diran/ang untuk pemi0ahan 0ampel urine8 0erum atau /airan lain dari bahan padat yang tidak larut" 7entri1uge ini bia0anya berke/epatan 'C(''' rpm %rota0i per menit-8 dan bi0a menampung 0ampel dari &C!'' ml"
Gambar General $urpo0e 7entri1uge %.- Mi/ro 7entri1uge atau di0ebut 4uga
mi/ro1uge08 memutar
mi/rotube0 khu0u0 pada ke/epatan tinggi" Jolume mi/otube0 berki0ar '"&C."' ml"
Gambar Mi/ro 7entri1uge %(- Spe/iality 7entri1uge yaitu /entri1uge yang dipakai untuk keperluan yang lebih 0pe0i1ik" Seperti mi/rohemato/rit /entri1uge0 dan blood bank /entri1uge08 yang diran/ang untuk pemakaian 0pe0i1ik di laboratorium klinik" Mi/rohemato/rit /entri1uge adalah merupakan 9aria0i dari mi/ro/entri1uge yang dapat menampung 0ampel kapiler untuk pengukuran 9olume hemato/rit pa/k /ell8 0edangkan Blood Bank 7entri1uge adalah /entri1uge yang dipakai di bank darah dan 0erologi yang diran/ang untuk memi0ahkan 0ampel 0erologi0 dalam tabung"
Gambar Spe/iality 7entri1uge %)- 7entri1uge berke/epatan tinggi8
yaitu
ultra/entri1uge0
dan
re1rigerated /entri1uge0" 7entri1uge berke/epatan tinggi berputar pada ke/epatan 'C.'"''' rpm dan ultra/entri1uge berputar pada ke/epatan di ata0 &'"''' rpm" Kebanyakan /entri1uge ini dilengkapi dengan 0i0tem pendinginan untuk men4aga 0ampel tetap dingin 0elama 0entri1uga0i" 7entri1uge ini la
Gambar 7entri1uge berke/epatan tinggi LAMPIRAN 8 LAMPIRAN
$emutaran
Ha0il dari
/entri1uge manual
pemutaran /entri1uge manual
$enimbangan ha0il
$enimbangan ha0il
pellet untuk ) menit
pellet ) menit meggunakan /entri1uge elektrik Hetti/h
Ha0il pellet untuk )
Ha0il pellet untuk .
menit menggunakan
menit menggunakan
/entri1uge elektrik
/entri1uge elektrik
Hetti/h
Hetti/h
