Laporan Praktikum Besar m.k Bioteknologi Akuakultur /aboratorium eproduksi dan
Seleksi Bakteri Probiotik Untuk Akuakultur 5uralim Paturakhman (;"1"1!!#*$" 'elompok 000 "
Departemen udidaya Perairan, 2P0', 0P
ABSTRAK Probiotik Probiotik merupakan merupakan mikroorg mikroorganism anismee yang menguntung menguntungkan kan bagi inangnya inangnya karena karena mampu mampu menekan menekan organisme pathogen serta meningkatkan penyerapan nutrisi pada pakan yang dimakan oleh ikan. Probiotik dapat mengeluarkan enzim amilase, protease, lipase, dan selulose yang mampu mengurangi senya3a kompleks menjadi senya3a yang lebih sederhana yang nantinya akan lebih mudah diserap oleh tubuh ikan. 4elain itu, bakteri probiotik mampu bersaing dengan bakteri pathogen lainnya dan menekan pertumbuhan dari bakteri pathogen. 5amun, tidak probio bi otik tik senya3a juga juga bers be rsif ifa at serta seba ebmenekan agai gai ben be ntuk tuk semua bakteri probiotik mampu mengubah senya3a kompleks menjadi sederhana bakteri pe ngen enda dalia lian n untuk biol biolog ogis is (biolog bio logica icall Praktikum contro con troll) pathogen. )leh karena itu perlu dilakukannya analisis terkaitpeng peranan bakteri kebutuhan akuakultur. Pra ktikum karena ini bertujuan untuk menyeleksi bakteri yang baik untuk digunakan sebagai probiotik dalam bidang nutrisi dan kesehatan. 'ata kunci = Probiotik, kesehatan, nutrisi, enzim, patogen
Pendahuluan Pakan Pakan maupun maupun kesehatan kesehatan ikan menjadi menjadi faktor faktor yang yang menen menentuka tukan n keber keberhas hasila ilan n suatu suatu usaha usaha budiday budidayaa ikan. Hal ini perlu adanya suatu perhatian khusus agar efisiensi dan efektivitas suatu budidaya ada pada kondisi maks maksim imal al.. Dala Dalam m siste istem m budi budida daya ya perl perlu u adan adany ya pendukung dalam meningkatkan pertumbuhan serta kese keseha hata tan n ikan ikan sala salah h satu satu cara carany nyaa adal adalah ah deng dengan an pemberian probiotik. Probiotik merupakan istilah yang digun digunak akan an pada pada mikr mikroo oorg rgan anis isme me hidu hidup p yang yang dapa dapatt memberik memberikan an efek baik pada kesehatan kesehatan organism organismee lain atau inangya. Pada akuakultur akuakultur,, probiotik probiotik digunakan digunakan dengan dengan cara menambahkannya pada campuran pakan serta dapat langsung ditambahkan ke kolam budidaya. Penambahan pada pakan ataupun kolam perairan memiliki tujuan yang berbeda dalam proses kegunaannya. Pemberian probiotik pada pakan lebih diutamakan untuk mempermudah mempermudah pencernaan ikan dalam mencerna pakan agar proses penyerapan menjadi lebih baik. Disisi lain, penambahan probiotik pada kolam budidaya lebih diutamakan untuk menekan bakteri pathogen pada kolam budidaya sehingga ikan yang berda di kolam tersebut tidak mudah untuk terserang penyakit (Azhar (Azhar !"#$ Penggunaa Penggunaan n probiotik probiotik dalam sistem sistem akuakultur akuakultur merupakan salah satu cara antisipasi yang efisien untuk pencegahan dari infeksi mikroba dan sebagai pengganti antibio antibiotik tik dan kemote kemotera rapi pi serta serta dapat dapat mening meningkat katkan kan pertumbuhan ikan melalui penyerapan yang maksimal enggun unaa aan n prob probio ioti tik k pada pada pada pakan. Pengg
akuakultur selain bermanfaat bagi inangnya,
perannya dalam membatasi atau membunuh patoge patogen n penyak penyakit, it, serta serta berper berperan an dalam dalam meni mening ngka kata tan n kuali ualita tas s air air (Yul (Yulvi viza zarr et al 201)! Prak Prakti tiku kum m ini ini bert bertuj ujua uan n untu untuk k meny menyel elek eksi si bakteri yang baik untuk digunakan sebagai probiotik dalam bidang nutrisi dan kesehatan ikan.
Metodologi ". %aktu aktu dan dan &empat empat Prak Prakti tiku kum m ini ini dila dilaks ksan anak akan an pada pada 'ami 'amis, s, )ktober !" pukul "*.!! hingga "+.!! di -enk dan /abor /aborato atoriu rium m 'eseh 'esehata atan n 0kan 0kan lantai lantai 1, Depar Departem temen en udi udida daya ya Pera Perair iran an,, 2aku 2akult ltas as Peri Perika kana nan n dan dan 0lmu 0lmu 'elautan, 0nstitut Pertanian ogor. . Alat Alat dan dan ah ahan an Alat yang digunakan pada praktikum ini antara lain ca3an petri, mikropipe mikropipet, t, mikrotip, mikrotip, korek korek api, kertas cakram, batang penyebar, ca3an petri, bunsen, jarum ose, erlenmeyer, waterbath, shaker , dan inkubator. 4edangkan bahan-bahan yang digunakan yaitu, isolat 5P-*, isolat Aeromonas hydrophila, isolat 4'&-b, isolat "-6b, isolat Vibrio harveyi 7-*##8, larutan fisiologis, alkohol 9!: dan 8:, media &4A, media &;4, media 4%;, susu skim, minyak zaitun, tepung kanji, ;u4)1 dan '0. #. Pros Prosed edur ur 'erj 'erjaa
#." Probiotik 6ntuk 5utrisi &P; @ jumlah koloni ? "B ? "fp (satuan ;26m/$ #."." 6ji Protease Pertama tangan dan meja disterilkan Hasil menggunakan alkohol 9!: agar aseptik, kemudian erikut ini merupakan tabel hasil pengamatan bunsen dinyalakan menggunakan korek api. 4elanjutnya pada seleksi bakteri probiotik untuk nutrisi dan bakteri uji digoreskan pada media 4%; yang kesehatan. mengandung susu skim menggunakan jarum ose steril. 7edia yang dicampur lalu diinkubasi selama 1 jam dalam inkubator dan diamati zona bening yang dapat &abel ". Hasil pengamatan probiotik untuk nutrisi dilihat. 5ama >ona &umbuh&ida
ona Hambat 5ama Diameter &erlebih dahulu dibuat kultur murni Aeromonas ona !.9, !.9, korek api. akteri kultur Aeromonas hydrophila dalam Hambat !.9, !.9 mikrotube diambil dengan mikropipet yang sebelumnya telah dipasangi mikrotip, kemudian dituang ke media &4A. Pada media tersebut disebar dengan batang penyebar yang sebelum digunakan direndam dengan 'ultur alkohol 8!: dan dibakar pada api bunsen. Diambil 1 ersama # buah kertas cakram dengan pinset dan satu per satu -" "-6b "! dicelupkan terlebih dahulu kedalam mikrotube yang berisi 5P-* lalu dimasukkan ke ca3an yang berisi media tadi. Diberi kertas 3rap dan diinkubasi selama 1 jam. #.. 7etode 'ultur ersama 'ultur Pertama tangan dan meja disterilkan ersama 9 menggunakan alkohol 9!: agar aseptik, kemudian "-6b "!- bunsen dinyalakan menggunakan korek api. 'ultur bakteri "-6b dan Vibrio harveyi diinokulasi dengan jarum ose dan dimasukkan kedalam labu erlenmeyer yang berisi 'ultur media 4%; cair "* m/ dan dishaker selama "+ jam maka ersama " akan diperoleh kepadatan "!+. 'epadatan tersebut -* BH "! diencerkan sebanyak * kali pada Vibrio harveyi dan sebanyak kali pada "-6b. 4etelah diencerkan hasil kepadatan dicampur dan dishaker kembali selama "+ jam dan menghasilkan kepadatan "!8. 'ultur mi? diencerkan 'ultur dan dipakai pada kepadatan "!-" dan "!-. 'epadatan dari ersama * - kontrol diencerkan 9 kali dan dipakai dengan kepadatan BH "! "!-* , "!- , dan "!-9. Hasil pengenceran tersebut disebar pada media &;4 kemudian diberi plastik 3rap dan diinkubasi selama 1 jam. 5ilai &P; dapat dihitung dengan rumus=
'ultur ersama BH "!-9
-
"
erdasarkan pada tabel diatas didapatkan hasil yaitu pada metode zona hambat memiliki diameter sebesar !.+ cm pada perlakuan P4 dari keempat zona yang terlihat semuanya memiliki diameter sebesar !.9 cm. 4edangkan pada metode kultur bersama jumlah koloni terbanyak pada kultur bersama BH "!-* sebanyak " koloni dan jumlah koloni yang paling sedikit ada pada kultur bersama BH "!-9 sebanyak " koloni.
Pembahasan Probiotik merupakan mikroorganisme yang memberikan manfaat pada organisme lain yang dia tempati. 7anfaat yang diberikan oleh probiotik ini diantaranya dapat meningkatkan penyerapan makanan secara optimal pada inangnya, meningkatkan kekebalan tubuh ikan, menjaga kualitas air, serta menekan bakteri lain atau patogen yang merugikan bagi inang (Puspita !!8$. Praktikum yang telah dilakukan yaitu terkait probiotik untuk nutrisi dan kesehatan ikan. Hasil yang diperoleh dari pengamtan probiotik untuk nutrisi menunjukka bah3a semua uji yang dilakukan pada probiotik seperti uji lipase, amilase serta protease terdapat adanya pertumbuhan probiotik. Hal ini disimpulkan bah3a probiotik memiliki peranan penting dalam membantu mencerna makanan dengan bantuan enzim. Hasil ini diperkuat dengan literatur yang menerangkan bah3a aplikasi probiotik pada pakan,seperti halnya bakteri probiotik 4'&-b mampu meningkatkan konversi pakan yang akan berguna pada pertumbuhan ikan. Hal tersebut dapat terjadi karena pada bakteri probiotik mengandung enzim-enzim yang mampu meningkatkan aktivitas pencernaan. Enzim-enzim yang dihasilkan oleh bakteri probiotik seperti enzim amilase, protease, lipase dan selulase. Enzim-enzim tersebut akan membantu enzim endogenous pada inang untuk menghidrolisi nutrien pakan. 5utrien yang telah dihidrolis dari pakan akan mudah diserap oleh organ pencernaan ikan yang nantinya akan diedarkan keseluruh tubuh ('anmani et al !"!$. akteri 4'&-b pada praktikum ini digunakan unutk uji protease, amilase dan lipase. akteri 4'&-b merupakan bakteri dari jenis Vibrio alginolyticus . akteri ini umum digunakan sebagai bakteri probiotik karena mampu menekan bakteri patogen lain yang tentunya bermanfaat bagi kesehatan inang. akteri 4'&-b dalampemberian melalui pakan dapat meningkatkan kecernaan sehingga pertumbuhan dapat ditingkatkan dalam 3aktu cepat yang tentunya menekan biaya produksi pakan. 'ecernaan yang tinggi dengan menggunakan bakteri probiotik disebabkan oleh bakteri probiotik yang menghasilkan enzim dalam jumlah yang cukup banyak.$. 4elanjutnya bakteri yang digunakan dalam uji amilase dan protease adalah bakteri "-6.
erdasarkan penelitian (%idanarni et al !!+$ menyatakan bah3a bakteri ini merupakan probiotik yang dapat digunakan dalam meningkatkan laju pertumbuhan udahg sebesar 8.!#: dengan nilai 2; ",#*. 4selanjutnya bakteri yang digunakan pada uji amilase adalah bakter 5P*. akteri 5P* merupakan bakteri dari genus Bacillus dan bersifat gram positif. 'egunaan bakteri ini adalah sebagai bakteri probiotik yang dapat meningkatkan sistem kekebalan tubuh atau imun inangnya. 4elain itu bakteri 5P* mampu meningkatkan kecernaan pakan inangnya sehingga dapat meningkatkan kesehatan ikan dan tidak mudah stress (Puspita !!8$ 4elain untuk nutrisi, probiotik juga bermanfaat bagi kesehatan ikan. Probiotik yang bermanfaat bagi inangnya bekerja dengan beberapa cara. Pertama, probiotik dapat memproduksi senya3a yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri lain khususnya bakteri patogen. 'edua, probiotik dapat berkompetisi substansi yang dibutuhkan untuk metabolisme dengan bakteri penyebab patogen sehingga pertumbuhan bakteri patogen menjadi terhambat (4eptiarini et al !"$. Pada percobaan dengan menggunakan kultur bersama, pengenceran pada angka "!-* memiliki tingkat koloni terbanyak yaitu sebanyak " koloni. Hal ini dikarenakan pada pengenceran "!-* merupakan pengenceran optimal dalam menguji daya hambat probiotik terhadap pertumbuhan bakteri patogen. 'oloni Vibro harveyi pada pengenceran "!-9 tidak terlalu banyak terbentuk dikarenakan bakteri probiotik dapat menekan pertumbuhan bakteri patogen. 7enurut 'anmani et al (!"!$ bakteri probiotik menghasilkan metabolisme antimikroba seperti hidrogen peroksida, asam laktat, diasetil dan senya3a bakteriosin. 'omponen senya3asenya3a tersebutlah yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri.
Kesimpulan erdasrkan praktikum yang telah dilakukan, ketiga uji yaitu uji protease, amilase, dan lipase menunjukkan hasil adanya pertumbuhan bakteri pada masing masing uji yang artinya bakteri probiotik mampu menghasilkan ketiga enzim didalam tubuh inang. Hasil dari pengamtan probiotik untuk kesehatan baik kultur bersama maupun zona hambat terdapat pertumbuhan serta adanya zona bening. Hal ini menunjukkan bah3a bakteri probiotik mampu menekan pertumbuhan bakteri patogen seperti Vibrio harveyi.
Datar Pustaka Azhar
2. !"#. Pengaruh pemberian probiotik dan prebiotik terhadap performan juvenile ikan kerapu bebek (Comileptes altivelis$. uletin Beterine 6dayana. Bol ("$= "-8. 'anmani P, 'umar 4, Fuvaraj 5, Paari ' A, Pattukumar B, Arul B. !"!. Comparison of Antimicrobial Activity of Probiotic Bacterium Streptococcus phocae P1!" #nterococcus faecium $C1% and Carnobacterium divergens
Against &ish Pathogen. 'orld (ournal of )airy and &ood Sciences . Bol *($= "1*-"*". Puspita 2. !!8. Pengaruh pemberiam bakteri probiotik melalui pakan terhadap pertumbuhan dan kelangsungan hidup udang 3indu Paneus monodon Gskripsi. ogor (0D$= 2akultas Perikanan dan 0lmu 'elautan 0nstitut Pertanian ogor. 4eptiarini, Esti H, %ardiyanto. !". Pengaruh %aktu Pemberian Probiotik yang erbeda &erhadap espon 0mun 5on-4pesifik 0kan 7as (Cyprinus carpio /.$ yang Diuji &antang dengan akteri Aeromonas salmonicida. (urnal *ekayasa dan +eknologi Budidaya Perairan . Bol " ("$= #8-1. %idanarni, Ayuzar E, 4ukenda. !!+. 7ekanisme penghambatan bakteri probiotik terhadap pertumbuhan Vibrio harveyi pada larva udang
3indu Penaeus monodon. (urnal Akuakultur ,ndonesia. Bol 9= "+"-"8!. Fulvizar ;, De3iyanti 0, Defira ; 5. !"1. 4eleksi bakteri berpotensi probiotik dari ikan mas (Cyprinus carpio $ ,ndegenous -antho berdasarkan aktivitas antibakteri secara in vitro. Iurnal &eknologi dan 0ndustri Pertanian 0ndonesia. ($= !-1.
