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PROBLEMAS TEMA II
1. Si una molécula circular de ADN se digiere con una enzima de restricción que corta a la molécula en un solo punto, ¿cuántos fragmentos se producen? a) 1 b) 2 c) 3 d)4 e) ninguna es correcta
2. Si una molécula circular de ADN se digiere con una enzima de restricción que corta a la molécula en dos puntos, ¿cuántos fragmentos se producen? a) 1 b) 2 c) 3 d)4 e) ninguna es correcta
3. Si una molécula lineal de ADN se digiere con una enzima de restricción que corta a la molécula en un solo punto, ¿cuántos fragmentos se producen? a) 1 b) 2 c) 3 d)4 e) ninguna es correcta
4. Si una molécula lineal de ADN se digiere con una enzima de restricción que corta a la molécula en dos puntos, ¿cuántos fragmentos se producen? a) 1 b) 2 c) 3 d)4 e) ninguna es correcta
5. Si una molécula lineal de ADN se digiere con una enzima de restricción que corta a la molécula en n puntos,¿cuántos fragmentos se producen? a) n-1 b) n c) n+1 d)n+2 e) ninguna es correcta
6. Ha recuperado un segmento de ADN clonado de 1.300 bp. Para caracterizar a este segmento clonado, ha aislado el inserto y decidido construir un mapa de restricción. Utilizando las enzimas I y II, y después de la electroforesis en un gel, determina el número y tamaño de los fragmentos producidos por las enzimas I y II, solas y combinadas, que son los siguientes: enzimas tamaño de los fragmentos de restricción I 350bp + 950bp II 200bp + 1.100bp I + II 150bp + 200bp + 950bp Con estos datos construya un mapa de restricción, mostrando mostrando las posiciones relativas de los sitios de restricción, y las distancias entre ellos en pares de bases.
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7. La secuencia de ADN 5´-CCGAATTCTACGCCTAC-3´ (solo se muestra una de las cadenas)contiene una secuencia palindrómica de 6 bases que funciona como un sitio de reconocimiento y corte para una enzima de restricción. Consultando la tabla 12.1, indique a. ¿cuál es esa secuencia palindrómica? b. ¿cuál es la enzima que corta a esa secuencia? c. ¿cuántos fragmentos se forman? d. ¿tienen los extremos romos o protuberantes? e. escriba los fragmentos de ADN cortados
8. Un gen muestra el siguiente mapa de restricción con EcoRI y con HindIII EcoRI EcoRI 3 Kb 4Kb 1Kb
HindIII 2Kb
4,5Kb
HindIII 1,5Kb
a. Dibuje los patrones de fragmentos de ADN esperados al separarlos mediante electroforesis en un gel e indique el tamaño de cada uno: Muestra 1: fragmento sin digerir Muestra 2: fragmentos digeridos con EcoRI Muestra 3: fragmentos digeridos con Hindi Muestra 4: fragmentos en una digestión doble
9. Se digiere un fragmento de ADN por separado con HindIII y SmaI, y conjuntamente con las dos enzimas. Se obtienen los siguientes fragmentos: HindIII 2,5 Kb + 5,0 Kb SmaI 2,0 Kp + 5,5 Kb HindIII y SmaI 2,5 Kb + 3,0 Kb + 2,0 Kb a) dibuje el mapa de restricción b) Cuando la mezcla de fragmentos producida en la digestión con las dos enzimas se digiere con EcoRI, se observa la perdida del fragmento de 3,0 Kp y la aparición de una banda de 1,5 Kb (en un gel de agarosa teñido con bromuro de etidio). Sitúe el punto de corte de la enzima EcoRI en el mapa de restricción.
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10. En el siguiente esquema se muestran los resultados de las huellas moleculares del DNA de una madre (M), del supuesto padre (P) y del hijo (H), utilizando diferentes sondas. Basándose en estas sondas, ¿podría concluir que P es el padre de H? M H P
11. Se ha secuenciado por el método de los didesoxinucleótidos un fragmento de DNA. A continuación se presenta una parte del autorradiograma del gel de secuenciación ddA ddG ddT ddC
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a. Deduzca la secuencia de la cadena de ADN sintetizada a partir del cebador. Indique los extremos 5´y 3´ b. Deduzca la secuencia de la cadena de ADN utilizada como molde. Indique los extremos 5´y 3´
