Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Zaragoza Laboratorio de io!u"mica #elular $ de los te%idos & 'rincipales #onstitu$entes (u"micos de la Materia )iva E!uipo* +,
-rupo* ./,+ Objetivos: Analizar la importancia del agua como constituyente más abundante de la materia viva. Cuantificar el contenido de minerales en una muestra biológica.
+
Identificar algunos componentes de la materia viva. Comparar los componentes de diferentes tipos de muestras. Manejar la rata como animal de experimentación.
Diagrama de flujo:
Se sacri0có una rata 1istar de al menos .,, g de peso mediante una anestesia con #loro2ormo3 Al órgano molido con los cubreob%etos6 se le agregaron +, mL de #loro2ormo: metanol6 $ se 4omogenizo $ se vació en un tubo de ensa$e para centri2ugar a 5,,, rpm al menos por 7 min3
'osteriorment e se 4icieron 5 pesadas del órgano6 uno 2ue de +g $ los otros . pesos de aproximadam ente ,3.7g3
Se realizó la disección del corazón de la rata3
'osteriorment e se recolectaron los sobrenadante s del tubo de ensa$e !ue salió de la centr"2uga $ se vertieron en otro tubo de ensa$e3
#omo los lipidos son insolubles en agua pero si solubles e n solventes organicos se prosiguio a tomaruna al"cuota igual de +mL pero de la 2ase cloro2órmica6 se vació en un tubo de ensa$e $ se le a@adieron +7 gotas de An4"drido Acético6 se mezcló6 se de%ó en2riar6 $ una vez 2rio se le a@adieron 7 gotas de cido sul2>rico concentrado3
Las otras . pesa as e corazón se colocaron en unas cazuelitas de aluminio previamente pesadas en balanza $ puestas a peso constante en una mu8a6 una vez !ue salieron de la mu8a se colocaron las muestras de órgano $ se les agrego + mL de etanol $ se metieron a la mu8a durante 9, minutos a +,,:++,;# Se agregaron 5, ml A continuación se de agua destilada a tomó una al"cuota de los sobrenadantes +mL de la 2ase acuosa $ se de%aron $ se determinaron las reposar durante +, prote"nas seg>n el min3 En este método de Lo?r$ * < el proceso se separó cual consto en la 2ase cloro2órmica6 agregar el reactivo 5 con los l"pidos de la $ /= esperando una 2ase acuosa
El órgano de+ g se colocó en un mortero con pistilo $ se molió con algunos cubreob%etos previamente bien molidos6 para 4acerle pruebas de l"pidos $ prote"nas3
Los sedimentos del tubo al igual !ue lo !ue !uedo en el mortero se lavaron con la misma cantidad de solución de cloro2ormo : metanol3
'ara 0nalizar después de los 9, min3 de de%ar en la mu8a las muestras6 se sacaron $ se colocaron dentro de un desecador para !ue se en2riaran durante ., min aprox3
Antes de 4acer cada prueba se prepararon blancos para poder observar los cambios3
Resultados. En esta práctica no se realizó la identificación de cenizas. Tabla . Clase de mol!culas "ue se encuentran en el cuerpo. .
Una vez estando 2rias las muestras6 se pesaron $ con los datos anteriores $ estos se realizó el cBlculo para conocer el procenta%e de 4umedad contenido en el órgano3
Constituyente Agua 'rote(nas *(pidos Minerales ,-a/ 0/ Cl1/ Ca/ etc.2 3cidos nucleicos Carbo$idratos FORMULA PARA DETRMINAR:
# del peso $idratado %& ) + + 4
% de humedad, el cálculo fue el mismo para todas las
muestras.
#5umedad:
Peso órgano g después de secar x 100 pesoórgano g antes de secar
Muestra 0.1586
#5umedad
0.2659
x 100
6 +7.%8%8#
Muestra 4 0.1233
#5umedad
0.2986
x 100
6 8.474%#
Tabla 4. 9rado de reacción en la identificación de l(pidos y prote(nas por medio de ,2 para los órganos "ue contienen más y ,12 para los "ue apenas si poseen alguno de los constituyentes anotados. Crgano D"gado
E!uip 'rote"na o s
L"pidos
+
H
azo
.
Ji@ón
I 5
:
G
/
9 7
:
#erebro #orazó n
Dumedad Muestra Muestra +
Muestr a+
Muestr a.
I,359
I,3GG
,35IH. ,3+9H, ,37.IH ,3/.G7 g g g g
7.3,9
G+3.+
,3.IGI ,3..,H ,3+9.5 ,3+5+H g g g g
I93+7
HG3/5
,3/I7I ,3.5+/ ,37I+, ,3.7IG g g g g
/G3H/
/73+/
,3+9GH ,3,77I ,3+9+5 ,3,/HI g g g g
.G3,/
./3/+
5
+,
,3.H79 ,3.9GH ,3+7GH ,3+.55 g g g g
793H7
/+3.9
# de $umedad presente en cada órgano. ,Mayor cantidad de cruces mayor intensidad de color2/ Mayor prote(na o l(pido en el órgano.
DIS!SI"# DE RES!$%&DOS: :e acuerdo a los objetivos esperados y a la tabla . sobre la información de # de constituyentes en el organismo/ los resultados de la tabla 4. comprueban "ue ciertamente el constituyente principal de la materia viva es el agua/ aun despu!s de "ue los # de cada e"uipo en cada muestra se muestran variados/ pues aun"ue el agua ocupa el mayor porcentaje presente en un organismo vivo no toda esta en un solo órgano por ello no todos los órganos cuentan con el mismo porcentaje de $umedad. ;especto a las biomol!culas ,l(pidos y prote(nas2 no se puede decir lo mismo ya "ue si comparamos la tabla . con la 4. se notara "ue los resultados expresan "ue $ay más l(pidos "ue prote(nas cuando !l # es mayor en este ./ 7%%2 ?rdinariamente los l(pidos reciben de forma incorrecta el nombre de grasas/ ya "ue las grasas son solo un tipo de l(pidos procedentes de animales los más abundantes son las grasas de origen animal y vegetal. As( pues se puede decir "ue los órganos con mayor l(pidos o en este caso grasas "ue otro órgano son el $(gado/ bazo y cerebro ya "ue en la parte experimental fueron estas muestras las "ue mostraron azules muy intensos. :e acuerdo a ,Copyrig$t/ 4&&@2 *as prote(nas son los materiales "ue desempean un mayor n
cerebro/ esto tal vez por"ue desempean un mayor trabajo en el organismo "ue otros.
O#$!SIO#ES: Claramente el agua es el constituyente mayoritario presente en los seres vivos/ es importante para efectuar procesos biológicos en los seres vivos. =e consiguió la determinación de l(pidos de los órganos más importantes de la rata y la determinación de prote(nas por el m!todo de *oBry/ además por medio del cálculo a trav!s de las diferencias obtenidas en el proceso desecado/ se cuantifico el # de $umedad de los órganos de rata para comparar su composición entre ellos e identificar sus diferencias. Concluyendo "ue los objetivos planteados y esperados fueron los obtenidos tal vez no al &&# como ya se tiene estipulado en la tabla ./ pero fueron tan cercanos "ue podemos decir "ue las t!cnicas utilizadas son las recomendables para conocer las concentraciones de l(pidos/ prote(nas/ y # $umedad en alg
Referencias. #op$rig4t6 J3 <.,,G=3 Las Proteínas 3 Jecuperado el . de Marzo de .,+/6 de 4ttp*KK???3rena3edu3veKSegundaEtapaKcienciasKproteinas34tml 36 #3 <+9HH=3 Bioquímica Experimental. Espa@a* Acribia 3
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